低压缺氧对大鼠膈肌肌浆网钙摄取功能的影响
作者：刘刚 钱桂生
单位：第三军医大学附属新桥医院呼吸内科研究所 重庆，400037
关键词：高原；缺氧；肌；肌浆网；Ca2+；大鼠
第三军医大学学报990512 提 要 目的：探讨慢性低压缺氧大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取功能的适应性变化。方法：建立慢性低压缺氧大鼠模型，利用双波长荧光光度计，用Fura-2荧光指示剂检测大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取功能。结果：慢性低压缺氧大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取功能明显增强。结论：慢性低压缺氧能增强大鼠膈肌兴奋-收缩耦联特性。
中图法分类号 R348.2；R845.22
Effects of hypobaric hypoxia on calcium uptake of sarcoplamic reticulum in rats
, 百拇医药
Liu Gang, Qian Guisheng (Department of Respiratory Diseases, Xinqiao Hospital, Third Military Medical University, Chongqing, 400037)
Abstract Objective: To observe the adaptive changes in calcium uptake of diaphragmatic sarcoplasmic reticulum in rat in response to moderate hypobaric hypoxia. Methods: After the model of hypobaric hypoxia was established in rats, calcium uptake by diaphragmatic sarcoplasmic reticulum was determined with dual-excitation fluorometer using Fura-2 free acid as the tracer. Results: The function of calcium uptake of diaphragmatic sarcoplasmic reticulum was significantly increased after chronic hypobaric hypoxia. Conclusion: Chronic moderate hypobaric hypoxia enhances the excitation-contraction coupling in the diaphragm in rats.
, 百拇医药
Key words altitude; hypoxia; diaphragm; sarcoplasmic reticulum; calcium; rat
缺氧是影响机体自身平衡的常见原因之一。不同程度的缺氧会导致机体结构和功能不同的变化。目前，急性和慢性中、重度缺氧对心肌、骨胳肌的影响研究较多。但有关膈肌对缺氧适应性变化的研究甚少。本研究采用模拟中高度高原(海拔3000m)复制慢性低压缺氧模型，检测大鼠膈肌肌浆网(Sarcoplasmic reticulum,SR)钙摄取动力学的变化，以探讨低压缺氧时大鼠膈肌兴奋-收缩耦联特性的适应性变化。
1 材料与方法
1.1 实验动物
Wisatr大鼠12只，体重(220±10)g，购自本校动物中心。随机分为2组。①对照组(n=6)；②低压缺氧组(n=6)：大鼠置本校低压舱内，模拟海拔3000m，缺氧8h/d、5d/周，共6周。两组动物均常规饲养。
, 百拇医药
1.2 取样
大鼠用10%乌拉坦液按1ml/100g腹腔注射麻醉，速取膈肌，置预冷的标准Hanks液中，洗净血迹，去除膈肌肌腱和脂肪，称重，分离肌浆网备用。缺氧组在缺氧后12h内取样。
1.3 肌浆网囊泡的分离
参照Carl[1]方法加以改进。
样本置缓冲液中(SR缓冲液含蔗糖0.25mol/L，Tris-HCl 10mmol/L,pH7.0,EDTA-Na 0.1mol/L)，制备组织匀浆，匀浆用双层纱布过滤后，10000×g离心20min，弃沉淀，上清再40000×g离心45min，沉淀用0.6mol/L KCl混悬，然后再40000×g离心45min。最后沉淀物(即SR)用不含EDTA的上述SR缓冲液混悬。Lorry法蛋白定量，调蛋白浓度8mg/ml，液氮速冻后，置-70℃冰箱保存备用。SR提取过程在0～4℃之间进行。
, http://www.100md.com
1.4 肌浆网Ca2+摄取功能测定
参照Kargacin等[2，3]进行。
1.4.1 试剂及仪器 游离型Fura-2购自Sigma公司，Luminescence Spectrometer LS 50B,美国PE公司。
1.4.2 双波长荧光光度计设置参数 激发波长340/380nm，发射波长510nm，340/380nm荧光强度每秒检测1次(检测在室温下进行)。
1.4.3 Ca2+浓度计算
[ION]t=Kd×(Rt-Rmin)/(Rmax-Rt)×Sf2/Sb2
, 百拇医药
[ION]2为t时间Ca2+浓度
Kd为Fura-2对Ca2+的离解常数
Rt为Fura-2在t时间的荧光强度比值
Rmin为Fura-2在没有Ca2+时完全结合型的荧光强度比值
Rmax为Fura-2在饱和Ca2+时完全结合型的荧光强度比值
SFB=Sf2/Sb2为380nm处游离型Fura-2与结合型Fura-2荧光强度之比值
1.4.4 SR对Ca2+摄取检测 反应液(mmol/L)含Tris-HCl 20，pH6.8，KCl 100, MgCl2 5，草酸钾5，CaCl2 0.1，ATP-Na2 4，Fura-2 2μm/ml和SR蛋白囊(Protein capsula) 20μg/ml，反应体积2ml。室温，反应液置石英杯中，用磁力搅拌籽混匀，待基线平衡后，用Ca2+(10mmol/L, 5μl)触发反应，测定340/380nm比值变化，再计算Ca2+浓度变化(用LS 508 B，Ca2+计算软件)。
, http://www.100md.com
1.4.5 统计学分析 数据以x±s表示，用SPSS(Statistics package for social science)软件，采用配对及非配对t检验。
2 结果
慢性低压缺氧组大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取功能明显高于正常组，见表1及图1、2。
正常组膈肌SR Ca2+摄取速率在100s后逐渐稳定，而缺氧组膈肌SR Ca2+摄取速率在70s后即趋于稳定(P>0.05)，见表1。
表1 低压缺氧对大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取功能的影响(n=6,x±s)
Tab 1 Effects of hypobaric hypoxia on the calcium uptake of diaphragmatic sarcoplasmic reticulum in rat (n=6,x±s) Time(s)
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Ca2+ concentration out of SR vesicles (nmol/L)
Velocity of Ca2+ uptake by SR (%)
Normal group
Hypoxia group
Normal group
Hypoxia group
0
1151.65±104.59
1189.59±72.54
, 百拇医药 10
738.55±10.13
736.73±17.87
35±5.8
38±3.60
20
725.12±11.98
567.03±11.72
37±5.8▲
52±2.75**▲
30
564.02±13.95
, http://www.100md.com
436.63±8.82
52±4.5▲
63±2.90**▲
40
436.10±30.75
361.45±15.67
62±5.0▲
70±1.57**▲
50
434.92±12.20
285.35±9.63
, 百拇医药
62±3.8▲
76±2.22**▲
60
350.28±11.78
245.52±11.20
69±3.0▲
79±1.48**▲
70
321.12±15.61
230.32±6.41
72±2.2▲
, http://www.100md.com
81±1.61**▲
80
299.10±10.30
223.22±6.59
74±3.1▲
81±1.13**▲
90
278.53±6.51
207.70±13.47
76±2.8▲
82±2.03**
, 百拇医药
100
238.33±9.74
206.83±12.34
79±2.1▲
83±1.89**
110
232.95±6.53
204.92±3.98
80±2.1
83±1.07**
120
, 百拇医药
226.07±12.29
206.75±5.19
80±2.5
83±1.17
**:P<0.01 vs normal;▲:P<0.05 vs former point
图1 正常大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取
A：上部曲线340nm荧光强度，下部曲线380nm荧光强度 B：340/380nm荧光强度比值 C：肌浆网囊外Ca2+浓度
, 百拇医药
Fig 1 Ca2+ uptake by diaphragmatic SR in normal rats monitored with fura-2
A:Upper (fluorescence intensity at 340nm), Lower (fluorescence intensity at 380nm) B:Fluorescence ratio of 340/380nm C:Ca2+ concentration out of SR vesicles
图2 中度高原缺氧大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取
A：340/380nm荧光强度比值 B：肌浆网囊外Ca2+浓度
, 百拇医药
Fig 2 Ca2+ uptake by diaphragmatic SR after moderate hypobaric hypoxia in rats
A:Fluorescence ratio of 340/380nm B:Ca2+ concentration out of SR vesicles
3 讨论
Ca2+在肌肉兴奋-收缩耦联中起着关键作用。既往常用Ca2+放射性同位素示踪法作肌浆网Ca2+动力学的研究。然而，此法需较大量的SR蛋白囊标本，且受敏感性较差、放射核素非特异性结合等因素影响，故不能准确反映肌浆网Ca2+动力学状况。
Kargacin等1988年应用Ca2+特异性结合荧光探针Fura-2游离酸对骨骼肌肌浆Ca2+摄取功能进行研究，并于1994年用同样方法对心肌肌浆网Ca2+摄取动力学进行成功研究，表明使用Fura-2游离酸指示剂来检测肌浆Ca2+的动态变化是一个快速、准确的方法。本实验对膈肌SR Ca2+摄取动力学检测的结果也证实了这点。
, 百拇医药
大量肌纤维特性的研究发现，不同的快慢性肌纤维有不同的Ca2+摄取动力学[4]。慢肌纤维和快肌纤维的Ca2+摄取机制有显著差异[5]。本实验慢性低压缺氧组膈肌SR Ca2+摄取能力增强，可能与纤维类型转变有关。肌肉对缺氧的适应变化除缺氧因素外，肌肉本身功能活动可能起重要作用[6]。缺氧条件下，肢体肌肉为降低全身氧耗而活动减少，这可能是骨骼肌氧化能力降低的重要原因。而膈肌与肢体肌相反，因缺氧而致肺通气量增加，膈肌活动增强。晚近报道慢性低压缺氧一月(海拔5000m)，ⅡA纤维比例明显增加，膈肌氧化能力增强[7]。
慢性低压缺氧大鼠SR Ca2+摄取功能增强，可能与SR Ca2+-ATP酶活性增强有关。孙希武等研究海拔5000m、8000m减压低氧对心肌SR Ca2+摄取及Ca2+-ATP酶活性和Ca2+-ATP mRNA表达的影响，结果表明，缺氧程度越重，时间越长，SR Ca2+摄取功能低下越明显。心肌缺氧后，首先引起细胞内微环境的变化，即细胞内酸中毒，这种变化可抑制SR Ca2+-ATP酶活性和Ca2+摄取能力。较长时间缺氧后，心肌SR Ca2+摄取能力进一步降低，而导致细胞内Ca2+超负荷，细胞内ATP分解供能和钙泵之间脱耦联，导致心肌细胞功能的进一步损伤，这些均说明海拔5000m缺氧对心肌SR Ca2+摄取功能损伤明显，而机体不能适应。但目前尚无有关缺氧状态下膈肌SR Ca2+摄取功能的研究报道。
, 百拇医药
本实验模拟海拔高度为3000m，此时动物动脉血氧饱和度约90%，系轻度缺氧状态。膈肌缺氧程度在海拔5000m时其氧化酶活性增强，线粒体密度增加，毛细血管密度增大，无明显组织损伤表现。肢体活动少，而膈肌活动强度却增加，即作适应性运动锻炼。结果表明在低压缺氧下SR Ca2+摄取功能增强，因此我们推测轻度缺氧后SR Ca2+-ATP酶活性可能增加。
本研究结果表明，利用双波长荧光分光光度计，用Fura-2游离酸是检测SR Ca2+动态变化的好方法。海拔3000m缺氧一月后，大鼠膈肌SR Ca2+摄取功能明显增强，其原因尚有待进一步探讨。
作者简介：刘刚，男，35岁，主治医师，博士研究生
参考文献
1 Carl S L,Feix K,Caswell A H.Immunolocalization of triadin,DHP receptors in adult and developing skeletal muscle of rats.Muscle & Nerve,1995,18(11):1232
, 百拇医药
2 Kargacin M E,Scheid C R,Honeyman T W.Continuous monitoring of Ca2+ uptake in membrane vesicles with fura-2.Am J Physiol,1988,255(5 Pt1):C694
3 Kargacin M E,Kargcin G J.Methods for determining cardiac sarcoplasmic reticum Ca2+ pump kinetics form fura-2 measurements.Am J Physiol,1994,267(Cell Physiol 36):1145
4 Schloffino S,Reggiani C.Molecular diversity of myofibrillar proteins:Gene regulation.Physiol Rev,1996,76(2):371
, 百拇医药
5 Lunde P K,Sejersted O M.Intracellullar calcium signalling in striated muscle cell.Scand J Clin Lab Invest,1997,57(7):559
6 Powers S K,Criswell D,Lieu F K,et al.Diaphragmatic fiber type specific adaptation to endurance exercise. Respir Physiol,1992,89(2):195
7 王东林，毛宝龄，钱桂生，等.慢性缺氧大鼠膈肌纤维类型适应性变化.中国应用生理杂志，1998，14(1)：34
(收稿：1999-03-10；修回：1999-05-10), http://www.100md.com
单位：第三军医大学附属新桥医院呼吸内科研究所 重庆，400037
关键词：高原；缺氧；肌；肌浆网；Ca2+；大鼠
第三军医大学学报990512 提 要 目的：探讨慢性低压缺氧大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取功能的适应性变化。方法：建立慢性低压缺氧大鼠模型，利用双波长荧光光度计，用Fura-2荧光指示剂检测大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取功能。结果：慢性低压缺氧大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取功能明显增强。结论：慢性低压缺氧能增强大鼠膈肌兴奋-收缩耦联特性。
中图法分类号 R348.2；R845.22
Effects of hypobaric hypoxia on calcium uptake of sarcoplamic reticulum in rats
, 百拇医药
Liu Gang, Qian Guisheng (Department of Respiratory Diseases, Xinqiao Hospital, Third Military Medical University, Chongqing, 400037)
Abstract Objective: To observe the adaptive changes in calcium uptake of diaphragmatic sarcoplasmic reticulum in rat in response to moderate hypobaric hypoxia. Methods: After the model of hypobaric hypoxia was established in rats, calcium uptake by diaphragmatic sarcoplasmic reticulum was determined with dual-excitation fluorometer using Fura-2 free acid as the tracer. Results: The function of calcium uptake of diaphragmatic sarcoplasmic reticulum was significantly increased after chronic hypobaric hypoxia. Conclusion: Chronic moderate hypobaric hypoxia enhances the excitation-contraction coupling in the diaphragm in rats.
, 百拇医药
Key words altitude; hypoxia; diaphragm; sarcoplasmic reticulum; calcium; rat
缺氧是影响机体自身平衡的常见原因之一。不同程度的缺氧会导致机体结构和功能不同的变化。目前，急性和慢性中、重度缺氧对心肌、骨胳肌的影响研究较多。但有关膈肌对缺氧适应性变化的研究甚少。本研究采用模拟中高度高原(海拔3000m)复制慢性低压缺氧模型，检测大鼠膈肌肌浆网(Sarcoplasmic reticulum,SR)钙摄取动力学的变化，以探讨低压缺氧时大鼠膈肌兴奋-收缩耦联特性的适应性变化。
1 材料与方法
1.1 实验动物
Wisatr大鼠12只，体重(220±10)g，购自本校动物中心。随机分为2组。①对照组(n=6)；②低压缺氧组(n=6)：大鼠置本校低压舱内，模拟海拔3000m，缺氧8h/d、5d/周，共6周。两组动物均常规饲养。
, 百拇医药
1.2 取样
大鼠用10%乌拉坦液按1ml/100g腹腔注射麻醉，速取膈肌，置预冷的标准Hanks液中，洗净血迹，去除膈肌肌腱和脂肪，称重，分离肌浆网备用。缺氧组在缺氧后12h内取样。
1.3 肌浆网囊泡的分离
参照Carl[1]方法加以改进。
样本置缓冲液中(SR缓冲液含蔗糖0.25mol/L，Tris-HCl 10mmol/L,pH7.0,EDTA-Na 0.1mol/L)，制备组织匀浆，匀浆用双层纱布过滤后，10000×g离心20min，弃沉淀，上清再40000×g离心45min，沉淀用0.6mol/L KCl混悬，然后再40000×g离心45min。最后沉淀物(即SR)用不含EDTA的上述SR缓冲液混悬。Lorry法蛋白定量，调蛋白浓度8mg/ml，液氮速冻后，置-70℃冰箱保存备用。SR提取过程在0～4℃之间进行。
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1.4 肌浆网Ca2+摄取功能测定
参照Kargacin等[2，3]进行。
1.4.1 试剂及仪器 游离型Fura-2购自Sigma公司，Luminescence Spectrometer LS 50B,美国PE公司。
1.4.2 双波长荧光光度计设置参数 激发波长340/380nm，发射波长510nm，340/380nm荧光强度每秒检测1次(检测在室温下进行)。
1.4.3 Ca2+浓度计算
[ION]t=Kd×(Rt-Rmin)/(Rmax-Rt)×Sf2/Sb2
, 百拇医药
[ION]2为t时间Ca2+浓度
Kd为Fura-2对Ca2+的离解常数
Rt为Fura-2在t时间的荧光强度比值
Rmin为Fura-2在没有Ca2+时完全结合型的荧光强度比值
Rmax为Fura-2在饱和Ca2+时完全结合型的荧光强度比值
SFB=Sf2/Sb2为380nm处游离型Fura-2与结合型Fura-2荧光强度之比值
1.4.4 SR对Ca2+摄取检测 反应液(mmol/L)含Tris-HCl 20，pH6.8，KCl 100, MgCl2 5，草酸钾5，CaCl2 0.1，ATP-Na2 4，Fura-2 2μm/ml和SR蛋白囊(Protein capsula) 20μg/ml，反应体积2ml。室温，反应液置石英杯中，用磁力搅拌籽混匀，待基线平衡后，用Ca2+(10mmol/L, 5μl)触发反应，测定340/380nm比值变化，再计算Ca2+浓度变化(用LS 508 B，Ca2+计算软件)。
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1.4.5 统计学分析 数据以x±s表示，用SPSS(Statistics package for social science)软件，采用配对及非配对t检验。
2 结果
慢性低压缺氧组大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取功能明显高于正常组，见表1及图1、2。
正常组膈肌SR Ca2+摄取速率在100s后逐渐稳定，而缺氧组膈肌SR Ca2+摄取速率在70s后即趋于稳定(P>0.05)，见表1。
表1 低压缺氧对大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取功能的影响(n=6,x±s)
Tab 1 Effects of hypobaric hypoxia on the calcium uptake of diaphragmatic sarcoplasmic reticulum in rat (n=6,x±s) Time(s)
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Ca2+ concentration out of SR vesicles (nmol/L)
Velocity of Ca2+ uptake by SR (%)
Normal group
Hypoxia group
Normal group
Hypoxia group
0
1151.65±104.59
1189.59±72.54
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738.55±10.13
736.73±17.87
35±5.8
38±3.60
20
725.12±11.98
567.03±11.72
37±5.8▲
52±2.75**▲
30
564.02±13.95
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436.63±8.82
52±4.5▲
63±2.90**▲
40
436.10±30.75
361.45±15.67
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70±1.57**▲
50
434.92±12.20
285.35±9.63
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62±3.8▲
76±2.22**▲
60
350.28±11.78
245.52±11.20
69±3.0▲
79±1.48**▲
70
321.12±15.61
230.32±6.41
72±2.2▲
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81±1.61**▲
80
299.10±10.30
223.22±6.59
74±3.1▲
81±1.13**▲
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278.53±6.51
207.70±13.47
76±2.8▲
82±2.03**
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100
238.33±9.74
206.83±12.34
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110
232.95±6.53
204.92±3.98
80±2.1
83±1.07**
120
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226.07±12.29
206.75±5.19
80±2.5
83±1.17
**:P<0.01 vs normal;▲:P<0.05 vs former point
图1 正常大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取
A：上部曲线340nm荧光强度，下部曲线380nm荧光强度 B：340/380nm荧光强度比值 C：肌浆网囊外Ca2+浓度
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Fig 1 Ca2+ uptake by diaphragmatic SR in normal rats monitored with fura-2
A:Upper (fluorescence intensity at 340nm), Lower (fluorescence intensity at 380nm) B:Fluorescence ratio of 340/380nm C:Ca2+ concentration out of SR vesicles
图2 中度高原缺氧大鼠膈肌肌浆网Ca2+摄取
A：340/380nm荧光强度比值 B：肌浆网囊外Ca2+浓度
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Fig 2 Ca2+ uptake by diaphragmatic SR after moderate hypobaric hypoxia in rats
A:Fluorescence ratio of 340/380nm B:Ca2+ concentration out of SR vesicles
3 讨论
Ca2+在肌肉兴奋-收缩耦联中起着关键作用。既往常用Ca2+放射性同位素示踪法作肌浆网Ca2+动力学的研究。然而，此法需较大量的SR蛋白囊标本，且受敏感性较差、放射核素非特异性结合等因素影响，故不能准确反映肌浆网Ca2+动力学状况。
Kargacin等1988年应用Ca2+特异性结合荧光探针Fura-2游离酸对骨骼肌肌浆Ca2+摄取功能进行研究，并于1994年用同样方法对心肌肌浆网Ca2+摄取动力学进行成功研究，表明使用Fura-2游离酸指示剂来检测肌浆Ca2+的动态变化是一个快速、准确的方法。本实验对膈肌SR Ca2+摄取动力学检测的结果也证实了这点。
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大量肌纤维特性的研究发现，不同的快慢性肌纤维有不同的Ca2+摄取动力学[4]。慢肌纤维和快肌纤维的Ca2+摄取机制有显著差异[5]。本实验慢性低压缺氧组膈肌SR Ca2+摄取能力增强，可能与纤维类型转变有关。肌肉对缺氧的适应变化除缺氧因素外，肌肉本身功能活动可能起重要作用[6]。缺氧条件下，肢体肌肉为降低全身氧耗而活动减少，这可能是骨骼肌氧化能力降低的重要原因。而膈肌与肢体肌相反，因缺氧而致肺通气量增加，膈肌活动增强。晚近报道慢性低压缺氧一月(海拔5000m)，ⅡA纤维比例明显增加，膈肌氧化能力增强[7]。
慢性低压缺氧大鼠SR Ca2+摄取功能增强，可能与SR Ca2+-ATP酶活性增强有关。孙希武等研究海拔5000m、8000m减压低氧对心肌SR Ca2+摄取及Ca2+-ATP酶活性和Ca2+-ATP mRNA表达的影响，结果表明，缺氧程度越重，时间越长，SR Ca2+摄取功能低下越明显。心肌缺氧后，首先引起细胞内微环境的变化，即细胞内酸中毒，这种变化可抑制SR Ca2+-ATP酶活性和Ca2+摄取能力。较长时间缺氧后，心肌SR Ca2+摄取能力进一步降低，而导致细胞内Ca2+超负荷，细胞内ATP分解供能和钙泵之间脱耦联，导致心肌细胞功能的进一步损伤，这些均说明海拔5000m缺氧对心肌SR Ca2+摄取功能损伤明显，而机体不能适应。但目前尚无有关缺氧状态下膈肌SR Ca2+摄取功能的研究报道。
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本实验模拟海拔高度为3000m，此时动物动脉血氧饱和度约90%，系轻度缺氧状态。膈肌缺氧程度在海拔5000m时其氧化酶活性增强，线粒体密度增加，毛细血管密度增大，无明显组织损伤表现。肢体活动少，而膈肌活动强度却增加，即作适应性运动锻炼。结果表明在低压缺氧下SR Ca2+摄取功能增强，因此我们推测轻度缺氧后SR Ca2+-ATP酶活性可能增加。
本研究结果表明，利用双波长荧光分光光度计，用Fura-2游离酸是检测SR Ca2+动态变化的好方法。海拔3000m缺氧一月后，大鼠膈肌SR Ca2+摄取功能明显增强，其原因尚有待进一步探讨。
作者简介：刘刚，男，35岁，主治医师，博士研究生
参考文献
1 Carl S L,Feix K,Caswell A H.Immunolocalization of triadin,DHP receptors in adult and developing skeletal muscle of rats.Muscle & Nerve,1995,18(11):1232
, 百拇医药
2 Kargacin M E,Scheid C R,Honeyman T W.Continuous monitoring of Ca2+ uptake in membrane vesicles with fura-2.Am J Physiol,1988,255(5 Pt1):C694
3 Kargacin M E,Kargcin G J.Methods for determining cardiac sarcoplasmic reticum Ca2+ pump kinetics form fura-2 measurements.Am J Physiol,1994,267(Cell Physiol 36):1145
4 Schloffino S,Reggiani C.Molecular diversity of myofibrillar proteins:Gene regulation.Physiol Rev,1996,76(2):371
, 百拇医药
5 Lunde P K,Sejersted O M.Intracellullar calcium signalling in striated muscle cell.Scand J Clin Lab Invest,1997,57(7):559
6 Powers S K,Criswell D,Lieu F K,et al.Diaphragmatic fiber type specific adaptation to endurance exercise. Respir Physiol,1992,89(2):195
7 王东林，毛宝龄，钱桂生，等.慢性缺氧大鼠膈肌纤维类型适应性变化.中国应用生理杂志，1998，14(1)：34
(收稿：1999-03-10；修回：1999-05-10), http://www.100md.com