尿5'-核苷酸磷酸二酯酶监测顺铂早期肾损害的研究
作者：廖 萍 叶司原 林克敏 周红卫
单位：廖 萍 叶司原 林克敏 广西医科大学附属肿瘤医院 南宁 530021; 周红卫 广西医科大学第一附属医院肾内科
关键词：顺氯氨铂；尿酶；磷酸二酯酶；N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶；肾功能试验
广西医科大学学报990527
摘要 目的：为了寻找监测顺铂早期肾损害的较敏感指标。方法：采用自身对照设计，动态观察10例用顺铂治疗的肿瘤患者投药前后尿中的 5'-核苷酸磷酸二酯酶(5'-NPD)和N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)的活性变化规律，分析酶活性变化与早期肾损害的关系。结果：顺铂投药后的第1天，5'-NPD和NAG的活性开始迅速升高，第3天到达最高峰，比投药前分别升高了7.9倍和2.5倍，第 11天恢复至投药前的活性水平。结论：5'-NPD和NAG可作为监测早期顺铂肾损害的指标，尿5'-NPD较为灵敏。
, http://www.100md.com
中国图书资料分类法分类号 R969
DETECTION OF EARLY NEPHRIC DAMAGE FOR USING CIS-DICHOLORDIAMINE PLATINUM BY URINARY 5'-NUCLEOTIDE PHOSPHODIESTERASE.
Liao Ping, Ye Siyuan, Lin Kemin, et al.
(the Affiliated Tumor Hospital of GuangXi Medical University, Nanning 530021)
Abstract Objective:To find out the sensitive indication in detecting early nephric damage.Methods:By self-control design, the change regularity of 5'-nucleotide phosphodiesterase (5'-NPD) and N-acetyl-β-glucosaminidase (NAG) were observed in ten cancer patients before and after injection of Cis-dicholordiamine platinum (PDD). Analyze the relation between enzymatic activity and the early nephric damage.Results:The first day after the injection, the activity of 5'-NPD and NAG rose quickly and reached the highest peak on the third day, increasing by 7.9 times and 2.5 times respectively compared with the activity before the injection of PDD.On the eleventh day, the activity returned to the level before the injection. The usual uroscopy of the patients remained normal range before and after the injection of PDD. In detection,the nephric damage for PDD, the activity of 5'-NPD and NAG demonstrated apparent positive correlation.(r=0.9918;P<0.001).The activity change trend of 5'-NPD showed within a larger range.Conclusion:These two kinds of urinary enzymes can both reflect the early nephric damage for PDD. This can act as the indication for detecting the early nephric damage for PDD, but the 5'-NPD showed more sensitivi ty.Detection of the urinary enzymes is of an important guide for preventing acute renal failure and making out reasonable dose of PDD.
, 百拇医药
Key words Phosphodiesterase N-acetyl-β-glucosaminidase Cis-Dicholordiamine Platinum Nephric function test
顺氯氨铂(简称顺铂，PDD)，是一种广谱的抗癌药物。但该药的主要毒副反应是肾损害，在一般情况下多为可逆性。但由于目前缺乏早期监测肾损害的灵敏指标，这种肾损害有时可以发展成为不可逆的，甚至导致病人死亡。所以寻找监测顺铂肾损害比较敏感的指标是一项重要的研究课题。本研究试图通过对用顺铂治疗的病人尿中5'-核苷酸磷酸二酯酶(5'-NPD)和N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)的活性检测，动态观察这两种尿酶的变化规律，为临床提供一种监测顺铂早期肾损害的指标。
1 材料和方法
1.1 研究对象：10例肿瘤患者，男7例，女3例。年龄37～62岁，平均47.1岁。用顺铂前无肾病史，肾功能正常，尿常规正常。10例肿瘤患者都以大剂量顺铂为主的化疗方案化疗，顺铂的剂量为80～100mg/m2，静脉给药，顺铂投药前检测一次尿5'-NPD和NAG以及尿常规。投药结束后，每隔1d检测一次这两种尿酶和尿常规。
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1.2 标本：收集上述病例晨尿中段尿液，同一尿标本同时检测尿5'-NPD，NAG和尿常规等项目，并于 12h内完成全部检测项目。
1.3 试剂：①底物：5'-[5碘吲哚酚-(3)]胸腺嘧啶核苷酸铵盐(上海东风生物技术有限公司)；②中止剂：10mmol/L NaHCO3加10mmol/L乙二胺四乙酸二钠(EDTA)加10mmol/L Na3PO4；③0.05mol/L Tris-HCL(pH10.0)缓冲液。
1.4 仪器：①721分光光度计(上海第三分析仪器厂)；②电热恒温箱(上海医疗器械七厂)；③71型pH计(美国Beckman公司)。
1.5 测定方法：①5'-NPD参照文献[1]报道的方法测定。在本实验条件下，能够将吸光度(A)提高0.001的酶量称为一个酶活性单位，按下列分式计算酶的活力单位：
, 百拇医药
酶活力单位(IU/L)=A值×13.9
②NAG按孙艺报道的方法测定[2]；③尿常规按叶应妩的方法测定[3]。
2 结果
2.1 10例用顺铂治疗的肿瘤患者，投药完毕后第1天尿5'-NPD和尿NAG的活性开始迅速升高，第3天酶活性到达最高峰，5'-NPD的活性是用药前酶活性的7.9倍，NAG是2.5倍。这些病人，通过加强水化和利尿措施后，这两种酶的活性逐渐下降，在第11天左右，逐渐恢复到用药前的活性水平。见表1。
表1 用顺铂治疗前后病人尿5'-NPD和NAG活性的变化(
±s) 酶 类
n
, 百拇医药
投药前
投药后(t/d)
1
3
5
7
9
11
5'-NPD(IU/L)
10
0.74±0.28
3.64±1.59
5.87±4.21
, 百拇医药
3.91±2.83
3.46±2.01
2.73±1.99
0.78±0.51
NAG(IU/L)
10
11.10±7.19
19.70±11.23
28.10±15.34
22.75±14.66
19.75±12.19
17.70±11.69
, http://www.100md.com
9.5±7.64
尿5'-NPD和NAG的活性呈明显正相关(r=0.9918;P<0.001)
2.2 在10例用顺铂治疗的病人中，有一例病人尿5'-NPD和NAG的活性自始至终保持在低水平，略高于用药前酶的活性水平。
2.3 10例用顺铂治疗的肿瘤患者，5'-NPD和NAG的活性呈明显正相关(r=0.9918,P<0.001)。
3 讨论
3.1 5'-NPD在肾脏的分布具有特异性，主要存在于肾皮质近曲小管上皮细胞的核膜、线粒体及微绒毛表面，肾小球部位不含5'-NPD活性[4]。顺铂肾毒性主要表现在肾皮质近曲小管，病变主要为上皮细胞变性和坏死，当肾小管受顺铂损害时，肾小管上皮细胞的5'-NPD释放入尿液中，尿5'-NPD的排出量明显增高，因此通过测定尿5'-NPD的活性，可以反映肾近曲小管的功能和损害情况。本实验通过测定用顺铂治疗的病人尿中5'-NPD的活性，来监测顺铂对肾近曲小管损害的情况。结果：10例病人中，有9例尿5'-NPD活性比服药前明显升高，提示注射顺铂后，对肾近曲小管有损害。但经过加强水化和利尿措施之后，于停药后的第11天左右，5'-NPD活性降至用药前的水平，提示肾小管的损伤已经恢复。10例病人中，有1例病人 5'-NPD的活性比用药前略高一些，提示肾小管基本上处于正常的状态，可不作任何处理。由此可见，通过尿酶的监测，对于预防急性肾功能衰竭的发生有重要的临床指导意义；另一方面，也可以提供制订病人顺铂治疗剂量的依据，有利于提高顺铂的疗效。
, 百拇医药
3.2 从表1中可以看出，10例用顺铂治疗的肿瘤病人，尿5'-NPD和NAG的活性，服药后第1天已经开始迅速升高，第3天已经到达最高峰，明显高于用药前酶的活性，而尿常规用药前后均在正常的范围内。显示出这两种尿酶的变化较尿常规变化出现得早，表明尿酶在监测早期药源性肾损害方面具有较大的优越性和临床实用价值。
3.3 尿NAG是目前国内外用于早期监测肾近曲小管损害的敏感指标。10例用顺铂治疗的肿瘤患者中，尿 5'-NPD活性和尿NAG活性呈明显正相关(r=0.9918;P<0.001)，显示出尿 5'-NPD和尿NAG在反映近曲小管损害方面具有一致性。从表1中可看出，在反映早期顺铂肾损害方面，5'-NPD的敏感性比NAG高，10例用顺铂的病人中，尿5'-NPD的活性在用药后的第1天和第3天分别比用药前升高了4.9倍和7.9倍，而NAG分别只升高了1.8倍和2.5倍，显示出尿5'-NPD变化趋势变动辐度大，灵敏度高的特性。
参考文献
, 百拇医药
1 林克敏，叶司原，利基林.尿5'-核苷酸磷酸二酯酶主要生化特性的探讨.广西医学,1998,20(5):783
2 孙艺,杨玉秀,周希静,等.尿NAG活性及尿β2-MG水平测定对SLE患者近端肾小管功能变化的探讨.中华肾脏病杂志,1995,11(3):161
3 叶应妩,王毓三主编.全国临床检验操作规程.第2版.南京:东南大学出版社, 1997,117～133
4 韩刚毅,王实,王元书,等.镉中毒大鼠的肾脏和尿磷酸二酯酶Ⅰ变化.前卫医药杂志，1993，10(1)：13
收稿日期：1999-03-10
, 百拇医药
单位：廖 萍 叶司原 林克敏 广西医科大学附属肿瘤医院 南宁 530021; 周红卫 广西医科大学第一附属医院肾内科
关键词：顺氯氨铂；尿酶；磷酸二酯酶；N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶；肾功能试验
广西医科大学学报990527
摘要 目的：为了寻找监测顺铂早期肾损害的较敏感指标。方法：采用自身对照设计，动态观察10例用顺铂治疗的肿瘤患者投药前后尿中的 5'-核苷酸磷酸二酯酶(5'-NPD)和N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)的活性变化规律，分析酶活性变化与早期肾损害的关系。结果：顺铂投药后的第1天，5'-NPD和NAG的活性开始迅速升高，第3天到达最高峰，比投药前分别升高了7.9倍和2.5倍，第 11天恢复至投药前的活性水平。结论：5'-NPD和NAG可作为监测早期顺铂肾损害的指标，尿5'-NPD较为灵敏。
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中国图书资料分类法分类号 R969
DETECTION OF EARLY NEPHRIC DAMAGE FOR USING CIS-DICHOLORDIAMINE PLATINUM BY URINARY 5'-NUCLEOTIDE PHOSPHODIESTERASE.
Liao Ping, Ye Siyuan, Lin Kemin, et al.
(the Affiliated Tumor Hospital of GuangXi Medical University, Nanning 530021)
Abstract Objective:To find out the sensitive indication in detecting early nephric damage.Methods:By self-control design, the change regularity of 5'-nucleotide phosphodiesterase (5'-NPD) and N-acetyl-β-glucosaminidase (NAG) were observed in ten cancer patients before and after injection of Cis-dicholordiamine platinum (PDD). Analyze the relation between enzymatic activity and the early nephric damage.Results:The first day after the injection, the activity of 5'-NPD and NAG rose quickly and reached the highest peak on the third day, increasing by 7.9 times and 2.5 times respectively compared with the activity before the injection of PDD.On the eleventh day, the activity returned to the level before the injection. The usual uroscopy of the patients remained normal range before and after the injection of PDD. In detection,the nephric damage for PDD, the activity of 5'-NPD and NAG demonstrated apparent positive correlation.(r=0.9918;P<0.001).The activity change trend of 5'-NPD showed within a larger range.Conclusion:These two kinds of urinary enzymes can both reflect the early nephric damage for PDD. This can act as the indication for detecting the early nephric damage for PDD, but the 5'-NPD showed more sensitivi ty.Detection of the urinary enzymes is of an important guide for preventing acute renal failure and making out reasonable dose of PDD.
, 百拇医药
Key words Phosphodiesterase N-acetyl-β-glucosaminidase Cis-Dicholordiamine Platinum Nephric function test
顺氯氨铂(简称顺铂，PDD)，是一种广谱的抗癌药物。但该药的主要毒副反应是肾损害，在一般情况下多为可逆性。但由于目前缺乏早期监测肾损害的灵敏指标，这种肾损害有时可以发展成为不可逆的，甚至导致病人死亡。所以寻找监测顺铂肾损害比较敏感的指标是一项重要的研究课题。本研究试图通过对用顺铂治疗的病人尿中5'-核苷酸磷酸二酯酶(5'-NPD)和N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)的活性检测，动态观察这两种尿酶的变化规律，为临床提供一种监测顺铂早期肾损害的指标。
1 材料和方法
1.1 研究对象：10例肿瘤患者，男7例，女3例。年龄37～62岁，平均47.1岁。用顺铂前无肾病史，肾功能正常，尿常规正常。10例肿瘤患者都以大剂量顺铂为主的化疗方案化疗，顺铂的剂量为80～100mg/m2，静脉给药，顺铂投药前检测一次尿5'-NPD和NAG以及尿常规。投药结束后，每隔1d检测一次这两种尿酶和尿常规。
, http://www.100md.com
1.2 标本：收集上述病例晨尿中段尿液，同一尿标本同时检测尿5'-NPD，NAG和尿常规等项目，并于 12h内完成全部检测项目。
1.3 试剂：①底物：5'-[5碘吲哚酚-(3)]胸腺嘧啶核苷酸铵盐(上海东风生物技术有限公司)；②中止剂：10mmol/L NaHCO3加10mmol/L乙二胺四乙酸二钠(EDTA)加10mmol/L Na3PO4；③0.05mol/L Tris-HCL(pH10.0)缓冲液。
1.4 仪器：①721分光光度计(上海第三分析仪器厂)；②电热恒温箱(上海医疗器械七厂)；③71型pH计(美国Beckman公司)。
1.5 测定方法：①5'-NPD参照文献[1]报道的方法测定。在本实验条件下，能够将吸光度(A)提高0.001的酶量称为一个酶活性单位，按下列分式计算酶的活力单位：
, 百拇医药
酶活力单位(IU/L)=A值×13.9
②NAG按孙艺报道的方法测定[2]；③尿常规按叶应妩的方法测定[3]。
2 结果
2.1 10例用顺铂治疗的肿瘤患者，投药完毕后第1天尿5'-NPD和尿NAG的活性开始迅速升高，第3天酶活性到达最高峰，5'-NPD的活性是用药前酶活性的7.9倍，NAG是2.5倍。这些病人，通过加强水化和利尿措施后，这两种酶的活性逐渐下降，在第11天左右，逐渐恢复到用药前的活性水平。见表1。
表1 用顺铂治疗前后病人尿5'-NPD和NAG活性的变化(
±s) 酶 类n
, 百拇医药
投药前
投药后(t/d)
1
3
5
7
9
11
5'-NPD(IU/L)
10
0.74±0.28
3.64±1.59
5.87±4.21
, 百拇医药
3.91±2.83
3.46±2.01
2.73±1.99
0.78±0.51
NAG(IU/L)
10
11.10±7.19
19.70±11.23
28.10±15.34
22.75±14.66
19.75±12.19
17.70±11.69
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9.5±7.64
尿5'-NPD和NAG的活性呈明显正相关(r=0.9918;P<0.001)
2.2 在10例用顺铂治疗的病人中，有一例病人尿5'-NPD和NAG的活性自始至终保持在低水平，略高于用药前酶的活性水平。
2.3 10例用顺铂治疗的肿瘤患者，5'-NPD和NAG的活性呈明显正相关(r=0.9918,P<0.001)。
3 讨论
3.1 5'-NPD在肾脏的分布具有特异性，主要存在于肾皮质近曲小管上皮细胞的核膜、线粒体及微绒毛表面，肾小球部位不含5'-NPD活性[4]。顺铂肾毒性主要表现在肾皮质近曲小管，病变主要为上皮细胞变性和坏死，当肾小管受顺铂损害时，肾小管上皮细胞的5'-NPD释放入尿液中，尿5'-NPD的排出量明显增高，因此通过测定尿5'-NPD的活性，可以反映肾近曲小管的功能和损害情况。本实验通过测定用顺铂治疗的病人尿中5'-NPD的活性，来监测顺铂对肾近曲小管损害的情况。结果：10例病人中，有9例尿5'-NPD活性比服药前明显升高，提示注射顺铂后，对肾近曲小管有损害。但经过加强水化和利尿措施之后，于停药后的第11天左右，5'-NPD活性降至用药前的水平，提示肾小管的损伤已经恢复。10例病人中，有1例病人 5'-NPD的活性比用药前略高一些，提示肾小管基本上处于正常的状态，可不作任何处理。由此可见，通过尿酶的监测，对于预防急性肾功能衰竭的发生有重要的临床指导意义；另一方面，也可以提供制订病人顺铂治疗剂量的依据，有利于提高顺铂的疗效。
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3.2 从表1中可以看出，10例用顺铂治疗的肿瘤病人，尿5'-NPD和NAG的活性，服药后第1天已经开始迅速升高，第3天已经到达最高峰，明显高于用药前酶的活性，而尿常规用药前后均在正常的范围内。显示出这两种尿酶的变化较尿常规变化出现得早，表明尿酶在监测早期药源性肾损害方面具有较大的优越性和临床实用价值。
3.3 尿NAG是目前国内外用于早期监测肾近曲小管损害的敏感指标。10例用顺铂治疗的肿瘤患者中，尿 5'-NPD活性和尿NAG活性呈明显正相关(r=0.9918;P<0.001)，显示出尿 5'-NPD和尿NAG在反映近曲小管损害方面具有一致性。从表1中可看出，在反映早期顺铂肾损害方面，5'-NPD的敏感性比NAG高，10例用顺铂的病人中，尿5'-NPD的活性在用药后的第1天和第3天分别比用药前升高了4.9倍和7.9倍，而NAG分别只升高了1.8倍和2.5倍，显示出尿5'-NPD变化趋势变动辐度大，灵敏度高的特性。
参考文献
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1 林克敏，叶司原，利基林.尿5'-核苷酸磷酸二酯酶主要生化特性的探讨.广西医学,1998,20(5):783
2 孙艺,杨玉秀,周希静,等.尿NAG活性及尿β2-MG水平测定对SLE患者近端肾小管功能变化的探讨.中华肾脏病杂志,1995,11(3):161
3 叶应妩,王毓三主编.全国临床检验操作规程.第2版.南京:东南大学出版社, 1997,117～133
4 韩刚毅,王实,王元书,等.镉中毒大鼠的肾脏和尿磷酸二酯酶Ⅰ变化.前卫医药杂志，1993，10(1)：13
收稿日期：1999-03-10
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