42例造血系肿瘤的免疫表型分析
作者：陈安薇 莫淑贤 张梨儿
单位：广州市第二人民医院血液内科
关键词：
广西医学GUANGXI MEDICAL YIXUE1999年 第21卷 第4期 Vol 造血系肿瘤是一组高度异质性的疾病，故在临床表现，病理、预后、对治疗的反应等方面均具有极其不同的特点。为提高对该组疾病的治疗水平，需要精确的诊断和分型。其中，检测血细胞表面分化抗原是形态学、免疫学及细胞遗传学(即MIC)诊断和重要组成部分。我科自1994年开始用碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶(APAAP)技术开展检测，现将结果予以分析。
1 材料与方法
42例均为初诊的造血系肿瘤患者，经形态学分型定为急性淋巴细胞性白血病(ALL)16例，其中L\-1型10例，L\-2型4例，L\-3型2例；急性髓细胞性白血病(AML)14例，其中M\-2a型8例，M\-3型4例，M\-5型2例；慢性髓细胞性白血病(CML)7例，其中慢性期6例，加速期1例；淋巴瘤(Ⅲ期)5例，其中何杰金氏病(HD)2例，非何杰金淋巴瘤(NHL)3例。
, 百拇医药
采用中国军事医科院提供的APAAP试剂盒及单克隆抗体。应用APAAP法，T细胞系列采用CD\-\{2,3,4,7,8,27\}；B细胞系列采用CD\-\{9,10,19,20\};髓细胞系列采用CD\-\{15,18,14,33\}；巨核细胞系列采用CD\-\{41,42\}；NK细胞系列采用CD\-\{16,57\}；还有HLA-DR。结果以阳性细胞>30%为判断标准。
2 结果
2.1 16例ALL，有10例L\-1型，其中9例为B-ALL，含8例C-ALL(CD\++\-\{10\})，另1例为CD\++\-9、19\++、DR\++,1例为T-ALL(CD\++\-3,7\++,8\++),该10例L\-1型ALL，有3例呈现髓系抗原(CD\-\{15\}\++,18\++)；4例L\-2型，其中2例为C-ALL(CD\-\{10\}\++)，1例为T-ALL(CD\++\-2,3\++,4\++,7\++),1例为B-T细胞同时表达(CD\++\-7,9\++,10\++);2例L\-3型，1例同时表达B-T细胞抗原(CD\-7\++,9\++,10\++)，另一例为CALLA及NK细胞阳性表达(CD\-\{10\}\++,16\++,57\++)。
, 百拇医药
2.2 14例AML，有8例M\-2a型，其中5例表达纯髓系抗原(CD\-\{15\}\++,18\++/CD\-\{18\}\++,33\++)，另1例同时表达HLA-DR\++，另2例伴T细胞抗原阳性(CD\++\-4/CD\++\-3)；4例M\-3型，除表达髓系统抗原外均有B细胞抗原表达(CD\++\-9,19\++)，1例还有T细胞抗原阳性(CD\++\-3)；2例M\-5型除表达髓系细胞抗原(CD\++\-\{18\},33\++)外，其中1例表达CD\-\{14\}\++及B细胞抗原(CD\++\-9)。
2.3 7例CML含6例慢性期，其中4例呈纯髓系抗原表达，另2例同时表达1或2种淋巴细胞抗原(CD\++\-3,7\++/CD\++\-310\++)；1例加速期除表达髓系抗原外，还表达CD\-\{20\}\++,HLA-DR\++。
2.4 5例淋巴瘤含2例HD，为多系细胞表达(CD\-\{10\}\++,19\++,18\++,3\++,27\++或CD\-9\++,10\++,18\++)，3例NHL则仅表达B细胞抗原(CD\-\{10\}\++/-/CD\++\-9,DR\++)。
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3 讨论
本文所报道造血系肿瘤免疫表型结果再次证实了造血系肿瘤细胞的异质性，42例中有20例表达2系或2系以上抗原。据统计，仅双表型ALL发生率约6%～22%，AML则达17%～60%(1)，若加上双系型及系列转换型，其发生率则会更高。
自1986年第一次MIC会议提出造血系肿瘤的免疫学标志之后，其分型配套一直在不断修改之中\+\{(2～5)\}。较为一致的结果是T细胞系表达CD\++\-3,7\++(但小部分AML亦可CD\++\-7阳性)，B细胞系表达CD\++\-9,19\++,10\++，DR\++(后者在其他白血病亦可表达)，髓细胞系表达CD\-\{13\}\++,33\++，M\-3不表达HLA-DR等，但在许多病例仍可有特殊表达。本文所作免疫表型分析大致与上述结果相符，但亦有个别病例呈现特殊性：(1)本文在ALL L\-3型其中1例发现同时表达NK细胞及CALLA抗原，临床上使用常规化疗未能获长期缓解，先后3次复发，于发病后13个月死于中枢神经系统白血病。因未见类似报道，故暂命名为非大颗粒细胞性NK细胞白血病。(2)据报道，AML病例中约有10%～20%伴有CD\++\-7，有人认为可能具特殊意义(6)，但亦有持相反意见(7)。本文在AML未发现CD\++\-7，但在1例慢性期CML中可见CD\++\-7，另外还有3例表达CD\-\{33\}\++，是否可作为预计进入加速期的指征，尚应予以探索。(3)淋巴瘤中HD免疫学检测显示多系表达，而NHL免疫表型较为单一，但因例数太少，未能定论。
, 百拇医药
由于细胞表面标志的高度异质性，致使需用各种针对不同白细胞分化抗原的单抗配套，然后综合分析。目前提供的淋巴系单抗能反应细胞的分化成熟阶段，但髓细胞抗原则主要反应细胞起源，临床上分析仍有相当的差距和难度。配套单抗过简可能会造成误诊或特殊类型的漏诊，过繁则难以操作，并浪费医疗资源。建议继续调整免疫分型的单抗谱系，更精确地反映造血系肿瘤的类型及程度，指导临床治疗。
参考文献
[1]朱平.急性白血病分型的进展和建议.实验血液学杂志 1997；5(1)：42
[2]陆道培.白血病治疗学.北京：科学出版社，1992：123
[3]张之南.白血病诊断及疗效标准.天津：科技出版社，1991：98
[4]戴瑞鸿，林果为.内科学新理论与新技术.上海：上海科教出版社，1995：33
, 百拇医药
[5]Bene MC，Castoldi G，Knapp W，et al.Proposals for the immunological classification of acute leukemias.European Group for the Immunological Characterization of Leukemias (EGIL).Leukemia 1995;9(10):1783
[6]刘征辉.CD\-7阳性的急性髓细胞白血病.国外医学.输血及血液学分册 1995；18(4)：212
[7]Lauria F，Raspadori D，Ventura MA，et al.The presence of lymphoid associated antigens in adult acute myeloid leukemia is devoid of prognostic relevance.Stem Cells Dayt 1995;13(4):428, 百拇医药
单位：广州市第二人民医院血液内科
关键词：
广西医学GUANGXI MEDICAL YIXUE1999年 第21卷 第4期 Vol 造血系肿瘤是一组高度异质性的疾病，故在临床表现，病理、预后、对治疗的反应等方面均具有极其不同的特点。为提高对该组疾病的治疗水平，需要精确的诊断和分型。其中，检测血细胞表面分化抗原是形态学、免疫学及细胞遗传学(即MIC)诊断和重要组成部分。我科自1994年开始用碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶(APAAP)技术开展检测，现将结果予以分析。
1 材料与方法
42例均为初诊的造血系肿瘤患者，经形态学分型定为急性淋巴细胞性白血病(ALL)16例，其中L\-1型10例，L\-2型4例，L\-3型2例；急性髓细胞性白血病(AML)14例，其中M\-2a型8例，M\-3型4例，M\-5型2例；慢性髓细胞性白血病(CML)7例，其中慢性期6例，加速期1例；淋巴瘤(Ⅲ期)5例，其中何杰金氏病(HD)2例，非何杰金淋巴瘤(NHL)3例。
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采用中国军事医科院提供的APAAP试剂盒及单克隆抗体。应用APAAP法，T细胞系列采用CD\-\{2,3,4,7,8,27\}；B细胞系列采用CD\-\{9,10,19,20\};髓细胞系列采用CD\-\{15,18,14,33\}；巨核细胞系列采用CD\-\{41,42\}；NK细胞系列采用CD\-\{16,57\}；还有HLA-DR。结果以阳性细胞>30%为判断标准。
2 结果
2.1 16例ALL，有10例L\-1型，其中9例为B-ALL，含8例C-ALL(CD\++\-\{10\})，另1例为CD\++\-9、19\++、DR\++,1例为T-ALL(CD\++\-3,7\++,8\++),该10例L\-1型ALL，有3例呈现髓系抗原(CD\-\{15\}\++,18\++)；4例L\-2型，其中2例为C-ALL(CD\-\{10\}\++)，1例为T-ALL(CD\++\-2,3\++,4\++,7\++),1例为B-T细胞同时表达(CD\++\-7,9\++,10\++);2例L\-3型，1例同时表达B-T细胞抗原(CD\-7\++,9\++,10\++)，另一例为CALLA及NK细胞阳性表达(CD\-\{10\}\++,16\++,57\++)。
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2.2 14例AML，有8例M\-2a型，其中5例表达纯髓系抗原(CD\-\{15\}\++,18\++/CD\-\{18\}\++,33\++)，另1例同时表达HLA-DR\++，另2例伴T细胞抗原阳性(CD\++\-4/CD\++\-3)；4例M\-3型，除表达髓系统抗原外均有B细胞抗原表达(CD\++\-9,19\++)，1例还有T细胞抗原阳性(CD\++\-3)；2例M\-5型除表达髓系细胞抗原(CD\++\-\{18\},33\++)外，其中1例表达CD\-\{14\}\++及B细胞抗原(CD\++\-9)。
2.3 7例CML含6例慢性期，其中4例呈纯髓系抗原表达，另2例同时表达1或2种淋巴细胞抗原(CD\++\-3,7\++/CD\++\-310\++)；1例加速期除表达髓系抗原外，还表达CD\-\{20\}\++,HLA-DR\++。
2.4 5例淋巴瘤含2例HD，为多系细胞表达(CD\-\{10\}\++,19\++,18\++,3\++,27\++或CD\-9\++,10\++,18\++)，3例NHL则仅表达B细胞抗原(CD\-\{10\}\++/-/CD\++\-9,DR\++)。
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3 讨论
本文所报道造血系肿瘤免疫表型结果再次证实了造血系肿瘤细胞的异质性，42例中有20例表达2系或2系以上抗原。据统计，仅双表型ALL发生率约6%～22%，AML则达17%～60%(1)，若加上双系型及系列转换型，其发生率则会更高。
自1986年第一次MIC会议提出造血系肿瘤的免疫学标志之后，其分型配套一直在不断修改之中\+\{(2～5)\}。较为一致的结果是T细胞系表达CD\++\-3,7\++(但小部分AML亦可CD\++\-7阳性)，B细胞系表达CD\++\-9,19\++,10\++，DR\++(后者在其他白血病亦可表达)，髓细胞系表达CD\-\{13\}\++,33\++，M\-3不表达HLA-DR等，但在许多病例仍可有特殊表达。本文所作免疫表型分析大致与上述结果相符，但亦有个别病例呈现特殊性：(1)本文在ALL L\-3型其中1例发现同时表达NK细胞及CALLA抗原，临床上使用常规化疗未能获长期缓解，先后3次复发，于发病后13个月死于中枢神经系统白血病。因未见类似报道，故暂命名为非大颗粒细胞性NK细胞白血病。(2)据报道，AML病例中约有10%～20%伴有CD\++\-7，有人认为可能具特殊意义(6)，但亦有持相反意见(7)。本文在AML未发现CD\++\-7，但在1例慢性期CML中可见CD\++\-7，另外还有3例表达CD\-\{33\}\++，是否可作为预计进入加速期的指征，尚应予以探索。(3)淋巴瘤中HD免疫学检测显示多系表达，而NHL免疫表型较为单一，但因例数太少，未能定论。
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由于细胞表面标志的高度异质性，致使需用各种针对不同白细胞分化抗原的单抗配套，然后综合分析。目前提供的淋巴系单抗能反应细胞的分化成熟阶段，但髓细胞抗原则主要反应细胞起源，临床上分析仍有相当的差距和难度。配套单抗过简可能会造成误诊或特殊类型的漏诊，过繁则难以操作，并浪费医疗资源。建议继续调整免疫分型的单抗谱系，更精确地反映造血系肿瘤的类型及程度，指导临床治疗。
参考文献
[1]朱平.急性白血病分型的进展和建议.实验血液学杂志 1997；5(1)：42
[2]陆道培.白血病治疗学.北京：科学出版社，1992：123
[3]张之南.白血病诊断及疗效标准.天津：科技出版社，1991：98
[4]戴瑞鸿，林果为.内科学新理论与新技术.上海：上海科教出版社，1995：33
, 百拇医药
[5]Bene MC，Castoldi G，Knapp W，et al.Proposals for the immunological classification of acute leukemias.European Group for the Immunological Characterization of Leukemias (EGIL).Leukemia 1995;9(10):1783
[6]刘征辉.CD\-7阳性的急性髓细胞白血病.国外医学.输血及血液学分册 1995；18(4)：212
[7]Lauria F，Raspadori D，Ventura MA，et al.The presence of lymphoid associated antigens in adult acute myeloid leukemia is devoid of prognostic relevance.Stem Cells Dayt 1995;13(4):428, 百拇医药