99mTc-PPM肺癌显像与肺癌DNA含量关系初探
作者：谭家驹 冯彦林 朱 正
单位：佛山市第一人民医院 谭家驹 胸心外科 冯彦林 核医学科 朱 正 病理科(528000)
关键词：肺肿瘤；显像；DNA含量；体层摄影术，发射型计算机
广东医学990814 【摘要】 目的 采用99mTc-培谱利欧霉素(peplomycin, PPM )进行SPECT肺癌显像，分析99mTc-PPM在体外显像诊断肺癌的价值及与肺癌DNA含量的关系。方法 28例肺癌与14例良性病变患者均进行SPECT早期及延迟平面及断层显像。结果 99mTc-PPM肺癌延迟摄取比值(UR)对肺癌的诊断灵敏度、特异性均为 85.7%，肺癌DNA含量指数(DI)与延迟UR相关系数r=0.36，异倍体细胞(AN)的发生率为84 .2% 。结论 99mTc-PPM对于体外显像诊断肺部恶性肿瘤具有明确的实用价值。
, 百拇医药
应用对肿瘤具有较好亲和性的显像剂判断肿瘤良恶性是肿瘤核医学显像诊断的一个重要发展方向。我们从1996年11月开始进行培谱利欧霉素(peplomycin,PPM) 的肿瘤显像研究，现把应用99m?Tc-PPM进行肺癌显像并分析其与癌细胞DNA含量关系的研究工作报道如下。
1 资料与方法
1.1 研究对象
1.1.1 肺癌组 共28例，其中中等分化及低分化腺癌12例，中等分化及低分化鳞癌15例，支气管囊腺癌1例。以上病例均经手术、病理和临床综合确诊。其中肿瘤直径>3 cm共19例，<3 cm共9例。
1.1.2 肺良性病变组 共14例，其中肺炎4例，肺结核3例，肺囊肿2例，炎性假瘤2例，肺腺瘤1例，肺脓肿1例，肺硬化血管瘤1例，均经手术及病理证实。
, 百拇医药
1.1.3 肺癌DNA含量测量组 共19例，均为以上肺癌组患者，其中中等分化腺癌5例，低分化腺癌4例，中等分化及低分化鳞癌10例。其中肿瘤直径>3 cm共14例。
1.2 药物与仪器 国产PPM，每支PPM内含PPM 0.5 mg，SNC1.H2O 2 0 μg。使用新鲜99mTcO-进行标记，丙酮做展开剂，测量标记率均大于95%。注射剂量0.925 ～1.11 GBq(25～30 mCi)。SPECT为法国生产的Sophy.DSX SPECT，配低能通用型准直器。 MPIAS-500图像分析仪测量细胞DNA含量。
1.3 研究方法 全部病例均在注射30 min内完成早期时相的前位、后位平面显像，必要时加照斜位；注射后150 min时完成延迟时相的前位、后位平面显像，如平面显像肿瘤病灶显示不清则加做断层显像。
, http://www.100md.com
DNA含量测定：手术切除标本用10%中性福尔马林固定，酒精脱水，石蜡包埋，切片厚度 4 μm，改良Feulgen法染色。用图像分析仪计算200～300个瘤细胞核积分光密度值作为瘤细胞DNA相对含量；同时选择病灶附近100个淋巴细胞作为二倍体细胞DNA含量对照值、另测量病灶旁无明显病变的小支气管粘膜上皮细胞200个作为参照细胞。
肺癌DNA含量指数(DI)=癌细胞核平均积分光密度值/淋巴细胞积分光密度值。
1.4 诊断指标及阳性标准 目测时以肺部病变部位放射性分布高于正常肺组织本底为阳性(+)；肿瘤部位放射性分布等于或低于肺本底为阴性(-)。将DNA含量>5C 的细胞作为异倍体细胞(AN)。分别计算肿瘤部位早期时相及延迟时相摄取比值(UR)：
1.5 统计学处理 采用t检验法及直线相关分析。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 肺部良恶性病变早期UR及延迟UR比较 结果见表1。
表1 肺良恶性病变UR比较(
±s) 组 别
例数
早期UR
延迟UR
良性病变组
14
1.01±0.11
1.02 ±0.08
肺 癌 组
, http://www.100md.com
28
1.16±0.13*
1.21±0.15△
注：两组间比较*P<0.01，△P<0.005
以肺癌组延迟时相-s(1.06)为阈值，早期UR、延迟UR的灵敏度分别为78 .6%(22/28 )、85.7%(24/28)，特异性分别为71.4%(10/14)、85.7%(12/14)。肺癌的不同组织学类型之间UR差异无显著性。
2.2 DNA含量与病理分型的关系 在DNA含量分析中，肺癌的DI=1.43±0.33，正常二倍体细胞DI=0.68±0.21，肺腺瘤DI=0.506±0.27，统计分析显示肺癌DI与二者比较P值均<0.01。肺腺癌DI=1.42±0.38，肺鳞癌DI=1.43±0.32，二者比较 P>0.05。
, 百拇医药
DNA分布直方图显示，肺良性肿瘤均为二倍体细胞；19例肺癌标本中有16例出现异倍体细胞，占84.2%，其DNA含量分布范围明显增宽，主峰右移，且出现双峰或多峰现象。
2.3 癌DNA含量与显像UR的相关分析 将肺癌DI与其早期UR及延迟UR分别进行直线相关分析，其相关系数分别为r=-0.11、r=0.32(P<0.05)；肿瘤直径>3 cm的癌细胞DNA含量与延迟UR相关分析，r=0.36(P<0.05)。
3 讨论
培普利欧霉素(peplomycin,PPM)化学名为[3-(S)-1苯乙基丙氨基]氨基博来霉素硫酸盐，分子量为1571.96。药物研究证明PPM注入机体后主要定位于肿瘤细胞核并与其DN A结合，它的作用模式为抑制DNA合成和切断DNA链；我们以前的工作明确了99mTc- PPM在正常人体内分布、排泄，并初步证实该显像剂能与肿瘤细胞结合并保持较稳定的滞留[1]；肺癌显像的结果进一步证实肺癌细胞能摄取99mTc-PPM并保持稳定滞留，它与肺癌细胞结合的剂量和它与良性病变细胞结合的剂量相比差异有显著性，是一种具有临床实用价值的肺癌亲肿瘤显像剂。
, 百拇医药
很多研究证实癌细胞DNA含量与其生物学行为密切相关。DNA含量异常增高，异倍体明显增多的肿瘤，其恶性程度明显增高，且预后较差，因此AN干系的出现是恶性肿瘤的一个重要生物学标志；本组肺癌的AN检出率为85.7%，与其他一些研究结果相近[2，3]。正常细胞与良性病变组织细胞的DNA含量相对稳定，而且均为二倍体细胞，但是，二倍体的出现不能除外恶性肿瘤，因为恶性肿瘤也有二倍体，与正常细胞或良性肿瘤二倍体难以区分。本组1例低分化腺癌DNA直方图均处于二倍体范围，而且99mTc-PPM早期及延迟显像均示阴性，手术中见肺及胸膜广泛转移，镜下见癌细胞细小而发育幼稚，DNA指数仅为0.873；在本文研究中出现的假阴性具有很好的一致性，这几例假阴性包括腺癌、鳞癌，既有中等分化，也有低分化。因此，99mTc-PPM定位滞留于肺癌细胞内受到多种因素的影响，其中癌细胞发生生物学变化及癌细胞不同内环境变化可能是影响PPM进行肿瘤细胞内并稳定结合的一个重要因素。故我们认为，影响PPM在肺癌细胞内的摄取与滞留因素是多方面的。
, http://www.100md.com
诊断结果显示延迟时相UR对肺癌的诊断效果最好，这说明99mTc-PPM，进入肺癌细胞内呈现一个较缓慢的动态结合积累过程，DI与早期UR和延迟UR的相关性分析也反映了这种情况，因为早期时相主要反映病灶的血液供应及血管的通透性，延迟时相则真正反映了99m Tc-PP M在细胞内摄取与DNA结合的情况，因此设想如果延长显像观察时间，有可能会进一步增加对肺癌的阳性检出率，延迟UR或者能间接反映肺癌细胞的DNA含量，这需要进一步加大样本量研究。
参考文献
1 冯彦林，谭家驹，余丰文，等.99mTc-PPM肿瘤显像的临床应用研究.中国现代医学杂志，1997，7(12)：12
2 Ten Velde GP, Schutte B, Vermeulen A, et al. Flow cytometric analysis of DNA ploidy level in paraffin-embedded tissue of non-small-cell lung cancer. Eur J Cancer Clin Oncol,1988,24:445
3 Zimmerman PV, Hawson GA, Bint MH, et al. Ploidy as a prognostic determin ant in surgically treated lung cancer. Lancet,1987,2:530, http://www.100md.com
单位：佛山市第一人民医院 谭家驹 胸心外科 冯彦林 核医学科 朱 正 病理科(528000)
关键词：肺肿瘤；显像；DNA含量；体层摄影术，发射型计算机
广东医学990814 【摘要】 目的 采用99mTc-培谱利欧霉素(peplomycin, PPM )进行SPECT肺癌显像，分析99mTc-PPM在体外显像诊断肺癌的价值及与肺癌DNA含量的关系。方法 28例肺癌与14例良性病变患者均进行SPECT早期及延迟平面及断层显像。结果 99mTc-PPM肺癌延迟摄取比值(UR)对肺癌的诊断灵敏度、特异性均为 85.7%，肺癌DNA含量指数(DI)与延迟UR相关系数r=0.36，异倍体细胞(AN)的发生率为84 .2% 。结论 99mTc-PPM对于体外显像诊断肺部恶性肿瘤具有明确的实用价值。
, 百拇医药
应用对肿瘤具有较好亲和性的显像剂判断肿瘤良恶性是肿瘤核医学显像诊断的一个重要发展方向。我们从1996年11月开始进行培谱利欧霉素(peplomycin,PPM) 的肿瘤显像研究，现把应用99m?Tc-PPM进行肺癌显像并分析其与癌细胞DNA含量关系的研究工作报道如下。
1 资料与方法
1.1 研究对象
1.1.1 肺癌组 共28例，其中中等分化及低分化腺癌12例，中等分化及低分化鳞癌15例，支气管囊腺癌1例。以上病例均经手术、病理和临床综合确诊。其中肿瘤直径>3 cm共19例，<3 cm共9例。
1.1.2 肺良性病变组 共14例，其中肺炎4例，肺结核3例，肺囊肿2例，炎性假瘤2例，肺腺瘤1例，肺脓肿1例，肺硬化血管瘤1例，均经手术及病理证实。
, 百拇医药
1.1.3 肺癌DNA含量测量组 共19例，均为以上肺癌组患者，其中中等分化腺癌5例，低分化腺癌4例，中等分化及低分化鳞癌10例。其中肿瘤直径>3 cm共14例。
1.2 药物与仪器 国产PPM，每支PPM内含PPM 0.5 mg，SNC1.H2O 2 0 μg。使用新鲜99mTcO-进行标记，丙酮做展开剂，测量标记率均大于95%。注射剂量0.925 ～1.11 GBq(25～30 mCi)。SPECT为法国生产的Sophy.DSX SPECT，配低能通用型准直器。 MPIAS-500图像分析仪测量细胞DNA含量。
1.3 研究方法 全部病例均在注射30 min内完成早期时相的前位、后位平面显像，必要时加照斜位；注射后150 min时完成延迟时相的前位、后位平面显像，如平面显像肿瘤病灶显示不清则加做断层显像。
, http://www.100md.com
DNA含量测定：手术切除标本用10%中性福尔马林固定，酒精脱水，石蜡包埋，切片厚度 4 μm，改良Feulgen法染色。用图像分析仪计算200～300个瘤细胞核积分光密度值作为瘤细胞DNA相对含量；同时选择病灶附近100个淋巴细胞作为二倍体细胞DNA含量对照值、另测量病灶旁无明显病变的小支气管粘膜上皮细胞200个作为参照细胞。
肺癌DNA含量指数(DI)=癌细胞核平均积分光密度值/淋巴细胞积分光密度值。
1.4 诊断指标及阳性标准 目测时以肺部病变部位放射性分布高于正常肺组织本底为阳性(+)；肿瘤部位放射性分布等于或低于肺本底为阴性(-)。将DNA含量>5C 的细胞作为异倍体细胞(AN)。分别计算肿瘤部位早期时相及延迟时相摄取比值(UR)：
1.5 统计学处理 采用t检验法及直线相关分析。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 肺部良恶性病变早期UR及延迟UR比较 结果见表1。
表1 肺良恶性病变UR比较(
±s) 组 别例数
早期UR
延迟UR
良性病变组
14
1.01±0.11
1.02 ±0.08
肺 癌 组
, http://www.100md.com
28
1.16±0.13*
1.21±0.15△
注：两组间比较*P<0.01，△P<0.005
以肺癌组延迟时相
-s(1.06)为阈值，早期UR、延迟UR的灵敏度分别为78 .6%(22/28 )、85.7%(24/28)，特异性分别为71.4%(10/14)、85.7%(12/14)。肺癌的不同组织学类型之间UR差异无显著性。2.2 DNA含量与病理分型的关系 在DNA含量分析中，肺癌的DI=1.43±0.33，正常二倍体细胞DI=0.68±0.21，肺腺瘤DI=0.506±0.27，统计分析显示肺癌DI与二者比较P值均<0.01。肺腺癌DI=1.42±0.38，肺鳞癌DI=1.43±0.32，二者比较 P>0.05。
, 百拇医药
DNA分布直方图显示，肺良性肿瘤均为二倍体细胞；19例肺癌标本中有16例出现异倍体细胞，占84.2%，其DNA含量分布范围明显增宽，主峰右移，且出现双峰或多峰现象。
2.3 癌DNA含量与显像UR的相关分析 将肺癌DI与其早期UR及延迟UR分别进行直线相关分析，其相关系数分别为r=-0.11、r=0.32(P<0.05)；肿瘤直径>3 cm的癌细胞DNA含量与延迟UR相关分析，r=0.36(P<0.05)。
3 讨论
培普利欧霉素(peplomycin,PPM)化学名为[3-(S)-1苯乙基丙氨基]氨基博来霉素硫酸盐，分子量为1571.96。药物研究证明PPM注入机体后主要定位于肿瘤细胞核并与其DN A结合，它的作用模式为抑制DNA合成和切断DNA链；我们以前的工作明确了99mTc- PPM在正常人体内分布、排泄，并初步证实该显像剂能与肿瘤细胞结合并保持较稳定的滞留[1]；肺癌显像的结果进一步证实肺癌细胞能摄取99mTc-PPM并保持稳定滞留，它与肺癌细胞结合的剂量和它与良性病变细胞结合的剂量相比差异有显著性，是一种具有临床实用价值的肺癌亲肿瘤显像剂。
, 百拇医药
很多研究证实癌细胞DNA含量与其生物学行为密切相关。DNA含量异常增高，异倍体明显增多的肿瘤，其恶性程度明显增高，且预后较差，因此AN干系的出现是恶性肿瘤的一个重要生物学标志；本组肺癌的AN检出率为85.7%，与其他一些研究结果相近[2，3]。正常细胞与良性病变组织细胞的DNA含量相对稳定，而且均为二倍体细胞，但是，二倍体的出现不能除外恶性肿瘤，因为恶性肿瘤也有二倍体，与正常细胞或良性肿瘤二倍体难以区分。本组1例低分化腺癌DNA直方图均处于二倍体范围，而且99mTc-PPM早期及延迟显像均示阴性，手术中见肺及胸膜广泛转移，镜下见癌细胞细小而发育幼稚，DNA指数仅为0.873；在本文研究中出现的假阴性具有很好的一致性，这几例假阴性包括腺癌、鳞癌，既有中等分化，也有低分化。因此，99mTc-PPM定位滞留于肺癌细胞内受到多种因素的影响，其中癌细胞发生生物学变化及癌细胞不同内环境变化可能是影响PPM进行肿瘤细胞内并稳定结合的一个重要因素。故我们认为，影响PPM在肺癌细胞内的摄取与滞留因素是多方面的。
, http://www.100md.com
诊断结果显示延迟时相UR对肺癌的诊断效果最好，这说明99mTc-PPM，进入肺癌细胞内呈现一个较缓慢的动态结合积累过程，DI与早期UR和延迟UR的相关性分析也反映了这种情况，因为早期时相主要反映病灶的血液供应及血管的通透性，延迟时相则真正反映了99m Tc-PP M在细胞内摄取与DNA结合的情况，因此设想如果延长显像观察时间，有可能会进一步增加对肺癌的阳性检出率，延迟UR或者能间接反映肺癌细胞的DNA含量，这需要进一步加大样本量研究。
参考文献
1 冯彦林，谭家驹，余丰文，等.99mTc-PPM肿瘤显像的临床应用研究.中国现代医学杂志，1997，7(12)：12
2 Ten Velde GP, Schutte B, Vermeulen A, et al. Flow cytometric analysis of DNA ploidy level in paraffin-embedded tissue of non-small-cell lung cancer. Eur J Cancer Clin Oncol,1988,24:445
3 Zimmerman PV, Hawson GA, Bint MH, et al. Ploidy as a prognostic determin ant in surgically treated lung cancer. Lancet,1987,2:530, http://www.100md.com