风湿性心脏病心功能不全时红细胞免疫状态与过氧化脂质的改变
作者：陈 灿 李 沛 王 伟 陈建英
单位：陈 灿 陈建英 广东医学院附属医院，心内科，广东省湛江市，524001；李 沛 广东医学院，预防医学教研室；王 伟 生化学教研室
关键词：风湿性心脏病；心功能不全；红细胞免疫；过氧化脂质
中国循环杂志990515 摘要：目的:探讨风湿性心脏病(风心病)心功能不全时红细胞免疫状态。
方法:将98例患者按心功能(NYHA)分级分为轻度心力衰竭(心衰)组36例、中度心衰组33例及重度心衰组29例,另有健康对照组48例,检测其红细胞受体花环率、红细胞免疫复合物花环率及红细胞免疫增强因子、红细胞免疫抑制因子、过氧化脂质的变化。
结果:心衰患者红细胞受体花环率、红细胞免疫复合物花环率和红细胞免疫增强因子均显著下降(P<0.01),而红细胞免疫抑制因子、过氧化脂质则明显升高(P<0.01),其变化且随心衰程度加重而更加显著。相关分析表明:红细胞受体花环率与红细胞免疫增强因子呈显著正相关(r=0.92，P<0.01),与红细胞免疫抑制因子、过氧化脂质呈显著负相关(r=-0.87、-0.81,P<0.01)。
, http://www.100md.com
结论:提示风心病心功能不全时存在红细胞免疫功能下降,且与红细胞免疫调节因子改变及过氧化脂质增加有关。
中图分类号：R541.2
文献标识码：A
文章编号：1000-3614(1999)05-0292-03
The Change of Erythrocyte Immune State and Lipid Peroxide in Patients of Rheumatic Heart Diseases with Cardiac Insufficiency
Chen Can,Li Pei,Wang Wei,et al.
Department of Cardiology,Affiliated Hospital of Guangdong Medical College,Zhanjiang(524001),Guangdong
, 百拇医药
Abstract Objective: To study the erythrocyte immune state in patients of rheumatic heart diseases with cardiac insufficiency.
Methods: According to the cardiac function (NYHA Standard) situations,98 patients with cardiac insufficiency were divided into 3 groups: mild type(n=36),median type(n=33)and severe type(n=29).Plasma red blood cell C3b receptor rosette(RBC-C3bRR),red cell blood immune complex rosette(RBC-ICR),enhancing factor(EF),inhibitory factor(IF)and lipid peroxide(LPO)were determined in all 3 groups.
, http://www.100md.com
Results:RBC-C3bRR,RBC-ICR and EF in total patients with cardiac insufficiency were significantly decreased(p<0.01),while IF and LPO were significantly increased(p<0.01).These changes became more obviously along with the cardiac function decreased.The correlation analysis showed:That RBC -C3bRR was related positively to EF(r=0.92,p<0.01),but negatively to IF and LPO(r=-0.87、-0.81,p<0.01).
Conclusion: The results suggest that the erythrocyte immune function in patients of rheumatic heart diseases with cardiac insufficiency is decreased,which is in relation to the change of erythrocyte immune regulation factors and the increase in LPO.
, 百拇医药
Key words Rheumatic heart disease; Cardiac insufficiency;Red blood cell immune;Lipid peroxide
(Chinese Circulation Journal,1999,14:292.)
风湿性心脏病(风心病)是临床常见心血管疾病之一,对其发病机制迄今尚未完全阐明,现认为与机体免疫状态等多因素有关。自Siegel等[1]提出红细胞免疫系统的概念之后,红细胞免疫在机体免疫调控中的作用已引起人们的极大兴趣,而风心病红细胞免疫功能的研究文献少有报道,本研究通过检测风心病心功能不全红细胞免疫状态的变化及对过氧化脂质水平的影响,以了解风心病心功能不全红细胞免疫状态的改变。
1 对象和方法
, 百拇医药 对象:1997年5月至1998年10月在本院住院确诊的风心病患者98例,按心功能(NYHA)分组:轻度心力衰竭(心衰)组(心功能Ⅱ级)36例,其中男24例,女12例,平均年龄29.0±1.6岁;中度心衰组(心功能Ⅲ级)33例,其中男15例,女18例,平均年龄40.0±2.8岁;重度心衰组(心功能Ⅳ级)29例，其中男10例,女19例,平均年龄45.0±2.6岁;健康对照组48例,均为本院体检正常人群,其中男21例,女27例,平均年龄40.0±2.3岁。
方法:清晨空腹抽血。①红细胞C3b受体花环率及红细胞免疫复合物花环率测定方法:将待测红细胞洗涤后配成浓度为1.25×107/L使用液,将酵母多糖冻干剂(上海长海医院免疫室提供)溶解洗涤离心后,按红细胞计数法配成浓度为1×108/L使用液待用。取2管待测红细胞使用液各75 μl 摇匀,分别加入补体致敏或未致敏酵母多糖使用液75 μl,放入37℃水浴30分钟后取出,每管加生理盐水150 μl,再加0.25%戊二醛25 μl混匀,水平涂片,吹干,甲醛固定,瑞氏染色,以结上≥2个酵母的红细胞作为一朵花环。计数200个红细胞,算出百分率,第1管为红细胞C3b受体花环率,第2管为红细胞免疫复合物花环率。②红细胞免疫增强因子及抑制因子测定方法:取待测两管新鲜血清各75 μl,第1管放58℃水浴30分钟,第2管放室温,另第3管加入75μl生理盐水,各管加入洗过3次的正常人O型红细胞悬液(1.25×107/L,本院生化室配制,为经肝素抗凝的新鲜血)50 μl混匀,37℃水浴3分钟,再加入补体致敏酵母菌悬液(1×108/L,由上海长海医院免疫室提供补体致敏酵母菌冻干试剂配制)50 μl混匀,放37℃水浴30分钟;加7滴生理盐水,2滴0.25%戊二醛混匀,水平涂片,吹干,甲醛固定,瑞氏染色。血清灭活管涂片高倍镜下计算2种花环标准,一是红细胞结上≥2个酵母菌为一朵花环(用于计算促进率),一是红细胞结上≥3个酵母菌为一朵花环(用于计算抑制率),血清未灭活管涂片高倍镜下计算,红细胞结上≥3个酵母菌为一朵花环(用于计算抑制率)。生理盐水管涂片高倍镜计算,红细胞结上≥2个酵母菌为一朵花环,每管涂片都计数200个红细胞,按各自标准算出花环率,并按以下公式求出促进率与抑制率,以此标准代表红细胞免疫增强因子和抑制因子活性:
, 百拇医药
红细胞C3b受体花环促进率=
③过氧化脂质测定参照文献[2]进行。
上述测定方法心衰各组及健康对照组标本均使用同批试剂。
统计学方法：采用SPSS-PC+软件包进行方差分析及相关分析。
2 结果
2.1 风心病心衰各组与健康对照组红细胞免疫功能的变化见附表。
附表 4组红细胞免疫功能变化(%,
±s) 组别
, 百拇医药
例数
红细胞受体花环率
红细胞免疫复合物花环率
红细胞免疫增强因子
红细胞免疫抑制因子
轻度心衰组
36
12.6±2.2*
7.50±1.14*
47.3±3.3*
36.4±4.2*
, 百拇医药
中度心衰组
33
10.1±1.9*△
6.10±1.25*△
41.5±4.1*△
42.7±4.6*△
重度心衰组
29
8.8±2.3*△▲
4.50±1.36*△▲▲
, 百拇医药 30.2±3.6*△▲▲
50.2±4.5*△▲▲
健康对照组
48
15.2±2.5
10.60±1.22
53.2±4.2
30.2±4.0
注:与健康对照组比*P<0.01; 与轻度心衰组比△P<0.01; 与中度心衰组比▲P<0.05 ▲▲P<0.01 由附表可见,心衰各组红细胞受体花环率、红细胞免疫复合物花环率和红细胞免疫增强因子均较健康对照组降低,且随心功能的减退而降低,而红细胞免疫抑制因子则较健康对照组升高,且随心功能减退而增加。
, 百拇医药
2.2 心衰患者过氧化脂质的变化经方差分析表明,各组的过氧化脂质差异有显著意义,其中中度心衰组(7.75±1.18)、重度心衰组(8.86±1.56)与轻度心衰组(6.15±1.25)比 P均<0.01,而重度心衰组与中度心衰组比P<0.05,进一步q检验结果为:心衰各组过氧化脂质与健康对照组(3.85±0.68)比差异有极显著意义(P<0.01),心衰各组间的过氧化脂质的差异随心功能减退而有升高的趋势。
2.3 相关分析表明,红细胞受体花环率与红细胞免疫增强因子呈显著正相关(r=0.92,P<0.01),而与红细胞免疫抑制因子、过氧化脂质呈显著负相关(r=-0.87、-0.81,P<0.01)。
3 讨论
80年代初,国内郭峰首先开展了红细胞免疫的研究,近二十年来,随着研究的深入,发现心血管疾病也存在着红细胞免疫功能异常,红细胞的免疫功能主要是清除免疫复合物并且是清除免疫复合物的主要系统[1,3]。在风心病中,国内严天虎[4]曾报道20例风湿活动患者红细胞免疫功能下降,在本研究中,我们用红细胞C3b受体花环率及红细胞免疫复合物花环率来表示红细胞的免疫功能,结果表明,风心病心功能不全患者红细胞免疫功能亦有明显降低,同时存在红细胞免疫增强因子下降、抑制因子升高,三者变化随心功能变化而发展,相关分析表明:红细胞C3b受体花环率与免疫增强因子呈正相关、与抑制因子呈负相关关系,这与理论相符,说明免疫调节因子在红细胞免疫中可能起重要作用,并可能随着风心病心功能不全的加重,二者平衡失调,造成红细胞免疫功能下降,值得注意的是,在红细胞免疫功能降低的同时,血清过氧化脂质增加,由于该脂质是生物膜中的多价不饱和脂肪酸受氧自由基的作用生成,故红细胞膜很容易受到自由基引发的脂质过氧化损伤,造成膜功能障碍[5],影响红细胞C3b受体功能,故此,过氧化脂质的损害,可能会造成红细胞免疫功能的降低。至于过氧化脂质的增加,目前认为与心衰时心肌缺血缺氧致氧自由基产生等因素有关[6]。
, 百拇医药
本研究提示:随风心病心功能的下降,红细胞免疫功能也随之下降,这可能与红细胞免疫调节因子的改变及过氧化脂质的增加有关。
作者简介：陈灿(1963-)，男，副教授，学士，主要从事心血管专业、心脏介入、风湿性心脏病的研究
参考文献
1 Siegel I,Tian Linliu.The red cell immune system.Lancent,1981,2:556—559.
2 Коробейков а З П.Мод нΦикадия о иредслсн и я В рса кции с Ти о барб ит уровой кнсдотой.Лабро ДсДо,1989，7：8—10.
3 Fearon DT.Identification of the membrance glycoprotein that is the C3b receptor of the human erythrocyte,polymorphonuclear leukocyte,B cymphocyte,and monocyte.J Exp Med,1980，152:20—30.
4 严天虎.20例风湿性心脏病患者红细胞免疫粘附活性检测结果.中国免疫学杂志,1991,7(增刊):59—61.
5 Slater TF.Free—radical mechanisms.J Biochem,1984,222:1—15.
6 马建林,张银环.脂质过氧化物、儿茶酚胺、前列腺素系统在CHF中的作用及相关性.临床心血管病杂志,1994,10:221—223.
收稿:1998-12-12
修回:1999-08-04, 百拇医药
单位：陈 灿 陈建英 广东医学院附属医院，心内科，广东省湛江市，524001；李 沛 广东医学院，预防医学教研室；王 伟 生化学教研室
关键词：风湿性心脏病；心功能不全；红细胞免疫；过氧化脂质
中国循环杂志990515 摘要：目的:探讨风湿性心脏病(风心病)心功能不全时红细胞免疫状态。
方法:将98例患者按心功能(NYHA)分级分为轻度心力衰竭(心衰)组36例、中度心衰组33例及重度心衰组29例,另有健康对照组48例,检测其红细胞受体花环率、红细胞免疫复合物花环率及红细胞免疫增强因子、红细胞免疫抑制因子、过氧化脂质的变化。
结果:心衰患者红细胞受体花环率、红细胞免疫复合物花环率和红细胞免疫增强因子均显著下降(P<0.01),而红细胞免疫抑制因子、过氧化脂质则明显升高(P<0.01),其变化且随心衰程度加重而更加显著。相关分析表明:红细胞受体花环率与红细胞免疫增强因子呈显著正相关(r=0.92，P<0.01),与红细胞免疫抑制因子、过氧化脂质呈显著负相关(r=-0.87、-0.81,P<0.01)。
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结论:提示风心病心功能不全时存在红细胞免疫功能下降,且与红细胞免疫调节因子改变及过氧化脂质增加有关。
中图分类号：R541.2
文献标识码：A
文章编号：1000-3614(1999)05-0292-03
The Change of Erythrocyte Immune State and Lipid Peroxide in Patients of Rheumatic Heart Diseases with Cardiac Insufficiency
Chen Can,Li Pei,Wang Wei,et al.
Department of Cardiology,Affiliated Hospital of Guangdong Medical College,Zhanjiang(524001),Guangdong
, 百拇医药
Abstract Objective: To study the erythrocyte immune state in patients of rheumatic heart diseases with cardiac insufficiency.
Methods: According to the cardiac function (NYHA Standard) situations,98 patients with cardiac insufficiency were divided into 3 groups: mild type(n=36),median type(n=33)and severe type(n=29).Plasma red blood cell C3b receptor rosette(RBC-C3bRR),red cell blood immune complex rosette(RBC-ICR),enhancing factor(EF),inhibitory factor(IF)and lipid peroxide(LPO)were determined in all 3 groups.
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Results:RBC-C3bRR,RBC-ICR and EF in total patients with cardiac insufficiency were significantly decreased(p<0.01),while IF and LPO were significantly increased(p<0.01).These changes became more obviously along with the cardiac function decreased.The correlation analysis showed:That RBC -C3bRR was related positively to EF(r=0.92,p<0.01),but negatively to IF and LPO(r=-0.87、-0.81,p<0.01).
Conclusion: The results suggest that the erythrocyte immune function in patients of rheumatic heart diseases with cardiac insufficiency is decreased,which is in relation to the change of erythrocyte immune regulation factors and the increase in LPO.
, 百拇医药
Key words Rheumatic heart disease; Cardiac insufficiency;Red blood cell immune;Lipid peroxide
(Chinese Circulation Journal,1999,14:292.)
风湿性心脏病(风心病)是临床常见心血管疾病之一,对其发病机制迄今尚未完全阐明,现认为与机体免疫状态等多因素有关。自Siegel等[1]提出红细胞免疫系统的概念之后,红细胞免疫在机体免疫调控中的作用已引起人们的极大兴趣,而风心病红细胞免疫功能的研究文献少有报道,本研究通过检测风心病心功能不全红细胞免疫状态的变化及对过氧化脂质水平的影响,以了解风心病心功能不全红细胞免疫状态的改变。
1 对象和方法
, 百拇医药 对象:1997年5月至1998年10月在本院住院确诊的风心病患者98例,按心功能(NYHA)分组:轻度心力衰竭(心衰)组(心功能Ⅱ级)36例,其中男24例,女12例,平均年龄29.0±1.6岁;中度心衰组(心功能Ⅲ级)33例,其中男15例,女18例,平均年龄40.0±2.8岁;重度心衰组(心功能Ⅳ级)29例，其中男10例,女19例,平均年龄45.0±2.6岁;健康对照组48例,均为本院体检正常人群,其中男21例,女27例,平均年龄40.0±2.3岁。
方法:清晨空腹抽血。①红细胞C3b受体花环率及红细胞免疫复合物花环率测定方法:将待测红细胞洗涤后配成浓度为1.25×107/L使用液,将酵母多糖冻干剂(上海长海医院免疫室提供)溶解洗涤离心后,按红细胞计数法配成浓度为1×108/L使用液待用。取2管待测红细胞使用液各75 μl 摇匀,分别加入补体致敏或未致敏酵母多糖使用液75 μl,放入37℃水浴30分钟后取出,每管加生理盐水150 μl,再加0.25%戊二醛25 μl混匀,水平涂片,吹干,甲醛固定,瑞氏染色,以结上≥2个酵母的红细胞作为一朵花环。计数200个红细胞,算出百分率,第1管为红细胞C3b受体花环率,第2管为红细胞免疫复合物花环率。②红细胞免疫增强因子及抑制因子测定方法:取待测两管新鲜血清各75 μl,第1管放58℃水浴30分钟,第2管放室温,另第3管加入75μl生理盐水,各管加入洗过3次的正常人O型红细胞悬液(1.25×107/L,本院生化室配制,为经肝素抗凝的新鲜血)50 μl混匀,37℃水浴3分钟,再加入补体致敏酵母菌悬液(1×108/L,由上海长海医院免疫室提供补体致敏酵母菌冻干试剂配制)50 μl混匀,放37℃水浴30分钟;加7滴生理盐水,2滴0.25%戊二醛混匀,水平涂片,吹干,甲醛固定,瑞氏染色。血清灭活管涂片高倍镜下计算2种花环标准,一是红细胞结上≥2个酵母菌为一朵花环(用于计算促进率),一是红细胞结上≥3个酵母菌为一朵花环(用于计算抑制率),血清未灭活管涂片高倍镜下计算,红细胞结上≥3个酵母菌为一朵花环(用于计算抑制率)。生理盐水管涂片高倍镜计算,红细胞结上≥2个酵母菌为一朵花环,每管涂片都计数200个红细胞,按各自标准算出花环率,并按以下公式求出促进率与抑制率,以此标准代表红细胞免疫增强因子和抑制因子活性:
, 百拇医药
红细胞C3b受体花环促进率=
③过氧化脂质测定参照文献[2]进行。
上述测定方法心衰各组及健康对照组标本均使用同批试剂。
统计学方法：采用SPSS-PC+软件包进行方差分析及相关分析。
2 结果
2.1 风心病心衰各组与健康对照组红细胞免疫功能的变化见附表。
附表 4组红细胞免疫功能变化(%,
±s) 组别, 百拇医药
例数
红细胞受体花环率
红细胞免疫复合物花环率
红细胞免疫增强因子
红细胞免疫抑制因子
轻度心衰组
36
12.6±2.2*
7.50±1.14*
47.3±3.3*
36.4±4.2*
, 百拇医药
中度心衰组
33
10.1±1.9*△
6.10±1.25*△
41.5±4.1*△
42.7±4.6*△
重度心衰组
29
8.8±2.3*△▲
4.50±1.36*△▲▲
, 百拇医药 30.2±3.6*△▲▲
50.2±4.5*△▲▲
健康对照组
48
15.2±2.5
10.60±1.22
53.2±4.2
30.2±4.0
注:与健康对照组比*P<0.01; 与轻度心衰组比△P<0.01; 与中度心衰组比▲P<0.05 ▲▲P<0.01 由附表可见,心衰各组红细胞受体花环率、红细胞免疫复合物花环率和红细胞免疫增强因子均较健康对照组降低,且随心功能的减退而降低,而红细胞免疫抑制因子则较健康对照组升高,且随心功能减退而增加。
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2.2 心衰患者过氧化脂质的变化经方差分析表明,各组的过氧化脂质差异有显著意义,其中中度心衰组(7.75±1.18)、重度心衰组(8.86±1.56)与轻度心衰组(6.15±1.25)比 P均<0.01,而重度心衰组与中度心衰组比P<0.05,进一步q检验结果为:心衰各组过氧化脂质与健康对照组(3.85±0.68)比差异有极显著意义(P<0.01),心衰各组间的过氧化脂质的差异随心功能减退而有升高的趋势。
2.3 相关分析表明,红细胞受体花环率与红细胞免疫增强因子呈显著正相关(r=0.92,P<0.01),而与红细胞免疫抑制因子、过氧化脂质呈显著负相关(r=-0.87、-0.81,P<0.01)。
3 讨论
80年代初,国内郭峰首先开展了红细胞免疫的研究,近二十年来,随着研究的深入,发现心血管疾病也存在着红细胞免疫功能异常,红细胞的免疫功能主要是清除免疫复合物并且是清除免疫复合物的主要系统[1,3]。在风心病中,国内严天虎[4]曾报道20例风湿活动患者红细胞免疫功能下降,在本研究中,我们用红细胞C3b受体花环率及红细胞免疫复合物花环率来表示红细胞的免疫功能,结果表明,风心病心功能不全患者红细胞免疫功能亦有明显降低,同时存在红细胞免疫增强因子下降、抑制因子升高,三者变化随心功能变化而发展,相关分析表明:红细胞C3b受体花环率与免疫增强因子呈正相关、与抑制因子呈负相关关系,这与理论相符,说明免疫调节因子在红细胞免疫中可能起重要作用,并可能随着风心病心功能不全的加重,二者平衡失调,造成红细胞免疫功能下降,值得注意的是,在红细胞免疫功能降低的同时,血清过氧化脂质增加,由于该脂质是生物膜中的多价不饱和脂肪酸受氧自由基的作用生成,故红细胞膜很容易受到自由基引发的脂质过氧化损伤,造成膜功能障碍[5],影响红细胞C3b受体功能,故此,过氧化脂质的损害,可能会造成红细胞免疫功能的降低。至于过氧化脂质的增加,目前认为与心衰时心肌缺血缺氧致氧自由基产生等因素有关[6]。
, 百拇医药
本研究提示:随风心病心功能的下降,红细胞免疫功能也随之下降,这可能与红细胞免疫调节因子的改变及过氧化脂质的增加有关。
作者简介：陈灿(1963-)，男，副教授，学士，主要从事心血管专业、心脏介入、风湿性心脏病的研究
参考文献
1 Siegel I,Tian Linliu.The red cell immune system.Lancent,1981,2:556—559.
2 Коробейков а З П.Мод нΦикадия о иредслсн и я В рса кции с Ти о барб ит уровой кнсдотой.Лабро ДсДо,1989，7：8—10.
3 Fearon DT.Identification of the membrance glycoprotein that is the C3b receptor of the human erythrocyte,polymorphonuclear leukocyte,B cymphocyte,and monocyte.J Exp Med,1980，152:20—30.
4 严天虎.20例风湿性心脏病患者红细胞免疫粘附活性检测结果.中国免疫学杂志,1991,7(增刊):59—61.
5 Slater TF.Free—radical mechanisms.J Biochem,1984,222:1—15.
6 马建林,张银环.脂质过氧化物、儿茶酚胺、前列腺素系统在CHF中的作用及相关性.临床心血管病杂志,1994,10:221—223.
收稿:1998-12-12
修回:1999-08-04, 百拇医药