抗喘止咳口服液的药理实验研究
作者：古梅 金建武 何正正
单位：北京中医药大学药厂(100029)
关键词：抗喘止咳口服液；吞噬功能；止咳祛痰；抗炎
中草药991121摘 要 采用巨噬细胞吞噬实验表明该口服液具有提高巨噬细胞吞噬功能，用化学刺激法和酚红祛痰法表明该口服液具有止咳祛痰的作用，采用小鼠耳肿胀和棉球植入法表明该口服液具有抗急、慢性炎症作用。
抗喘止咳口服液由黄芪、生地、杏仁、炙枇杷叶等10余味中药组成，由北京中医药大学药厂研究室制剂组提供，该药具有敛肺固本，防感止喘的功效，我们对其药理作用进行了实验研究。
1 材料
1.1 药物：抗喘止咳口服液由北京中医药大学药厂研究室制剂组提供，4 g生药/mL。参蛤补肺胶囊，批号930213，中国吉林双辽制药厂。乙酰水杨酸肠溶液，批号940309-14，西北第二合成药厂。RPMI 1640完全培养基：RPMI培养基十青霉素100 μg/mL+链霉素100 μg/mL+2 mol/L L-谷氨酸胺+10%小牛血清，过滤上述溶液消毒冷冻备用。
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1.2 动物：昆明种小鼠，由北京市药品检验所动物中心提供。
2 方法和结果：
2.1 对非特异性免疫功能的影响(巨噬细胞吞噬作用)〔1〕：将体重18～22 g的小鼠雌雄各半，随机分为空白对照组，抗喘止咳口服液4.0，8.0 g/kg组，参蛤补肺胶囊8.0 g/kg组。ig给药7 d，在给药第4天时每只小鼠注射10 %硫乙酸盐培养基(灭菌)0.8 mL，末次给药1.5 h后将各组小鼠摘眼球放血断脊柱处死，清毒腹部皮肤切开，注射含肝素的生理盐水5～6 mL，轻揉腹部，剪开腹部吸出腹腔液放入冷藏的试管，1 500 r/min离心5 min，弃上清液，将同组的细胞合并，过滤，各管加入少量RPMI 1640完全培养基，将此细胞混悬液计数，配成2×106个/mL并加入带孔培养板中，37 ℃培养2 h，用生理盐水冲洗2次，甩干，再加0.1 %中性生理盐水，37 ℃培养30 min，甩去中性红，将板用生理盐水冲洗3次，甩干，各管加细胞溶解液(5 %乙醇和5 %乙酸)，放冰箱24 h后在540 nm下测定吸光度(A)值，结果见表1。
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表1 对非特异性免疫功能的影响(
±s,n＝10) 组别
剂量(g/kg)
A值
对照组
-
0.070±0.043
抗喘止咳口服液
4.0
0.078±0.033
8.0
0.138±0.034*
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参蛤补肺胶囊
8.0
0.121±0.055*
与对照组比：*P<0.05
结果显示，抗喘止咳组中性红的含量增加，其所测A值与对照组比具有明显的提高，说明抗喘止咳口服液能提高巨噬细胞的功能。
2.2 对止咳化痰作用的影响
2.2.1 止咳〔2〕：将体重为18～20 g的小鼠雌雄各半，分组及剂量同2.1，ig给药，给药后1.5 h用6 mL SO2刺激2 min后，记录从刺激到出现咳嗽的时间(潜伏期)及小鼠在取出钟罩后2，5，10 min之内咳嗽的次数，结果见表2。
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表2 对止咳作用的影响(±s,n＝10) 组 别
剂量(g/kg)
潜伏期
药后不同时间(min)咳嗽次数
2
5
10
对照组
-
36.9±24.2
34.6±28.9
, 百拇医药
36.7±28.3
27.0±30.6
抗喘止咳口服液
4.0
45.4±32.4
18.0±23.5
15.0±23.7
9.5±21.5
8.0
66.3±36.9
16.1±21.6
18.0±23.8
, http://www.100md.com
10.4±22.1
参蛤补肺胶囊
8.0
60.2±29.4
6.4±16.3
5.5±16.4*
0*
与对照组比：*P<0.05
结果抗喘止咳口服液随剂量的增加潜伏期延长，与对照组相比咳嗽次数降低，说明抗喘止咳口服液有较明显的止咳作用。
2.2.2 祛痰〔3〕：将体重20～25 g的小鼠雌雄各半，分组及剂量同2.1，ig给药，给药后30 min ip 0.6%酚红溶液，30 min后处死，分离出气管，于喉头下气管环之间剪切口，插入平头针0.03 cm，结扎固定，以0.5 mL NaHCO3缓慢抽洗合并洗液，于波长546 nm处比色，测A值结果见表3。
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表3 对祛痰作用的影响(±s,n＝10) 组别
剂量(g/kg)
酚红A值
对照组
-
4.61±1.65
抗喘止咳口服液
4.0
5.48±1.12
8.0
6.61±1.60*
, 百拇医药
参蛤补肺胶囊
8.0
7.01±2.69*
与对照组比：*P<0.05
结果抗喘止咳口服液具有增加气管排泌酚红的作用，即有化痰作用。
2.3 抗急、慢性炎症作用
2.3.1 抗急性炎症〔3〕：将体重18～20 g小鼠(全部雄性)随机分为空白对照组，抗喘止咳口服液4.0，8.0 g/kg组，参蛤补肺胶囊8.0 g/kg，阿司匹林0.2 g/kg组，ig给药，1.5 h后以二甲苯于一侧耳壳正反面均匀涂抹，30 min后处死动物，于同一部位用打孔器冲下耳片，记录两耳的重量差，结果见表4。
, 百拇医药
表4 抗急性炎症的作用(±s,n＝10) 组别
剂量(g/kg)
两耳之差(g)
对照组
-
18.9±5.5
抗喘止咳口服液
4.0
15.5±3.47
8.0
13.8±4.5*
, 百拇医药
参蛤补肺胶囊
8.0
13.5±4.8*
阿司匹林
0.2
12.6±5.7*
与对照组比：*P<0.05
结果抗喘止咳口服液随剂量加大具有一定的抗急性炎症作用。
2.3.2 抗慢性炎症〔4〕：将体重20～25 g小鼠(全部雄性)，分组及剂量同2.3.1，将20 mg灭菌棉球从切口处植入皮下，即日起ig给药10 d，第10天处死小鼠，打开切口，将棉球连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，烘干，称重记录肉芽肿的重量，结果见表5。
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结果从表5可见，抗喘止咳口服液具有较强的抗慢性炎症作用。
表5 抗慢性炎症作用(±s,n＝10) 组别
剂量(g/kg)
肉芽重(g/10g)
对照组
-
4.53±1.35
抗喘止咳口服液
4.0
2.61±0.80*
, http://www.100md.com
8.0
2.58±1.05*
参蛤补肺胶囊
8.0
3.92±1.48
阿司匹林
0.2
2.74±0.51*
与对照组比：*P<0.05
3 结论
方中黄芪为君药，文献记载用于脾肺气虚证的喘咳〔5〕，现代药理研究表明黄芪有较好的增加免疫功能〔6〕。方中杏仁，宣肺下气，止咳平喘，灸枇杷叶清肃肺热，化痰止咳。白术、生地、防风、牡蛎、苦参补气、养阴生津，解表祛风，收敛胜湿、清热〔5〕。综观全方有益气固表，止咳平喘与所做的药理实验结果相一致。另外该口服液的急性毒性实验为生药259.92 g/kg，长期毒性实验为生药108.3 g/kg，且各脏器检验结果良好，显示该口服液安全可靠。
, 百拇医药
参考文献
1 王晓京，等.中国免疫学杂志，1987，3(4)：211
2 徐叔云主编.药理实验方法学.北京：人民卫生出版社，1993：1166
3 李仪奎主编.中药药理实验方法学.上海：上海科学技术出版社，1991：430，298
4 林华，等.中草药，1996，27(2)：98
5 颜正华主编.中药学.北京：人民卫生出版社，1991：633，644，742，153，74，678，145
6 王浴生，等.主编.中药药理与应用.北京：人民卫生出版社，1998：982
收稿日期：1999-05-16, 百拇医药
单位：北京中医药大学药厂(100029)
关键词：抗喘止咳口服液；吞噬功能；止咳祛痰；抗炎
中草药991121摘 要 采用巨噬细胞吞噬实验表明该口服液具有提高巨噬细胞吞噬功能，用化学刺激法和酚红祛痰法表明该口服液具有止咳祛痰的作用，采用小鼠耳肿胀和棉球植入法表明该口服液具有抗急、慢性炎症作用。
抗喘止咳口服液由黄芪、生地、杏仁、炙枇杷叶等10余味中药组成，由北京中医药大学药厂研究室制剂组提供，该药具有敛肺固本，防感止喘的功效，我们对其药理作用进行了实验研究。
1 材料
1.1 药物：抗喘止咳口服液由北京中医药大学药厂研究室制剂组提供，4 g生药/mL。参蛤补肺胶囊，批号930213，中国吉林双辽制药厂。乙酰水杨酸肠溶液，批号940309-14，西北第二合成药厂。RPMI 1640完全培养基：RPMI培养基十青霉素100 μg/mL+链霉素100 μg/mL+2 mol/L L-谷氨酸胺+10%小牛血清，过滤上述溶液消毒冷冻备用。
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1.2 动物：昆明种小鼠，由北京市药品检验所动物中心提供。
2 方法和结果：
2.1 对非特异性免疫功能的影响(巨噬细胞吞噬作用)〔1〕：将体重18～22 g的小鼠雌雄各半，随机分为空白对照组，抗喘止咳口服液4.0，8.0 g/kg组，参蛤补肺胶囊8.0 g/kg组。ig给药7 d，在给药第4天时每只小鼠注射10 %硫乙酸盐培养基(灭菌)0.8 mL，末次给药1.5 h后将各组小鼠摘眼球放血断脊柱处死，清毒腹部皮肤切开，注射含肝素的生理盐水5～6 mL，轻揉腹部，剪开腹部吸出腹腔液放入冷藏的试管，1 500 r/min离心5 min，弃上清液，将同组的细胞合并，过滤，各管加入少量RPMI 1640完全培养基，将此细胞混悬液计数，配成2×106个/mL并加入带孔培养板中，37 ℃培养2 h，用生理盐水冲洗2次，甩干，再加0.1 %中性生理盐水，37 ℃培养30 min，甩去中性红，将板用生理盐水冲洗3次，甩干，各管加细胞溶解液(5 %乙醇和5 %乙酸)，放冰箱24 h后在540 nm下测定吸光度(A)值，结果见表1。
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表1 对非特异性免疫功能的影响(
±s,n＝10) 组别剂量(g/kg)
A值
对照组
-
0.070±0.043
抗喘止咳口服液
4.0
0.078±0.033
8.0
0.138±0.034*
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参蛤补肺胶囊
8.0
0.121±0.055*
与对照组比：*P<0.05
结果显示，抗喘止咳组中性红的含量增加，其所测A值与对照组比具有明显的提高，说明抗喘止咳口服液能提高巨噬细胞的功能。
2.2 对止咳化痰作用的影响
2.2.1 止咳〔2〕：将体重为18～20 g的小鼠雌雄各半，分组及剂量同2.1，ig给药，给药后1.5 h用6 mL SO2刺激2 min后，记录从刺激到出现咳嗽的时间(潜伏期)及小鼠在取出钟罩后2，5，10 min之内咳嗽的次数，结果见表2。
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表2 对止咳作用的影响(
±s,n＝10) 组 别剂量(g/kg)
潜伏期
药后不同时间(min)咳嗽次数
2
5
10
对照组
-
36.9±24.2
34.6±28.9
, 百拇医药
36.7±28.3
27.0±30.6
抗喘止咳口服液
4.0
45.4±32.4
18.0±23.5
15.0±23.7
9.5±21.5
8.0
66.3±36.9
16.1±21.6
18.0±23.8
, http://www.100md.com
10.4±22.1
参蛤补肺胶囊
8.0
60.2±29.4
6.4±16.3
5.5±16.4*
0*
与对照组比：*P<0.05
结果抗喘止咳口服液随剂量的增加潜伏期延长，与对照组相比咳嗽次数降低，说明抗喘止咳口服液有较明显的止咳作用。
2.2.2 祛痰〔3〕：将体重20～25 g的小鼠雌雄各半，分组及剂量同2.1，ig给药，给药后30 min ip 0.6%酚红溶液，30 min后处死，分离出气管，于喉头下气管环之间剪切口，插入平头针0.03 cm，结扎固定，以0.5 mL NaHCO3缓慢抽洗合并洗液，于波长546 nm处比色，测A值结果见表3。
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表3 对祛痰作用的影响(
±s,n＝10) 组别剂量(g/kg)
酚红A值
对照组
-
4.61±1.65
抗喘止咳口服液
4.0
5.48±1.12
8.0
6.61±1.60*
, 百拇医药
参蛤补肺胶囊
8.0
7.01±2.69*
与对照组比：*P<0.05
结果抗喘止咳口服液具有增加气管排泌酚红的作用，即有化痰作用。
2.3 抗急、慢性炎症作用
2.3.1 抗急性炎症〔3〕：将体重18～20 g小鼠(全部雄性)随机分为空白对照组，抗喘止咳口服液4.0，8.0 g/kg组，参蛤补肺胶囊8.0 g/kg，阿司匹林0.2 g/kg组，ig给药，1.5 h后以二甲苯于一侧耳壳正反面均匀涂抹，30 min后处死动物，于同一部位用打孔器冲下耳片，记录两耳的重量差，结果见表4。
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表4 抗急性炎症的作用(
±s,n＝10) 组别剂量(g/kg)
两耳之差(g)
对照组
-
18.9±5.5
抗喘止咳口服液
4.0
15.5±3.47
8.0
13.8±4.5*
, 百拇医药
参蛤补肺胶囊
8.0
13.5±4.8*
阿司匹林
0.2
12.6±5.7*
与对照组比：*P<0.05
结果抗喘止咳口服液随剂量加大具有一定的抗急性炎症作用。
2.3.2 抗慢性炎症〔4〕：将体重20～25 g小鼠(全部雄性)，分组及剂量同2.3.1，将20 mg灭菌棉球从切口处植入皮下，即日起ig给药10 d，第10天处死小鼠，打开切口，将棉球连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，烘干，称重记录肉芽肿的重量，结果见表5。
, http://www.100md.com
结果从表5可见，抗喘止咳口服液具有较强的抗慢性炎症作用。
表5 抗慢性炎症作用(
±s,n＝10) 组别剂量(g/kg)
肉芽重(g/10g)
对照组
-
4.53±1.35
抗喘止咳口服液
4.0
2.61±0.80*
, http://www.100md.com
8.0
2.58±1.05*
参蛤补肺胶囊
8.0
3.92±1.48
阿司匹林
0.2
2.74±0.51*
与对照组比：*P<0.05
3 结论
方中黄芪为君药，文献记载用于脾肺气虚证的喘咳〔5〕，现代药理研究表明黄芪有较好的增加免疫功能〔6〕。方中杏仁，宣肺下气，止咳平喘，灸枇杷叶清肃肺热，化痰止咳。白术、生地、防风、牡蛎、苦参补气、养阴生津，解表祛风，收敛胜湿、清热〔5〕。综观全方有益气固表，止咳平喘与所做的药理实验结果相一致。另外该口服液的急性毒性实验为生药259.92 g/kg，长期毒性实验为生药108.3 g/kg，且各脏器检验结果良好，显示该口服液安全可靠。
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参考文献
1 王晓京，等.中国免疫学杂志，1987，3(4)：211
2 徐叔云主编.药理实验方法学.北京：人民卫生出版社，1993：1166
3 李仪奎主编.中药药理实验方法学.上海：上海科学技术出版社，1991：430，298
4 林华，等.中草药，1996，27(2)：98
5 颜正华主编.中药学.北京：人民卫生出版社，1991：633，644，742，153，74，678，145
6 王浴生，等.主编.中药药理与应用.北京：人民卫生出版社，1998：982
收稿日期：1999-05-16, 百拇医药