中药内外合治对哮喘豚鼠下丘脑中5-羟色胺含量的影响
作者：万力生 陈陶后
单位：
关键词：支气管哮喘；中药疗法；5-HT；疾病模型；动物
新中医990820 提 要 以豚鼠为实验动物进行哮喘模型研究，结果表明：哮喘豚鼠下丘脑中5-羟色胺(5-HT)明显升高，5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)无显著变化，中药内外合治能抑制5-HT释放，从而推测该法可预防支气管哮喘发作。
本研究从中医药理论整体观出发，探讨哮喘的发作病因，测定了哮喘豚鼠下丘脑中5-HT含量，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料 幼龄健康雄性豚鼠27只，体重300±50 g，由同济医科大学实验动物学部提供(合格证书：医动第19～023号)。扶正化痰合剂(由黄芪、黄精、益智仁、仙茅、麻黄、半夏、茯苓等组成)、喘敷灵(由白芥子、细辛、延胡索等组成)均由湖北中医学院附属医院药剂科制备。5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸标准品由Sigma公司提供。
, http://www.100md.com
1.2 方法 将27只豚鼠随机分为3组，正常组(9只)，造模组(9只)，中药组(9只)。造模组和中药组豚鼠按国际上常用方法，以卵蛋白致敏和攻击加以复制哮喘模型〔1〕。在致敏后当天，中药组用扶正化痰合剂(4 g/kg)灌胃，同时外敷喘敷灵，用姜汁调喘敷灵药末，敷于豚鼠双侧定喘、肺俞及脾俞穴，并以胶膏及宽扁橡皮筋固定，每次3小时，隔7天1次，共4次。贴敷前先用眼科剪及剃须刀以穴位为中心去毛备皮。穴位定位根据文献〔2〕确定。在致敏后第15、18、21、28天各引喘1次。于最后1次引喘2小时后，各组豚鼠迅速断头取脑，冰皿上精确称取下丘脑第三脑室周围组织，-28℃冰冻保存，采用化学荧光检测法〔3〕，由同济医科大学神经生物学教研室检测。
2 结果
中药内外合治对过敏性哮喘豚鼠下丘脑中5-HT、5-HIAA的影响，见附表。造模后豚鼠脑组织中5-HT含量明显升高(P<0.05)，中药治疗后恢复至正常水平。5-HIAA的含量各组间差异无显著性意义。
, 百拇医药
附表 各组豚鼠脑组织中5-HT、5-HIAA含量的比较(ng/100mg湿重脑组织) 组别
n
5-HT
5-HIAA
正常组
9
3.51±0.66
4.00±0.36
造模组
9
4.73±0.98※
4.37±1.19
, 百拇医药
中药组
9
3.74±0.44
4.06±0.49
注：与正常组比较，※P<0.05
3 讨论
5-羟色胺在体内广泛分布并具有多种生物活性。它不仅是重要的神经递质，也是重要的免疫调节因子。汪氏等发现哮喘发作期患者血浆5-HT明显升高，认为如能控制血浆中游离5-HT的升高，这对哮喘的预防、治疗和改善预后，可能有重要意义〔4〕。Michoud等在大鼠的静脉内注射或气管内气雾5-HT，发现引起支气管痉挛、招致哮喘发作〔5〕。李氏等认为5-HT还具有活化鸟苷酸环化酶的作用，使三磷酸鸟苷生成环磷酸鸟苷，促进支气管平滑肌收缩，所以，5-HT还参与速发型过敏反应〔6〕。Ptak等发现局部注射50～100 ng 5-HT能最适地启动迟发型过敏反应(DTH)。即使更低剂量的5-HT也能启动DTH反应。进一步证明5-HT有调节DTH的作用〔7〕。有研究表明5-HT主要通过作用于支气管壁上5-HT2受体，引起支气管平滑肌痉挛，粘膜水肿，腺体分泌亢进。刘氏等发现哮喘的炎性介质5-HT可促进兔气道平滑肌细胞(ASMC)增生〔8〕。所有这些都说明了5-HT是引起哮喘发作的重要原因。
, 百拇医药
正常人体内部“神经—内分泌—免疫”三大系统间的相互作用，相互制约，构成一个复杂的“网络”，任何环节的紊乱或失调都会直接或间接地影响其它系统的功能。实验结果表明，哮喘豚鼠中枢中5-HT异常增高，必然是影响了内分泌、免疫系统的功能，从而导致哮喘发作。本实验从中医药理论整体观出发，采用中药内外合治的方法。内服中药黄芪、黄精、益智仁健脾补肾，增强机体免疫功能，外敷药白芥子、细辛、延胡索等辛散温通，化饮祛瘀，标本兼治，共同达到平喘的目的。因此，从本实验结果看，对哮喘病因的研究既要有“整体”的综合，亦应有细胞、分子水平的深入研究。因此，从中医药领域挖掘防治哮喘的方药大有前途。
参考文献
1 吕宝璋，王小兵，单京瑞.豚鼠肺组织中β和M受体的检定及其在实验性过敏性哮喘的变化.中华医学杂志，1985，65(7)∶385
2 李辞蓉，华兴邦，周浩良，等.豚鼠针灸穴位图谱的研究.上海针灸杂志，1992(2)∶28
, http://www.100md.com
3 徐淑云.药理实验方法学.第2版.北京∶人民卫生出版社，1991.440
4 汪昌树，刘冰怀，顾统云，等.支气管哮喘患者血浆5-HT含量变化及意义.安徽医学，1994，15(5)∶11～13
5 Michoud.MC，et al.Effect of indomethacin and atropine in experimental asthma in conscious guinea pigs.J Appl Physiol，1976，40∶889
6 李淑芳，赫国志.慢性肺心病血5-羟色胺的测定.中华结核和呼吸系疾病杂志，1986(5)∶276
7 Ptak W，Geba GP，Askenase PW.Initiation of delayed-type hypersensitivity by low doses of monochonal IgE antibody.J Immunol，1991，146∶3929～3936
8 刘振千，梁凤珍，马军红，等.5-羟色胺对气道平滑肌细胞增生的影响及c-fos的表达.中华结核和呼吸系疾病杂志，1998(1)∶56
(收稿日期：1998-12-07), http://www.100md.com
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关键词：支气管哮喘；中药疗法；5-HT；疾病模型；动物
新中医990820 提 要 以豚鼠为实验动物进行哮喘模型研究，结果表明：哮喘豚鼠下丘脑中5-羟色胺(5-HT)明显升高，5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)无显著变化，中药内外合治能抑制5-HT释放，从而推测该法可预防支气管哮喘发作。
本研究从中医药理论整体观出发，探讨哮喘的发作病因，测定了哮喘豚鼠下丘脑中5-HT含量，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料 幼龄健康雄性豚鼠27只，体重300±50 g，由同济医科大学实验动物学部提供(合格证书：医动第19～023号)。扶正化痰合剂(由黄芪、黄精、益智仁、仙茅、麻黄、半夏、茯苓等组成)、喘敷灵(由白芥子、细辛、延胡索等组成)均由湖北中医学院附属医院药剂科制备。5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸标准品由Sigma公司提供。
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1.2 方法 将27只豚鼠随机分为3组，正常组(9只)，造模组(9只)，中药组(9只)。造模组和中药组豚鼠按国际上常用方法，以卵蛋白致敏和攻击加以复制哮喘模型〔1〕。在致敏后当天，中药组用扶正化痰合剂(4 g/kg)灌胃，同时外敷喘敷灵，用姜汁调喘敷灵药末，敷于豚鼠双侧定喘、肺俞及脾俞穴，并以胶膏及宽扁橡皮筋固定，每次3小时，隔7天1次，共4次。贴敷前先用眼科剪及剃须刀以穴位为中心去毛备皮。穴位定位根据文献〔2〕确定。在致敏后第15、18、21、28天各引喘1次。于最后1次引喘2小时后，各组豚鼠迅速断头取脑，冰皿上精确称取下丘脑第三脑室周围组织，-28℃冰冻保存，采用化学荧光检测法〔3〕，由同济医科大学神经生物学教研室检测。
2 结果
中药内外合治对过敏性哮喘豚鼠下丘脑中5-HT、5-HIAA的影响，见附表。造模后豚鼠脑组织中5-HT含量明显升高(P<0.05)，中药治疗后恢复至正常水平。5-HIAA的含量各组间差异无显著性意义。
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附表 各组豚鼠脑组织中5-HT、5-HIAA含量的比较(ng/100mg湿重脑组织) 组别
n
5-HT
5-HIAA
正常组
9
3.51±0.66
4.00±0.36
造模组
9
4.73±0.98※
4.37±1.19
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中药组
9
3.74±0.44
4.06±0.49
注：与正常组比较，※P<0.05
3 讨论
5-羟色胺在体内广泛分布并具有多种生物活性。它不仅是重要的神经递质，也是重要的免疫调节因子。汪氏等发现哮喘发作期患者血浆5-HT明显升高，认为如能控制血浆中游离5-HT的升高，这对哮喘的预防、治疗和改善预后，可能有重要意义〔4〕。Michoud等在大鼠的静脉内注射或气管内气雾5-HT，发现引起支气管痉挛、招致哮喘发作〔5〕。李氏等认为5-HT还具有活化鸟苷酸环化酶的作用，使三磷酸鸟苷生成环磷酸鸟苷，促进支气管平滑肌收缩，所以，5-HT还参与速发型过敏反应〔6〕。Ptak等发现局部注射50～100 ng 5-HT能最适地启动迟发型过敏反应(DTH)。即使更低剂量的5-HT也能启动DTH反应。进一步证明5-HT有调节DTH的作用〔7〕。有研究表明5-HT主要通过作用于支气管壁上5-HT2受体，引起支气管平滑肌痉挛，粘膜水肿，腺体分泌亢进。刘氏等发现哮喘的炎性介质5-HT可促进兔气道平滑肌细胞(ASMC)增生〔8〕。所有这些都说明了5-HT是引起哮喘发作的重要原因。
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正常人体内部“神经—内分泌—免疫”三大系统间的相互作用，相互制约，构成一个复杂的“网络”，任何环节的紊乱或失调都会直接或间接地影响其它系统的功能。实验结果表明，哮喘豚鼠中枢中5-HT异常增高，必然是影响了内分泌、免疫系统的功能，从而导致哮喘发作。本实验从中医药理论整体观出发，采用中药内外合治的方法。内服中药黄芪、黄精、益智仁健脾补肾，增强机体免疫功能，外敷药白芥子、细辛、延胡索等辛散温通，化饮祛瘀，标本兼治，共同达到平喘的目的。因此，从本实验结果看，对哮喘病因的研究既要有“整体”的综合，亦应有细胞、分子水平的深入研究。因此，从中医药领域挖掘防治哮喘的方药大有前途。
参考文献
1 吕宝璋，王小兵，单京瑞.豚鼠肺组织中β和M受体的检定及其在实验性过敏性哮喘的变化.中华医学杂志，1985，65(7)∶385
2 李辞蓉，华兴邦，周浩良，等.豚鼠针灸穴位图谱的研究.上海针灸杂志，1992(2)∶28
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3 徐淑云.药理实验方法学.第2版.北京∶人民卫生出版社，1991.440
4 汪昌树，刘冰怀，顾统云，等.支气管哮喘患者血浆5-HT含量变化及意义.安徽医学，1994，15(5)∶11～13
5 Michoud.MC，et al.Effect of indomethacin and atropine in experimental asthma in conscious guinea pigs.J Appl Physiol，1976，40∶889
6 李淑芳，赫国志.慢性肺心病血5-羟色胺的测定.中华结核和呼吸系疾病杂志，1986(5)∶276
7 Ptak W，Geba GP，Askenase PW.Initiation of delayed-type hypersensitivity by low doses of monochonal IgE antibody.J Immunol，1991，146∶3929～3936
8 刘振千，梁凤珍，马军红，等.5-羟色胺对气道平滑肌细胞增生的影响及c-fos的表达.中华结核和呼吸系疾病杂志，1998(1)∶56
(收稿日期：1998-12-07), http://www.100md.com