肝硬化患者血清一氧化氮和肿瘤坏死因子与肝纤维化的关系
作者：周伏喜 卢放根 凌奇荷 霍继荣 林礼茂
单位：湖南医科大学第二附属医院(长沙 410011)
关键词：肝硬化；一氧化氮；肿瘤坏死因子
湖南医学990514 肝硬化的主要病理改变是纤维化，肝纤维化形成过程中影响因素很多，如免疫功能紊乱，内毒素血症等，其中比较明确的是肿瘤坏死因子(TNF)[1]。新近发现，TNF可促使一氧化氮(NO)的产生[2]，同时NO可加重肝脏的损害[3]。NO是否与肝纤维化有关尚不清楚，为此，本文通过检测肝硬化患者血清中TNF-α，NO和Ⅲ型前胶原(PCⅢ)来分析它们之间的关系。
1 对象与方法
1.1 对象 肝硬化患者35例均经本院消化科住院确诊。男26例，女9例，平均年龄48(31～65)岁，对照组为体检正常的志愿者30例，男19例，女11例，平均年龄39岁。酒精性肝硬化及药物性肝硬化患者因病例太少未列入观察。
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1.2 方法 空腹静脉采血4 ml，尽快分离血清分装，于-20 ℃保存待测。①TNF-α的测定：用ELISA方法检测，试剂购于深圳晶美生物试剂公司，操作按说明书进行。②血清NO的测定方法：本室参照Griess的体液NO测定方法建立，血清去蛋白质，用镀铜镉还原后加Griess试剂显色，比色测定[4]。③血清PCⅢ测定：用放免法，放免试剂盒购于重庆肿瘤所，操作按说明书进行。
1.3 统计学处理 实验数据用均数±标准差(
±s)表示，两样本均数比较采用t检验。
2 结果
肝硬化患者血清NO，TNF-α和PCⅢ结果比较见附表。结果显示：肝硬化患者PCⅢ，TNF-α和NO值均明显高于对照组，两者相比，差异均有显著性(P<0.01，t值分别为3.174，12.323，12.122)；经多因素相关分析发现仅TNF-α与PCⅢ呈正相关。即PCⅢ=113.603+6.511×TNF-α(t=3.314，P<0.01)。
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附表 肝硬化患者血清NO和TNF-α与PCⅢ的比较 组别
n
PCⅢ(μg/l)
NO(μmol/L)
TNF-α(pg/ml)
对照组
30
114.50±51.09
37.02±12.85
131.19±19.14
肝硬化
35
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176.15±41.58
73.43±22.60
611.90±276.26
3 讨论
TNF-α主要来源于激活的单核细胞和巨噬细胞，在肝脏主要来自于枯否细胞[5]。肝硬化患者由于侧支循环的形成和门脉高压，肠道吸收的细菌及其抗原成分直接进入体内，与单核巨噬细胞有广泛的接触并导致这些细胞的激活。血清PCⅢ是胶原代谢的产物，其含量能可靠地反映肝纤维化的活动性和程度[6]。本结果表明肝硬化患者血清中TNF-α，NO和PCⅢ的水平均明显增高。进一步分析发现TNF-α和PCⅢ呈明显正相关，即随着TNF-α的增高，PCⅢ水平也增高，但与NO无明显的相关。这一结果说明，肝硬化患者的纤维化过程与TNF-α有关，支持Peterson等的结论[1]。由于TNF-α可由肝脏枯否细胞产生，在局部发挥作用，提示影响枯否细胞功能的各种因素如感染的作用，是加重肝纤维化的原因，针对影响枯否细胞各因素进行治疗缓解肝纤维化有指导意义。NO水平尽管与肝脏纤维化及TNF之间无相关关系，但是由于NO是一强力扩血管物质，与肝硬化患者门脉血流动力学紊乱有关[7]。门脉血流动力学紊乱是肝硬化患者各种并发症产生的原因之一，因此NO可能通过一种间接机制影响肝纤维化的过程，其本身并无直接作用。
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参考文献
1 Peterson TC,Isbrucker RA.Fibroproliferation in liver disease.:role of monocyte factors.Hepatology,1992,15:191
2 Stevenson MM,Tam MF.IL-12-induced protein against blood-stage plamsmodium chabaudi as requires IFN-α and occurs via a nitric oxide dependent mechanism.J Immunol,1995,155:2545～2556
3 Rockey D.The cellular pathogenesis of portal hypertension:stellate cell contractility endothelin, and nitric oxide.Hepatology,1997,25(1):2
, 百拇医药
4 卢放根，方建珍，霍继荣，等.不同腹水中一氧化氮合成酶，一氧化氮和肿瘤坏死因子的研究.中华内科杂志，1996，36(10)：744～747
5 Dieter P,Ambs P,Fitzke E,et al.Comparative studies of cytotoxicity and the release of TNF-α,nitric oxide,and eicosanoids of liver macrophages treated with lipopolysauharide and liposome-encapsulated MTP-PE.J Immunol,1995,155:2595～2604
6 李伟道，刘光明，林 丁.125I标记人PCⅢ建立RIA诊断肝硬化.临床肝胆病杂志，1993，9(2)：143
7 Vallance P,Moncada S.Hyperdynamic circulation in cirrhosis:a role for nitric oxide.Lancet,1991,337:776
(19980215 收稿), http://www.100md.com
单位：湖南医科大学第二附属医院(长沙 410011)
关键词：肝硬化；一氧化氮；肿瘤坏死因子
湖南医学990514 肝硬化的主要病理改变是纤维化，肝纤维化形成过程中影响因素很多，如免疫功能紊乱，内毒素血症等，其中比较明确的是肿瘤坏死因子(TNF)[1]。新近发现，TNF可促使一氧化氮(NO)的产生[2]，同时NO可加重肝脏的损害[3]。NO是否与肝纤维化有关尚不清楚，为此，本文通过检测肝硬化患者血清中TNF-α，NO和Ⅲ型前胶原(PCⅢ)来分析它们之间的关系。
1 对象与方法
1.1 对象 肝硬化患者35例均经本院消化科住院确诊。男26例，女9例，平均年龄48(31～65)岁，对照组为体检正常的志愿者30例，男19例，女11例，平均年龄39岁。酒精性肝硬化及药物性肝硬化患者因病例太少未列入观察。
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1.2 方法 空腹静脉采血4 ml，尽快分离血清分装，于-20 ℃保存待测。①TNF-α的测定：用ELISA方法检测，试剂购于深圳晶美生物试剂公司，操作按说明书进行。②血清NO的测定方法：本室参照Griess的体液NO测定方法建立，血清去蛋白质，用镀铜镉还原后加Griess试剂显色，比色测定[4]。③血清PCⅢ测定：用放免法，放免试剂盒购于重庆肿瘤所，操作按说明书进行。
1.3 统计学处理 实验数据用均数±标准差(
±s)表示，两样本均数比较采用t检验。2 结果
肝硬化患者血清NO，TNF-α和PCⅢ结果比较见附表。结果显示：肝硬化患者PCⅢ，TNF-α和NO值均明显高于对照组，两者相比，差异均有显著性(P<0.01，t值分别为3.174，12.323，12.122)；经多因素相关分析发现仅TNF-α与PCⅢ呈正相关。即PCⅢ=113.603+6.511×TNF-α(t=3.314，P<0.01)。
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附表 肝硬化患者血清NO和TNF-α与PCⅢ的比较 组别
n
PCⅢ(μg/l)
NO(μmol/L)
TNF-α(pg/ml)
对照组
30
114.50±51.09
37.02±12.85
131.19±19.14
肝硬化
35
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176.15±41.58
73.43±22.60
611.90±276.26
3 讨论
TNF-α主要来源于激活的单核细胞和巨噬细胞，在肝脏主要来自于枯否细胞[5]。肝硬化患者由于侧支循环的形成和门脉高压，肠道吸收的细菌及其抗原成分直接进入体内，与单核巨噬细胞有广泛的接触并导致这些细胞的激活。血清PCⅢ是胶原代谢的产物，其含量能可靠地反映肝纤维化的活动性和程度[6]。本结果表明肝硬化患者血清中TNF-α，NO和PCⅢ的水平均明显增高。进一步分析发现TNF-α和PCⅢ呈明显正相关，即随着TNF-α的增高，PCⅢ水平也增高，但与NO无明显的相关。这一结果说明，肝硬化患者的纤维化过程与TNF-α有关，支持Peterson等的结论[1]。由于TNF-α可由肝脏枯否细胞产生，在局部发挥作用，提示影响枯否细胞功能的各种因素如感染的作用，是加重肝纤维化的原因，针对影响枯否细胞各因素进行治疗缓解肝纤维化有指导意义。NO水平尽管与肝脏纤维化及TNF之间无相关关系，但是由于NO是一强力扩血管物质，与肝硬化患者门脉血流动力学紊乱有关[7]。门脉血流动力学紊乱是肝硬化患者各种并发症产生的原因之一，因此NO可能通过一种间接机制影响肝纤维化的过程，其本身并无直接作用。
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参考文献
1 Peterson TC,Isbrucker RA.Fibroproliferation in liver disease.:role of monocyte factors.Hepatology,1992,15:191
2 Stevenson MM,Tam MF.IL-12-induced protein against blood-stage plamsmodium chabaudi as requires IFN-α and occurs via a nitric oxide dependent mechanism.J Immunol,1995,155:2545～2556
3 Rockey D.The cellular pathogenesis of portal hypertension:stellate cell contractility endothelin, and nitric oxide.Hepatology,1997,25(1):2
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4 卢放根，方建珍，霍继荣，等.不同腹水中一氧化氮合成酶，一氧化氮和肿瘤坏死因子的研究.中华内科杂志，1996，36(10)：744～747
5 Dieter P,Ambs P,Fitzke E,et al.Comparative studies of cytotoxicity and the release of TNF-α,nitric oxide,and eicosanoids of liver macrophages treated with lipopolysauharide and liposome-encapsulated MTP-PE.J Immunol,1995,155:2595～2604
6 李伟道，刘光明，林 丁.125I标记人PCⅢ建立RIA诊断肝硬化.临床肝胆病杂志，1993，9(2)：143
7 Vallance P,Moncada S.Hyperdynamic circulation in cirrhosis:a role for nitric oxide.Lancet,1991,337:776
(19980215 收稿), http://www.100md.com