人工虫草对慢性肾功能衰竭患者肾功能及免疫功能的影响
作者：杨焕荣 张春梅 马景春 刘晓琴 侯美玲
单位：262500 山东潍坊医学院附属青州医院肾内科
关键词：肾功能衰竭，慢性；细胞免疫；体液免疫；人工虫草；血肌酐；血红蛋白
中西医结合实用临床急救990409 摘要 目的：探讨人工虫草对慢性肾功能衰竭患者肾功能及免疫功能的影响。方法：53例慢性肾功能衰竭患者随机分为2组，治疗组29例给予人工虫草菌丝粉(金水宝胶囊)及常规西药对症治疗；对照组24例单用相同西药治疗。结果：53例慢性肾功能衰竭患者与健康人比较，单克隆抗体OKT3、OKT4及OKT8均明显降低(P均<0.01)。治疗组治疗后OKT8明显降低(0.14±0.09比0.24±0.10)，OKT4/OKT8明显升高(1.97±0.54比1.02±0.48)，P均<0.01；对体液免疫无影响。治疗组患者血红蛋白升高〔(78.50±0.53)g/L升至(87.20±0.44)g/L〕，血肌酐明显下降〔(478.5±196.4)μmol/L比(351.7±137.3)μmol/L〕，P均<0.05。结论：人工虫草具有调整慢性肾功能衰竭患者细胞免疫的作用，并能改善肾性贫血及肾功能。
, 百拇医药
Influences of artifical cordyceps sinensis on renal functions and immune functions in patients with chronic renal failure
Yang Huanrong,Zhang Chunmei,Ma Jingchun,et al.
Qingzhou Hospital,Weifang Medical College,Shandong 262500
Abstract Objective:To investigate the influences of artificial cordyceps sinensis (ACS) on renal functions and immune functions in patients with chronic renal function(CRF).Methods:53 cases with CRF were randomly divided into two groups.The treatment group was treated with hypha powder of ACS 〔i.e Jinshuibao Capsule(金水宝胶囊)〕 and conventional western medicine for relieving symptoms otherwise the control group treated with same western medicine alone.Results:In comparison between 53 cases with CRF and healthy subjects the monoclonal antibodies OKT3,OKT4，and OKT8 in the former were significantly depressed (all P<0.01).After therapy in treatment group the OKT8 was significantly depressed (0.14±0.09 vs.0.24±0.10),OKT4/OKT8 significantly elevated (1.97±0.54 vs.1.02±0.48,all P<0.01).There was not influence on humoural immunities.The hemoglobin was increased 〔(78.50±0.53)g/L vs. (87.20±0.44)g/L〕 and blood creatinine decreased 〔(478.5±196.4)μmol/L vs. (351.7±137.3)μmol/L〕 significantly (all P<0.05).Conclusions:ACS possesses the actions on regulating cell immunities in patients with CRF and is able to improve renal anemia and renal functions.
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Key words chronic renal failure cellular immunity humoural immunity artificial cordyceps sinensis serum creatinine hemoglobin
慢性肾功能衰竭(CRF)患者细胞免疫受损的观点已被证实〔1，2〕。提高患者的细胞免疫功能和机体整体防御能力，将有助于增强CRF患者的抗病能力，延长患者的生命。我们观察了人工虫草菌丝粉(金水宝胶囊)对CRF患者免疫功能及肾功能的影响，并对其临床疗效的机制进行初步分析和探讨。
1 资料与方法
1.1 临床资料：选择我院住院的CRF患者53例，诊断按文献〔3〕标准。其中男29例，女24例；年龄18.7～57.7岁，平均38.2岁；病程2.6～4.2年，平均3.4年。原发病：慢性肾小球肾炎32例，慢性肾盂肾炎9例，狼疮性肾炎6例，其他肾病6例。所有患者血肌酐(SCr)均>350 μmol/L，肌酐清除率(CCr)均<0.42 ml.s-1.1.73 m-2。
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1.2 治疗方法：将53例CRF患者随机分为2组，治疗组29例中男16例，女13例；平均年龄37.9岁；平均病程3.17年。对照组24例中男13例，女11例；平均年龄38.5岁；平均病程3.63年。2组患者年龄和病程等有可比性。治疗组给予金水宝胶囊2粒，每日3次；并给予常规对症治疗(所用西药皆对免疫功能无影响，如卡托普利、速尿等)；对照组只用相同西药。疗程均为8周。并选择20例健康人作正常对照(正常组)，其中男10例，女10例；年龄20.2～55.3岁，平均37.7岁。
1.3 实验方法：血清IgA、IgG、IgM及C3采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法。T淋巴细胞亚群检查采用改良四层PAP法测定：取肝素抗凝的外周血，淋巴细胞分离液分离单个核细胞，用PPMI 1640洗 涤后调成浓度为1×109/L，滴于玻片上吹干、固定。分别加单克隆抗体OKT3、OKT4及OKT8(均为武汉生物制品研究所产品)，在37 ℃下放置2小时，PBS洗涤3次后依次加兔抗人多克隆抗体，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体及PAP，洗涤后加苏木素染色、冲洗、封片。血红蛋白(Hb)、SCr、血尿素氮(BUN)均按本院的常规方法检测。
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1.4 统计学方法：检测数据用均数±标准差(
±s)表示，t检验，P<0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 人工虫草对CRF患者肾功能的影响：治疗组29例患者SCr由(478.5±196.4)μmol/L降为(351.7±137.3)μmol(P<0.05)，Hb由(78.50±0.53)g/L升为(87.20±0.44)g/L(P<0.05)；对照组SCr由(456.7±201.3)μmol/L降为(376.9±159.4)μmol/L(P<0.05)，Hb由(73.6±0.94)g/L上升为(75.2±0.37)g/L(P>0.05)。2组比较治疗组疗效更明显。表明人工虫草具有改善肾性贫血及肾功能的作用。
2.2 人工虫草对CRF患者体液免疫和细胞免疫的影响见表1。CRF患者IgA、IgG均较正常组低(P均<0.01)，IgM和C3与正常组比较无显著性差异(P均>0.05)。治疗组与对照组比较，体液免疫各项指标均无显著性差异(P>0.05)，表明人工虫草对CRF患者体液免疫无影响。53例CRF患者与健康人比较：OKT3、OKT4及OKT8均有显著下降(P均<0.01)。治疗组治疗8周后OKT8降低，OKT4/OKT8升高；对照组各项指标治疗前后均无显著性差异(P均>0.05)。表明人工虫草具有调整CRF患者T淋巴细胞亚群比例的作用。2组比较治疗组OKT8降低及OKT4/OKT8升高更明显(P均<0.01)。
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表1 人工虫草对CRF患者体液免疫和细胞免疫的影响(±s) 组别
例数
(例)
体液免疫
细胞免疫
IgA(g/L)
IgG(g/L)
IgM(g/L)
C3(U)
OKT3
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OKT4
OKT8
OKT4/OKT8
正常组
20
5.90±0.27
8.90±1.20
1.30±0.07
128±25
0.67±0.09
0.43±0.08
, 百拇医药
0.35±0.08
1.39±0.54
治疗组
治疗前
29
3.80±1.02
4.70±0.56
1.15±0.37
123±25
0.49±0.06
0.28±0.05
0.24±0.10
, 百拇医药
1.02±0.48
治疗后
29
3.70±0.40＃
5.00±1.12＃
1.41±0.56
118±34
0.57±0.07＃
0.27±0.04＃
0.14±0.09*△＃
1.97±0.54△*＃
, 百拇医药
对照组
治疗前
24
3.76±0.73
4.83±0.50
1.29±0.56
127±17
0.52±0.11
0.27±0.04
0.25±0.16
1.03±0.67
治疗后
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24
3.58±1.00
4.76±0.49
1.32±0.33
124±14
0.54±0.12
0.25±0.05
0.26±0.13
0.96±0.84
注：与对照组治疗后比较：*P<0.01；与本组治疗前比较：△P<0.01；与正常组比较：＃P<0.01
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3 讨论
据祖国医学文献记载，冬虫夏草具有“保肺益肾、秘精益气”〔4〕的作用。近年来许多学者〔57〕从不同学科、不同方面进行了研究，发现冬虫夏草具有复杂的药理作用及广泛的实用价值，具有延缓CRF大鼠的肾功能减退，减轻蛋白尿，纠正氨基酸、蛋白质和脂质代谢紊乱，抑制残余肾组织的肾小球硬化和肾小管间质损伤的发展等作用。
人工虫草系从青海冬虫夏草中分离所得的拟青霉Cs4菌株，经纯化、人工发酵加工而成，含有19种氨基酸，其中7种为必需氨基酸，具有降低血脂，增加心、脑供血，轻度降血压，抑制血小板聚集，延长缺氧动物生存时间，抗炎、止咳，促性腺及降低过氧化脂质等作用〔8〕。我们的研究发现：CRF患者无论在体液免疫及细胞免疫方面均较正常人降低。人工虫草对CRF患者体液免疫无影响，而对细胞免疫中T淋巴细胞亚群比例具有调节作用，这可能与CRF患者长期低蛋白饮食或不能进食，机体内环境和内分泌代谢以及蛋白质、氨基酸、脂质代谢等处于紊乱状态，影响了细胞的免疫功能有关。而人工虫草通过调整这种紊乱状态而达到调整T细胞亚群比例的作用。人工虫草能降低过氧化脂质，清除自由基，稳定细胞膜，有利于细胞免疫功能的恢复。我们研究结果还表明，治疗后CRF患者血红蛋白水平升高，血肌酐下降，长期应用有利于纠正CRF患者的肾性贫血，保护细胞免疫功能，提高患者的生存质量。
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作者简介：杨焕荣，男，35岁，讲师，主治医师。
4 参考文献
1 马路，徐淑芹，张爱莲.慢性肾功能衰竭病人血清对正常人细胞免疫功能的影响.中华肾脏病杂志，1991；7(4)：306307
2 Lindner A,Karkiulakis G D,Missirlis E,et al.High incidence of neoplasia in uremic patients receiving congterm dialysis.Nephron,1981；27:292297
3 中国人民解放军总后勤部卫生部.临床疾病诊断依据.第1版.北京：人民军医出版社，1987：232233
4 赵学敏(清).本草纲目拾遗.第3版.北京：人民卫生出版社，1957：130131
, 百拇医药
5 赵学智，黎磊石.冬虫夏草对环孢霉素A急性肾毒性保护作用的实验研究.中华肾脏病杂志，1995；11(2)：2325
6 刘强，侯积寿，马济民，等.虫草影响慢性肾功能衰竭进展的实验研究.中华肾脏病杂志，1995；11(2)：8182
7 Muszber K L,Szabot,Fesus L，et al.A highly sensitive method for the measurement of ATPase activity.Anal Biochem,1977;7(1):286289
8 郭用庄.发酵虫草及其制剂金水宝胶囊的药化、药理及临床应用.现代诊断学与治疗杂志，1996；1(1)：6062
(收稿：19980703 修回：19990314), 百拇医药
单位：262500 山东潍坊医学院附属青州医院肾内科
关键词：肾功能衰竭，慢性；细胞免疫；体液免疫；人工虫草；血肌酐；血红蛋白
中西医结合实用临床急救990409 摘要 目的：探讨人工虫草对慢性肾功能衰竭患者肾功能及免疫功能的影响。方法：53例慢性肾功能衰竭患者随机分为2组，治疗组29例给予人工虫草菌丝粉(金水宝胶囊)及常规西药对症治疗；对照组24例单用相同西药治疗。结果：53例慢性肾功能衰竭患者与健康人比较，单克隆抗体OKT3、OKT4及OKT8均明显降低(P均<0.01)。治疗组治疗后OKT8明显降低(0.14±0.09比0.24±0.10)，OKT4/OKT8明显升高(1.97±0.54比1.02±0.48)，P均<0.01；对体液免疫无影响。治疗组患者血红蛋白升高〔(78.50±0.53)g/L升至(87.20±0.44)g/L〕，血肌酐明显下降〔(478.5±196.4)μmol/L比(351.7±137.3)μmol/L〕，P均<0.05。结论：人工虫草具有调整慢性肾功能衰竭患者细胞免疫的作用，并能改善肾性贫血及肾功能。
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Influences of artifical cordyceps sinensis on renal functions and immune functions in patients with chronic renal failure
Yang Huanrong,Zhang Chunmei,Ma Jingchun,et al.
Qingzhou Hospital,Weifang Medical College,Shandong 262500
Abstract Objective:To investigate the influences of artificial cordyceps sinensis (ACS) on renal functions and immune functions in patients with chronic renal function(CRF).Methods:53 cases with CRF were randomly divided into two groups.The treatment group was treated with hypha powder of ACS 〔i.e Jinshuibao Capsule(金水宝胶囊)〕 and conventional western medicine for relieving symptoms otherwise the control group treated with same western medicine alone.Results:In comparison between 53 cases with CRF and healthy subjects the monoclonal antibodies OKT3,OKT4，and OKT8 in the former were significantly depressed (all P<0.01).After therapy in treatment group the OKT8 was significantly depressed (0.14±0.09 vs.0.24±0.10),OKT4/OKT8 significantly elevated (1.97±0.54 vs.1.02±0.48,all P<0.01).There was not influence on humoural immunities.The hemoglobin was increased 〔(78.50±0.53)g/L vs. (87.20±0.44)g/L〕 and blood creatinine decreased 〔(478.5±196.4)μmol/L vs. (351.7±137.3)μmol/L〕 significantly (all P<0.05).Conclusions:ACS possesses the actions on regulating cell immunities in patients with CRF and is able to improve renal anemia and renal functions.
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Key words chronic renal failure cellular immunity humoural immunity artificial cordyceps sinensis serum creatinine hemoglobin
慢性肾功能衰竭(CRF)患者细胞免疫受损的观点已被证实〔1，2〕。提高患者的细胞免疫功能和机体整体防御能力，将有助于增强CRF患者的抗病能力，延长患者的生命。我们观察了人工虫草菌丝粉(金水宝胶囊)对CRF患者免疫功能及肾功能的影响，并对其临床疗效的机制进行初步分析和探讨。
1 资料与方法
1.1 临床资料：选择我院住院的CRF患者53例，诊断按文献〔3〕标准。其中男29例，女24例；年龄18.7～57.7岁，平均38.2岁；病程2.6～4.2年，平均3.4年。原发病：慢性肾小球肾炎32例，慢性肾盂肾炎9例，狼疮性肾炎6例，其他肾病6例。所有患者血肌酐(SCr)均>350 μmol/L，肌酐清除率(CCr)均<0.42 ml.s-1.1.73 m-2。
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1.2 治疗方法：将53例CRF患者随机分为2组，治疗组29例中男16例，女13例；平均年龄37.9岁；平均病程3.17年。对照组24例中男13例，女11例；平均年龄38.5岁；平均病程3.63年。2组患者年龄和病程等有可比性。治疗组给予金水宝胶囊2粒，每日3次；并给予常规对症治疗(所用西药皆对免疫功能无影响，如卡托普利、速尿等)；对照组只用相同西药。疗程均为8周。并选择20例健康人作正常对照(正常组)，其中男10例，女10例；年龄20.2～55.3岁，平均37.7岁。
1.3 实验方法：血清IgA、IgG、IgM及C3采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法。T淋巴细胞亚群检查采用改良四层PAP法测定：取肝素抗凝的外周血，淋巴细胞分离液分离单个核细胞，用PPMI 1640洗 涤后调成浓度为1×109/L，滴于玻片上吹干、固定。分别加单克隆抗体OKT3、OKT4及OKT8(均为武汉生物制品研究所产品)，在37 ℃下放置2小时，PBS洗涤3次后依次加兔抗人多克隆抗体，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体及PAP，洗涤后加苏木素染色、冲洗、封片。血红蛋白(Hb)、SCr、血尿素氮(BUN)均按本院的常规方法检测。
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1.4 统计学方法：检测数据用均数±标准差(
±s)表示，t检验，P<0.05为差异有显著性。2 结果
2.1 人工虫草对CRF患者肾功能的影响：治疗组29例患者SCr由(478.5±196.4)μmol/L降为(351.7±137.3)μmol(P<0.05)，Hb由(78.50±0.53)g/L升为(87.20±0.44)g/L(P<0.05)；对照组SCr由(456.7±201.3)μmol/L降为(376.9±159.4)μmol/L(P<0.05)，Hb由(73.6±0.94)g/L上升为(75.2±0.37)g/L(P>0.05)。2组比较治疗组疗效更明显。表明人工虫草具有改善肾性贫血及肾功能的作用。
2.2 人工虫草对CRF患者体液免疫和细胞免疫的影响见表1。CRF患者IgA、IgG均较正常组低(P均<0.01)，IgM和C3与正常组比较无显著性差异(P均>0.05)。治疗组与对照组比较，体液免疫各项指标均无显著性差异(P>0.05)，表明人工虫草对CRF患者体液免疫无影响。53例CRF患者与健康人比较：OKT3、OKT4及OKT8均有显著下降(P均<0.01)。治疗组治疗8周后OKT8降低，OKT4/OKT8升高；对照组各项指标治疗前后均无显著性差异(P均>0.05)。表明人工虫草具有调整CRF患者T淋巴细胞亚群比例的作用。2组比较治疗组OKT8降低及OKT4/OKT8升高更明显(P均<0.01)。
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表1 人工虫草对CRF患者体液免疫和细胞免疫的影响(
±s) 组别例数
(例)
体液免疫
细胞免疫
IgA(g/L)
IgG(g/L)
IgM(g/L)
C3(U)
OKT3
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OKT4
OKT8
OKT4/OKT8
正常组
20
5.90±0.27
8.90±1.20
1.30±0.07
128±25
0.67±0.09
0.43±0.08
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0.35±0.08
1.39±0.54
治疗组
治疗前
29
3.80±1.02
4.70±0.56
1.15±0.37
123±25
0.49±0.06
0.28±0.05
0.24±0.10
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1.02±0.48
治疗后
29
3.70±0.40＃
5.00±1.12＃
1.41±0.56
118±34
0.57±0.07＃
0.27±0.04＃
0.14±0.09*△＃
1.97±0.54△*＃
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对照组
治疗前
24
3.76±0.73
4.83±0.50
1.29±0.56
127±17
0.52±0.11
0.27±0.04
0.25±0.16
1.03±0.67
治疗后
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24
3.58±1.00
4.76±0.49
1.32±0.33
124±14
0.54±0.12
0.25±0.05
0.26±0.13
0.96±0.84
注：与对照组治疗后比较：*P<0.01；与本组治疗前比较：△P<0.01；与正常组比较：＃P<0.01
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3 讨论
据祖国医学文献记载，冬虫夏草具有“保肺益肾、秘精益气”〔4〕的作用。近年来许多学者〔57〕从不同学科、不同方面进行了研究，发现冬虫夏草具有复杂的药理作用及广泛的实用价值，具有延缓CRF大鼠的肾功能减退，减轻蛋白尿，纠正氨基酸、蛋白质和脂质代谢紊乱，抑制残余肾组织的肾小球硬化和肾小管间质损伤的发展等作用。
人工虫草系从青海冬虫夏草中分离所得的拟青霉Cs4菌株，经纯化、人工发酵加工而成，含有19种氨基酸，其中7种为必需氨基酸，具有降低血脂，增加心、脑供血，轻度降血压，抑制血小板聚集，延长缺氧动物生存时间，抗炎、止咳，促性腺及降低过氧化脂质等作用〔8〕。我们的研究发现：CRF患者无论在体液免疫及细胞免疫方面均较正常人降低。人工虫草对CRF患者体液免疫无影响，而对细胞免疫中T淋巴细胞亚群比例具有调节作用，这可能与CRF患者长期低蛋白饮食或不能进食，机体内环境和内分泌代谢以及蛋白质、氨基酸、脂质代谢等处于紊乱状态，影响了细胞的免疫功能有关。而人工虫草通过调整这种紊乱状态而达到调整T细胞亚群比例的作用。人工虫草能降低过氧化脂质，清除自由基，稳定细胞膜，有利于细胞免疫功能的恢复。我们研究结果还表明，治疗后CRF患者血红蛋白水平升高，血肌酐下降，长期应用有利于纠正CRF患者的肾性贫血，保护细胞免疫功能，提高患者的生存质量。
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作者简介：杨焕荣，男，35岁，讲师，主治医师。
4 参考文献
1 马路，徐淑芹，张爱莲.慢性肾功能衰竭病人血清对正常人细胞免疫功能的影响.中华肾脏病杂志，1991；7(4)：306307
2 Lindner A,Karkiulakis G D,Missirlis E,et al.High incidence of neoplasia in uremic patients receiving congterm dialysis.Nephron,1981；27:292297
3 中国人民解放军总后勤部卫生部.临床疾病诊断依据.第1版.北京：人民军医出版社，1987：232233
4 赵学敏(清).本草纲目拾遗.第3版.北京：人民卫生出版社，1957：130131
, 百拇医药
5 赵学智，黎磊石.冬虫夏草对环孢霉素A急性肾毒性保护作用的实验研究.中华肾脏病杂志，1995；11(2)：2325
6 刘强，侯积寿，马济民，等.虫草影响慢性肾功能衰竭进展的实验研究.中华肾脏病杂志，1995；11(2)：8182
7 Muszber K L,Szabot,Fesus L，et al.A highly sensitive method for the measurement of ATPase activity.Anal Biochem,1977;7(1):286289
8 郭用庄.发酵虫草及其制剂金水宝胶囊的药化、药理及临床应用.现代诊断学与治疗杂志，1996；1(1)：6062
(收稿：19980703 修回：19990314), 百拇医药