栀子提取物京尼平苷和西红花苷利胆作用的研究
作者：朱振家 钱之玉 陆莉华 任小梅
单位：中国药科大学药理学教研室(南京 210009)
关键词：京尼平苷；西红花苷；利胆；胆汁成分
中草药991118 摘 要 采用测定大鼠胆汁分泌量的实验方法，观察栀子提取物京尼平苷和西红花苷十二指肠给药后的利胆作用。结果显示西红花苷50和100 mg/kg剂量均不增加大鼠的胆汁流量，而京尼平苷50和100 mg/kg剂量均可显著增加大鼠胆汁流量，降低胆汁内胆固醇含量，增加胆汁内HCO-3浓度，但对胆汁酸，胆红素，〔Ca2+〕含量无显著影响。表明西红花苷没有利胆作用，而京尼平苷是栀子利胆的有效成分，它能改变胆汁成分，可能对阻止胆固醇结石的形成有一定的作用。
Studies of Geniposide and Crocins from Cape Jasmine
, http://www.100md.com
(Gardenia jasminoides) on the Biliary Secretion in Rat
Zhu Zhenjia Qian Zhiyu Lu Lihua et al.
(Department of Pharmacology, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009)
Abstract Effects of geniposide and crocins, the two extracts from Gardenia jasminoides Ellis, on the biliary secretion in rat were investigated. It was observed that, at the doses of 50 mg/kg and 100 mg/kg, geniposide could significantly increase the biliary secretion after intraduodenal administration, while crocins showed no effect. On the other hand, geniposide can markedly decrease the content of cholesterol and elevate HCO3- concentration in bile, but without effect on the level of bilirubin, bile acid and Ca2+. The results show that geniposide is the main choleretic principle in Gardenia jasminoides Ellis.
, 百拇医药
Key words geniposide crocin choleretics bile contents
栀子是茜草科植物山栀子Gardenia jasminoides Ellis的成熟果实，具有利胆保肝、镇痛、降压和抗菌消炎等作用〔1〕。栀子作为传统的利胆保肝中药，应用于临床已有1 600多年历史。中外学者对栀子的药性、炮制、有效成分、药理作用和临床应用等做了大量的研究，均肯定其利胆保肝作用，但对其有效成分是京尼平苷还是西红花苷，众说不一。《中药大辞典》指出栀子发挥保肝利胆作用的物质是藏花素(crocin,又叫西红花苷)和藏红花酸(crocetin)〔2〕。Takeda 报道西红花苷、西红花酸和栀子醇提物均可使胆汁分泌量增加〔3，4〕，郑氏却认为京尼平苷是栀子利胆的有效成分〔5〕。本研究同时观察京尼平苷和西红花苷对大鼠胆汁分泌量的影响，以确定栀子利胆的有效成分，并考察有效成分对胆汁成分的影响，初步探讨其利胆的作用机制。
, http://www.100md.com
1 材料
京尼平苷和西红花苷(从江苏省药材公司购得的同一批栀子生药中提得，含量分别为54.8 %和56.3 %)；去氢胆酸片剂(0.25 g/片，上海黄河利亚制药有限公司，批号970101)。SD大鼠，雄性，体重250 ～ 300 g，由本校动物室提供。
2 方法
2.1 胆汁的收集及流量测定：大鼠60只，随机分为6组，每组10只：生理盐水组，去氢胆酸组50 mg/kg，京尼平苷50和100 mg/kg组，西红花苷50和100 mg/kg组。实验前12 h禁食不禁水。乌拉坦1 g/kg ip麻醉，胆管插管，将胆汁引流于1 mL注射器中，注意避光。待稳定20 min后，先收集30 min胆汁，然后各组大鼠分别由十二指肠给予相应药物1 mL/100 g，阴性对照组给予等容量生理盐水。给药后每隔30 min收集胆汁1次，共4次，记录胆汁流量，计算给药后胆汁流量增加的百分率，并测定胆汁成分。
, 百拇医药
2.2 胆汁成分的测定：胆红素、胆固醇、Ca2+和HCO3含量测定根据文献方法〔6〕，胆汁酸含量测定采用洪南康法〔7〕。
3 结果
3.1 京尼平苷和西红花苷对大鼠胆汁分泌的影响：见表1。京尼平苷50和100 mg/kg和去氢胆酸50 mg/kg组给药后各时间点(0.5，1.0，1.5，2.0 h)胆汁流量增加的百分率与生理盐水组比较均有非常显著的提高(P<0.01)。其中，京尼平苷100 mg/kg组给药后胆汁流量增加迅速，0.5 h即达高峰；50 mg/kg组利胆作用稍缓慢，1 h后达高峰。西红花苷两个剂量组(50和100 mg/kg)给药后的胆汁流量均降低，100 mg/kg组给药1.0，1.5和2.0 h后的胆汁流量反而显著性减少(P<0.05)。
表1 京尼平苷和西红花苷对大鼠胆汁分泌的影响(n＝10，
±s) 组别
, http://www.100md.com
剂量
(mg/kg)
胆汁增加率(%)
0.5 h
1.0 h
1.5 h
2.0 h
生理盐水
-
-3.2±12.4
-3.4±8.3
-6.7±6.9
-12.1±12.0
, http://www.100md.com
京尼平苷
50
26.0±12.9**
45.6±20.0**
23.1±6.4**
22.7±11.7**
100
47.8±16.4**△
41.4±22.2**
23.7±9.7**
, http://www.100md.com
16.4±7.6**
西红花苷
50
-5.7±9.1
-0.5±6.9
-9.6±4.5
-17.1±4.4
100
-8.5±17.4
-15.7±9.6*
-21.3±10.8*
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-23.8±10.0*
去氢胆酸
50
48.9±14.1**
49.6±25.1**
21.4±8.2**
18.1±12.2**
与生理盐水组相比：*P<0.05 **P<0.01；与50 mg/kg京尼平苷组比较：△P<0.013.2 京尼平苷对大鼠胆汁成分的影响：京尼平苷50 mg/kg组，去氢胆酸50 mg/kg组与生理盐水组相比较，胆汁中胆固醇含量均明显降低(P<0.05)，100 mg/kg京尼平苷组降低更明显(P<0.01)，HCO3-含量3组均显著不同程度升高(P<0.05)(表2)。胆红素、胆汁酸和Ca2+含量无明显变化(表3)。
, 百拇医药
表2 京尼平苷对大鼠胆汁中胆固醇和HCO3-含量的影响(n＝10,±s) 组别
剂量
(mg/kg)
胆固醇(μmol/mL)
〔HCO3-〕(mmol/L)
给药前
给药后
减少率(%)
给药前
, http://www.100md.com
给药后
增加率(%)
生理盐水
-
7.61±1.02
6.90±1.22
8.42±6.14
54.3±3.2
53.1±3.4
-1.87±7.20
去氢胆酸
50
, http://www.100md.com
7.04±0.83
5.50±1.53
21.50±9.91*
54.3±3.1
57.1±4.1
7.38±6.71*
京尼平苷
50
8.78±0.95
6.59±1.11
21.92±14.05*
, 百拇医药
48.1±8.1
54.3±7.8
13.71±6.12**
100
7.92±2.03
5.29±1.95
33.17±9.54**
48.3±6.2
51.8±6.6
7.37±5.97*
与生理盐水组比较：*P<0.05 **P<0.01表3 京尼平苷对大鼠胆汁中胆红素、胆汁酸和Ca2+含量的影响(n＝10,±s)
, 百拇医药
组别
剂量
(mg/kg)
胆红素(mg/mL)
胆汁酸(μg/mL)
Ca2+(mg/mL)
给药前
给药后
给药前
给药后
给药前
给药后
, 百拇医药 生理盐水
-
4.4±1.1
3.6±1.2
0.163±0.007
0.160±0.007
1.86±0.24
1.78±0.30
去氢胆酸
50
5.1±2.0
4.1±2.0
, 百拇医药
0.159±0.008
0.161±0.005
1.96±0.39
1.78±0.29
京尼平苷
50
5.0±1.5
4.3±1.4
0.169±0.011
0.169±0.008
2.05±0.14
1.95±0.27
, 百拇医药
100
4.3±0.7
3.8±0.7
0.166±0.006
0.166±0.006
2.14±0.15
2.04±0.29
4 讨论
实验中所用的京尼平苷和西红花苷为本室从中药栀子中提取而得，经薄层鉴定和HPLC测定，京尼平苷中不含西红花苷，西红花苷中也不含京尼平苷，从实验结果可见西红花苷提取物在高、低剂量组均不具有利胆作用，相反高剂量组抑制胆汁分泌，说明西红花苷没有利胆作用。低剂量的京尼平苷有显著的利胆效应，1 h达到利胆峰值，高剂量作用更强更快(在0.5 h高剂量组与低剂量组比较P<0.01)，Takeda和Masahori报道，京尼平苷是通过其水解产物京尼平起利胆作用的〔8，9〕，这与本实验中观察到的高、低剂量组的京尼平苷表现出近似量效和时效关系是一致的。综上所述，京尼平苷具有利胆作用。本研究表明西红花苷不是栀子利胆的有效成分，因此《中药大辞典》记载西红花苷和西红花酸有利胆作用值得商榷。
, http://www.100md.com
胆汁是重要的消化液，肌体内一些大分子及脂类等代谢产物需经肝脏处理后，通过胆汁排出体外；另一方面胆石的研成及其防治亦与胆汁成分的变化密切相关。胆结石包括胆固醇结石和胆色素结石，胆固醇结石的形成与胆固醇过饿和、胆汁蛋白异常、胆囊中胆汁郁积及一些未阐明的因素有关；胆色素结石的形成是胆汁中胆红素钙盐过饿和引起的，胆红素沉淀与钙盐相互作用形成难溶性钙盐和高分子聚合物。本实验表明十二指肠给予京尼平苷后，大鼠胆汁中的胆固醇含量明显降低，胆红素、胆汁酸和Ca2+含量无明显变化。这提示京尼平苷可阻止胆固醇结石的形成，但对胆色素结石可能无效。
作者简介：钱之玉，1965年毕业于中国药科大学药学专业，现任中国药科大学药学院药理
教研室主任、教授、博士生导师.自八十年代初完成水飞蓟宾注射剂研制后，又
从栀子中提取西红花总苷并制成片剂一脉络清片[新药<中药>二类]即将投产
, http://www.100md.com
上市.长期从事药理学基础和应用研究，先后在国内外杂志上发表论文40余篇；
申请国家发明专利1项.
参考文献
1 阴健，等.中药现代研究与临床应用.北京：学苑出版社，1993：471
2 江苏新医学院编.中药大辞典.下册.上海：上海科学技术出版社，1977：1984
3 Takeda Y, et al. Chem Pharm Bull, 1976, 24(11):2644
4 Ineuye H, et al. Phytochemistry, 1974,13(10):2219
5 郑若玄，等.中国中西医结合杂志，1985，5(6)：356
6 陈奇，等.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993：451
7 洪南康，等.上海医学，1983，6(1)：35
8 Takeda S, et al. J Pharm Dyn, 1981,4:724
9 Masahori M, et al. Planta Med, 1988,54:556
收稿日期：1999-06-11, 百拇医药
单位：中国药科大学药理学教研室(南京 210009)
关键词：京尼平苷；西红花苷；利胆；胆汁成分
中草药991118 摘 要 采用测定大鼠胆汁分泌量的实验方法，观察栀子提取物京尼平苷和西红花苷十二指肠给药后的利胆作用。结果显示西红花苷50和100 mg/kg剂量均不增加大鼠的胆汁流量，而京尼平苷50和100 mg/kg剂量均可显著增加大鼠胆汁流量，降低胆汁内胆固醇含量，增加胆汁内HCO-3浓度，但对胆汁酸，胆红素，〔Ca2+〕含量无显著影响。表明西红花苷没有利胆作用，而京尼平苷是栀子利胆的有效成分，它能改变胆汁成分，可能对阻止胆固醇结石的形成有一定的作用。
Studies of Geniposide and Crocins from Cape Jasmine
, http://www.100md.com
(Gardenia jasminoides) on the Biliary Secretion in Rat
Zhu Zhenjia Qian Zhiyu Lu Lihua et al.
(Department of Pharmacology, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009)
Abstract Effects of geniposide and crocins, the two extracts from Gardenia jasminoides Ellis, on the biliary secretion in rat were investigated. It was observed that, at the doses of 50 mg/kg and 100 mg/kg, geniposide could significantly increase the biliary secretion after intraduodenal administration, while crocins showed no effect. On the other hand, geniposide can markedly decrease the content of cholesterol and elevate HCO3- concentration in bile, but without effect on the level of bilirubin, bile acid and Ca2+. The results show that geniposide is the main choleretic principle in Gardenia jasminoides Ellis.
, 百拇医药
Key words geniposide crocin choleretics bile contents
栀子是茜草科植物山栀子Gardenia jasminoides Ellis的成熟果实，具有利胆保肝、镇痛、降压和抗菌消炎等作用〔1〕。栀子作为传统的利胆保肝中药，应用于临床已有1 600多年历史。中外学者对栀子的药性、炮制、有效成分、药理作用和临床应用等做了大量的研究，均肯定其利胆保肝作用，但对其有效成分是京尼平苷还是西红花苷，众说不一。《中药大辞典》指出栀子发挥保肝利胆作用的物质是藏花素(crocin,又叫西红花苷)和藏红花酸(crocetin)〔2〕。Takeda 报道西红花苷、西红花酸和栀子醇提物均可使胆汁分泌量增加〔3，4〕，郑氏却认为京尼平苷是栀子利胆的有效成分〔5〕。本研究同时观察京尼平苷和西红花苷对大鼠胆汁分泌量的影响，以确定栀子利胆的有效成分，并考察有效成分对胆汁成分的影响，初步探讨其利胆的作用机制。
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1 材料
京尼平苷和西红花苷(从江苏省药材公司购得的同一批栀子生药中提得，含量分别为54.8 %和56.3 %)；去氢胆酸片剂(0.25 g/片，上海黄河利亚制药有限公司，批号970101)。SD大鼠，雄性，体重250 ～ 300 g，由本校动物室提供。
2 方法
2.1 胆汁的收集及流量测定：大鼠60只，随机分为6组，每组10只：生理盐水组，去氢胆酸组50 mg/kg，京尼平苷50和100 mg/kg组，西红花苷50和100 mg/kg组。实验前12 h禁食不禁水。乌拉坦1 g/kg ip麻醉，胆管插管，将胆汁引流于1 mL注射器中，注意避光。待稳定20 min后，先收集30 min胆汁，然后各组大鼠分别由十二指肠给予相应药物1 mL/100 g，阴性对照组给予等容量生理盐水。给药后每隔30 min收集胆汁1次，共4次，记录胆汁流量，计算给药后胆汁流量增加的百分率，并测定胆汁成分。
, 百拇医药
2.2 胆汁成分的测定：胆红素、胆固醇、Ca2+和HCO3含量测定根据文献方法〔6〕，胆汁酸含量测定采用洪南康法〔7〕。
3 结果
3.1 京尼平苷和西红花苷对大鼠胆汁分泌的影响：见表1。京尼平苷50和100 mg/kg和去氢胆酸50 mg/kg组给药后各时间点(0.5，1.0，1.5，2.0 h)胆汁流量增加的百分率与生理盐水组比较均有非常显著的提高(P<0.01)。其中，京尼平苷100 mg/kg组给药后胆汁流量增加迅速，0.5 h即达高峰；50 mg/kg组利胆作用稍缓慢，1 h后达高峰。西红花苷两个剂量组(50和100 mg/kg)给药后的胆汁流量均降低，100 mg/kg组给药1.0，1.5和2.0 h后的胆汁流量反而显著性减少(P<0.05)。
表1 京尼平苷和西红花苷对大鼠胆汁分泌的影响(n＝10，
±s) 组别, http://www.100md.com
剂量
(mg/kg)
胆汁增加率(%)
0.5 h
1.0 h
1.5 h
2.0 h
生理盐水
-
-3.2±12.4
-3.4±8.3
-6.7±6.9
-12.1±12.0
, http://www.100md.com
京尼平苷
50
26.0±12.9**
45.6±20.0**
23.1±6.4**
22.7±11.7**
100
47.8±16.4**△
41.4±22.2**
23.7±9.7**
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16.4±7.6**
西红花苷
50
-5.7±9.1
-0.5±6.9
-9.6±4.5
-17.1±4.4
100
-8.5±17.4
-15.7±9.6*
-21.3±10.8*
, http://www.100md.com
-23.8±10.0*
去氢胆酸
50
48.9±14.1**
49.6±25.1**
21.4±8.2**
18.1±12.2**
与生理盐水组相比：*P<0.05 **P<0.01；与50 mg/kg京尼平苷组比较：△P<0.013.2 京尼平苷对大鼠胆汁成分的影响：京尼平苷50 mg/kg组，去氢胆酸50 mg/kg组与生理盐水组相比较，胆汁中胆固醇含量均明显降低(P<0.05)，100 mg/kg京尼平苷组降低更明显(P<0.01)，HCO3-含量3组均显著不同程度升高(P<0.05)(表2)。胆红素、胆汁酸和Ca2+含量无明显变化(表3)。
, 百拇医药
表2 京尼平苷对大鼠胆汁中胆固醇和HCO3-含量的影响(n＝10,
±s) 组别剂量
(mg/kg)
胆固醇(μmol/mL)
〔HCO3-〕(mmol/L)
给药前
给药后
减少率(%)
给药前
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给药后
增加率(%)
生理盐水
-
7.61±1.02
6.90±1.22
8.42±6.14
54.3±3.2
53.1±3.4
-1.87±7.20
去氢胆酸
50
, http://www.100md.com
7.04±0.83
5.50±1.53
21.50±9.91*
54.3±3.1
57.1±4.1
7.38±6.71*
京尼平苷
50
8.78±0.95
6.59±1.11
21.92±14.05*
, 百拇医药
48.1±8.1
54.3±7.8
13.71±6.12**
100
7.92±2.03
5.29±1.95
33.17±9.54**
48.3±6.2
51.8±6.6
7.37±5.97*
与生理盐水组比较：*P<0.05 **P<0.01表3 京尼平苷对大鼠胆汁中胆红素、胆汁酸和Ca2+含量的影响(n＝10,
±s), 百拇医药
组别
剂量
(mg/kg)
胆红素(mg/mL)
胆汁酸(μg/mL)
Ca2+(mg/mL)
给药前
给药后
给药前
给药后
给药前
给药后
, 百拇医药 生理盐水
-
4.4±1.1
3.6±1.2
0.163±0.007
0.160±0.007
1.86±0.24
1.78±0.30
去氢胆酸
50
5.1±2.0
4.1±2.0
, 百拇医药
0.159±0.008
0.161±0.005
1.96±0.39
1.78±0.29
京尼平苷
50
5.0±1.5
4.3±1.4
0.169±0.011
0.169±0.008
2.05±0.14
1.95±0.27
, 百拇医药
100
4.3±0.7
3.8±0.7
0.166±0.006
0.166±0.006
2.14±0.15
2.04±0.29
4 讨论
实验中所用的京尼平苷和西红花苷为本室从中药栀子中提取而得，经薄层鉴定和HPLC测定，京尼平苷中不含西红花苷，西红花苷中也不含京尼平苷，从实验结果可见西红花苷提取物在高、低剂量组均不具有利胆作用，相反高剂量组抑制胆汁分泌，说明西红花苷没有利胆作用。低剂量的京尼平苷有显著的利胆效应，1 h达到利胆峰值，高剂量作用更强更快(在0.5 h高剂量组与低剂量组比较P<0.01)，Takeda和Masahori报道，京尼平苷是通过其水解产物京尼平起利胆作用的〔8，9〕，这与本实验中观察到的高、低剂量组的京尼平苷表现出近似量效和时效关系是一致的。综上所述，京尼平苷具有利胆作用。本研究表明西红花苷不是栀子利胆的有效成分，因此《中药大辞典》记载西红花苷和西红花酸有利胆作用值得商榷。
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胆汁是重要的消化液，肌体内一些大分子及脂类等代谢产物需经肝脏处理后，通过胆汁排出体外；另一方面胆石的研成及其防治亦与胆汁成分的变化密切相关。胆结石包括胆固醇结石和胆色素结石，胆固醇结石的形成与胆固醇过饿和、胆汁蛋白异常、胆囊中胆汁郁积及一些未阐明的因素有关；胆色素结石的形成是胆汁中胆红素钙盐过饿和引起的，胆红素沉淀与钙盐相互作用形成难溶性钙盐和高分子聚合物。本实验表明十二指肠给予京尼平苷后，大鼠胆汁中的胆固醇含量明显降低，胆红素、胆汁酸和Ca2+含量无明显变化。这提示京尼平苷可阻止胆固醇结石的形成，但对胆色素结石可能无效。
作者简介：钱之玉，1965年毕业于中国药科大学药学专业，现任中国药科大学药学院药理
教研室主任、教授、博士生导师.自八十年代初完成水飞蓟宾注射剂研制后，又
从栀子中提取西红花总苷并制成片剂一脉络清片[新药<中药>二类]即将投产
, http://www.100md.com
上市.长期从事药理学基础和应用研究，先后在国内外杂志上发表论文40余篇；
申请国家发明专利1项.
参考文献
1 阴健，等.中药现代研究与临床应用.北京：学苑出版社，1993：471
2 江苏新医学院编.中药大辞典.下册.上海：上海科学技术出版社，1977：1984
3 Takeda Y, et al. Chem Pharm Bull, 1976, 24(11):2644
4 Ineuye H, et al. Phytochemistry, 1974,13(10):2219
5 郑若玄，等.中国中西医结合杂志，1985，5(6)：356
6 陈奇，等.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993：451
7 洪南康，等.上海医学，1983，6(1)：35
8 Takeda S, et al. J Pharm Dyn, 1981,4:724
9 Masahori M, et al. Planta Med, 1988,54:556
收稿日期：1999-06-11, 百拇医药