清肺镇咳糖浆中岩白菜素含量的测定
作者:黄俊龙
单位:南宁市第二人民医院
关键词:
广西医学GUANGXI MEDICAL YIXUE1999年 第21卷 第4期 Vol 清肺镇咳糖浆为一种中药制剂,处方主要由葶苈子、矮地茶、荆芥、知母等七味中药组成,近年来广泛应用于治疗感冒咽炎、肺热咳等症,疗效确切,得患者好评。但原标准中尚无含量测定指标,为更好地确保该产品的内在质量,我们对其中的主药之一矮地茶(紫金牛科植物紫金牛的干燥全株)进行了质量控制指标研究,并制订了其中镇咳主要成分岩白菜素(矮茶素I,Bergenin)的含量测定方法,现报道如下。
1 材料、方法与结果
1.1仪器与试药:岛津UV-265分光光度计;电子天平(德国沙多利斯)。岩白菜素对照品(按中国药典方法测定含量99.5%)(1);醋酸乙酯、甲醇(均为AR级)。
, 百拇医药
1.2 提取溶剂及方法的确定:岩白菜素易溶于甲醇,能在水、乙醇、醋酸乙酯等溶剂中微溶,经比较不同的提取溶剂及方法,以醋酸乙酯提取4次,每次20ml为好。由于方中其它成分对岩白菜素测定干扰较大,故采用先过硅胶小柱的方法来逐步消除干扰物质的影响,以提高分析的准确度。
1.3 测定波长的选择:取岩白菜素对照品适量,以甲醇溶解并制成适当浓度的对照品溶液,在200~450nm波长范围内扫描,测定吸收光谱。同法作样品及阴性空白的谱图。岩白菜素和样品均在275nm有最大吸收峰,而在此附近,阴性空白的干扰约为0.022左右,基本能满足定量测定的要求。
1.4 线性关系考察:精密称取岩白菜素对照品25mg于50ml量瓶中,以甲醇溶解并稀释至刻度,按上述所色定的条件,在275±1nm处测定吸收度,并以吸收度A对浓度C(ug/ml)进行分析,得回归方程:C=41.490A±0.00506,r=0.9999。表明岩白菜素浓度在4~28μg/ml范围内线性关系良好,并且直线通过原点,可以用单点法测定并计算。
, 百拇医药
1.5 方法精密度试验:分别吸取上述对照品溶液,在选定的测定条件下,依法重复操作测定,计算岩白菜素对照品吸收度的相对标准偏差,结果RED=0.29%,表明该法精密度较好。
1.6 方法稳定性试验:取上述对照品溶液及样品各1份,分别在放置0、2、4、6h时,依法操作,测定吸收度,计算含量及相对标准偏差,结果对照品RSD=043%,样品RSD=0.51%,表明方法稳定性较好(见表1)。
表1 方法稳定性试验 样品
平均吸收度A(n=3)
RSD(%)
0h
2h
4h
, 百拇医药
6h
对照品
0.482
0.481
0.478
0.478
0.43
供试品
0.407
0.405
0.405
0.402
0.51
, 百拇医药
1.7 方法重复性试验:准确量取样品10ml共5份,按样品测定项下进行操作测定,计算岩白菜素的含量及相对标准差,结果RSD=1.08%,表明方法重复性较好。
1.8 加样回收率试验:精密量取已知含量的样品6份,再分别精密加入一定量的岩白菜素对照品,按样品测定项下操作,依法测定,计算回收率,结果平均回收率为98.46%,RSD=0.95%,表明方法回收率较好(见表2)。表2 加样回收率试验 No
原有量
(mg)
加入量
(mg)
测得量\+*
(mg)
, 百拇医药
回收率
(%)
(%)
RSD
(%)
1
4.611
4.50
9.010
97.76
2
4.611
, 百拇医药
4.50
9.005
97.64
3
4.810
4.50
9.290
99.56
98.46
0.95
4
4.810
5.00
, 百拇医药
9.700
97.80
5
5.263
5.00
10.178
98.30
6
5.263
5.00
10.248
99.70
*n=3
, 百拇医药
1.9 样品测定:准确量取清热镇咳糖浆10ml,置分液漏斗中,用醋酸乙酯提取三次,每次15ml,合并醋酸乙酯,水浴上蒸干,残渣加少量甲醇使溶解,定量转移到硅胶小柱上(80目,10×25mm)以甲醇洗脱,准确收集洗脱液25ml,摇匀。照分光光度法,在275mm的波长处测定吸收度,以回归方程计算样品岩白菜素的含量,结果见表3。表3 样品测定 批号
含量(mg/100ml)
RSD(%)
981120
4.85
4.76
4.77
, 百拇医药
4.77
1.58
981121
4.30
4.32
4.35
4.32
0.58
981122
5.14
5.18
5.05
5.12
, 百拇医药
1.30
2 讨论
2.1从线性关系、精密度、稳定性、重复性试验以及加样回收率试验等方法学考察上看,本含量测定方法符合有关规定,药检部门、生产企业可作为控质量标准使用。
2.2 根据所测三批样品,含量最高为5.81mg/100ml,最低为4.30mg/100ml,留有余地,适当放宽,暂定含量限度为不得低于4.0mg/100ml。
参考文献
[1]卫生部药政局.中国药典.1995年1部.北京:化工出版社 1995:181
[2]贾晓斌,施亚芳,赵厚民.HPLC法测定清金糖浆及紫金牛药材中岩白菜素的含量.南京中医药科大学学报 1997;13(3):147, http://www.100md.com
单位:南宁市第二人民医院
关键词:
广西医学GUANGXI MEDICAL YIXUE1999年 第21卷 第4期 Vol 清肺镇咳糖浆为一种中药制剂,处方主要由葶苈子、矮地茶、荆芥、知母等七味中药组成,近年来广泛应用于治疗感冒咽炎、肺热咳等症,疗效确切,得患者好评。但原标准中尚无含量测定指标,为更好地确保该产品的内在质量,我们对其中的主药之一矮地茶(紫金牛科植物紫金牛的干燥全株)进行了质量控制指标研究,并制订了其中镇咳主要成分岩白菜素(矮茶素I,Bergenin)的含量测定方法,现报道如下。
1 材料、方法与结果
1.1仪器与试药:岛津UV-265分光光度计;电子天平(德国沙多利斯)。岩白菜素对照品(按中国药典方法测定含量99.5%)(1);醋酸乙酯、甲醇(均为AR级)。
, 百拇医药
1.2 提取溶剂及方法的确定:岩白菜素易溶于甲醇,能在水、乙醇、醋酸乙酯等溶剂中微溶,经比较不同的提取溶剂及方法,以醋酸乙酯提取4次,每次20ml为好。由于方中其它成分对岩白菜素测定干扰较大,故采用先过硅胶小柱的方法来逐步消除干扰物质的影响,以提高分析的准确度。
1.3 测定波长的选择:取岩白菜素对照品适量,以甲醇溶解并制成适当浓度的对照品溶液,在200~450nm波长范围内扫描,测定吸收光谱。同法作样品及阴性空白的谱图。岩白菜素和样品均在275nm有最大吸收峰,而在此附近,阴性空白的干扰约为0.022左右,基本能满足定量测定的要求。
1.4 线性关系考察:精密称取岩白菜素对照品25mg于50ml量瓶中,以甲醇溶解并稀释至刻度,按上述所色定的条件,在275±1nm处测定吸收度,并以吸收度A对浓度C(ug/ml)进行分析,得回归方程:C=41.490A±0.00506,r=0.9999。表明岩白菜素浓度在4~28μg/ml范围内线性关系良好,并且直线通过原点,可以用单点法测定并计算。
, 百拇医药
1.5 方法精密度试验:分别吸取上述对照品溶液,在选定的测定条件下,依法重复操作测定,计算岩白菜素对照品吸收度的相对标准偏差,结果RED=0.29%,表明该法精密度较好。
1.6 方法稳定性试验:取上述对照品溶液及样品各1份,分别在放置0、2、4、6h时,依法操作,测定吸收度,计算含量及相对标准偏差,结果对照品RSD=043%,样品RSD=0.51%,表明方法稳定性较好(见表1)。
表1 方法稳定性试验 样品
平均吸收度A(n=3)
RSD(%)
0h
2h
4h
, 百拇医药
6h
对照品
0.482
0.481
0.478
0.478
0.43
供试品
0.407
0.405
0.405
0.402
0.51
, 百拇医药
1.7 方法重复性试验:准确量取样品10ml共5份,按样品测定项下进行操作测定,计算岩白菜素的含量及相对标准差,结果RSD=1.08%,表明方法重复性较好。
1.8 加样回收率试验:精密量取已知含量的样品6份,再分别精密加入一定量的岩白菜素对照品,按样品测定项下操作,依法测定,计算回收率,结果平均回收率为98.46%,RSD=0.95%,表明方法回收率较好(见表2)。表2 加样回收率试验 No
原有量
(mg)
加入量
(mg)
测得量\+*
(mg)
, 百拇医药
回收率
(%)
(%)
RSD
(%)
1
4.611
4.50
9.010
97.76
2
4.611
, 百拇医药
4.50
9.005
97.64
3
4.810
4.50
9.290
99.56
98.46
0.95
4
4.810
5.00
, 百拇医药
9.700
97.80
5
5.263
5.00
10.178
98.30
6
5.263
5.00
10.248
99.70
*n=3
, 百拇医药
1.9 样品测定:准确量取清热镇咳糖浆10ml,置分液漏斗中,用醋酸乙酯提取三次,每次15ml,合并醋酸乙酯,水浴上蒸干,残渣加少量甲醇使溶解,定量转移到硅胶小柱上(80目,10×25mm)以甲醇洗脱,准确收集洗脱液25ml,摇匀。照分光光度法,在275mm的波长处测定吸收度,以回归方程计算样品岩白菜素的含量,结果见表3。表3 样品测定 批号
含量(mg/100ml)
RSD(%)
981120
4.85
4.76
4.77
, 百拇医药
4.77
1.58
981121
4.30
4.32
4.35
4.32
0.58
981122
5.14
5.18
5.05
5.12
, 百拇医药
1.30
2 讨论
2.1从线性关系、精密度、稳定性、重复性试验以及加样回收率试验等方法学考察上看,本含量测定方法符合有关规定,药检部门、生产企业可作为控质量标准使用。
2.2 根据所测三批样品,含量最高为5.81mg/100ml,最低为4.30mg/100ml,留有余地,适当放宽,暂定含量限度为不得低于4.0mg/100ml。
参考文献
[1]卫生部药政局.中国药典.1995年1部.北京:化工出版社 1995:181
[2]贾晓斌,施亚芳,赵厚民.HPLC法测定清金糖浆及紫金牛药材中岩白菜素的含量.南京中医药科大学学报 1997;13(3):147, http://www.100md.com