慢性肾功能不全患者血清可溶性Fas及相关因子的变化
作者：戴勇 王沙燕 黄瑞芳 齐晖 彭保 李德萍
单位：518020 广东省深圳市人民医院
关键词：肾功能衰竭,慢性；细胞凋亡；白细胞介素-6；肿瘤坏；死因子-α
临床内科杂志990623 【摘要】 目的 研究慢性肾功能不全患者血清可溶性Fas/APO-1(sFas)及相关因子的变化。方法 采用ELISA法检测20名正常人和6 0例慢性肾功能不全患者血清sFas及IL-6、TNF-α水平。结果 肾功 能代偿期sFas、IL-6和TNF-α无明显改变;肾功能失代偿期sFas开始增高,其升高与血清BU N和Cr明显相关。IL-6及TNF-α在肾功能失代偿期无明显变化,进入肾功能衰竭期后显著升 高。其中IL-6与BUN明显相关,TNF-α与BUN及Cr均明显相关。患者sFas与IL-6和TNF-α 无明显相关性。透析后与透析前比较无 明显差别。结论 慢性肾功能不全患者晚期存在细胞凋亡调节因子紊乱。
, 百拇医药
Fas/APO-1蛋白为近年来发现的一种重要的凋亡调节因子 ,它与Fas配体(FasL)结合,可以介导细胞凋亡。可溶性Fas(Soluble Fas,sFas)是Fas基因的 变异产物,由于Fas mRNA的异常,编码出一种缺乏跨膜区功能的可溶性Fas蛋白,其作用是对抗 在Fas/FasL中相互作用的膜Fas分子,因而血清sFas被认为是凋亡的抑制因子。肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)被认为是与Fas受体有关的细胞凋亡诱导因子。本研 究采用ELISA法检测慢性肾功能不全患者血清sFas以及TNF-α和IL-6水平,以探讨这些细胞 凋亡调节因子在慢性肾功能不全患者中的变化。
对象与方法
一、研究对象:慢性肾功能不全患者60例,均为我院门诊及住院病人,其中男性27例,女性33例 ,年龄24岁～68岁(平均年龄42.1岁)。肾功能不全代偿期患者12例,失代偿期15例,肾功能衰 竭期 13;尿毒症期血液透析患者20例,均采用聚砜膜透析器。原发病分别为慢性肾小球肾炎47例, 肾病综合征5例,慢性肾盂肾炎4例,肾结核2例,糖尿病肾病2例。正常对照组20名,为本院职工及献 血员,其中男性18名,女性2名,平均年龄45.6岁。
, 百拇医药
二、研究方法:抽取病人和对照组外周静脉血3 ml,血液透析病人在血透前及血 透结束时各抽血1次,以2% EDTA抗凝,1500 rpm离心,留取血浆并储存于-20℃待测。采用ELIS A法检测sFas、IL-6及TNF-α,试剂盒由美国Genzyme公司生产,酶标仪上450 nm处读取吸光 度值,根据标准曲线分别计算sFas、IL-6及TNF-α浓度值,以pg/ml表示。病人组同时常规 生化测定BUN和Cr值。
三、统计学处理:实验数据以
±s表示,组间比较用t检验。部分指标进行直 线回归分析。
结果
一、慢性肾功能不全患者sFas、IL-6及TNF-α的变化:肾功能代偿期sFas水平与正常对照 组相比无显著性差异(P>0.05),肾功能不全失代偿期sFas明显增加(P<0.05), 肾 功能衰竭期进一步升高,肾功能衰竭期和尿毒症血透患者sFas值与正常组比较,有极显著性差 异(P<0.001)。尿毒症时,IL-6及TNF-α也明显增高,与正常组比较均有显著性差异(P<0.05),但患者sFas与IL-6和TNF-α水平没有明显相关, r 分别为0.08和0.04,P均>0.05(见附表)。慢性肾功能不全患者sFas水平与血清BUN 和Cr明显相关(r=0.488和0.294,P<0.05),IL-6与BUN明显相关(r=0.488, P<0.05),而与Cr无明显相关(r=0.037,P>0.05),TNF-α与血清BUN和Cr均 明显相关(r=0.428和0.359,P<0.05)。
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附表 正常组和慢性肾功能不全各期患者血清sFas及IL-6、TNF -α的变化(Pg/ml±s) 组别
例数
sFas
IL-6
TNF-α
正常组
20
35.15±20.19
64.10±34.43
114.60±63.80
, 百拇医药
肾功能不全代偿期
13
35.08±11.96
71.33±45.76
98.83±66.70
肾功能不全失代偿期
12
53.87±22.89*
96.73±90.33
110.27±88.17
肾功能衰竭期
, 百拇医药 15
106.86±56.06**
106.79±34.14*
160.57±57.66*
尿毒症透析病人
20
109.35±46.32**
91.25±41.21*
155.50±62.65*
注:与对照组比较*P<0.05,**P<0.001。
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二、血液透析对sFas、IL-6及TNF-α的影响,20例尿毒症透析患者透析后sFas及IL-6、TN F-α分别为116.85±41.29、114.10±64.44、178.50±81.76 Pg/me,与透析前比较 无 明显变化,P均>0.05);仍高于正常对照组,P分别<0.001、<0.05和<0.05。
讨论
Fas/FasL系统在肾脏广泛存在,参与肾小球疾病的发生和发展,尤其对免疫系统的调节起重要 作用。一方面由于Fas基因调控异常和(或)伴有凋亡小体的吞噬减少,暴露了更多隐蔽自身抗 原,使循环中抗体增多,诱发对核小体特异的辅助T淋巴自身免疫耐受失常,激活B细胞产生许 多自身抗体,形成免疫复合物,沉积在肾小球基底膜上,活化补体致肾小球肾炎。另一方面由 于Fas/FasL功能增强,造成大量肾实质细胞凋亡、肾脏功能丧失,进展成为终末期肾功能衰竭 [ 1]。血清sFas蛋白是突变了剪切部位的Fas mRNA的翻译产物,由于Fas mRNA的异常,编码 出一种缺乏跨膜功能的sFas蛋白。由于sFas抑制Fas介导的活化淋巴细胞的清除功能,因而是 细胞凋亡抑制因子[2]。我们研究发现慢性肾功能不全患者氮质血症开始sFas增高, 随着肾功能不全加重,sFas进一步增加,并与BUN和Cr呈正相关,这是否与肾功能衰竭终末期肾 功能丧失,免疫系统失调,sFas增加作为保护性反应,抑制细胞凋亡造成的肾脏结构进一步损 害有关还有待进一步证实。另外肾功能不全细胞调亡增多[2],凋亡细胞分解、释放 sFas增加。
, 百拇医药
由于TNF-α和IL-6刺激Fas基因转录,因此为细胞调亡诱导因子[3],而Fas本身也 介导TNF-α活性[4]。有报道肾功能衰竭时TNF-α和IL-6增加[5]。本 组结果显示肾功能不全尿毒症期TNF-α和IL-6也增加,但与sFas无明显相关。我们认为肾 功能不全晚期机体免疫系统全面受损,多种因素共同参与了对细胞凋亡的影响。
血液透析是通过体外循环来清除血液中代谢产物及有毒物质,缓解某些临床症状。但不能从 根本上改善肾功能及机体的免疫状态,可能是透析后血清sFas/APO-1、IL-6和TNF-α无明 显变化的原因。但有报道血透后IL-6和TNF-α增加[5],本组结果显示透析后IL- 6和TNF-α无明显增加,可能与我们采用的组织相容性好、对免疫系统刺激性小的聚砜膜透 析器有关。关于Fas/FasL系统及相关因子与肾脏疾病的发生发展及其治疗关系的具体研究有 待于进一步探讨。
, 百拇医药
参考文献
[1]陈明.Fas/FasL与肾小球疾病.国外医学泌尿系统分册,1998,18∶91.
[2]Cheng J,Zhou T,Liu C,et al.Protection from Fas-mediated apoptosis by a soluble form of the Fas molecule.Science,1994,263∶1759.
[3]Powell CB,Herzog TJ,Scott JH,et al.Evidence for a rotein synthesis- dependent and independent TNF alpha cytolytic mechanism.Gynecol Oncol,1995,58∶327.
[4]Wada N,Matsumura M,Ohba Y,et al.Transcription stimulation of the Fas -encoding gene by nuclear factor for interleukin-6 expression upon influenza virus infection.J Biol Chem,1995,270∶18007.
[5]Pereira BJG,Shairo LS,KIng AJ,et al.Plasma level of proinflammatory cytokines and inhibitory protein in chronic renal failure and dialysis patients. Blood Purif,1992,10∶103.
收稿:1999-01-05 修回:1999-08-09, http://www.100md.com
单位：518020 广东省深圳市人民医院
关键词：肾功能衰竭,慢性；细胞凋亡；白细胞介素-6；肿瘤坏；死因子-α
临床内科杂志990623 【摘要】 目的 研究慢性肾功能不全患者血清可溶性Fas/APO-1(sFas)及相关因子的变化。方法 采用ELISA法检测20名正常人和6 0例慢性肾功能不全患者血清sFas及IL-6、TNF-α水平。结果 肾功 能代偿期sFas、IL-6和TNF-α无明显改变;肾功能失代偿期sFas开始增高,其升高与血清BU N和Cr明显相关。IL-6及TNF-α在肾功能失代偿期无明显变化,进入肾功能衰竭期后显著升 高。其中IL-6与BUN明显相关,TNF-α与BUN及Cr均明显相关。患者sFas与IL-6和TNF-α 无明显相关性。透析后与透析前比较无 明显差别。结论 慢性肾功能不全患者晚期存在细胞凋亡调节因子紊乱。
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Fas/APO-1蛋白为近年来发现的一种重要的凋亡调节因子 ,它与Fas配体(FasL)结合,可以介导细胞凋亡。可溶性Fas(Soluble Fas,sFas)是Fas基因的 变异产物,由于Fas mRNA的异常,编码出一种缺乏跨膜区功能的可溶性Fas蛋白,其作用是对抗 在Fas/FasL中相互作用的膜Fas分子,因而血清sFas被认为是凋亡的抑制因子。肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)被认为是与Fas受体有关的细胞凋亡诱导因子。本研 究采用ELISA法检测慢性肾功能不全患者血清sFas以及TNF-α和IL-6水平,以探讨这些细胞 凋亡调节因子在慢性肾功能不全患者中的变化。
对象与方法
一、研究对象:慢性肾功能不全患者60例,均为我院门诊及住院病人,其中男性27例,女性33例 ,年龄24岁～68岁(平均年龄42.1岁)。肾功能不全代偿期患者12例,失代偿期15例,肾功能衰 竭期 13;尿毒症期血液透析患者20例,均采用聚砜膜透析器。原发病分别为慢性肾小球肾炎47例, 肾病综合征5例,慢性肾盂肾炎4例,肾结核2例,糖尿病肾病2例。正常对照组20名,为本院职工及献 血员,其中男性18名,女性2名,平均年龄45.6岁。
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二、研究方法:抽取病人和对照组外周静脉血3 ml,血液透析病人在血透前及血 透结束时各抽血1次,以2% EDTA抗凝,1500 rpm离心,留取血浆并储存于-20℃待测。采用ELIS A法检测sFas、IL-6及TNF-α,试剂盒由美国Genzyme公司生产,酶标仪上450 nm处读取吸光 度值,根据标准曲线分别计算sFas、IL-6及TNF-α浓度值,以pg/ml表示。病人组同时常规 生化测定BUN和Cr值。
三、统计学处理:实验数据以
±s表示,组间比较用t检验。部分指标进行直 线回归分析。结果
一、慢性肾功能不全患者sFas、IL-6及TNF-α的变化:肾功能代偿期sFas水平与正常对照 组相比无显著性差异(P>0.05),肾功能不全失代偿期sFas明显增加(P<0.05), 肾 功能衰竭期进一步升高,肾功能衰竭期和尿毒症血透患者sFas值与正常组比较,有极显著性差 异(P<0.001)。尿毒症时,IL-6及TNF-α也明显增高,与正常组比较均有显著性差异(P<0.05),但患者sFas与IL-6和TNF-α水平没有明显相关, r 分别为0.08和0.04,P均>0.05(见附表)。慢性肾功能不全患者sFas水平与血清BUN 和Cr明显相关(r=0.488和0.294,P<0.05),IL-6与BUN明显相关(r=0.488, P<0.05),而与Cr无明显相关(r=0.037,P>0.05),TNF-α与血清BUN和Cr均 明显相关(r=0.428和0.359,P<0.05)。
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附表 正常组和慢性肾功能不全各期患者血清sFas及IL-6、TNF -α的变化(Pg/ml
±s) 组别例数
sFas
IL-6
TNF-α
正常组
20
35.15±20.19
64.10±34.43
114.60±63.80
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肾功能不全代偿期
13
35.08±11.96
71.33±45.76
98.83±66.70
肾功能不全失代偿期
12
53.87±22.89*
96.73±90.33
110.27±88.17
肾功能衰竭期
, 百拇医药 15
106.86±56.06**
106.79±34.14*
160.57±57.66*
尿毒症透析病人
20
109.35±46.32**
91.25±41.21*
155.50±62.65*
注:与对照组比较*P<0.05,**P<0.001。
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二、血液透析对sFas、IL-6及TNF-α的影响,20例尿毒症透析患者透析后sFas及IL-6、TN F-α分别为116.85±41.29、114.10±64.44、178.50±81.76 Pg/me,与透析前比较 无 明显变化,P均>0.05);仍高于正常对照组,P分别<0.001、<0.05和<0.05。
讨论
Fas/FasL系统在肾脏广泛存在,参与肾小球疾病的发生和发展,尤其对免疫系统的调节起重要 作用。一方面由于Fas基因调控异常和(或)伴有凋亡小体的吞噬减少,暴露了更多隐蔽自身抗 原,使循环中抗体增多,诱发对核小体特异的辅助T淋巴自身免疫耐受失常,激活B细胞产生许 多自身抗体,形成免疫复合物,沉积在肾小球基底膜上,活化补体致肾小球肾炎。另一方面由 于Fas/FasL功能增强,造成大量肾实质细胞凋亡、肾脏功能丧失,进展成为终末期肾功能衰竭 [ 1]。血清sFas蛋白是突变了剪切部位的Fas mRNA的翻译产物,由于Fas mRNA的异常,编码 出一种缺乏跨膜功能的sFas蛋白。由于sFas抑制Fas介导的活化淋巴细胞的清除功能,因而是 细胞凋亡抑制因子[2]。我们研究发现慢性肾功能不全患者氮质血症开始sFas增高, 随着肾功能不全加重,sFas进一步增加,并与BUN和Cr呈正相关,这是否与肾功能衰竭终末期肾 功能丧失,免疫系统失调,sFas增加作为保护性反应,抑制细胞凋亡造成的肾脏结构进一步损 害有关还有待进一步证实。另外肾功能不全细胞调亡增多[2],凋亡细胞分解、释放 sFas增加。
, 百拇医药
由于TNF-α和IL-6刺激Fas基因转录,因此为细胞调亡诱导因子[3],而Fas本身也 介导TNF-α活性[4]。有报道肾功能衰竭时TNF-α和IL-6增加[5]。本 组结果显示肾功能不全尿毒症期TNF-α和IL-6也增加,但与sFas无明显相关。我们认为肾 功能不全晚期机体免疫系统全面受损,多种因素共同参与了对细胞凋亡的影响。
血液透析是通过体外循环来清除血液中代谢产物及有毒物质,缓解某些临床症状。但不能从 根本上改善肾功能及机体的免疫状态,可能是透析后血清sFas/APO-1、IL-6和TNF-α无明 显变化的原因。但有报道血透后IL-6和TNF-α增加[5],本组结果显示透析后IL- 6和TNF-α无明显增加,可能与我们采用的组织相容性好、对免疫系统刺激性小的聚砜膜透 析器有关。关于Fas/FasL系统及相关因子与肾脏疾病的发生发展及其治疗关系的具体研究有 待于进一步探讨。
, 百拇医药
参考文献
[1]陈明.Fas/FasL与肾小球疾病.国外医学泌尿系统分册,1998,18∶91.
[2]Cheng J,Zhou T,Liu C,et al.Protection from Fas-mediated apoptosis by a soluble form of the Fas molecule.Science,1994,263∶1759.
[3]Powell CB,Herzog TJ,Scott JH,et al.Evidence for a rotein synthesis- dependent and independent TNF alpha cytolytic mechanism.Gynecol Oncol,1995,58∶327.
[4]Wada N,Matsumura M,Ohba Y,et al.Transcription stimulation of the Fas -encoding gene by nuclear factor for interleukin-6 expression upon influenza virus infection.J Biol Chem,1995,270∶18007.
[5]Pereira BJG,Shairo LS,KIng AJ,et al.Plasma level of proinflammatory cytokines and inhibitory protein in chronic renal failure and dialysis patients. Blood Purif,1992,10∶103.
收稿:1999-01-05 修回:1999-08-09, http://www.100md.com