醒脑静注射液对急性脑梗死患者单核细胞CD＋54分子表达的影响
作者：吴玉生 王 钊 姜立平
单位：250031 济南军区总医院中医内科(吴玉生现在第一军医大学南方医院中医内科，广州 510515)；王 钊 成都军区总医院；姜立平 山东中医药大学附属医院
关键词：脑梗死，急性；醒脑静注射液；单核细胞Cdsub>54分子表达
中西医结合实用临床急救990513 摘要 目的：探讨醒脑静注射液对急性脑梗死炎症反应的影响。方法：40例急性期脑梗死患者，随机分为2组。对照组20例用常规方法治疗；醒脑静组20例在常规方法治疗的基础上加用醒脑静注射液治疗。观察患者病程第3、10、15日外周血单核细胞(PBMC)CD54分子表达情况，并与20例健康组作比较，同时观察临床疗效。结果：患者第3日PBMCCD+54分子处于高水平表达状态(与健康组比较，P<0.001)；第10日时，醒脑静组降至健康组水平(P>0.05)，而对照组仍显著高于健康组(P<0.001)，至第15日时才达健康组水平(P>0.05)；且醒脑静组愈显率65.0%，显著高于对照组30.0%(χ2=4.91，P<0.05)。结论：醒脑静注射液对急性脑梗死炎症反应具有抑制作用，治疗脑梗死患者有效。
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Influence of Xingnaojing Injection(醒脑静注射液) on CD54 molecular expression in patients with acute cerebral infarctions
Wu Yusheng,Wang Zhao,Jiang Liping.
General Hospital of Jinan Command,Jinan 250031
Abstract Objective:To investigate the influence of Xingnaojing Injection(XNJI，醒脑静注射液) on inflammatory reactions of acute cerebral infarctions.Methods:40 cases of acute phase were selected and randomly divided into two groups.The control group (n=20) was treated with conventional methods otherwise the treatment group treated with the same methods adding XNJI.The conditions of CD54 molecular expression of mononuclear cells in peripheral blood during the ill course on the 3th ,10th and 15th day were observed and compared with healthy subjects (n=20) and meantime the curative effects were abserved too.Results:On the 3th day the CD+54 molecules of mononuclear cells were in a high expression level and in comparison with healthy subjects the difference was significant (P<0.001).On the 10th day in XNJI group they were depressed to the same level as that in healthy group (P>0.05),but in control group they were significantly higher than that in healthy group (P<0.001) and till the 15th day they were reached to the level of healthy group (P>0.05).The markedly effective rate (65.0%) in XNJI group was significantly higher than that (30.0%) in control group (χ2=4.91，P<0.05).Conclusions:XNJI possesses inhibiting actions on inflammatory reactions of cerebral infarctions and is able to treat cerebral infarctions effectively.
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Key words acute cerebral infarction Xingnaojing Injection CD54 molecules of mononuclear expression
醒脑静注射液是安宫牛黄丸改制的水溶性注射液，近年来常用于治疗多种脑血管疾病。1996年6月～1998年6月，用醒脑静注射液治疗20例急性脑梗死患者，动态观察其外周血单核细胞(PBMC)CD+54分子表达状况，报告如下。
1 资料与方法
1.1 病例；脑梗死诊断按文献〔1〕标准，并均辅以颅脑CT或MRI检查。40例均为住院患者，病程≤3日，排除感染、肿瘤及自身免疫性疾病。入院后随机分为2组，对照组20例中男11例，女9例；年龄44～79岁，平均54.0岁。醒脑静组20例中男10例，女10例；年龄45～73岁，平均57.0岁。另设健康组(同期查体健康者)20例，男12例，女8例；年龄38～69岁，平均58.5岁。
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1.2 治疗方法：
1.2.1 对照组：参照文献〔1〕的方法，改善脑循环用10% 706代血浆500 ml静滴，每日1次；降颅压用20%甘露醇250 ml静滴，每4～6小时1次；保护脑组织、改善脑细胞代谢用三磷酸腺苷二钠40 mg、辅酶A 100 U、维生素C 4 g加入5%葡萄糖(或生理盐水)250 ml中静滴，每日1次；其他处理包括降血压、吸氧、维持水及电解质平衡、鼻饲饮食等。15日为1个疗程，除甘露醇外，均治疗1个疗程。
1.2.2 醒脑静组：在对照组用药的基础上，同时用醒脑静注射液(无锡健宏药业总公司生产)40 ml加入5%葡萄糖(生理盐水)250 ml中静滴，每日1次。治疗1个疗程。
1.3 观察项目与检测方法：
1.3.1 观察用药1个疗程前后临床变化情况。
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1.3.2 PBMCCD+54分子检测：
1.3.2.1 主要试剂：异硫氰酸荧光素(FITC)标记鼠抗人CD54单抗，阴性对照为FITC标记羊抗鼠IgG1多克隆抗体(法国国际免疫公司生产)。
1.3.2.2 主要仪器：采用美国BectonDickinson公司产FACScan型流式细胞仪。
1.3.2.3 操作：采健康组及患者病程第3、10、15日静脉血2 ml，用2% EDTA抗凝；加FicollHypaque分离液2 ml，1 500 r/min离心15分钟，提取单核细胞层，再用PBS漂洗，同速离心，70%乙醇固定细胞层，4℃条件保存待测。将除去固定剂PBMC悬液滴入两个试管，每管500 μl，分别加入FITC标记鼠抗人CD54单抗及FITC标记羊抗鼠IgG1多抗各20 μl，室温下反应20分钟，以PBS漂洗离心，弃上清液。流式细胞仪记数前先调整仪器，使变异系数控制在2%左右，然后上机计数2×104个细胞，荧光强度对数放大，数据存软盘，用Ceil Qutst Plot软件分析。
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1.4 疗效评定标准：参考《中医病证诊疗标准》〔2〕，从意识状态、语言表达、肩关节、指关节、髋关节、趾关节、综合功能7个方面进行评估。每项功能正常为4分，功能完全丧失为0分，满分28分。治疗后积分>24分为基本治愈；积分增加>10分为显效；积分增加≥4分为有效；积分增加<4分为无效。
1.5 统计学方法：数据用均数±标准差(
±s)表示，采用t检验及χ2检验。
2 结果
2.1 临床疗效：对照组基本治愈1例，显效5例，有效11例，无效3例，愈显率30.0%；醒脑静组基本治愈1例，显效12例，有效4例，无效3例，愈显率65.0%，2组比较：χ2=4.91，P<0.05。
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2.2 健康组及2组患者PBMCCD+54检测结果：健康组为(4.72±1.15)%；2组患者PBMCCD+54数动态检测结果见表1。2组患者第3日PBMCCD+54数显著高于健康组(P均<0.001)，且均显著高于本组第10日时(P均<0.001)；醒脑静组第10日的PBMCCD+54数已降至健康组水平(P>0.05)，而对照组仍呈CD+54分子的高表达状态，与健康组比较，P<0.001，直到第15日才降至健康组水平(P>0.05)。说明醒脑静注射液能抑制PBMCCD+54分子的表达。
表1 2组患者PBMCCD+54动态变化(±s) % 组别
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例数(例)
病程第3日
病程第10日
病程第15日
醒脑静组
20
12.40±2.05△
5.01±1.05*
4.63±1.11
对照组
20
11.90±2.13△
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8.90±1.21
4.70±1.09
注：与本组病程第10日时比较：△P<0.001；与对照组病程
第10日时比较：*P<0.001
3 讨论
脑梗死后缺血区域的炎症反应对神经组织造成的损伤与单核细胞关系密切。正常情况下，PBMC不表达或很少表达CD+54分子，但脑梗死后，缺血区血管内皮细胞、神经元、神经胶质细胞合成大量白细胞介素1(IL1)、肿瘤坏死因子(TNF)等细胞因子，可刺激PBMC表达CD+54分子于细胞膜表面〔3〕，称为CD+54细胞，可被荧光素处理的抗CD+54单克隆抗体所标记。CD+54又称细胞间粘附分子1(ICAM1)，属免疫球蛋白超家族成员，其配体是白细胞粘附分子CD18家族中两个成员：LFA1(CD+11a/CD+18)、Mac1(CD+11b/CD+18)。CD+54分子与LFA1相互作用可介导单核细胞、中性粒细胞与血管内皮细胞的粘附，进一步向损伤区趋化，造成损伤加重；大量中性粒细胞在局灶血管内聚集，阻塞微血管，形成无复流现象〔3〕；浸润到组织中的白细胞又能释放大量炎性介质，加重缺血区炎症反应，引起组织水肿、蛋白质水解、自由基反应加强〔3〕，加重了神经缺损症状。
, 百拇医药
醒脑静注射液由麝香、冰片、郁金、栀子等组成，具有祛瘀散邪、醒脑开窍功能。其中麝香气味芳香，辛香走窜，善治脑病，其水溶性多肽能透过血脑屏障，抑制炎症血管通透性，抑制白细胞粘附性，减轻白细胞向脑组织浸润〔4〕，还能抑制中性粒细胞溶酶体释放〔5〕。冰片亦能促进药物透过血脑屏障，直达病所〔6〕。醒脑静注射液对PBMCCD+54分子表达的抑制作用，发挥其抗炎作用。
本文曾获1998年“醒脑静临床应用观察与研究”征文二等奖
作者简介：吴玉生，男，31岁，主治医师。
4 参考文献
1 黄友岐主编.神经病学.第2版.北京：人民卫生出版社，1990：147155
, 百拇医药
2 王立恒主编.中医病证诊疗标准.第1版.济南：黄河出版社，1990：5054
3 周华东，琚亚飞.细胞间粘附分子与缺血性脑血管病.国外医学脑血管疾病分册，1997；5(2)：8789
4 邓文龙.开窍方药的临床及实验研究进展.中成药研究，1985；7(3)：3338
5 王文杰，白金叶.麝香糖蛋白对白三烯B4激活的大鼠中性白细胞影响.中国中药杂志，1998；23(4)：238240
6 徐伟，王宗锐.薄荷醇及冰片对磺胺嘧啶和伊文思蓝在脑中分布的影响.中药药理与临床，1995；11(6)：3133
(收稿：19981102), http://www.100md.com
单位：250031 济南军区总医院中医内科(吴玉生现在第一军医大学南方医院中医内科，广州 510515)；王 钊 成都军区总医院；姜立平 山东中医药大学附属医院
关键词：脑梗死，急性；醒脑静注射液；单核细胞Cdsub>54分子表达
中西医结合实用临床急救990513 摘要 目的：探讨醒脑静注射液对急性脑梗死炎症反应的影响。方法：40例急性期脑梗死患者，随机分为2组。对照组20例用常规方法治疗；醒脑静组20例在常规方法治疗的基础上加用醒脑静注射液治疗。观察患者病程第3、10、15日外周血单核细胞(PBMC)CD54分子表达情况，并与20例健康组作比较，同时观察临床疗效。结果：患者第3日PBMCCD+54分子处于高水平表达状态(与健康组比较，P<0.001)；第10日时，醒脑静组降至健康组水平(P>0.05)，而对照组仍显著高于健康组(P<0.001)，至第15日时才达健康组水平(P>0.05)；且醒脑静组愈显率65.0%，显著高于对照组30.0%(χ2=4.91，P<0.05)。结论：醒脑静注射液对急性脑梗死炎症反应具有抑制作用，治疗脑梗死患者有效。
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Influence of Xingnaojing Injection(醒脑静注射液) on CD54 molecular expression in patients with acute cerebral infarctions
Wu Yusheng,Wang Zhao,Jiang Liping.
General Hospital of Jinan Command,Jinan 250031
Abstract Objective:To investigate the influence of Xingnaojing Injection(XNJI，醒脑静注射液) on inflammatory reactions of acute cerebral infarctions.Methods:40 cases of acute phase were selected and randomly divided into two groups.The control group (n=20) was treated with conventional methods otherwise the treatment group treated with the same methods adding XNJI.The conditions of CD54 molecular expression of mononuclear cells in peripheral blood during the ill course on the 3th ,10th and 15th day were observed and compared with healthy subjects (n=20) and meantime the curative effects were abserved too.Results:On the 3th day the CD+54 molecules of mononuclear cells were in a high expression level and in comparison with healthy subjects the difference was significant (P<0.001).On the 10th day in XNJI group they were depressed to the same level as that in healthy group (P>0.05),but in control group they were significantly higher than that in healthy group (P<0.001) and till the 15th day they were reached to the level of healthy group (P>0.05).The markedly effective rate (65.0%) in XNJI group was significantly higher than that (30.0%) in control group (χ2=4.91，P<0.05).Conclusions:XNJI possesses inhibiting actions on inflammatory reactions of cerebral infarctions and is able to treat cerebral infarctions effectively.
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Key words acute cerebral infarction Xingnaojing Injection CD54 molecules of mononuclear expression
醒脑静注射液是安宫牛黄丸改制的水溶性注射液，近年来常用于治疗多种脑血管疾病。1996年6月～1998年6月，用醒脑静注射液治疗20例急性脑梗死患者，动态观察其外周血单核细胞(PBMC)CD+54分子表达状况，报告如下。
1 资料与方法
1.1 病例；脑梗死诊断按文献〔1〕标准，并均辅以颅脑CT或MRI检查。40例均为住院患者，病程≤3日，排除感染、肿瘤及自身免疫性疾病。入院后随机分为2组，对照组20例中男11例，女9例；年龄44～79岁，平均54.0岁。醒脑静组20例中男10例，女10例；年龄45～73岁，平均57.0岁。另设健康组(同期查体健康者)20例，男12例，女8例；年龄38～69岁，平均58.5岁。
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1.2 治疗方法：
1.2.1 对照组：参照文献〔1〕的方法，改善脑循环用10% 706代血浆500 ml静滴，每日1次；降颅压用20%甘露醇250 ml静滴，每4～6小时1次；保护脑组织、改善脑细胞代谢用三磷酸腺苷二钠40 mg、辅酶A 100 U、维生素C 4 g加入5%葡萄糖(或生理盐水)250 ml中静滴，每日1次；其他处理包括降血压、吸氧、维持水及电解质平衡、鼻饲饮食等。15日为1个疗程，除甘露醇外，均治疗1个疗程。
1.2.2 醒脑静组：在对照组用药的基础上，同时用醒脑静注射液(无锡健宏药业总公司生产)40 ml加入5%葡萄糖(生理盐水)250 ml中静滴，每日1次。治疗1个疗程。
1.3 观察项目与检测方法：
1.3.1 观察用药1个疗程前后临床变化情况。
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1.3.2 PBMCCD+54分子检测：
1.3.2.1 主要试剂：异硫氰酸荧光素(FITC)标记鼠抗人CD54单抗，阴性对照为FITC标记羊抗鼠IgG1多克隆抗体(法国国际免疫公司生产)。
1.3.2.2 主要仪器：采用美国BectonDickinson公司产FACScan型流式细胞仪。
1.3.2.3 操作：采健康组及患者病程第3、10、15日静脉血2 ml，用2% EDTA抗凝；加FicollHypaque分离液2 ml，1 500 r/min离心15分钟，提取单核细胞层，再用PBS漂洗，同速离心，70%乙醇固定细胞层，4℃条件保存待测。将除去固定剂PBMC悬液滴入两个试管，每管500 μl，分别加入FITC标记鼠抗人CD54单抗及FITC标记羊抗鼠IgG1多抗各20 μl，室温下反应20分钟，以PBS漂洗离心，弃上清液。流式细胞仪记数前先调整仪器，使变异系数控制在2%左右，然后上机计数2×104个细胞，荧光强度对数放大，数据存软盘，用Ceil Qutst Plot软件分析。
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1.4 疗效评定标准：参考《中医病证诊疗标准》〔2〕，从意识状态、语言表达、肩关节、指关节、髋关节、趾关节、综合功能7个方面进行评估。每项功能正常为4分，功能完全丧失为0分，满分28分。治疗后积分>24分为基本治愈；积分增加>10分为显效；积分增加≥4分为有效；积分增加<4分为无效。
1.5 统计学方法：数据用均数±标准差(
±s)表示，采用t检验及χ2检验。2 结果
2.1 临床疗效：对照组基本治愈1例，显效5例，有效11例，无效3例，愈显率30.0%；醒脑静组基本治愈1例，显效12例，有效4例，无效3例，愈显率65.0%，2组比较：χ2=4.91，P<0.05。
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2.2 健康组及2组患者PBMCCD+54检测结果：健康组为(4.72±1.15)%；2组患者PBMCCD+54数动态检测结果见表1。2组患者第3日PBMCCD+54数显著高于健康组(P均<0.001)，且均显著高于本组第10日时(P均<0.001)；醒脑静组第10日的PBMCCD+54数已降至健康组水平(P>0.05)，而对照组仍呈CD+54分子的高表达状态，与健康组比较，P<0.001，直到第15日才降至健康组水平(P>0.05)。说明醒脑静注射液能抑制PBMCCD+54分子的表达。
表1 2组患者PBMCCD+54动态变化(
±s) % 组别, http://www.100md.com
例数(例)
病程第3日
病程第10日
病程第15日
醒脑静组
20
12.40±2.05△
5.01±1.05*
4.63±1.11
对照组
20
11.90±2.13△
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8.90±1.21
4.70±1.09
注：与本组病程第10日时比较：△P<0.001；与对照组病程
第10日时比较：*P<0.001
3 讨论
脑梗死后缺血区域的炎症反应对神经组织造成的损伤与单核细胞关系密切。正常情况下，PBMC不表达或很少表达CD+54分子，但脑梗死后，缺血区血管内皮细胞、神经元、神经胶质细胞合成大量白细胞介素1(IL1)、肿瘤坏死因子(TNF)等细胞因子，可刺激PBMC表达CD+54分子于细胞膜表面〔3〕，称为CD+54细胞，可被荧光素处理的抗CD+54单克隆抗体所标记。CD+54又称细胞间粘附分子1(ICAM1)，属免疫球蛋白超家族成员，其配体是白细胞粘附分子CD18家族中两个成员：LFA1(CD+11a/CD+18)、Mac1(CD+11b/CD+18)。CD+54分子与LFA1相互作用可介导单核细胞、中性粒细胞与血管内皮细胞的粘附，进一步向损伤区趋化，造成损伤加重；大量中性粒细胞在局灶血管内聚集，阻塞微血管，形成无复流现象〔3〕；浸润到组织中的白细胞又能释放大量炎性介质，加重缺血区炎症反应，引起组织水肿、蛋白质水解、自由基反应加强〔3〕，加重了神经缺损症状。
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醒脑静注射液由麝香、冰片、郁金、栀子等组成，具有祛瘀散邪、醒脑开窍功能。其中麝香气味芳香，辛香走窜，善治脑病，其水溶性多肽能透过血脑屏障，抑制炎症血管通透性，抑制白细胞粘附性，减轻白细胞向脑组织浸润〔4〕，还能抑制中性粒细胞溶酶体释放〔5〕。冰片亦能促进药物透过血脑屏障，直达病所〔6〕。醒脑静注射液对PBMCCD+54分子表达的抑制作用，发挥其抗炎作用。
本文曾获1998年“醒脑静临床应用观察与研究”征文二等奖
作者简介：吴玉生，男，31岁，主治医师。
4 参考文献
1 黄友岐主编.神经病学.第2版.北京：人民卫生出版社，1990：147155
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2 王立恒主编.中医病证诊疗标准.第1版.济南：黄河出版社，1990：5054
3 周华东，琚亚飞.细胞间粘附分子与缺血性脑血管病.国外医学脑血管疾病分册，1997；5(2)：8789
4 邓文龙.开窍方药的临床及实验研究进展.中成药研究，1985；7(3)：3338
5 王文杰，白金叶.麝香糖蛋白对白三烯B4激活的大鼠中性白细胞影响.中国中药杂志，1998；23(4)：238240
6 徐伟，王宗锐.薄荷醇及冰片对磺胺嘧啶和伊文思蓝在脑中分布的影响.中药药理与临床，1995；11(6)：3133
(收稿：19981102), http://www.100md.com