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编号:10236773
心肌抗体结合链球菌膜抗原吸附试验对心血管疾病的诊断意义
http://www.100md.com 《广东医学》 1999年第7期
     作者:周汉建 陈国庆 余步云

    单位:中山医科大学附属第三医院心内科(510630)

    关键词:心肌抗体;心脏疾病;链球菌抗原

    广东医学990707 【摘要】 目的 探讨心肌抗体(HRA)结合链球菌膜抗原吸附试验对心血管疾病的诊断意义。方法 应用酶免疫斑点法检测117例各种心脏疾病患者和32例正常人血清的HRA,并将测得的阳性血清用A组链球菌膜抗原进行吸附试验。结果 风心病、原发性心肌病、病毒性心肌炎、缺血性心脏病和其他心脏病患者HRA阳性率的分别为65.7%、57.9%、50%、26.7%和25%,吸附试验阳性率则分别为73.9%、18.2%、11.1%、0%和0%。吸附后风心病的阳性率明显高于原发性心肌病或病毒性心肌炎(P<0.01)。结论 应用酶免疫斑点法检测HRA结合链球菌膜抗原吸附试验,既可提高风心病诊断的特异性,也有利于各种心脏病的鉴别。
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    Heart reactive antibodies combined with absorption assay in the diagnosis of heart diseases

    Zhou Hanjian, Chen Guoqing, Yu Buyun.

    Department of Cardiology, Third Affiliated Hospital, Sun Yat-sen University of Medical Sciences, Guangzhou 510630

    【Abstract】 Objective To evaluate the significance of heart reactive antibodies (HRA) combined with absorption assay in the diagnosis of heart diseases. Methods 117 patients with a variety of heart diseases and 32 health individuals were tested by the IELISA-HRA assay. HRA absorption assay was also carried out by applying with streptococcal A cell membrane antigen on 55 patients with positive HRA sera. Results The positive rate of HRA was 65.7% in rheumatic heart disease, 57.9% in primary myocardiopathy, 50% in viral myocarditis, 26.7% in ischemic heart disease, 25% in other heart diseases. With HRA absorption assay, it was 73.9%, 18.2%, 11.1%, 0%, 0%, respectively. The positive rate of HRA absorption assay was significantly higher in rheumatic heart disease than that in primary myocardiopathy or viral myocarditis (P<0.01). Conclusion The IELISA-HRA assay combined with absorption assay will be significant for the differenciation of heart diseases and gives a specific means for the diagnosis of rheumatic heart disease.
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    【Key words】 Heart reactive antibodies Heart diseases Streptococcal antigen

    心肌抗体(heart reactive antibody,HRA)是机体免疫功能紊乱产生的自身抗体,与心肌损伤有关,主要见于风心病、心肌病、病毒性心肌炎、心肌梗死后综合征、缺血性心脏病、心脏手术后综合征等。由于检查对象、方法不同,其阳性率和特异性有所差异。我们于1995~1996年应用酶免疫斑点法检测117例各种心脏病患者血清的HRA,并将测得的阳性血清用A组链球菌膜抗原进行吸附试验,以进一步探讨其对心血管疾病的诊断意义。

    1 材料与方法

    1.1 病例选择 (1)心脏病组:①风心病35例,男21例,女14例,平均年龄38.4±7.8岁,均符合1992年修订的Jone's标准。②原发性心肌病19例,男11例,女8例,平均年龄45.2±8.6岁,均符合1980年WHO/ISFC制定的诊断标准。③ 病毒性心肌炎18例,男10例,女8例,平均年龄26.7±6.7岁,均符合1987年全国心肌炎会议制定的标准。④ 缺血性心脏病30例,男18例,女12例,平均年龄62.4±12.1岁,包括急性心肌梗死7例,心绞痛23例。⑤ 其他心脏病16例,男9例,女7例,平均年龄54.4±13.1岁,包括肺源性心脏病13例,累及心脏的胶原性疾病3例。(2)正常对照组:32例,均为健康体检者,其中男20例,女12例,平均年龄34.4±9.6岁。
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    1.2 HRA检测和HRA吸附试验

    1.2.1 材料制备 ①用SD大白鼠心室肌提取心肌抗原。②A组溶血性链球菌膜抗原应用超声震荡法提取。③抗人HRP-IgG。④孔径0.45 μm的硝酸纤维膜(NC膜)等。

    1.2.2 HRA的检测方法——酶免疫斑点法 步骤简单概括如下:将心肌抗原滴在NC膜上,干燥封闭后,加入稀释血清,孵育及冲洗后再加入抗人HRP-IgG酶标抗体,再孵育及冲洗后加入底物(DAB-H2O2)显色,呈黄色斑者为阳性。

    1.2.3 HRA吸附试验 吸取HRA阳性血清0.1 mL,加等量A组链球菌膜抗原,以同一血清加0.1 mL PBS作为对照,孵育后移于4℃冰箱内过夜,取出各管于4℃下3 000 r/min离心30 min,吸取上清液制备稀释血清,其余步骤同HRA的检测,不显色者为吸附试验阳性。
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    1.3 统计学处理方法 根据不同材料,采用χ2检验、Yate′s连续性校正或Fisher精确检验法。

    2 结果

    2.1 酶免疫斑点法检测心肌抗体结果 见表1。

    表1 各种心脏疾病心肌抗体检测结果 病种分组

    例数

    阳性[例(%)]

    阴性(例)

    P1*

    P2**

, http://www.100md.com     风湿性心脏病

    35

    23( 65.7 )

    12

    <0.01

    原发性心肌病

    19

    11(57.9)

    8

    <0.01

    NS***

    病毒性心脏病

    18
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    9(50.0)

    9

    <0.01

    NS

    缺血性心脏病

    30

    8(26.7)

    22

    <0.01

    <0.01

    其他心脏病

    16

    4(25.0)
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    12

    <0.05

    <0.01

    正常对照组

    32

    0(0)

    32

    注:*表示各心脏病组与正常对照组HRA阳性率比较;**表示风心病组与 其余心脏病组HRA阳性率比较,表2同;***表示差异无显著意义

    2.2 链球菌膜抗原吸附试验结果 见表2 。

    表2 链球菌膜抗原吸附试验结果 疾病种类

    例数
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    HRA阳性

    例数

    HRA吸附试验

    P值

    阳性[例(%)]

    阴性(例)

    风湿性心脏病

    35

    23

    17(73.9)

    6

    原发性心肌病

    19
, 百拇医药
    11

    2(18.2)

    9

    <0.01

    病毒性心脏病

    18

    9

    1(11.1)

    8

    <0.01

    缺血性心脏病

    30

    8
, 百拇医药
    0(0)

    8

    <0.01

    其他心脏病

    15

    4

    0 (0)

    4

    <0.05

    3 讨论

    心肌抗体(HRA)是心肌受累的标志,其产生机理及临床意义尚未十分清楚,目前认为可能是机体免疫调节失衡的情况下,各种致病因素损伤心肌导致HRA的产生,进而加剧心肌损害。本研究应用酶免疫斑点法对117例各种心脏病患者进行HRA 检测,结果发现风心病、原发性心肌病、病毒性心肌炎、缺血性心脏病、其他心脏病患者的HRA阳性率的分别为65.7%、57.9%、50%、26.7%、25%,与正常对照组比较差异均有显著意义。在HRA阳性的心脏疾病中,以风心病、原发性心肌病和病毒性心肌炎的阳性率较高,这和以往的报道相似[1]。同时风心病的HRA阳性率分别与心肌病或心肌炎比较差异均无显著性(P>0.05)。这提示:HRA阳性仅能代表有心肌受累,临床上单纯HRA阳性的患者可能为风心病或其他心脏疾病,应注意病因鉴别,在病因未明时,须严密追踪,观察心脏受累情况。
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    风心病患者HRA阳性率较高,为65.7%,说明HRA检测对诊断风心病具有一定意义[2]。但是,由于其他心脏疾病(如原发性心肌病、病毒性心肌炎等)患者血清中也可检测到HRA[3,4],因此,HRA对诊断风心病的特异性意义尚有争议。根据链球菌膜抗原与心肌组织具有交叉抗原性原理[5],A组链球菌诱生的HRA具有与心肌抗原及A组链球菌膜抗原结合的双重特性,在实验中已与链球菌膜抗原结合的HRA不能再与心肌抗原发生反应,故可通过HRA阳性血清经A组链球菌膜抗原处理前后的变化来判断被检者HRA是否系A组链球菌感染诱发。本研究结果显示,吸附前风心病与原发性心肌病或病毒性心肌炎患者的HRA阳性率比较均无明显差异,吸附后风心病的阳性率为73.9%,明显高于原发性心肌病(18.2%)或病毒性心肌炎(11.1%),经比较差异均有显著性(P<0.01)。故应用酶免疫斑点法检测HRA结合链球菌膜抗原吸附试验,既可提高风心病诊断的特异性,也有利于各种心血管疾病的鉴别。

    参考文献
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    1 章 敏,时德志,梁生本,等.各种心肌疾患中抗心肌抗体反应的意义.哈尔滨医科大学学报,1996,30(3):209

    2 Shastry P. Persistence of heart reactive antibodies in acute rheumatic fever and rheumatic heart diseases patients. J Clin Lab Immuol, 1988, 27: 87

    3 景宏美,张克智.血清中抗心肌抗体检测在病毒性心肌炎及扩张型心肌病中的临床意义.南通医学院学报,1997,17(4):521

    4 张福明,王相峰,张淑琴.120例心肌炎病人的病毒抗体、心肌抗体及酶学检测.白求恩医科大学学报,1996,22(6):628

    5 John B. An immuological relationship between the group A streptococcus and mammalia muscle. J Exp Med, 1985,124: 661, 百拇医药