聚合酶链反应诊断婴儿肝炎综合征巨细胞病毒感染
作者：赵萍 张伟忠
单位：广东惠州市中心人民医院儿科，广东 惠州 516001
关键词：聚合酶链反应；巨细胞病毒；婴儿肝炎综合征；酶联免疫吸附试验
宁夏医学杂志/991226 【摘要】 采用PCR及酶联免疫吸附试验(ELISA)，对68例婴儿肝炎综合征患儿进行晨尿CMV-DNA和血清CMV-IgM测定，并对其喂养方法进行调查。结果68例中CMV-DNA阳性25例，CMV-IgM抗体阳性16例，两种检测方法均为阳性10例；CMV肝炎患儿中纯母乳喂养率52%，人工喂养28.6%，混合喂养27.3%。提示，PCR诊断CMV感染具有很高的特异性，且敏感、方便、快速，可推广使用；CMV感染在病毒所致的婴儿肝炎综合征中占首位；虽然母乳喂养是CMV感染的途径之一，但围产期感染的致病率低，母乳仍为婴儿最佳食品。
【中图分类号】 R723.19 【文献标识码】 B
, http://www.100md.com
巨细胞病毒(CMV)感染在我国儿童中相当普遍，多发生在婴儿时期，而肝脏又是婴儿期CMV感激的重要靶器官之一。我们应用聚合酶链反应(PCR)检测68例婴儿肝炎综合征患儿尿中CMV-DNA特异片段，现报告如下。
1 对象与方法
1.1 病人来源：1995年以来我科收治婴儿肝炎综合征患儿68例，其中28天～30天3例，～60天64例，>60天1例。均具有黄疸、肝脾肿大、肝功能异常、HBsAg(-)，符合婴儿肝炎综合征的诊断标准[1]。单纯母乳喂养50例，人工喂养7例，混合喂养11例。
1.2 诊断标准：按全国小儿巨细胞病毒感染学术会议拟定的巨细胞病毒感染诊断试行标准[2]。实验室检查检出巨细胞病毒DNA特异片段或IgM抗体。
1.3 检测方法
, 百拇医药
1.3.1 聚合酶链反应(PCR)：采用中山医科大学达安基因诊断中心提供的试剂和方法，取晨尿1.5ml离心、沉淀、扩增、电泳，最后在紫外检测仪上观察，若在244碱基处出现橙黄色条带为HCMV阳性。为排除假阳性，严格遵守操作规则，所用试管、吸嘴均一次性使用，每组检测均设阴性、阳性对照。
1.3.2 血清CMV-IgM抗体测定：待检血清为患儿入院时采取，先用乳胶凝集试验排除类风湿因子，以免产生假阳性，然后用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法测IgM抗体。采用解放军302医院病毒研究室制备的人CMV-IgM诊断盒，IgM抗体效价>1：10为阳性。
2 结果
2.1 检测结果：对68例婴肝患儿同时进行晨尿CMV-DNA和血清CMV-IgM抗体测定。其中CMV-DNA阳性25例，阳性率为36.8%；血清CMV-IgM抗体测定，类风湿因子乳胶凝集试验结果全部阴性，CMV-IgM抗体阳性16例，阳性率为23.5%；其中两种检测方法均为阳性10例。共有31例证实有CMV感染。
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2.2 喂养方式与CMV检出关系(见附表)
附表 喂养方式与CMV感染检出率的关系
n
CMV(+)
CMV(-)
n
%
n
%
母乳喂养
50
26
52.0
, 百拇医药
24
48.0
人工喂养
7
2
28.6
5
71.4
混合喂养
11
3
27.3
8
, http://www.100md.com 72.7
3 讨论
人类巨细胞病毒(HCMV)属人疱疹病毒属β亚群，具有高度种属特异 性和潜伏—活化的特性[3]。CMV侵入人体后即可引起产毒性感染，出现临床症状，又可以潜伏的形式存在，在某种情况下潜伏病毒被激活，导致病毒感染。本组31例均为症状性感染患儿，具有黄疸、肝脾肿大、肝功能异常，尿CMV-DNA阳性和/或CMV-IgM阳性共31例，可确诊为CMV肝炎，占全部婴肝患儿的45.6%。故在由病毒引起的婴肝患儿中CMV感染占首位。
目前已有多种检测方法可证明CMV感染，但仍以用ELISA法检测血清中抗CMV-IgM抗体和用PCR检测尿液中CMV-DNA较为常用，尤其是PCR技术快速、敏感、特异性更高[4]，且取材方便，容易推广。用这两种方法的检测结果表明，PCR的敏感度高于ELiSA法，故血清抗CMV-IgM抗体阴性不能除外CMV感染。
, http://www.100md.com
CMV感染在我国相当普遍，育龄妇女血清抗CMV-IgG抗体阳性率高达96%[5]，故婴儿CMV感染大多来自再发感染的母亲。本组因家庭经济状况及其它客观因素，未能对全部患儿的母亲进行血清CMV-IgM及尿CMV-DNA检测。因此患儿母亲CMV感染率无法统计，且本组患儿均是出生28天以后进行有关CMV感染方面的检测，所以亦无法明确是先天性感染或围产期感染。从本组的喂养方式来看，CMV感染者纯母乳喂养率为52%，混合喂养率为27.3%，人工喂养率为28.6%，三者无显著性差异。虽然母乳喂养是CMV感染的途径之一，但围产期感染的致病率低，则母乳仍为婴儿最佳食物。
参考文献
[1]病毒性肝炎防治方案-关于婴儿时期病毒性肝炎[J].中华儿科杂志，1985，28(4)：276
[2]董永绥.巨细胞病毒感染诊断试行标准[J].中华儿科杂志，1995，33(1)：8
[3]方峰.巨细胞病毒性肝炎[J].实用儿科临床杂志，1998，13(4)：234
[4]刘湘国.聚合酶链反应快速诊断婴儿肝炎综合征患儿巨细胞病毒感染[J].中华传染病杂志，1993，4：207
[5]方峰，董永绥，魏晴，等.巨细胞病毒所致婴儿肝脏损害的前瞻性研究[J].中华儿科杂志，1995，33(6)：350
(收稿：1999—05—24), 百拇医药
单位：广东惠州市中心人民医院儿科，广东 惠州 516001
关键词：聚合酶链反应；巨细胞病毒；婴儿肝炎综合征；酶联免疫吸附试验
宁夏医学杂志/991226 【摘要】 采用PCR及酶联免疫吸附试验(ELISA)，对68例婴儿肝炎综合征患儿进行晨尿CMV-DNA和血清CMV-IgM测定，并对其喂养方法进行调查。结果68例中CMV-DNA阳性25例，CMV-IgM抗体阳性16例，两种检测方法均为阳性10例；CMV肝炎患儿中纯母乳喂养率52%，人工喂养28.6%，混合喂养27.3%。提示，PCR诊断CMV感染具有很高的特异性，且敏感、方便、快速，可推广使用；CMV感染在病毒所致的婴儿肝炎综合征中占首位；虽然母乳喂养是CMV感染的途径之一，但围产期感染的致病率低，母乳仍为婴儿最佳食品。
【中图分类号】 R723.19 【文献标识码】 B
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巨细胞病毒(CMV)感染在我国儿童中相当普遍，多发生在婴儿时期，而肝脏又是婴儿期CMV感激的重要靶器官之一。我们应用聚合酶链反应(PCR)检测68例婴儿肝炎综合征患儿尿中CMV-DNA特异片段，现报告如下。
1 对象与方法
1.1 病人来源：1995年以来我科收治婴儿肝炎综合征患儿68例，其中28天～30天3例，～60天64例，>60天1例。均具有黄疸、肝脾肿大、肝功能异常、HBsAg(-)，符合婴儿肝炎综合征的诊断标准[1]。单纯母乳喂养50例，人工喂养7例，混合喂养11例。
1.2 诊断标准：按全国小儿巨细胞病毒感染学术会议拟定的巨细胞病毒感染诊断试行标准[2]。实验室检查检出巨细胞病毒DNA特异片段或IgM抗体。
1.3 检测方法
, 百拇医药
1.3.1 聚合酶链反应(PCR)：采用中山医科大学达安基因诊断中心提供的试剂和方法，取晨尿1.5ml离心、沉淀、扩增、电泳，最后在紫外检测仪上观察，若在244碱基处出现橙黄色条带为HCMV阳性。为排除假阳性，严格遵守操作规则，所用试管、吸嘴均一次性使用，每组检测均设阴性、阳性对照。
1.3.2 血清CMV-IgM抗体测定：待检血清为患儿入院时采取，先用乳胶凝集试验排除类风湿因子，以免产生假阳性，然后用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法测IgM抗体。采用解放军302医院病毒研究室制备的人CMV-IgM诊断盒，IgM抗体效价>1：10为阳性。
2 结果
2.1 检测结果：对68例婴肝患儿同时进行晨尿CMV-DNA和血清CMV-IgM抗体测定。其中CMV-DNA阳性25例，阳性率为36.8%；血清CMV-IgM抗体测定，类风湿因子乳胶凝集试验结果全部阴性，CMV-IgM抗体阳性16例，阳性率为23.5%；其中两种检测方法均为阳性10例。共有31例证实有CMV感染。
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2.2 喂养方式与CMV检出关系(见附表)
附表 喂养方式与CMV感染检出率的关系
n
CMV(+)
CMV(-)
n
%
n
%
母乳喂养
50
26
52.0
, 百拇医药
24
48.0
人工喂养
7
2
28.6
5
71.4
混合喂养
11
3
27.3
8
, http://www.100md.com 72.7
3 讨论
人类巨细胞病毒(HCMV)属人疱疹病毒属β亚群，具有高度种属特异 性和潜伏—活化的特性[3]。CMV侵入人体后即可引起产毒性感染，出现临床症状，又可以潜伏的形式存在，在某种情况下潜伏病毒被激活，导致病毒感染。本组31例均为症状性感染患儿，具有黄疸、肝脾肿大、肝功能异常，尿CMV-DNA阳性和/或CMV-IgM阳性共31例，可确诊为CMV肝炎，占全部婴肝患儿的45.6%。故在由病毒引起的婴肝患儿中CMV感染占首位。
目前已有多种检测方法可证明CMV感染，但仍以用ELISA法检测血清中抗CMV-IgM抗体和用PCR检测尿液中CMV-DNA较为常用，尤其是PCR技术快速、敏感、特异性更高[4]，且取材方便，容易推广。用这两种方法的检测结果表明，PCR的敏感度高于ELiSA法，故血清抗CMV-IgM抗体阴性不能除外CMV感染。
, http://www.100md.com
CMV感染在我国相当普遍，育龄妇女血清抗CMV-IgG抗体阳性率高达96%[5]，故婴儿CMV感染大多来自再发感染的母亲。本组因家庭经济状况及其它客观因素，未能对全部患儿的母亲进行血清CMV-IgM及尿CMV-DNA检测。因此患儿母亲CMV感染率无法统计，且本组患儿均是出生28天以后进行有关CMV感染方面的检测，所以亦无法明确是先天性感染或围产期感染。从本组的喂养方式来看，CMV感染者纯母乳喂养率为52%，混合喂养率为27.3%，人工喂养率为28.6%，三者无显著性差异。虽然母乳喂养是CMV感染的途径之一，但围产期感染的致病率低，则母乳仍为婴儿最佳食物。
参考文献
[1]病毒性肝炎防治方案-关于婴儿时期病毒性肝炎[J].中华儿科杂志，1985，28(4)：276
[2]董永绥.巨细胞病毒感染诊断试行标准[J].中华儿科杂志，1995，33(1)：8
[3]方峰.巨细胞病毒性肝炎[J].实用儿科临床杂志，1998，13(4)：234
[4]刘湘国.聚合酶链反应快速诊断婴儿肝炎综合征患儿巨细胞病毒感染[J].中华传染病杂志，1993，4：207
[5]方峰，董永绥，魏晴，等.巨细胞病毒所致婴儿肝脏损害的前瞻性研究[J].中华儿科杂志，1995，33(6)：350
(收稿：1999—05—24), 百拇医药