HPLC光电二极管矩阵检测器测定龙胆泻肝丸中龙胆苦苷的含量
作者：许军 彭红 杨武亮
单位：许军 彭红 杨武亮 江西中医学院药学系(南昌330006)
关键词：HPLC；龙胆泻肝丸；龙胆苦苷
HPLC光电二极管矩阵检测器测定龙 胆泻肝丸中龙胆苦苷的含量摘 要 用HPLC光电二极管矩阵检测器测定龙胆泻肝丸中龙苦苷的含量，以C 18柱，甲醇-水-乙腈(1∶4∶2)为流动相，检测波长270 nm。该方法线性关系优良， 平均加样回收率为100.48%，RSD 1.57%，可作为龙胆泻肝丸的含量测定 方 法。
龙胆泻肝丸系1995版中国药典收载[1]，具有清肝胆、利湿热功效。本丸由龙胆、 柴胡、黄芩等10味药材制成水泛丸，君药为龙胆。据分析[2]龙胆中含有裂烯醚萜 苷类苦味成分龙胆苦苷、当药苷、当药苦苷，药理研究结果表明，龙胆苦苷能促进胃液分泌 ，具抗炎利胆等作用，是龙胆药材的主要有效成分[3]。本丸中仅龙胆中含龙胆苦 苷成 分。为了控制龙胆泻肝丸产品质量，在中国药典1995版未收载定量分析情况下，研究制定了 HPLC光电二极管矩阵检测器测定龙胆泻肝丸中龙胆苦苷的含量方法。
, 百拇医药
1 仪器与试药
Waters高效液相色谱仪、510泵，U6K进样器，996光电二级管矩阵检测器，YWG-C18 柱(10 μm,4.0 mm×200 mm)，SB 200超声波清洗器。
龙胆苦苷对照品：中国药品生物制品检定所(供鉴别用，经精制而成，归一化含量为99.59% )；龙胆泻肝丸(按1995版中国药典方法自制 )；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件：用18烷基键合硅胶为分析柱，甲醇-水-乙腈(1∶4∶2)为流动相，流速1 .0 mL/min，检测波长经二极管矩阵检测为270 nm(图1)。
, 百拇医药
图1 龙胆苦苷对照品HPLC图
2.2 标准曲线制备：精密称取龙胆苦苷对照品15 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释 至刻度，作为对照品溶液，精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10、12 μL分别进样，测定色 谱峰面积，以龙胆苦苷为纵坐标，色谱峰面积为横坐标，绘制标准曲线，结果在此范围内呈 良好的线性关系。回归方程为Y=587930X+183155,r=0.9994。
2.3 样品的测定：精密称取样品10 g碾细置100 mL碘量瓶中，加水50 mL超声提取，滤过 ，精密吸取续滤液25 mL，置分液漏斗中加水饱和的正丁醇振摇萃取，合并正丁醇液，蒸干 ，残渣加甲醇溶解后置10 mL量瓶中加甲醇至刻度，摇匀，精密吸取10 μL注入液相色谱仪( 图2)，外标峰面积法计算含量，见表1。
, 百拇医药
图2 龙胆泻肝丸样品HPLC图
表1 样品测定结果(n=3)
批号
平均含量%
RSD%
970305
0.144
1.16
970308
0.153
1.06
970311
, http://www.100md.com
0.150
1.24
2.4 重现性实验：取样品续进行5次平行实验RSD=1.16%。
2.5 回收率实验：精密称取龙胆苦苷一定量置100 mL碘量瓶中，再精密称取已测含量的 样品，照样品测定方法测定，加样回收率为100.48%,RSD为1.57%。
3 讨论
通过HPLC光电二级管矩阵检测器测定龙胆泻肝丸中君药龙胆中龙胆苦苷含量，可有效地控制 该产品质量，提高中成药研制水平。经过筛选HPLC流动相选取较佳的流动相配比，使样品达 到基线分离。因《中国药典》1995版一部未收载该产品含量测定项，所以该方法可作为补充 方法对该产品进行质量控制。
参 考 文 献
1 中华人民共和国药典.一部.1995：455
2 国家医药管理局中草药情报中心站编.植物药有效成分手册.北京：人民卫生出 版社，1986：497
3 罗集鹏，等.药学学报，1986，21(1)∶40
(1998-08-12收稿), 百拇医药
单位：许军 彭红 杨武亮 江西中医学院药学系(南昌330006)
关键词：HPLC；龙胆泻肝丸；龙胆苦苷
HPLC光电二极管矩阵检测器测定龙 胆泻肝丸中龙胆苦苷的含量摘 要 用HPLC光电二极管矩阵检测器测定龙胆泻肝丸中龙苦苷的含量，以C 18柱，甲醇-水-乙腈(1∶4∶2)为流动相，检测波长270 nm。该方法线性关系优良， 平均加样回收率为100.48%，RSD 1.57%，可作为龙胆泻肝丸的含量测定 方 法。
龙胆泻肝丸系1995版中国药典收载[1]，具有清肝胆、利湿热功效。本丸由龙胆、 柴胡、黄芩等10味药材制成水泛丸，君药为龙胆。据分析[2]龙胆中含有裂烯醚萜 苷类苦味成分龙胆苦苷、当药苷、当药苦苷，药理研究结果表明，龙胆苦苷能促进胃液分泌 ，具抗炎利胆等作用，是龙胆药材的主要有效成分[3]。本丸中仅龙胆中含龙胆苦 苷成 分。为了控制龙胆泻肝丸产品质量，在中国药典1995版未收载定量分析情况下，研究制定了 HPLC光电二极管矩阵检测器测定龙胆泻肝丸中龙胆苦苷的含量方法。
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1 仪器与试药
Waters高效液相色谱仪、510泵，U6K进样器，996光电二级管矩阵检测器，YWG-C18 柱(10 μm,4.0 mm×200 mm)，SB 200超声波清洗器。
龙胆苦苷对照品：中国药品生物制品检定所(供鉴别用，经精制而成，归一化含量为99.59% )；龙胆泻肝丸(按1995版中国药典方法自制 )；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件：用18烷基键合硅胶为分析柱，甲醇-水-乙腈(1∶4∶2)为流动相，流速1 .0 mL/min，检测波长经二极管矩阵检测为270 nm(图1)。
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图1 龙胆苦苷对照品HPLC图
2.2 标准曲线制备：精密称取龙胆苦苷对照品15 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释 至刻度，作为对照品溶液，精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10、12 μL分别进样，测定色 谱峰面积，以龙胆苦苷为纵坐标，色谱峰面积为横坐标，绘制标准曲线，结果在此范围内呈 良好的线性关系。回归方程为Y=587930X+183155,r=0.9994。
2.3 样品的测定：精密称取样品10 g碾细置100 mL碘量瓶中，加水50 mL超声提取，滤过 ，精密吸取续滤液25 mL，置分液漏斗中加水饱和的正丁醇振摇萃取，合并正丁醇液，蒸干 ，残渣加甲醇溶解后置10 mL量瓶中加甲醇至刻度，摇匀，精密吸取10 μL注入液相色谱仪( 图2)，外标峰面积法计算含量，见表1。
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图2 龙胆泻肝丸样品HPLC图
表1 样品测定结果(n=3)
批号
平均含量%
RSD%
970305
0.144
1.16
970308
0.153
1.06
970311
, http://www.100md.com
0.150
1.24
2.4 重现性实验：取样品续进行5次平行实验RSD=1.16%。
2.5 回收率实验：精密称取龙胆苦苷一定量置100 mL碘量瓶中，再精密称取已测含量的 样品，照样品测定方法测定，加样回收率为100.48%,RSD为1.57%。
3 讨论
通过HPLC光电二级管矩阵检测器测定龙胆泻肝丸中君药龙胆中龙胆苦苷含量，可有效地控制 该产品质量，提高中成药研制水平。经过筛选HPLC流动相选取较佳的流动相配比，使样品达 到基线分离。因《中国药典》1995版一部未收载该产品含量测定项，所以该方法可作为补充 方法对该产品进行质量控制。
参 考 文 献
1 中华人民共和国药典.一部.1995：455
2 国家医药管理局中草药情报中心站编.植物药有效成分手册.北京：人民卫生出 版社，1986：497
3 罗集鹏，等.药学学报，1986，21(1)∶40
(1998-08-12收稿), 百拇医药