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编号:10242666
皮肤石蜡半薄切片制作的方法与体会
http://www.100md.com 《宁夏医学杂志》 1999年第5期
     作者:刘爱娥

    单位:浙江省上虞市医院 312300

    关键词:

    宁夏医学杂志9905 1 方法

    取材固定:取材组织块边长不大于3,厚度在3mm以下,用10%中性福尔马林固定4~2小时。脱水透明:用50%、75%、85%各级酒精分别处理半小时,再放入95%酒精Ⅰ、Ⅱ液中各脱水1小时,然后在无水酒精Ⅰ、Ⅱ液中分别脱水1小时。用松节油Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ液各处理6~8小时,氯仿Ⅰ、Ⅱ各透明1小时。浸蜡包埋:用58~60℃石蜡浸蜡4小时,每小时更换一次石蜡。用自动包埋机(Leica 1160型)包埋组织块,包埋石蜡温度应在60~62℃之间,包埋面与皮肤垂直。冷却后将蜡块放入冰箱内冷冻1小时以上后切片。切片:应用Leica 2035型切片机,切片刻度调至2U,切片刀选用羽毛牌一次性刀片(R型),刀片角度调至7~10度。组织块放置时表皮组织朝上,皮下组织朝下,选定一处作粗切片,当粗切片已经完整时,将刀片移到另一较锋利之处进行精切,一般都能顺利切出厚度2U的连续完整的薄切片。放在45℃温水中展平捞至洁净的载玻片上,放入65℃烤箱内烘烤半小时。

    脱蜡染色:同一般HE切片染色。脱蜡至水后,用哈瑞氏苏木素染色5~7分钟,水洗后用1%盐酸酒精分化1~2秒钟,自来水蓝化15分钟,用0.25%伊红染胞浆5分钟,水洗后经各级大酒精脱水,二甲苯透明,干燥后封片。

    2 体会

    制作皮肤半薄切片方法简便,不需要特殊设备和试剂,而且效果稳定。经上述处理后的组织切片厚薄均匀、平整无皱褶、不脱片,尤其是染色后细胞结构比常规切片更加清晰,提高了诊断的准确率。经多次的制片实践,体会到还应注意以下几点。组织应充分固定取材组织块不能太厚,而且组织固定应越鲜越好。在制作过程中此类标本应进行单独处理所用试剂要保征其浓度和纯净度。皮肤组织经酒精处理后,采用松节油软化,氯仿透明,目的是处理皮肤组织的韧性,调整组织的硬度,减少切片时的阴力。

    收稿:1998—7—3, 百拇医药