鞭柱唐松草化学成分研究
作者：余世春 吴庆立 王立为 杨峻山 肖培根
单位：余世春 吴庆立 王立为 杨峻山 肖培根 中国医学科学院，中国协和医科大学药；用植物研究所(100094)
关键词：唐松草属；鞭柱唐松草 24S-环菠萝蜜烷-3β，16β，24，25，30-五醇-3-O-(2-O-β-D-木糖基)-β-D-木糖苷
鞭柱唐松草化学成分研究 摘 要 自鞭柱唐松草根Thalictrum smithii分离鉴定了4个化合物，24 S-环菠萝蜜烷-3β，16β，24，25，30-五醇-3-O-(2-O-β-D-木糖基)-β-D-木糖苷(Ⅰ)、β-胡萝卜苷(Ⅱ)、小檗碱(Ⅲ)和5-羟基-4′-甲氧基黄酮 7-O(6-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)，其中Ⅰ为一新的天然产物，并应用光谱和化学方法鉴定了其结构。
Studies on Chemical Constituents of Smith Meadowrue
, http://www.100md.com
Root (Thalictrum smithii)
Yu Shichun, Wu Qingli, Wang Liwei, et al.
(Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking
Union Medical College, Beijing 100094)
Abstract From the root of Thalictrum smithii Boivin, a new triterpene glycoside, 24S-cycloartane-3β, 16β, 24, 25, 30-pentaol-3-O-(2-O-β-D-xylosyl)-β-D-xyloside (Ⅰ) and three known compounds, β-sitosterol-3-O-β-D-glucoside (Ⅱ)， berberine (Ⅲ) and 5-hydroxy-4′-methoxyflavono-7-O-(6-Ο-α-L-rhamnosyl)-β-D-glucoside (Ⅳ) were isolated. Their structures were determined by spectroscopic and chemical methodes.
, 百拇医药
Key words Thalictrum L. Thalictrum smithii Boivin 24S-cycloartane-3β, 16β, 24, 25, 30-pentaol-3-O-(2-O-β-D-xylosyl)-β-D-xyloside
唐松草属Thalictrum L.植物广布于世界各地，中国有67种，其中近一半的种作为药用，主要用于治疗肝炎、痢疾和目赤。对该属植物的化学研究表明，其主要次生代谢产物为生物碱，亦含有少量的三萜和黄酮类化合物。鞭柱唐松草分布于中国的东北及西北地区，民间用于治疗肝炎[1]，至今尚无化学研究。为了明确该植物的活性成分及其在该属中的化学分类学意义，我们对其乙醇提取物进行了植物化学研究，从中分离鉴定了4个单体化合物，24S-环菠萝蜜烷-3β,16β,24,25,30-五醇-3-O-(2-O-β-D-木糖基)-β-D-木糖苷(Ⅰ)、β-胡萝卜苷(Ⅱ)、小檗碱(Ⅲ)和5-羟基-4’-甲氧基黄酮 7-O(6-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)，其中Ⅰ为一新的三萜皂苷。
, 百拇医药
化合物Ⅰ为白色针晶，熔点211℃～213℃,FAB-MS示其分子量为756(m/z 755，M+-1)，并给出623(M+-xyl-1),491(苷元)的离子峰，结合其1HNMR 和13CNMR 谱，确定其分子式为 C40H68O13。
化合物Ⅰ的1HNMR(500 MHz，DMSO-d6)谱高场区给出2个AB系统的双峰质子信号δ0.27和0.45(各1 H，d,J=2.9 Hz,C19-H)，示环丙烷存在。另外还给出6个甲基质子信号δ0.80(s,C28-H),0.84(d,J=6.5 Hz,C21-H)，0.99,1.03(s,C26,27-H)，1.03(s,C29-H)和1.08(s,C18-H)，无烯氢信号，提示该化合物的苷元为一羊毛甾烷衍生物。且与化合物cyclofoetigenin B 相似[2,3]。化合物Ⅰ酸水解，薄层层析检出D-木糖，通过对其1 D和2 D NMR 谱分析，包括 DEPT、13C-1HCOSY 和 HMBC(见图 1)，确定其苷化位置在3位，且糖基取代为2-O-β-D-木糖基-β-D-木糖苷。在化合物Ⅰ的 HMBC 谱中，其中一个β-木糖的端基质子信号δ4.28(1 H,d,J=7.1 Hz,C1′-H)与C3(88.6,Δδca.+8.0 ppm)相关，另一个β-木糖端基质子信号δ4.42(1 H,d,J=7.6 Hz,C1′-H)与C2′(79.7，Δδca.+55 ppm)位相关，其DEPT谱给出5个季碳，16个次甲基，13个亚甲基和6个甲基碳信号。由此推定该化合物的结构为24S-环菠萝蜜烷-3β,16β,24,25,30-五醇-3-O-(2-O-β-D-木糖基)-β-D-木糖苷。
, 百拇医药
化合物Ⅱ～Ⅳ经光谱分析和与标准品对照，分别鉴定为β-胡萝卜苷(Ⅱ)、小檗碱(Ⅲ)和5-羟基-4′-甲氧基黄酮 7-O(6-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)[4]。
化合物I的结构式见图1，1H和13C NMR 谱数据见表1。
图1 化合物I的化学结构式和HMBC光谱的相互作用
表1 化合物I的1HNMR 和13CNMR 谱数据(δ in ppm ,J in Hz)
N0
, http://www.100md.com
13C
DEPT
1H
N0
13C
DEPT
1H
1
31.3
CH2
1.16,1.40
21
, http://www.100md.com
17.6
CH3
0.84(d,6.5)
2
28.9
CH2
1.63,1.89
22
32.3
CH2
1.11,1.66
3
, 百拇医药
88.6
CH
3.25
23
27.1
CH2
1.28,1.42
4
43.9
C
24
76.6
CH
, http://www.100md.com
3.16
5
47.4
CH
1.28
25
71.5
C
6
21.3
CH2
0.91,1.55
26
, http://www.100md.com
25.9
CH3
1.03
7
26.1
CH2
0.99,1.23
27
24.8
CH3
0.99
8
, 百拇医药
47.8
CH
1.43
28
19.8
CH3
0.80
9
20.2
C
29
19.7
CH3
, 百拇医药
1.03
10
24.9
C
30
65.3
CH2
3.34,3.80
11
25.5
CH2
1.27,1.91
, 百拇医药 1′
103.6
CH
4.28(d,7.1)
12
32.4
CH2
1.52,1.57
2′
79.7
CH
3.28
13
, 百拇医药
44.7
C
3′
75.8
CH
3.33
14
46.0
C
4′
69.2
CH
3.26
, http://www.100md.com 15
48.1
CH2
1.23,1.90
5′
65.1
CH2
3.05,3.68
16
70.5
CH
4.23
1″
, http://www.100md.com
103.8
CH
4.42(d,7.6)
17
56.2
CH
1.44
2″
74.1
CH
2.98
18
17.6
, 百拇医药
CH3
1.08
3″
75.8
CH
3.04
19
29.2
CH2
0.27,0.45(d,3.9)
4″
69.2
, 百拇医药 CH
3.25
20
28.3
CH
1.78
5″
65.6
CH2
2.97,3.62
1 仪器、试剂与原料 熔点用X-4型显微熔点仪测定(温度计未校正)，UV用Philips PYE Unican Pu8800 型紫外光谱仪测定。IR用Pekin-Elmer 983G 型红外光谱仪测定，KBr 压片。FAB-MS 用ZAB-HS 型质谱仪测定。EI-MS 用 KYKY-ZSP-50 型质谱仪测定。NMR(包括 2D NMR)用 Bruker AM-500型核磁共振仪测定，溶剂为DMSO-d6和CD6OD，内标为TMS。层析用硅胶为青岛海洋化工厂出品、聚酰胺为湖南澧县一中试剂厂生产、Sephadex LH-20 为 Pharmacia公司生产。聚酰胺薄膜为浙江省黄岩化学实验厂和德国Maclerey-Nagel-Co.出品。聚酰胺TLC直接在紫外灯下观察荧光或喷AlCl3-EtOH乙醇液后观察硅胶。TLC直接在紫外下观察或喷5%的磷钼酸的乙醇液后加热显色。鞭柱唐松草于 1996年7月采集于四川省马尔康。
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2 提取和分离
鞭柱唐松草的根20 kg切碎，95%乙醇加热回流提取3次，乙醇浸膏加水溶解，水不溶物留存，水液乙醚脱脂后，正丁醇萃取，得浸膏120g,硅胶柱层析(100～120目)，氯仿-甲醇系统梯度洗脱，薄层检测合并为12部分。第4部分析出Ⅲ(2000mg)。第五部分经硅胶 H柱层析，Sephadex-LH20(MeOH)纯化后得化合物Ⅱ(300mg)。第九部分硅胶 H 柱层析，薄层检测后合并为9个部位，第5部分经硅胶柱层析后，Sephadex-LH20(MeOH)纯化得化合物Ⅰ(120mg)。第7部分经 Sephadex-LH20纯化后得化合物Ⅳ(20mg)。
3 结构鉴定
化合物Ⅰ：白色针晶，mp 211℃～213℃,FAB-MS m/z：755(M+-1),623(M+-xyl-1)和491(苷元)，1HNMR 和13CNMR 谱数据见表1。
, 百拇医药
化合物Ⅱ：白色粉末，EL-MS m/z(%) 414(20.8%)，TLC 检测与标准品对照鉴定为 β-胡萝卜苷。
化合物Ⅲ：黄色针晶，TLC 检测与标准品对照，鉴定为小檗碱。
化合物Ⅳ：白色粉末，mp 271℃～273℃,IR、UV、1H、13CNMR 光谱数据与文献[4]一致，故推定该化合物的结构为5-羟基-4′-甲氧基黄酮 7-O(6-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷。
参 考 文 献
1 中国科学院中国植物志编委会.中国植物志.北京：科学出版社，1979：502
2 Ganenko T V, et al.Khim Prir Soedin, 1985, 21:370; Chem Nat Compd (Eng1,Trams1), 1986:228
3 Ganenko T V, et al. Khim Prir Soedin, 1985, 21:370; Chem Nat Copd (ENG 1, Trans 1),1984:61
4 Ina H,et al.Phytochemistry,1981,20:1176
(1999-01-11收稿), 百拇医药
单位：余世春 吴庆立 王立为 杨峻山 肖培根 中国医学科学院，中国协和医科大学药；用植物研究所(100094)
关键词：唐松草属；鞭柱唐松草 24S-环菠萝蜜烷-3β，16β，24，25，30-五醇-3-O-(2-O-β-D-木糖基)-β-D-木糖苷
鞭柱唐松草化学成分研究 摘 要 自鞭柱唐松草根Thalictrum smithii分离鉴定了4个化合物，24 S-环菠萝蜜烷-3β，16β，24，25，30-五醇-3-O-(2-O-β-D-木糖基)-β-D-木糖苷(Ⅰ)、β-胡萝卜苷(Ⅱ)、小檗碱(Ⅲ)和5-羟基-4′-甲氧基黄酮 7-O(6-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)，其中Ⅰ为一新的天然产物，并应用光谱和化学方法鉴定了其结构。
Studies on Chemical Constituents of Smith Meadowrue
, http://www.100md.com
Root (Thalictrum smithii)
Yu Shichun, Wu Qingli, Wang Liwei, et al.
(Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking
Union Medical College, Beijing 100094)
Abstract From the root of Thalictrum smithii Boivin, a new triterpene glycoside, 24S-cycloartane-3β, 16β, 24, 25, 30-pentaol-3-O-(2-O-β-D-xylosyl)-β-D-xyloside (Ⅰ) and three known compounds, β-sitosterol-3-O-β-D-glucoside (Ⅱ)， berberine (Ⅲ) and 5-hydroxy-4′-methoxyflavono-7-O-(6-Ο-α-L-rhamnosyl)-β-D-glucoside (Ⅳ) were isolated. Their structures were determined by spectroscopic and chemical methodes.
, 百拇医药
Key words Thalictrum L. Thalictrum smithii Boivin 24S-cycloartane-3β, 16β, 24, 25, 30-pentaol-3-O-(2-O-β-D-xylosyl)-β-D-xyloside
唐松草属Thalictrum L.植物广布于世界各地，中国有67种，其中近一半的种作为药用，主要用于治疗肝炎、痢疾和目赤。对该属植物的化学研究表明，其主要次生代谢产物为生物碱，亦含有少量的三萜和黄酮类化合物。鞭柱唐松草分布于中国的东北及西北地区，民间用于治疗肝炎[1]，至今尚无化学研究。为了明确该植物的活性成分及其在该属中的化学分类学意义，我们对其乙醇提取物进行了植物化学研究，从中分离鉴定了4个单体化合物，24S-环菠萝蜜烷-3β,16β,24,25,30-五醇-3-O-(2-O-β-D-木糖基)-β-D-木糖苷(Ⅰ)、β-胡萝卜苷(Ⅱ)、小檗碱(Ⅲ)和5-羟基-4’-甲氧基黄酮 7-O(6-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)，其中Ⅰ为一新的三萜皂苷。
, 百拇医药
化合物Ⅰ为白色针晶，熔点211℃～213℃,FAB-MS示其分子量为756(m/z 755，M+-1)，并给出623(M+-xyl-1),491(苷元)的离子峰，结合其1HNMR 和13CNMR 谱，确定其分子式为 C40H68O13。
化合物Ⅰ的1HNMR(500 MHz，DMSO-d6)谱高场区给出2个AB系统的双峰质子信号δ0.27和0.45(各1 H，d,J=2.9 Hz,C19-H)，示环丙烷存在。另外还给出6个甲基质子信号δ0.80(s,C28-H),0.84(d,J=6.5 Hz,C21-H)，0.99,1.03(s,C26,27-H)，1.03(s,C29-H)和1.08(s,C18-H)，无烯氢信号，提示该化合物的苷元为一羊毛甾烷衍生物。且与化合物cyclofoetigenin B 相似[2,3]。化合物Ⅰ酸水解，薄层层析检出D-木糖，通过对其1 D和2 D NMR 谱分析，包括 DEPT、13C-1HCOSY 和 HMBC(见图 1)，确定其苷化位置在3位，且糖基取代为2-O-β-D-木糖基-β-D-木糖苷。在化合物Ⅰ的 HMBC 谱中，其中一个β-木糖的端基质子信号δ4.28(1 H,d,J=7.1 Hz,C1′-H)与C3(88.6,Δδca.+8.0 ppm)相关，另一个β-木糖端基质子信号δ4.42(1 H,d,J=7.6 Hz,C1′-H)与C2′(79.7，Δδca.+55 ppm)位相关，其DEPT谱给出5个季碳，16个次甲基，13个亚甲基和6个甲基碳信号。由此推定该化合物的结构为24S-环菠萝蜜烷-3β,16β,24,25,30-五醇-3-O-(2-O-β-D-木糖基)-β-D-木糖苷。
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化合物Ⅱ～Ⅳ经光谱分析和与标准品对照，分别鉴定为β-胡萝卜苷(Ⅱ)、小檗碱(Ⅲ)和5-羟基-4′-甲氧基黄酮 7-O(6-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)[4]。
化合物I的结构式见图1，1H和13C NMR 谱数据见表1。
图1 化合物I的化学结构式和HMBC光谱的相互作用
表1 化合物I的1HNMR 和13CNMR 谱数据(δ in ppm ,J in Hz)
N0
, http://www.100md.com
13C
DEPT
1H
N0
13C
DEPT
1H
1
31.3
CH2
1.16,1.40
21
, http://www.100md.com
17.6
CH3
0.84(d,6.5)
2
28.9
CH2
1.63,1.89
22
32.3
CH2
1.11,1.66
3
, 百拇医药
88.6
CH
3.25
23
27.1
CH2
1.28,1.42
4
43.9
C
24
76.6
CH
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3.16
5
47.4
CH
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C
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CH2
0.99,1.23
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0.99
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47.8
CH
1.43
28
19.8
CH3
0.80
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20.2
C
29
19.7
CH3
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1.03
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C
30
65.3
CH2
3.34,3.80
11
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CH2
1.27,1.91
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103.6
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4.28(d,7.1)
12
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CH2
1.52,1.57
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CH
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44.7
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75.8
CH
3.33
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C
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69.2
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4.23
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17
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CH
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CH
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0.27,0.45(d,3.9)
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, 百拇医药 CH
3.25
20
28.3
CH
1.78
5″
65.6
CH2
2.97,3.62
1 仪器、试剂与原料 熔点用X-4型显微熔点仪测定(温度计未校正)，UV用Philips PYE Unican Pu8800 型紫外光谱仪测定。IR用Pekin-Elmer 983G 型红外光谱仪测定，KBr 压片。FAB-MS 用ZAB-HS 型质谱仪测定。EI-MS 用 KYKY-ZSP-50 型质谱仪测定。NMR(包括 2D NMR)用 Bruker AM-500型核磁共振仪测定，溶剂为DMSO-d6和CD6OD，内标为TMS。层析用硅胶为青岛海洋化工厂出品、聚酰胺为湖南澧县一中试剂厂生产、Sephadex LH-20 为 Pharmacia公司生产。聚酰胺薄膜为浙江省黄岩化学实验厂和德国Maclerey-Nagel-Co.出品。聚酰胺TLC直接在紫外灯下观察荧光或喷AlCl3-EtOH乙醇液后观察硅胶。TLC直接在紫外下观察或喷5%的磷钼酸的乙醇液后加热显色。鞭柱唐松草于 1996年7月采集于四川省马尔康。
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2 提取和分离
鞭柱唐松草的根20 kg切碎，95%乙醇加热回流提取3次，乙醇浸膏加水溶解，水不溶物留存，水液乙醚脱脂后，正丁醇萃取，得浸膏120g,硅胶柱层析(100～120目)，氯仿-甲醇系统梯度洗脱，薄层检测合并为12部分。第4部分析出Ⅲ(2000mg)。第五部分经硅胶 H柱层析，Sephadex-LH20(MeOH)纯化后得化合物Ⅱ(300mg)。第九部分硅胶 H 柱层析，薄层检测后合并为9个部位，第5部分经硅胶柱层析后，Sephadex-LH20(MeOH)纯化得化合物Ⅰ(120mg)。第7部分经 Sephadex-LH20纯化后得化合物Ⅳ(20mg)。
3 结构鉴定
化合物Ⅰ：白色针晶，mp 211℃～213℃,FAB-MS m/z：755(M+-1),623(M+-xyl-1)和491(苷元)，1HNMR 和13CNMR 谱数据见表1。
, 百拇医药
化合物Ⅱ：白色粉末，EL-MS m/z(%) 414(20.8%)，TLC 检测与标准品对照鉴定为 β-胡萝卜苷。
化合物Ⅲ：黄色针晶，TLC 检测与标准品对照，鉴定为小檗碱。
化合物Ⅳ：白色粉末，mp 271℃～273℃,IR、UV、1H、13CNMR 光谱数据与文献[4]一致，故推定该化合物的结构为5-羟基-4′-甲氧基黄酮 7-O(6-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷。
参 考 文 献
1 中国科学院中国植物志编委会.中国植物志.北京：科学出版社，1979：502
2 Ganenko T V, et al.Khim Prir Soedin, 1985, 21:370; Chem Nat Compd (Eng1,Trams1), 1986:228
3 Ganenko T V, et al. Khim Prir Soedin, 1985, 21:370; Chem Nat Copd (ENG 1, Trans 1),1984:61
4 Ina H,et al.Phytochemistry,1981,20:1176
(1999-01-11收稿), 百拇医药