液体酶法高密度脂蛋白胆固醇试剂盒的研制和临床应用
作者：杨永学 薛琨 刘庆军
单位：杨永学 薛琨(黑龙江省临床检验中心)；刘庆军(中国人民解放军空军八六○○一部队医院)
关键词：
黑龙江医学990549 高密脂蛋白胆固醇(HDL)具有抗动脉硬化的作用，特别是HDL-C能清除外围组织的胆固醇。HDL中的胆固醇浓度比其它脂蛋白都低，这就形成胆固醇向HDL分子流动的浓度梯度，HDL-C还能抑制动脉壁平滑肌细胞摄取LHDL，防止胆固醇在细胞内过多堆集。由此可见，血清HDL-C测定是动脉粥样硬化性冠心病的重要指标之一。其主要测定方法有化学法和酶法。根据Trioter酶促反应原理，自行设计的研制方法是：采用阴离子沉淀及磁力搅拌技术，研制成液体酶试剂。其优点如下：生产工艺温和，成本低，价格便宜，易推广应用；液体型试剂具有高度的均一性，不需要复溶水，避免了水质干扰。利用氯化镁(MgCl2)-硫酸葡聚糖阴离子沉淀技术，沉淀完全，上清电泳图谱中只存在HDL各亚群，但酶试剂的精密度和准确度高，批内、批间CV分别为2.36%和3.48%，回收率为97.2～103.6%，用Boehiger定值参考血清(批号为18789306)监控，其测定值为1.23±0.03mmol/L，在靶值1.24±0.05mmol/L(
±S)范围之内；稳定性能好，加入适当稳定剂，保证了酶试剂的稳定性，试剂盒在4℃保存可稳定1年。工作试剂在4℃保存可稳定30d，且反应快速，呈色稳定。37℃15min呈色完全；在1h内颜色基本稳定，适用于全自动或半自动生化分析仪及手工操作，解决了以往无自动、半自动生化分析仪不能检测此项目的困难，为广大基层医院开展该酶的检测、应用提供了方便，并解决了全省HDL-C测定方法不统一，结果不理想的难题。
液体酶法HDL-C试剂盒的应用，统一了测定方法，为实验室的标准化管理创造了条件，为临床冠心病的早期诊断和预防提供了科学依据。自1994年全省开始广泛开展了血清HDL-C测定。1997年HDL-C测定被列为全省室间质评调查项目，200多个实验室的调查结果表明：及格率、优秀率分别为90.12%和40.05%。1998年HDL-C测定将列为室间质评活动的正式项目。酶试剂盒的价格，关键取决于所用的酶量。研制液体酶试剂工艺温和，生产过程中，胆固醇氧化酶(CO)、胆固醇酯酶(CE)、辣根过氧化物酶(POD)基本能保持原有酶活性。酶活力实验表明，液体酶试剂比干粉试剂节省50%的酶用量，降低了生产成本，其价格是干粉试剂盒的54%(干粉试剂64.00元/100ml，液体酶试剂盒35.00元/100ml)。
1993-09，液体酶试剂盒研制成功，在省内外广泛推广应用，经查至今未见有关新的报道，它填补了国内空白。同时它也创造了很好的经济效益。
(收稿日期：1999-03-17), 百拇医药
单位：杨永学 薛琨(黑龙江省临床检验中心)；刘庆军(中国人民解放军空军八六○○一部队医院)
关键词：
黑龙江医学990549 高密脂蛋白胆固醇(HDL)具有抗动脉硬化的作用，特别是HDL-C能清除外围组织的胆固醇。HDL中的胆固醇浓度比其它脂蛋白都低，这就形成胆固醇向HDL分子流动的浓度梯度，HDL-C还能抑制动脉壁平滑肌细胞摄取LHDL，防止胆固醇在细胞内过多堆集。由此可见，血清HDL-C测定是动脉粥样硬化性冠心病的重要指标之一。其主要测定方法有化学法和酶法。根据Trioter酶促反应原理，自行设计的研制方法是：采用阴离子沉淀及磁力搅拌技术，研制成液体酶试剂。其优点如下：生产工艺温和，成本低，价格便宜，易推广应用；液体型试剂具有高度的均一性，不需要复溶水，避免了水质干扰。利用氯化镁(MgCl2)-硫酸葡聚糖阴离子沉淀技术，沉淀完全，上清电泳图谱中只存在HDL各亚群，但酶试剂的精密度和准确度高，批内、批间CV分别为2.36%和3.48%，回收率为97.2～103.6%，用Boehiger定值参考血清(批号为18789306)监控，其测定值为1.23±0.03mmol/L，在靶值1.24±0.05mmol/L(
±S)范围之内；稳定性能好，加入适当稳定剂，保证了酶试剂的稳定性，试剂盒在4℃保存可稳定1年。工作试剂在4℃保存可稳定30d，且反应快速，呈色稳定。37℃15min呈色完全；在1h内颜色基本稳定，适用于全自动或半自动生化分析仪及手工操作，解决了以往无自动、半自动生化分析仪不能检测此项目的困难，为广大基层医院开展该酶的检测、应用提供了方便，并解决了全省HDL-C测定方法不统一，结果不理想的难题。液体酶法HDL-C试剂盒的应用，统一了测定方法，为实验室的标准化管理创造了条件，为临床冠心病的早期诊断和预防提供了科学依据。自1994年全省开始广泛开展了血清HDL-C测定。1997年HDL-C测定被列为全省室间质评调查项目，200多个实验室的调查结果表明：及格率、优秀率分别为90.12%和40.05%。1998年HDL-C测定将列为室间质评活动的正式项目。酶试剂盒的价格，关键取决于所用的酶量。研制液体酶试剂工艺温和，生产过程中，胆固醇氧化酶(CO)、胆固醇酯酶(CE)、辣根过氧化物酶(POD)基本能保持原有酶活性。酶活力实验表明，液体酶试剂比干粉试剂节省50%的酶用量，降低了生产成本，其价格是干粉试剂盒的54%(干粉试剂64.00元/100ml，液体酶试剂盒35.00元/100ml)。
1993-09，液体酶试剂盒研制成功，在省内外广泛推广应用，经查至今未见有关新的报道，它填补了国内空白。同时它也创造了很好的经济效益。
(收稿日期：1999-03-17), 百拇医药