BB型肌酸激酶作为小细胞肺癌标志物的评价
作者：韩一平 刘燕燕 李平升 张世明 刘忠令 郭 健 秦叔逵
单位：第二军医大学长海医院呼吸内科，上海，200433；秦叔逵 解放军第81医院肿瘤科
关键词：肺肿瘤；肺癌；小细胞；肌酸激酶
第二军医大学学报991244 小细胞肺癌(SCLC)是肺癌中恶性程度最高的一种组织学类型，具有分泌某些多肽、激素、酶类，如神经原特异性烯醇化酶(NSE)等物质的神经内分泌细胞特征。近10余年的研究表明，SCLC具有过量BB型肌酸激酶(CK-BB)的表达，血清学诊断阳性率达32%～80%，并且其升高水平与肿瘤负荷大小、有无转移或复发，以及预后等因素密切相关，是SCLC诊断、鉴别诊断、病情判断和疗效评价的较可靠指标。为此，我们采用ELISA法检测了 SCLC患者血清CK-BB水平，并和另一肿瘤标志物NSE进行对比研究，旨在评价CK-BB作为SCLC生物学标志物的临床诊断价值。
, 百拇医药
1 资料和方法
1.1 检测对象 (1)健康对照组(NC)50例，年龄22～81岁；(2)肺癌组120例，年龄25～79岁，均为病理学或细胞学诊断证实；其中SCLC 46例(局限期6例，广泛期40例)，非小细胞肺癌(NSCLC)74例(鳞癌37例，腺癌37例)；(3)良性肺部疾病组(BPD)40例(肺炎、支气管扩张等)，年龄20～75岁。
1.2 方法
1.2.1 血清CK-BB检测 采用双抗体夹心ELISA法。
1.2.2 血清NSE检测 采用BAS-ELISA法测定[1]。
1.2.3 兔抗人CK-BB抗血清制备 抗原CK-BB从人脑组织中提纯获得。脑组织匀浆经50%～70%乙醇分级沉淀后，过2次DEAE-Sephadex A-50层析柱层析，最终得到电泳纯CK-BB。经超滤浓缩，分装后-70℃保存。抗血清制备按常规方法免疫新西兰雄兔(由第二军医大学实验动物中心提供)，3～4个月后用双向免疫扩散试验鉴定抗体效价。颈动脉放血分离血清，免疫学性质分析表明，免疫获得的兔抗人CK-BB抗血清与脑内其他杂蛋白无免疫交叉反应，特异性较高。
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2 结果
2.1 各组血清CK-BB和NSE水平 血清CK-BB、NSE水平在BPD组和NC组间无差异(P>0.05)， SCLC组显著高于NC、BPD和NSCLC组(P<0.01)。以健康人平均水平加上两个标准差作为CK-BB、NSE正常值上限(17 μg/L、20 μg/L)，SCLC组 CK-BB和NSE的阳性率分别为71.7%和 80.4%；NSCLC组分别为12.2%，10.8%；BPD组均为7.5%(表1)。
表1 各组血清CK-BB、NSE水平和阳性率
[
±s，ρB/μg.L-1,(%)]
例数
, http://www.100md.com
血清水平(ρB/μg.L-1)
阳性率(%，n)
CK-BB
NSE
CK-BB
NSE
SCLC
46
33.6±9.9
32.9±9.5
71.7(37)
80.4(37)
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NSCLC
74
14.8±4.9**
15.0±5.1**
12.2(9)
10.8(8)
鳞癌
37
15.2±5.2**
16.4±5.9**
16.2(6)
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18.8(7)
腺癌
37
14.2±4.3**
13.7±4.6**
8.1(3)
2.7(1)
BPD
40
11.4±4.3**
12.2±5.2**
, 百拇医药
7.5(3)
7.5(3)
NC
50
10.6±3.4**
9.8±5.4**
SCLC：小细胞肺癌；NSCLC：非小细胞肺癌；BPD：良性肺部疾病；NC：健康对照；**P<0.01与SCLC组比较
2.2 血清CK-BB、NSE与SCLC转移数目的关系 伴1个以上转移灶的SCLC患者，血清CK-BB、NSE阳性检出率分别为57.1%(8/14)和78.6%(11/14)，而伴2个以上转移灶者阳性检出率均为100%(26/26)。无转移SCLC患者血清CK-BB无1例异常升高，伴有1个以上转移灶的血清CK-BB为(26.4±8.9) μg/L，伴有2个以上转移灶的血清CK-BB达(43.3±10.1) μg/L (P<0.05)。但血清CK-BB、NSE升高并不能预示肿瘤转移的特殊部位。
, 百拇医药
2.3 SCLC组治疗前、后血清CK-BB、NSE变化 对20例SCLC患者治疗前、后血清CK-BB、NSE水平进行检测，未经治疗者均为阳性。经1个疗程以上化疗后病情缓解(原肺癌肿块明显缩小或消失)，血清CK-BB、NSE水平下降，其中降至正常范围者CK-BB有17例(85%)，NSE有18例(90%)。在随访1年中，8例患者病情复发，血清CK-BB、NSE再度升高者分别为6/8例和8/8例。
2.4 不同组织学类型肺癌血清CK-BB、NSE水平 各种肺癌中以SCLC患者血清CK-BB、NSE水平和阳性率最高，与鳞癌、腺癌相比差异非常显著(P<0.01，表1)。
2.5 血清CK-BB、NSE在SCLC中联合检测结果 CK-BB在SCLC中阳性检出率为71.7%(表1)，同时检测NSE，发现除其中1例为阴性外，均与CK-BB变化呈平行关系，即联合检测CK-BB和NSE，并把其中任何一项有异常者诊断为阳性，其诊断阳性率为82.6%(38/46)，特异性为7.8%，诊断符合率为85.8%。
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3 讨论
流行病学调查表明肺癌发病率和死亡率呈逐年上升趋势，已占男性各种致死原因的首位。SCLC又是预后最差者，因此，如何早期诊断SCLC一直是不少学者潜心研究的热点。近10余年来的研究表明，在神经内分泌细胞肿瘤中发现的CK-BB、NSE是SCLC有用的标志物[2，3]。本实验通过ELISA法测定肺癌患者血清CK-BB水平，结果71.7% SCLC患者血清CK-BB明显升高，而其他良恶性肺疾病各组最高仅12.2 %，和周建等[4]报道一致。所有CK-BB阳性病例均为广泛期患者，故CK-BB不足以成为SCLC早期诊断的灵敏指标。血清CK-BB水平与肿瘤负荷大小有关，随着转移数目的增加而呈进行性递增。无转移SCLC患者血清CK-BB无异常升高，伴有1个以上转移灶的血清CK-BB为(26.4±8.9) μg/L，伴有2个以上转移灶的血清CK-BB达(43.3±10.1) μg/L,反映出与病情轻、重、有无转移密切相关。本研究还提示血清CK-BB升降与治疗效果基本一致。血清CK-BB升高的SCLC患者经治疗(化疗)病情缓解时，血清CK-BB水平下降,当病情复发时,CK-BB水平再度升高，这对临床判断疗效和指导治疗有一定价值[5]。但和NSE相比，其敏感性、特异性、诊断符合率均未显出优越性。有文献指出，血清CK-BB水平与SCLC患者生存时间呈明显负相关，是判断SCLC患者预后的有用指标[6]。以上结果表明，血清CK-BB的检测有助于SCLC的诊断、鉴别诊断、病情判断和疗效监测。联合检测血清NSE是提高SCLC诊断灵敏度和准确性的有效途径之一。
, 百拇医药
中图分类号 R 734.2 文章编号：0258-879X(1999)12-1046-03 文献标识码：B
作者简介：韩一平，女，1961年4月生，硕士，副教授，硕士生导师
参考文献
1 韩一平，李平升，秦叔逵. 血清NSE的ELISA检测法及临床意义[J]. 中国实验临床免疫学杂志，1994，6(5):24
2 Niklinski J, Furman M, Palynycako Z, et al. Carcinoembryonic antigen、 neuron-specific enolase and creatine kinase-BB as tumour markers for carcinoma of the lung[J]. Neoplasma， 1991，38(6): 645
, 百拇医药
3 Ariyoshi Y, Kato K, Ishiguro Y, et al. Evalution of serum neuron-specific enolase as a tumour marker for carcinoma of lung[J]. Gann，1983，74(2):219
4 周 建，熊 新.血清BB型肌酸激酶和神经特异性烯醇化酶在SCLC 中的临床意义[J].华西医科大学学报，1995,26(1):90
5 Jaques G, Belper G, Holle R, et al. Prognostic value of pretreatment carcinoembryonic antigen、neuron-specific enolase and creatinase-BB levels in sera of patients with small cell lung cancer[J]. Cancer， 1988，62(1): 125
6 Bork E, Hansen M, Urdal P, et al. Early detection of responsein small cell bronchogenic carcinoma by changes in serum concentrations of creatine kinase，neuron-specific enolase，calcitonin，ACTH，serotonin and gastrin releasing peptide[J]. Eur J Cancer Clin Oncol， 1988，24(6): 1033
(1999-05-18收稿，1999-10-15修回), 百拇医药
单位：第二军医大学长海医院呼吸内科，上海，200433；秦叔逵 解放军第81医院肿瘤科
关键词：肺肿瘤；肺癌；小细胞；肌酸激酶
第二军医大学学报991244 小细胞肺癌(SCLC)是肺癌中恶性程度最高的一种组织学类型，具有分泌某些多肽、激素、酶类，如神经原特异性烯醇化酶(NSE)等物质的神经内分泌细胞特征。近10余年的研究表明，SCLC具有过量BB型肌酸激酶(CK-BB)的表达，血清学诊断阳性率达32%～80%，并且其升高水平与肿瘤负荷大小、有无转移或复发，以及预后等因素密切相关，是SCLC诊断、鉴别诊断、病情判断和疗效评价的较可靠指标。为此，我们采用ELISA法检测了 SCLC患者血清CK-BB水平，并和另一肿瘤标志物NSE进行对比研究，旨在评价CK-BB作为SCLC生物学标志物的临床诊断价值。
, 百拇医药
1 资料和方法
1.1 检测对象 (1)健康对照组(NC)50例，年龄22～81岁；(2)肺癌组120例，年龄25～79岁，均为病理学或细胞学诊断证实；其中SCLC 46例(局限期6例，广泛期40例)，非小细胞肺癌(NSCLC)74例(鳞癌37例，腺癌37例)；(3)良性肺部疾病组(BPD)40例(肺炎、支气管扩张等)，年龄20～75岁。
1.2 方法
1.2.1 血清CK-BB检测 采用双抗体夹心ELISA法。
1.2.2 血清NSE检测 采用BAS-ELISA法测定[1]。
1.2.3 兔抗人CK-BB抗血清制备 抗原CK-BB从人脑组织中提纯获得。脑组织匀浆经50%～70%乙醇分级沉淀后，过2次DEAE-Sephadex A-50层析柱层析，最终得到电泳纯CK-BB。经超滤浓缩，分装后-70℃保存。抗血清制备按常规方法免疫新西兰雄兔(由第二军医大学实验动物中心提供)，3～4个月后用双向免疫扩散试验鉴定抗体效价。颈动脉放血分离血清，免疫学性质分析表明，免疫获得的兔抗人CK-BB抗血清与脑内其他杂蛋白无免疫交叉反应，特异性较高。
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2 结果
2.1 各组血清CK-BB和NSE水平 血清CK-BB、NSE水平在BPD组和NC组间无差异(P>0.05)， SCLC组显著高于NC、BPD和NSCLC组(P<0.01)。以健康人平均水平加上两个标准差作为CK-BB、NSE正常值上限(17 μg/L、20 μg/L)，SCLC组 CK-BB和NSE的阳性率分别为71.7%和 80.4%；NSCLC组分别为12.2%，10.8%；BPD组均为7.5%(表1)。
表1 各组血清CK-BB、NSE水平和阳性率
[
±s，ρB/μg.L-1,(%)]例数
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血清水平(ρB/μg.L-1)
阳性率(%，n)
CK-BB
NSE
CK-BB
NSE
SCLC
46
33.6±9.9
32.9±9.5
71.7(37)
80.4(37)
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NSCLC
74
14.8±4.9**
15.0±5.1**
12.2(9)
10.8(8)
鳞癌
37
15.2±5.2**
16.4±5.9**
16.2(6)
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18.8(7)
腺癌
37
14.2±4.3**
13.7±4.6**
8.1(3)
2.7(1)
BPD
40
11.4±4.3**
12.2±5.2**
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7.5(3)
7.5(3)
NC
50
10.6±3.4**
9.8±5.4**
SCLC：小细胞肺癌；NSCLC：非小细胞肺癌；BPD：良性肺部疾病；NC：健康对照；**P<0.01与SCLC组比较
2.2 血清CK-BB、NSE与SCLC转移数目的关系 伴1个以上转移灶的SCLC患者，血清CK-BB、NSE阳性检出率分别为57.1%(8/14)和78.6%(11/14)，而伴2个以上转移灶者阳性检出率均为100%(26/26)。无转移SCLC患者血清CK-BB无1例异常升高，伴有1个以上转移灶的血清CK-BB为(26.4±8.9) μg/L，伴有2个以上转移灶的血清CK-BB达(43.3±10.1) μg/L (P<0.05)。但血清CK-BB、NSE升高并不能预示肿瘤转移的特殊部位。
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2.3 SCLC组治疗前、后血清CK-BB、NSE变化 对20例SCLC患者治疗前、后血清CK-BB、NSE水平进行检测，未经治疗者均为阳性。经1个疗程以上化疗后病情缓解(原肺癌肿块明显缩小或消失)，血清CK-BB、NSE水平下降，其中降至正常范围者CK-BB有17例(85%)，NSE有18例(90%)。在随访1年中，8例患者病情复发，血清CK-BB、NSE再度升高者分别为6/8例和8/8例。
2.4 不同组织学类型肺癌血清CK-BB、NSE水平 各种肺癌中以SCLC患者血清CK-BB、NSE水平和阳性率最高，与鳞癌、腺癌相比差异非常显著(P<0.01，表1)。
2.5 血清CK-BB、NSE在SCLC中联合检测结果 CK-BB在SCLC中阳性检出率为71.7%(表1)，同时检测NSE，发现除其中1例为阴性外，均与CK-BB变化呈平行关系，即联合检测CK-BB和NSE，并把其中任何一项有异常者诊断为阳性，其诊断阳性率为82.6%(38/46)，特异性为7.8%，诊断符合率为85.8%。
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3 讨论
流行病学调查表明肺癌发病率和死亡率呈逐年上升趋势，已占男性各种致死原因的首位。SCLC又是预后最差者，因此，如何早期诊断SCLC一直是不少学者潜心研究的热点。近10余年来的研究表明，在神经内分泌细胞肿瘤中发现的CK-BB、NSE是SCLC有用的标志物[2，3]。本实验通过ELISA法测定肺癌患者血清CK-BB水平，结果71.7% SCLC患者血清CK-BB明显升高，而其他良恶性肺疾病各组最高仅12.2 %，和周建等[4]报道一致。所有CK-BB阳性病例均为广泛期患者，故CK-BB不足以成为SCLC早期诊断的灵敏指标。血清CK-BB水平与肿瘤负荷大小有关，随着转移数目的增加而呈进行性递增。无转移SCLC患者血清CK-BB无异常升高，伴有1个以上转移灶的血清CK-BB为(26.4±8.9) μg/L，伴有2个以上转移灶的血清CK-BB达(43.3±10.1) μg/L,反映出与病情轻、重、有无转移密切相关。本研究还提示血清CK-BB升降与治疗效果基本一致。血清CK-BB升高的SCLC患者经治疗(化疗)病情缓解时，血清CK-BB水平下降,当病情复发时,CK-BB水平再度升高，这对临床判断疗效和指导治疗有一定价值[5]。但和NSE相比，其敏感性、特异性、诊断符合率均未显出优越性。有文献指出，血清CK-BB水平与SCLC患者生存时间呈明显负相关，是判断SCLC患者预后的有用指标[6]。以上结果表明，血清CK-BB的检测有助于SCLC的诊断、鉴别诊断、病情判断和疗效监测。联合检测血清NSE是提高SCLC诊断灵敏度和准确性的有效途径之一。
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中图分类号 R 734.2 文章编号：0258-879X(1999)12-1046-03 文献标识码：B
作者简介：韩一平，女，1961年4月生，硕士，副教授，硕士生导师
参考文献
1 韩一平，李平升，秦叔逵. 血清NSE的ELISA检测法及临床意义[J]. 中国实验临床免疫学杂志，1994，6(5):24
2 Niklinski J, Furman M, Palynycako Z, et al. Carcinoembryonic antigen、 neuron-specific enolase and creatine kinase-BB as tumour markers for carcinoma of the lung[J]. Neoplasma， 1991，38(6): 645
, 百拇医药
3 Ariyoshi Y, Kato K, Ishiguro Y, et al. Evalution of serum neuron-specific enolase as a tumour marker for carcinoma of lung[J]. Gann，1983，74(2):219
4 周 建，熊 新.血清BB型肌酸激酶和神经特异性烯醇化酶在SCLC 中的临床意义[J].华西医科大学学报，1995,26(1):90
5 Jaques G, Belper G, Holle R, et al. Prognostic value of pretreatment carcinoembryonic antigen、neuron-specific enolase and creatinase-BB levels in sera of patients with small cell lung cancer[J]. Cancer， 1988，62(1): 125
6 Bork E, Hansen M, Urdal P, et al. Early detection of responsein small cell bronchogenic carcinoma by changes in serum concentrations of creatine kinase，neuron-specific enolase，calcitonin，ACTH，serotonin and gastrin releasing peptide[J]. Eur J Cancer Clin Oncol， 1988，24(6): 1033
(1999-05-18收稿，1999-10-15修回), 百拇医药