血液病患者血中某些VB12和叶酸的放射免疫测定意义
作者：陈检芳 刘秀兰 郑 衡 谢兆霞
单位：陈检芳 刘秀兰 同位素室 长沙 410078；郑 衡 谢兆霞 附属湘雅医院血液病研究室 长沙 410008
关键词：血液病；叶酸；维生素B12；血清；放射免疫测定
湖南医科大学学报990528 中国图书分类号 R552
血液病患者血细胞增殖异常，导致体内维行素B12(VB12)和叶酸(FA)代谢紊乱。当VB12和FA缺乏时，同样可致巨幼细胞性贫血[1～4]。Mollin等[3]报道巨幼细胞贫血时，血中VB12和FA减低常先于血细胞形态异常改变。有学者认为血清中VB12和FA浓度低下与骨髓细胞出现巨幼样异常病变符合率达95%。中枢神经系统白血病(CNSL)缓解后患者脑脊液VB12明显降低，复发时升高；FA则于缓解后升高，复发时下降。白血病患者白细胞膜上叶酸受体的升高可能主要是还原叶酸载体(RFC)增多所致。上述资料说明血中VB12和FA含量变化与多种血液病有密切关系。作者采用FA和VB12放射免疫分析(RIA)测定51例不同类别、不同程度的血液病患者血清中FA及VB12含量，旨在对其含量的变化规律进行观察。现将结果报告如下。
, 百拇医药
1 对象与方法
1.1 对象
健康成人(正常对照)组：32例，男12例，女20例；年龄21～58(平均35.59)岁；体格检查，血象，T3，T4，TSH检查均正常，HBsAg阴性。慢性粒细胞白血病(CGL)组：25例，男16例，女9例；年龄18～60(平均39.28)岁；其中6例(男5，女1)年龄15～60(平均40.67)岁。经住院治疗一月后进行血清FA，VB12复查。非何杰金氏淋巴瘤(NHL)组：3例，年龄30～59(平均45.33)岁。骨髓增生异常综合症(MDS)组：8例，男6例，女2例；年龄34～87(平均61.63)岁。真性红细胞增多症(PV)组：3例，男2例，女1例；年龄37～53(平均44.67)岁。缺铁性贫血(IDA)组：12例，男3例，女9例；年龄24～50(平均38.42)岁。以上患者均来源于湘雅医院血液科，均经血常规、骨髓细胞形态学及细胞化学染色或淋巴结活检确诊。
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1.2 方法
1.2.1 标本收集与保存 病人入院时，取静脉血4ml，按常规方法分离血清，置-20℃冰箱内保存备用。住院治疗后需复查的病人，于出院前3d取静脉血，按上述方法处理。
1.2.2 FA和VB12的测定 采用美国杜帮公司VB12/FA双相计数不煮沸的RIA药盒。受检者入院前2周以上未用过FA和VB12按试剂盒说明书操作，每次实验质量控制均符合该公司规定。仪器采用GC-611型γ自动放免仪(安徽合肥中国科学技术大学生产)。
1.3 统计学处理
实验结果用均数±标准差(
±s)表示，统计采用t检验。
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2 结 果
2.1 血液病患者血中VB12和FA含量
测定值见表1。CGL组血VB12显著高于对照组(P<0.01)；FA与对照组无明显差异。NHL组血中FA明显低于对照组，差异有显著性(P<0.05)；而两组的VB12差异不显著。MDS，PV和IDA的FA，VB12与正常对照组的比较，差异均无显著性。
表1 各组血液病贫血患者血清VB12与FA测定值(±s) 组别
n
VB12(pmol.L-1)
, 百拇医药
FA(nmol.L-1)±s
P±s
P
正常对照
32
524.67±137.87
23.12±7.46
CGL
25
1096.72±439.78
, 百拇医药
<0.01
23.51±11.73
>0.05
MDS
8
675.67±556.06
>0.05
27.62±19.98
>0.05
NHL
3
566.63±187.23
, http://www.100md.com
>0.05
14.29±2.12
<0.05
PV
3
576.32±148.76
>0.05
15.98±7.35
>0.05
IDA
12
474.75±172.19
, 百拇医药
>0.05
28.45±23.36
>0.05
P均为与正常对照组比较
2.2 CGL病患者治疗前、后血清VB12和FA含量
结果见表2。治疗后与正常对照组及与治疗前比较血VB12差异均有显著性(P<0.05)。治疗前与正常对照组比较FA有升高趋势，但差异无显著性；治疗后与治疗前比较，差异无显著性，但有下降趋势；治疗后的FA值恢复至正常对照组水平。
表2 CGL病患者治疗前、后血清VB12，FA测定值(±s) 组别
, 百拇医药
n
VB12(pmol.L-1)
FA(nmol.L-1)±s
P±s
P
正常对照
32
524.67±137.87
23.12±7.46
, 百拇医药
治疗前
6
1409.67±452.79①
<0.05
23.89±10.26①
>0.05
治疗后
6
928.62±414.76②
<0.05
22.43±13.46②
, 百拇医药
>0.05
①与对照组比较 ②与治疗前比较
2.3 MDS各类型病人血中FA与VB12值的变化
与正常对照组比较结果见表3。表3显示，各型MDS病人血清FA值随病程转化而呈递减变化；血清VB12则以RA有明显升高，未见随病程转化而递减的现象。因MDS各类型病例数少未能进行统计分析。
表3 MDS患者与正常人血清中VB12与FA比较(±s) 组别
n
VB12(pmol.L-1)
, 百拇医药
FA(nmol.L-1)
正常对照
32
524.67±137.87
23.12±7.46
难治性贫血(RA)
3
1245.68±504.84
51.44±4.62
难治性贫血伴原始
3
, 百拇医药 340.68±190.39
16.70±3.04
粒细胞增多(RAEB)
难治性贫血伴原始
2
323.14±360.17
8.54±1.89
粒细胞增多转化
型(RAEB-t)
3 讨 论
FA和VB12在体内相互参与“一碳单位”的转移、代谢。FA是DNA合成过程中的重要辅酶，是“一碳单位”的载体。VB12通过增加FA的利用率对核酸和蛋白质的生物合成产生影响，促进红细胞的发育和成熟。当FA，VB12缺乏时导致巨红细胞性贫血。血液病病人在其细胞分裂增殖、缓解的过程中，可能导致血FA，VB12含量的变化。为分析这些变化规律，笔者测定51例不同类型血液病病例的血清FA和VB12含量。结果表明：正 常对照组血清VB12，FA值男女之间无显著差异；25例CGL患者血中VB12明显高 于正常对照组(P<0.01)，而FA值无明显变化。VB12在急、慢性粒细胞白血病中的显著性升高，已为许多学者认可。据报道，VB12的吸收与“内因子”量的变化有关，还与恶性血液病的活动期和缓解期的利用率有关[1]。CGL病缓解期患者可能因粒细胞的增殖分裂速度减慢，致VB12的利用率降低，故血中VB12逐渐蓄积增高。在CML缓解期FA的利用可能不致引起代谢变化。3例NHL与正常对照组比较，VB12无显著性差异，而FA的含量则显著降低(P<0.05)。这可能与淋巴细胞的大量增殖，DNA合成加快，FA被利用加速有关。3例PV的VB12和FA值无统计学意义。12例IDA的上二物质与正常对照组比较差异无显著性，提示该病可能与FA，VB12代谢无关。8例MDS患者血清VB12和FA变化与病程转化的类型有关，尤以RA病例其VB12和FA(±s)均明显高于正常对照组。MDS患者血清中FA值的发展呈递减型变化；当MDS发展成白血病时，FA浓度显著降低，而VB12则变化较少。此规律与文献报道[2]一致。
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对上述25例CGL患者中的6例进行了治疗前和经过一月的住院治疗后的血清VB12和FA测定。结果 表明：与对照组比较，治疗前VB12显著增高 (P<0.05)；而治疗后组则较治疗前明显降低(P<0.05)。FA的含量均无显著性差异(P>0.05)。说明住院治疗后的患者，其细胞的增殖分裂速度得以控制，而FA，VB12的代谢水平趋于恢复状态。白血病患者治疗前血清VB12水平高于正常，尤以CGL者增高最为显著[5，6]。本观察与之相符。白血病患者随着病情的缓解，血清VB12水平亦随之下降。从本文6例CGL患者治疗后血清VB12下降的动态观察也证实了这一规律。
综上所述，测定血清VB12和FA水平，对血液病的辅助诊断、鉴别诊断和疗效观察，特别是对CGL治疗前及急性期与缓解期的判断，具有一定的参考价值。
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参考文献
1 Kshitish CD, Victor H. Vitamin B12-folate interrelations. Clin Haemat, 1976,5(3):697～720
2 刘访杰，杨崇礼，李来全，等.维生素B12和叶酸的放射免疫分析在血液病诊断中的意义.临床内科杂志，1988，5(4)：24～25
3 Mollin DL, AndeRson BB, Burman JF. The serum vitamin B12 level: its assay and significance. Clin Haemat, 1976,5(3):521～546
4 顾荣泉，贺根兴，吴京，等.白血病患者血清叶酸、维生素B12和铁蛋白的测定.上海第二医科大学学报，1993，13(4)：360～362
5 许小平，王友赤，林修基.白血病患者血清叶酸和维生素B12水平的变化及其临床意义.中华血液学杂志，1990，11(2)：74～76
6 Hoogstratem B, Herman B, Harriet S. Serum folate and serum vitamin B12 in patients with malignant hematologic diseases. Cancer Res, 1965,25:1933, http://www.100md.com
单位：陈检芳 刘秀兰 同位素室 长沙 410078；郑 衡 谢兆霞 附属湘雅医院血液病研究室 长沙 410008
关键词：血液病；叶酸；维生素B12；血清；放射免疫测定
湖南医科大学学报990528 中国图书分类号 R552
血液病患者血细胞增殖异常，导致体内维行素B12(VB12)和叶酸(FA)代谢紊乱。当VB12和FA缺乏时，同样可致巨幼细胞性贫血[1～4]。Mollin等[3]报道巨幼细胞贫血时，血中VB12和FA减低常先于血细胞形态异常改变。有学者认为血清中VB12和FA浓度低下与骨髓细胞出现巨幼样异常病变符合率达95%。中枢神经系统白血病(CNSL)缓解后患者脑脊液VB12明显降低，复发时升高；FA则于缓解后升高，复发时下降。白血病患者白细胞膜上叶酸受体的升高可能主要是还原叶酸载体(RFC)增多所致。上述资料说明血中VB12和FA含量变化与多种血液病有密切关系。作者采用FA和VB12放射免疫分析(RIA)测定51例不同类别、不同程度的血液病患者血清中FA及VB12含量，旨在对其含量的变化规律进行观察。现将结果报告如下。
, 百拇医药
1 对象与方法
1.1 对象
健康成人(正常对照)组：32例，男12例，女20例；年龄21～58(平均35.59)岁；体格检查，血象，T3，T4，TSH检查均正常，HBsAg阴性。慢性粒细胞白血病(CGL)组：25例，男16例，女9例；年龄18～60(平均39.28)岁；其中6例(男5，女1)年龄15～60(平均40.67)岁。经住院治疗一月后进行血清FA，VB12复查。非何杰金氏淋巴瘤(NHL)组：3例，年龄30～59(平均45.33)岁。骨髓增生异常综合症(MDS)组：8例，男6例，女2例；年龄34～87(平均61.63)岁。真性红细胞增多症(PV)组：3例，男2例，女1例；年龄37～53(平均44.67)岁。缺铁性贫血(IDA)组：12例，男3例，女9例；年龄24～50(平均38.42)岁。以上患者均来源于湘雅医院血液科，均经血常规、骨髓细胞形态学及细胞化学染色或淋巴结活检确诊。
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1.2 方法
1.2.1 标本收集与保存 病人入院时，取静脉血4ml，按常规方法分离血清，置-20℃冰箱内保存备用。住院治疗后需复查的病人，于出院前3d取静脉血，按上述方法处理。
1.2.2 FA和VB12的测定 采用美国杜帮公司VB12/FA双相计数不煮沸的RIA药盒。受检者入院前2周以上未用过FA和VB12按试剂盒说明书操作，每次实验质量控制均符合该公司规定。仪器采用GC-611型γ自动放免仪(安徽合肥中国科学技术大学生产)。
1.3 统计学处理
实验结果用均数±标准差(
±s)表示，统计采用t检验。, http://www.100md.com
2 结 果
2.1 血液病患者血中VB12和FA含量
测定值见表1。CGL组血VB12显著高于对照组(P<0.01)；FA与对照组无明显差异。NHL组血中FA明显低于对照组，差异有显著性(P<0.05)；而两组的VB12差异不显著。MDS，PV和IDA的FA，VB12与正常对照组的比较，差异均无显著性。
表1 各组血液病贫血患者血清VB12与FA测定值(
±s) 组别n
VB12(pmol.L-1)
, 百拇医药
FA(nmol.L-1)
±sP
±sP
正常对照
32
524.67±137.87
23.12±7.46
CGL
25
1096.72±439.78
, 百拇医药
<0.01
23.51±11.73
>0.05
MDS
8
675.67±556.06
>0.05
27.62±19.98
>0.05
NHL
3
566.63±187.23
, http://www.100md.com
>0.05
14.29±2.12
<0.05
PV
3
576.32±148.76
>0.05
15.98±7.35
>0.05
IDA
12
474.75±172.19
, 百拇医药
>0.05
28.45±23.36
>0.05
P均为与正常对照组比较
2.2 CGL病患者治疗前、后血清VB12和FA含量
结果见表2。治疗后与正常对照组及与治疗前比较血VB12差异均有显著性(P<0.05)。治疗前与正常对照组比较FA有升高趋势，但差异无显著性；治疗后与治疗前比较，差异无显著性，但有下降趋势；治疗后的FA值恢复至正常对照组水平。
表2 CGL病患者治疗前、后血清VB12，FA测定值(
±s) 组别, 百拇医药
n
VB12(pmol.L-1)
FA(nmol.L-1)
±sP
±sP
正常对照
32
524.67±137.87
23.12±7.46
, 百拇医药
治疗前
6
1409.67±452.79①
<0.05
23.89±10.26①
>0.05
治疗后
6
928.62±414.76②
<0.05
22.43±13.46②
, 百拇医药
>0.05
①与对照组比较 ②与治疗前比较
2.3 MDS各类型病人血中FA与VB12值的变化
与正常对照组比较结果见表3。表3显示，各型MDS病人血清FA值随病程转化而呈递减变化；血清VB12则以RA有明显升高，未见随病程转化而递减的现象。因MDS各类型病例数少未能进行统计分析。
表3 MDS患者与正常人血清中VB12与FA比较(
±s) 组别n
VB12(pmol.L-1)
, 百拇医药
FA(nmol.L-1)
正常对照
32
524.67±137.87
23.12±7.46
难治性贫血(RA)
3
1245.68±504.84
51.44±4.62
难治性贫血伴原始
3
, 百拇医药 340.68±190.39
16.70±3.04
粒细胞增多(RAEB)
难治性贫血伴原始
2
323.14±360.17
8.54±1.89
粒细胞增多转化
型(RAEB-t)
3 讨 论
FA和VB12在体内相互参与“一碳单位”的转移、代谢。FA是DNA合成过程中的重要辅酶，是“一碳单位”的载体。VB12通过增加FA的利用率对核酸和蛋白质的生物合成产生影响，促进红细胞的发育和成熟。当FA，VB12缺乏时导致巨红细胞性贫血。血液病病人在其细胞分裂增殖、缓解的过程中，可能导致血FA，VB12含量的变化。为分析这些变化规律，笔者测定51例不同类型血液病病例的血清FA和VB12含量。结果表明：正 常对照组血清VB12，FA值男女之间无显著差异；25例CGL患者血中VB12明显高 于正常对照组(P<0.01)，而FA值无明显变化。VB12在急、慢性粒细胞白血病中的显著性升高，已为许多学者认可。据报道，VB12的吸收与“内因子”量的变化有关，还与恶性血液病的活动期和缓解期的利用率有关[1]。CGL病缓解期患者可能因粒细胞的增殖分裂速度减慢，致VB12的利用率降低，故血中VB12逐渐蓄积增高。在CML缓解期FA的利用可能不致引起代谢变化。3例NHL与正常对照组比较，VB12无显著性差异，而FA的含量则显著降低(P<0.05)。这可能与淋巴细胞的大量增殖，DNA合成加快，FA被利用加速有关。3例PV的VB12和FA值无统计学意义。12例IDA的上二物质与正常对照组比较差异无显著性，提示该病可能与FA，VB12代谢无关。8例MDS患者血清VB12和FA变化与病程转化的类型有关，尤以RA病例其VB12和FA(
±s)均明显高于正常对照组。MDS患者血清中FA值的发展呈递减型变化；当MDS发展成白血病时，FA浓度显著降低，而VB12则变化较少。此规律与文献报道[2]一致。, http://www.100md.com
对上述25例CGL患者中的6例进行了治疗前和经过一月的住院治疗后的血清VB12和FA测定。结果 表明：与对照组比较，治疗前VB12显著增高 (P<0.05)；而治疗后组则较治疗前明显降低(P<0.05)。FA的含量均无显著性差异(P>0.05)。说明住院治疗后的患者，其细胞的增殖分裂速度得以控制，而FA，VB12的代谢水平趋于恢复状态。白血病患者治疗前血清VB12水平高于正常，尤以CGL者增高最为显著[5，6]。本观察与之相符。白血病患者随着病情的缓解，血清VB12水平亦随之下降。从本文6例CGL患者治疗后血清VB12下降的动态观察也证实了这一规律。
综上所述，测定血清VB12和FA水平，对血液病的辅助诊断、鉴别诊断和疗效观察，特别是对CGL治疗前及急性期与缓解期的判断，具有一定的参考价值。
, http://www.100md.com
参考文献
1 Kshitish CD, Victor H. Vitamin B12-folate interrelations. Clin Haemat, 1976,5(3):697～720
2 刘访杰，杨崇礼，李来全，等.维生素B12和叶酸的放射免疫分析在血液病诊断中的意义.临床内科杂志，1988，5(4)：24～25
3 Mollin DL, AndeRson BB, Burman JF. The serum vitamin B12 level: its assay and significance. Clin Haemat, 1976,5(3):521～546
4 顾荣泉，贺根兴，吴京，等.白血病患者血清叶酸、维生素B12和铁蛋白的测定.上海第二医科大学学报，1993，13(4)：360～362
5 许小平，王友赤，林修基.白血病患者血清叶酸和维生素B12水平的变化及其临床意义.中华血液学杂志，1990，11(2)：74～76
6 Hoogstratem B, Herman B, Harriet S. Serum folate and serum vitamin B12 in patients with malignant hematologic diseases. Cancer Res, 1965,25:1933, http://www.100md.com