中药热毒清治疗人巨细胞病毒感染
作者：姜宏 闻良珍 凌霞珍 陈素华
单位：430030 武汉，同济医科大学附属同济医院妇产科；姜宏，现在合肥市解放军第105医院妇产科
关键词：
中华传染病杂志990417
妊娠期人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染已成为影响胎儿及新生儿生长发育的常见病因，但目前尚无对妊娠期HCMV活动性感染安全有效的治疗方法。我们应用热毒清治疗HCMV活动性感染的育龄妇女和孕妇，通过治疗前、后IL-2和TNF-α的测定，探讨热毒清的临床疗效及作用机制。
临床资料
一、一般资料
1997年3月至1998年2月，从在我院门诊及病房就诊306例有异常妊娠史的孕妇中，筛选有异常妊娠史抗-HCMV-IgM阳性育龄妇女和孕妇共70例，其中育龄妇女50例，年龄22～34岁，平均26岁；中孕妇女20例，年龄22～32岁，平均26岁；选择20例抗-HCMV-IgM阴性育龄妇女作为对照，年龄22～28岁，平均25岁。
, 百拇医药
二、治疗方法及疗效观察
对28例抗-HCMV-IgM阳性育龄妇女和20例中孕妇女给予热毒清冲剂(主要成份为金银花、鱼腥草、大青叶、蒲公英等)治疗，每日3剂，连服2周，停药3～7天复查抗-HCMV-IgM，观察其转阴率；另22例抗-HCMV-IgM阳性育龄妇女未给任何治疗，3周后复查抗-HCMV-IgM的自然转阴率。
三、抗-HCMV-IgM及IL-2和TNF-α的检测
(一)标本采集 抽取研究对象外周血2ml，分离血清，分成2管，冻存于-20°C，分别用于测定抗-HCMV-IgM和IL-2和TNF-α。
(二)抗-HCMV-IgM的检测 采用ELISA法，试剂盒购自美国Hope公司，操作按说明书进行。
(三)IL-2和TNF-α的检测 采用双抗体夹心ELISA法测定治疗前后患者血清IL-2和TNF-α含量，以20例正常育龄妇女血清IL-2和TNF-α值作为正常对照，试剂盒购自美国Genzyme公司，按说明书进行操作。制作IL-2和TNF-α的标准浓度曲线及直线回归方程，将所测A值代入回归方程，算出IL-2和TNF-α的含量。
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四、统计处理
采用χ2及配对或非配对t检验。
结果
一、抗-HCMV-IgM的转阴率
48例抗-HCMV-IgM阳性育龄妇女及孕妇经中药热毒清治疗后35例转阴，转阴率为72.9%，22例未经治疗的抗-HCMV-IgM阳性患者3周后复查3例转阴，自然转阴率为13.6%，两者差异有极显著性(χ2=21.36,P<0.01)。
二、抗-HCMV-IgM阳性患者IL-2和TNF-α的改变(表1)
表1 抗-HCMV-IgM阳性患者IL-2和TNF-α水平(
) 组 别
, http://www.100md.com
例数
IL-2(pg/ml)
TNF-α(pg/ml)
正常育龄妇女
20
245.45±193.34
49.85±25.92
抗-HCMV-IgM
阳性育龄妇女
28
68.31±44.45
99.95±64.29
, 百拇医药
由表1可见，抗-HCMV-IgM阳性育龄妇女IL-2水平较阴性妇女明显降低，而TNF-α则明显升高，差异均有显著性(t值分别为4.70和3.03，P值均小于0.01)。
三、热毒清治疗前后抗-HCMV-IgM阳性患者IL-2和TNF-α的改变(表2)
表2 热毒清治疗前后抗-HCMV-IgM阳性患者IL-2和TNF-α水平() 组 别
例数
IL-2(pg/ml)
TNF-α(pg/ml)
治疗前
治疗后
, 百拇医药
治疗前
治疗后
IgM阳性育龄妇女
28
68.31±44.45
247.54±160.85
95.95±64.29
60.44
抗-HCMV-IgM
阳性孕妇
20
83.87±73.76
, http://www.100md.com
290.16±129.55
136.30±82.67
52.15
由表2可见，经热毒清治疗后抗-HCMV-IgM阳性育龄妇女和孕妇IL-2水平较治疗前有显著性升高(t值分别为5.68和6.19，P值均<0.01)；而TNF-α则较治疗前有显著性下降(t值分别为2.87和4.37，P值均<0.01)。讨论
本实验的结果显示HCMV活动性感染的育龄妇女和孕妇TNF-α水平显著升高，经热毒清治疗抗-HCMV-IgM转阴后迅速下降至正常水平，表明TNF-α水平的升高与HCMV活动性感染有关，可作为HCMV活动性感染的一项参考指标。
IL-2来源于活化的TH细胞，是T淋巴细胞受抗原刺激后所产生的具有免疫调节作用的淋巴因子，有实验证明IL-2可明显抑制HCMV的增殖，并可增加CD3抗HCMV特异性T淋巴细胞的数量[1]，在抗病毒免疫中起着重要作用。HCMC感染机体后可通过直接侵犯免疫系统，造成免疫功能的损伤，使得宿主的外周血CD4+/CD8+下降[2]。本实验的结果也证实HCMV活动性感染育龄妇女和孕妇IL-2水平显著下降，表明机体的免疫功能受到抑制，导致一些具有抗病毒效应的淋巴因子减少，这可能是HCMV能够长期潜伏在体内并在一定条件下引起病理损害的重要原因。
, 百拇医药
由于孕期HCMV活动性感染率可对胎儿及新生儿的生长发育产生严重影响，因此在积极预防HCMV感染的同时应加强孕期抗HCMV的治疗。
中药热毒清系本院中西医结合研究所研制的一种纯中药制剂，其主要成份为金银花、鱼腥草、大青叶、蒲公英等，经30余年的基础研究和临床应用，证实该药具有抗病毒及提高机体免疫功能的作用[3～5]，临床使用前的毒性实验及安全性实验均为阴性。本实验在前期热毒清体外抑制HCMV的基础上，将其应用于HCMV活动性感染育龄妇女和孕妇的临床治疗，取得满意的结果，抗-HCMC-IgM转阴率为72.9%，显著高于对照组。通过治疗前后IL-2和TNF-α的测定，发现热毒清治疗后患者血清IL-2水平显著升高，TNF-α显著下降，表明热毒清在体内可通过提高机体免疫功能而发挥其抗HCMV作用。治疗期间对患者心、肝、肾等重要器官均无明显毒性作用，随访8例新生儿均未发现异常。
中药热毒清具有药源充足，经济方便，安全范围大，患者易接受等优点，能显著提高机体免疫功能，在体内外均有良好的抗HCMV作用，是治疗育龄妇女和孕妇活动性HCMV感染的一种安全有效的药物，值得临床进一步推广应用。
, 百拇医药
本课题为国家“九五”重点攻关资助项目
参考文献
1 Reddehase MD,Mutter W,Koszinows UH,et al.In Vivo application of recombinant interleukin-2 in the immunotherapy of established cytomegalovirus infection.J Exp Med,1987,165:650-656.
2 张文卿，邵济钧.巨细胞病毒感染的孕妇外周血T淋巴细胞亚群的分析.中华微生物和免疫学杂志，1992，12：106-108.
3 江汉珍，卢银平，董继华，等.热毒清抗合胞病毒、流感病毒的实验研究.同济医科大学学报，1996，25(suppl 1):5-8.
4 薛绍华，等.中药“抗炎6号”注射液抗感染作用机理的实验研究——Ⅰ.对非特异性免疫功能的影响.武汉医学院学报，1984，4：286-288.
5 薛绍华，等.中药“抗炎6号”注射液抗感染作用机理的实验研究——Ⅱ.对特异性体液免疫应答功能的影响.武汉医学院学报，1984，5：344-347.
(收稿：1998-11-17 修回：1999-05-25), 百拇医药
单位：430030 武汉，同济医科大学附属同济医院妇产科；姜宏，现在合肥市解放军第105医院妇产科
关键词：
中华传染病杂志990417
妊娠期人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染已成为影响胎儿及新生儿生长发育的常见病因，但目前尚无对妊娠期HCMV活动性感染安全有效的治疗方法。我们应用热毒清治疗HCMV活动性感染的育龄妇女和孕妇，通过治疗前、后IL-2和TNF-α的测定，探讨热毒清的临床疗效及作用机制。
临床资料
一、一般资料
1997年3月至1998年2月，从在我院门诊及病房就诊306例有异常妊娠史的孕妇中，筛选有异常妊娠史抗-HCMV-IgM阳性育龄妇女和孕妇共70例，其中育龄妇女50例，年龄22～34岁，平均26岁；中孕妇女20例，年龄22～32岁，平均26岁；选择20例抗-HCMV-IgM阴性育龄妇女作为对照，年龄22～28岁，平均25岁。
, 百拇医药
二、治疗方法及疗效观察
对28例抗-HCMV-IgM阳性育龄妇女和20例中孕妇女给予热毒清冲剂(主要成份为金银花、鱼腥草、大青叶、蒲公英等)治疗，每日3剂，连服2周，停药3～7天复查抗-HCMV-IgM，观察其转阴率；另22例抗-HCMV-IgM阳性育龄妇女未给任何治疗，3周后复查抗-HCMV-IgM的自然转阴率。
三、抗-HCMV-IgM及IL-2和TNF-α的检测
(一)标本采集 抽取研究对象外周血2ml，分离血清，分成2管，冻存于-20°C，分别用于测定抗-HCMV-IgM和IL-2和TNF-α。
(二)抗-HCMV-IgM的检测 采用ELISA法，试剂盒购自美国Hope公司，操作按说明书进行。
(三)IL-2和TNF-α的检测 采用双抗体夹心ELISA法测定治疗前后患者血清IL-2和TNF-α含量，以20例正常育龄妇女血清IL-2和TNF-α值作为正常对照，试剂盒购自美国Genzyme公司，按说明书进行操作。制作IL-2和TNF-α的标准浓度曲线及直线回归方程，将所测A值代入回归方程，算出IL-2和TNF-α的含量。
, http://www.100md.com
四、统计处理
采用χ2及配对或非配对t检验。
结果
一、抗-HCMV-IgM的转阴率
48例抗-HCMV-IgM阳性育龄妇女及孕妇经中药热毒清治疗后35例转阴，转阴率为72.9%，22例未经治疗的抗-HCMV-IgM阳性患者3周后复查3例转阴，自然转阴率为13.6%，两者差异有极显著性(χ2=21.36,P<0.01)。
二、抗-HCMV-IgM阳性患者IL-2和TNF-α的改变(表1)
表1 抗-HCMV-IgM阳性患者IL-2和TNF-α水平(
) 组 别, http://www.100md.com
例数
IL-2(pg/ml)
TNF-α(pg/ml)
正常育龄妇女
20
245.45±193.34
49.85±25.92
抗-HCMV-IgM
阳性育龄妇女
28
68.31±44.45
99.95±64.29
, 百拇医药
由表1可见，抗-HCMV-IgM阳性育龄妇女IL-2水平较阴性妇女明显降低，而TNF-α则明显升高，差异均有显著性(t值分别为4.70和3.03，P值均小于0.01)。
三、热毒清治疗前后抗-HCMV-IgM阳性患者IL-2和TNF-α的改变(表2)
表2 热毒清治疗前后抗-HCMV-IgM阳性患者IL-2和TNF-α水平(
) 组 别例数
IL-2(pg/ml)
TNF-α(pg/ml)
治疗前
治疗后
, 百拇医药
治疗前
治疗后
IgM阳性育龄妇女
28
68.31±44.45
247.54±160.85
95.95±64.29
60.44
抗-HCMV-IgM
阳性孕妇
20
83.87±73.76
, http://www.100md.com
290.16±129.55
136.30±82.67
52.15
由表2可见，经热毒清治疗后抗-HCMV-IgM阳性育龄妇女和孕妇IL-2水平较治疗前有显著性升高(t值分别为5.68和6.19，P值均<0.01)；而TNF-α则较治疗前有显著性下降(t值分别为2.87和4.37，P值均<0.01)。讨论
本实验的结果显示HCMV活动性感染的育龄妇女和孕妇TNF-α水平显著升高，经热毒清治疗抗-HCMV-IgM转阴后迅速下降至正常水平，表明TNF-α水平的升高与HCMV活动性感染有关，可作为HCMV活动性感染的一项参考指标。
IL-2来源于活化的TH细胞，是T淋巴细胞受抗原刺激后所产生的具有免疫调节作用的淋巴因子，有实验证明IL-2可明显抑制HCMV的增殖，并可增加CD3抗HCMV特异性T淋巴细胞的数量[1]，在抗病毒免疫中起着重要作用。HCMC感染机体后可通过直接侵犯免疫系统，造成免疫功能的损伤，使得宿主的外周血CD4+/CD8+下降[2]。本实验的结果也证实HCMV活动性感染育龄妇女和孕妇IL-2水平显著下降，表明机体的免疫功能受到抑制，导致一些具有抗病毒效应的淋巴因子减少，这可能是HCMV能够长期潜伏在体内并在一定条件下引起病理损害的重要原因。
, 百拇医药
由于孕期HCMV活动性感染率可对胎儿及新生儿的生长发育产生严重影响，因此在积极预防HCMV感染的同时应加强孕期抗HCMV的治疗。
中药热毒清系本院中西医结合研究所研制的一种纯中药制剂，其主要成份为金银花、鱼腥草、大青叶、蒲公英等，经30余年的基础研究和临床应用，证实该药具有抗病毒及提高机体免疫功能的作用[3～5]，临床使用前的毒性实验及安全性实验均为阴性。本实验在前期热毒清体外抑制HCMV的基础上，将其应用于HCMV活动性感染育龄妇女和孕妇的临床治疗，取得满意的结果，抗-HCMC-IgM转阴率为72.9%，显著高于对照组。通过治疗前后IL-2和TNF-α的测定，发现热毒清治疗后患者血清IL-2水平显著升高，TNF-α显著下降，表明热毒清在体内可通过提高机体免疫功能而发挥其抗HCMV作用。治疗期间对患者心、肝、肾等重要器官均无明显毒性作用，随访8例新生儿均未发现异常。
中药热毒清具有药源充足，经济方便，安全范围大，患者易接受等优点，能显著提高机体免疫功能，在体内外均有良好的抗HCMV作用，是治疗育龄妇女和孕妇活动性HCMV感染的一种安全有效的药物，值得临床进一步推广应用。
, 百拇医药
本课题为国家“九五”重点攻关资助项目
参考文献
1 Reddehase MD,Mutter W,Koszinows UH,et al.In Vivo application of recombinant interleukin-2 in the immunotherapy of established cytomegalovirus infection.J Exp Med,1987,165:650-656.
2 张文卿，邵济钧.巨细胞病毒感染的孕妇外周血T淋巴细胞亚群的分析.中华微生物和免疫学杂志，1992，12：106-108.
3 江汉珍，卢银平，董继华，等.热毒清抗合胞病毒、流感病毒的实验研究.同济医科大学学报，1996，25(suppl 1):5-8.
4 薛绍华，等.中药“抗炎6号”注射液抗感染作用机理的实验研究——Ⅰ.对非特异性免疫功能的影响.武汉医学院学报，1984，4：286-288.
5 薛绍华，等.中药“抗炎6号”注射液抗感染作用机理的实验研究——Ⅱ.对特异性体液免疫应答功能的影响.武汉医学院学报，1984，5：344-347.
(收稿：1998-11-17 修回：1999-05-25), 百拇医药