原发性肝癌患者HBVX基因与内分泌激素相关性的初步研究**
作者：田小平 郑义同 何浩明 苏彩女
单位：连云港市第一人民医院 邮政编码：222002
关键词：原发性肝癌 内分泌激素 乙型肝炎病毒X基因 相关分析
江苏医药990604 摘要 为了解原发性肝癌(HCC)患者的内分泌激素水平与HBVX基因间的相互关系，探讨HBV相关性HCC发生中内分泌激素的作用，用聚合酶链反应技术―限制片段长度多肽性分析法(PCR-RFLP)检测48例原发性肝癌患者血清HBVX基因，并与用放射免疫法(RIA)检测的血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、生长激素(HGH)、泌乳素(PRL)、C肽水平进行相关分析。结果表明，HBVX基因阳性原发性肝癌患者血清HGH水平显著高于阴性组(t＝3.38，P<0.01)；T水平显著低于阴性组(t＝2.24，P<0.05)。HBVX基因阳性肝癌患者C肽水平与E2高度正相关(r＝0.861，P<0.01)，与T正相关(r＝0.380，P<0.05)；血清HGH水平与E2正相关(r=0.471，P<0.05)。结果提示：HGH、T、E2水平的改变与HBV相关性HCC发生有关；其中E2、胰岛素和HGH可能有协同作用。
, 百拇医药
乙型肝炎病毒的X基因与HCC高度相关性已引起人们的重视，这主要与HBVX基因能编码具有反式激活作用的X蛋白有关。已有研究表明，X蛋白在HBV复制、肝炎病理损害及肝癌的形成中都有重要作用[1]。目前关于HBVX基因的研究已成热点，但在评价HBVX基因作用上，应综合考虑机体激素-内分泌-免疫网络的整体效应，不仅把肝脏作为激素代谢的场所，而且应考虑激素对肝脏和肝脏对内分泌系统的相互作用，即肝脏应被认为是内分泌系统的一部分。本研究将通过分析原发性肝癌患者血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、生长激素(HGH)、泌乳素(PRL)、C肽的相关状况，在机体综合调控水平上探讨HBVX基因与HCC的关系。
对象与方法
一、对象 48例原发性肝癌患者为我院1996年～1997年肿瘤科住院患者，经影像学确诊并排除转移性肝癌。男32例，女16例，平均年龄56.41±9.67岁。空腹抽血加抑肽酶立即分离血清-20℃冰冻保存待检。
, 百拇医药
二、方法
1.HBVX基因 PCR-RFLP法检测，由上海中亚生物基因研究所提供。
2.T、E2、HGH、PRL、C肽 RIA法检测，由九鼎生物技术公司、北京北方生物技术研究所提供。严格按说明书操作。
3.统计分析 所有数据在Minitab软件中处理，相关性以相关系数表示并检验，显著性用t检验。
结果
一、原发性肝癌患者血清T、E2、HGH、PRL、C肽水平的检测结果见表1。表1显示，HBVX基因阳性患者血清T水平显著低于HBVX基因阴性组；HBVX基因阳性血清组HGH水平极高于阴性组。E2、PRL、C肽水平则无显著差异。
, 百拇医药
表1 原发性肝癌患者血清T、E2、HGH、PRL和C肽水平(
±s)
例数
T(ng/dl)
E2(pg/ml)
HGH(ng/ml)
PRL(ng/ml)
C肽(ng/ml)
HBVX阳性组
16
, 百拇医药
280.00±253.00
23.30±10.50
8.03±3.99
15.00±14.60
2.16±1.08
HBVX阴性组
32
536.00±302.00
33.10±12.90
2.83±2.61
17.10±14.20
, 百拇医药 1.48±1.13
t 值
2.24
2.05
3.38
0.33
1.44
P 值
0.039
0.057
0.0082
0.74
0.17
, 百拇医药
二、原发性肝癌患者HBVX基因阳性血清T、E2、HGH、PRL、C肽水平的相关分析结果见表2。
表2 HBVX基因阳性原发性肝癌患者内分泌激素 相关分析(相关系数)
T
E2
PRL
HGH
E2
0.268
PRL
-0.084
-0.066
, 百拇医药
HGH
-0.316
0.471
-0.191
C肽
0.380
0.861
-0.295
0.393
表2显示，HBVX基因阳性原发性肝癌患者E2水平与C肽水平有高相关，E2与HGH相关，T与C肽水平亦相关；其它相关性不显著。讨论
大量的研究表明，HBVX基因在HBV相关的HCC的形成与发展中有重要作用，在肝癌细胞中可检出整合状态的X基因，X基因表达的X蛋白是HCC的肿瘤细胞中常见的阳性标志物。在HBVX基因致HCC机制上，认为主要是X蛋白反式激活细胞的原癌基因，如X-myc、N-myc等基因，和HBVDNA片段(已证实主要是X基因)与肝细胞的整合，导致肿瘤抑癌基因(如p53基因)的缺失与实变[2,3]。显然，在HBVX基因致HCC的确切机制仍未明朗时，我们不应忽略机体的内分泌-激素网络系统在其中的作用。
, 百拇医药
早在70年代，Baum[4]认为肝脏肿瘤的发生与性激素水平的改变有关，注意到激素对肿瘤细胞的生物学行为起重要的调控作用。肝脏是多种激素的靶器官，也是激素进行生物学转化和储存的主要部位，体内激素水平的失衡常可引起细胞生物学效应的改变，进而引发肿瘤。肿瘤组织也可分泌异位激素促进自身生长，显然，细胞癌变是多因素与机体系统相作用的结果，而内分泌-激素网络系统应有重要价值。
对结果分析发现，肝癌患者HBVX基因阳性血清HGH显著高于阴性组，T显著低于阴性组，而两组E2、PRL、C肽水平差异不显著，提示HBVX基因在HCC发生中，HGH、T、E2有重要作用。作者认为，HBV相关性HCC形成中，整合了HBVX基因的肝细胞DNA，可能由于HGH、E2、T作用于肝细胞的RNA，使具有反式激活作用的X蛋白大量表达，一方面发挥X蛋白对原癌基因的激活作用，另一方面则使抑癌基因失活形成HCC。可能在某些正反馈机制的影响下，HGH水平升高并加速体内T向E2的转化而使T水平降低，发挥内分泌-激素的作用。研究表明[5]，长期服用避孕药物或绝经期妇女长期使用雌激素，肝脏良性肿瘤发病率增加，雌激素可增加肝细胞内RNA的含量及其合成，还有实验提示雌激素及其受体在肝再生过程中起作用。
, 百拇医药
本文发现HBVX基因阳性患者C肽水平与E2呈高度正相关、与T呈正相关，HGH与E2正相关，表明HBV相关性HCC发生中胰岛素、HGH和E2可能发挥协同作用。胰岛素与E2有类似作用，通过促进肝细胞DNA、RNA的增加，可能HGH起配合或促进作用，进而促进肝结构蛋白和许多血浆蛋白在肝内的合成。HBV肝炎患者，由于HBVX基因的整合，X蛋白的反式激活，可能在某些机制的促进下，胰岛素、HGH与E2促进X基因、X蛋白发挥生物学作用。已有报道应用抗激素治疗作为肝癌治疗的辅助手段，可以显著延长患者的存活率。
**连云港市卫生局科研资助课题
参考文献
[1] 曾明，等.国外医学流行病学传染病学分册 1993；12(1)：7.
[2] 冯志华，等.国外医学流行病学传染病学分册 1995；22(3)：105.
[3] 林勇，等.国外医学流行病学传染病学分册 1990；17(1)：16.
[4] Baum JK, et al. Lancet 1973；2：926.
[5] 曾明德等主编.肝脏与内分泌.北京：人民卫生出版社，1995：107.
(1998年7月29日收稿 同年9月26日修回), 百拇医药
单位：连云港市第一人民医院 邮政编码：222002
关键词：原发性肝癌 内分泌激素 乙型肝炎病毒X基因 相关分析
江苏医药990604 摘要 为了解原发性肝癌(HCC)患者的内分泌激素水平与HBVX基因间的相互关系，探讨HBV相关性HCC发生中内分泌激素的作用，用聚合酶链反应技术―限制片段长度多肽性分析法(PCR-RFLP)检测48例原发性肝癌患者血清HBVX基因，并与用放射免疫法(RIA)检测的血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、生长激素(HGH)、泌乳素(PRL)、C肽水平进行相关分析。结果表明，HBVX基因阳性原发性肝癌患者血清HGH水平显著高于阴性组(t＝3.38，P<0.01)；T水平显著低于阴性组(t＝2.24，P<0.05)。HBVX基因阳性肝癌患者C肽水平与E2高度正相关(r＝0.861，P<0.01)，与T正相关(r＝0.380，P<0.05)；血清HGH水平与E2正相关(r=0.471，P<0.05)。结果提示：HGH、T、E2水平的改变与HBV相关性HCC发生有关；其中E2、胰岛素和HGH可能有协同作用。
, 百拇医药
乙型肝炎病毒的X基因与HCC高度相关性已引起人们的重视，这主要与HBVX基因能编码具有反式激活作用的X蛋白有关。已有研究表明，X蛋白在HBV复制、肝炎病理损害及肝癌的形成中都有重要作用[1]。目前关于HBVX基因的研究已成热点，但在评价HBVX基因作用上，应综合考虑机体激素-内分泌-免疫网络的整体效应，不仅把肝脏作为激素代谢的场所，而且应考虑激素对肝脏和肝脏对内分泌系统的相互作用，即肝脏应被认为是内分泌系统的一部分。本研究将通过分析原发性肝癌患者血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、生长激素(HGH)、泌乳素(PRL)、C肽的相关状况，在机体综合调控水平上探讨HBVX基因与HCC的关系。
对象与方法
一、对象 48例原发性肝癌患者为我院1996年～1997年肿瘤科住院患者，经影像学确诊并排除转移性肝癌。男32例，女16例，平均年龄56.41±9.67岁。空腹抽血加抑肽酶立即分离血清-20℃冰冻保存待检。
, 百拇医药
二、方法
1.HBVX基因 PCR-RFLP法检测，由上海中亚生物基因研究所提供。
2.T、E2、HGH、PRL、C肽 RIA法检测，由九鼎生物技术公司、北京北方生物技术研究所提供。严格按说明书操作。
3.统计分析 所有数据在Minitab软件中处理，相关性以相关系数表示并检验，显著性用t检验。
结果
一、原发性肝癌患者血清T、E2、HGH、PRL、C肽水平的检测结果见表1。表1显示，HBVX基因阳性患者血清T水平显著低于HBVX基因阴性组；HBVX基因阳性血清组HGH水平极高于阴性组。E2、PRL、C肽水平则无显著差异。
, 百拇医药
表1 原发性肝癌患者血清T、E2、HGH、PRL和C肽水平(
±s)例数
T(ng/dl)
E2(pg/ml)
HGH(ng/ml)
PRL(ng/ml)
C肽(ng/ml)
HBVX阳性组
16
, 百拇医药
280.00±253.00
23.30±10.50
8.03±3.99
15.00±14.60
2.16±1.08
HBVX阴性组
32
536.00±302.00
33.10±12.90
2.83±2.61
17.10±14.20
, 百拇医药 1.48±1.13
t 值
2.24
2.05
3.38
0.33
1.44
P 值
0.039
0.057
0.0082
0.74
0.17
, 百拇医药
二、原发性肝癌患者HBVX基因阳性血清T、E2、HGH、PRL、C肽水平的相关分析结果见表2。
表2 HBVX基因阳性原发性肝癌患者内分泌激素 相关分析(相关系数)
T
E2
PRL
HGH
E2
0.268
PRL
-0.084
-0.066
, 百拇医药
HGH
-0.316
0.471
-0.191
C肽
0.380
0.861
-0.295
0.393
表2显示，HBVX基因阳性原发性肝癌患者E2水平与C肽水平有高相关，E2与HGH相关，T与C肽水平亦相关；其它相关性不显著。讨论
大量的研究表明，HBVX基因在HBV相关的HCC的形成与发展中有重要作用，在肝癌细胞中可检出整合状态的X基因，X基因表达的X蛋白是HCC的肿瘤细胞中常见的阳性标志物。在HBVX基因致HCC机制上，认为主要是X蛋白反式激活细胞的原癌基因，如X-myc、N-myc等基因，和HBVDNA片段(已证实主要是X基因)与肝细胞的整合，导致肿瘤抑癌基因(如p53基因)的缺失与实变[2,3]。显然，在HBVX基因致HCC的确切机制仍未明朗时，我们不应忽略机体的内分泌-激素网络系统在其中的作用。
, 百拇医药
早在70年代，Baum[4]认为肝脏肿瘤的发生与性激素水平的改变有关，注意到激素对肿瘤细胞的生物学行为起重要的调控作用。肝脏是多种激素的靶器官，也是激素进行生物学转化和储存的主要部位，体内激素水平的失衡常可引起细胞生物学效应的改变，进而引发肿瘤。肿瘤组织也可分泌异位激素促进自身生长，显然，细胞癌变是多因素与机体系统相作用的结果，而内分泌-激素网络系统应有重要价值。
对结果分析发现，肝癌患者HBVX基因阳性血清HGH显著高于阴性组，T显著低于阴性组，而两组E2、PRL、C肽水平差异不显著，提示HBVX基因在HCC发生中，HGH、T、E2有重要作用。作者认为，HBV相关性HCC形成中，整合了HBVX基因的肝细胞DNA，可能由于HGH、E2、T作用于肝细胞的RNA，使具有反式激活作用的X蛋白大量表达，一方面发挥X蛋白对原癌基因的激活作用，另一方面则使抑癌基因失活形成HCC。可能在某些正反馈机制的影响下，HGH水平升高并加速体内T向E2的转化而使T水平降低，发挥内分泌-激素的作用。研究表明[5]，长期服用避孕药物或绝经期妇女长期使用雌激素，肝脏良性肿瘤发病率增加，雌激素可增加肝细胞内RNA的含量及其合成，还有实验提示雌激素及其受体在肝再生过程中起作用。
, 百拇医药
本文发现HBVX基因阳性患者C肽水平与E2呈高度正相关、与T呈正相关，HGH与E2正相关，表明HBV相关性HCC发生中胰岛素、HGH和E2可能发挥协同作用。胰岛素与E2有类似作用，通过促进肝细胞DNA、RNA的增加，可能HGH起配合或促进作用，进而促进肝结构蛋白和许多血浆蛋白在肝内的合成。HBV肝炎患者，由于HBVX基因的整合，X蛋白的反式激活，可能在某些机制的促进下，胰岛素、HGH与E2促进X基因、X蛋白发挥生物学作用。已有报道应用抗激素治疗作为肝癌治疗的辅助手段，可以显著延长患者的存活率。
**连云港市卫生局科研资助课题
参考文献
[1] 曾明，等.国外医学流行病学传染病学分册 1993；12(1)：7.
[2] 冯志华，等.国外医学流行病学传染病学分册 1995；22(3)：105.
[3] 林勇，等.国外医学流行病学传染病学分册 1990；17(1)：16.
[4] Baum JK, et al. Lancet 1973；2：926.
[5] 曾明德等主编.肝脏与内分泌.北京：人民卫生出版社，1995：107.
(1998年7月29日收稿 同年9月26日修回), 百拇医药