肾脏病患者血、尿内皮素变化
作者：郑京 王智 阮诗玮 洪江淮 吴竟 丘余良
单位：作福建省人民医院，福建福州350004
关键词：肾脏病；血、尿内皮素
现代康复/991231
[摘要]目的：探讨血、尿内皮素在慢性肾炎中的作用。方法：检测正常人、慢性肾小球肾炎患者血内皮素(PET)和12h尿内皮素排泄量(UET)、内生肌酐清除率(Ccr)。结果：所有患者PET、UET水平均升高。UET与病理分级有相关性，PET与病理分级无相关性。结论：内皮素参与慢性肾小球肾炎进展，尿内皮素比血内皮素更能明确反映肾脏病理损害程度且能反映肾小管的损伤程度，是肾小管功能损害的一个指标。
[中图分类号]
[文献标识码]B
, 百拇医药
[文章编号]1007-5496(1999)12-1409-02
Changes of plasma endothelin and urinary excretion
rate of endothelin in patients of chronic glomerulonephritis
ZHENG Jing,WANG Zhi,YUAN Shi-wei,et al.
Fujian Province People's Hospital,Fujian 350004,China
[Abstract]Objective： To elucidate the effects on progressive renal disease of plasma endothelin(PET) and urinary excretion rate of endothelin in patients of chronic glomerulonephritis.Method： PET,UET/12 h creatinine clearance(Ccr) in 60 patients with chronic glomerulonephritis and in 30 normal persons were measured.Results： The level of PET and UET in all patients was markedly elevated.Relativity between UET and pathologic grading was found .Non-relativity
, 百拇医药
between PET and pathologic grading was found.Conclusion： Endothelin plays an important role in progressive renal disease.UET shows the degree of damage and changes of functions more clearly than PET. Besides,UET reflects the position of damage and is a sensitive marker of renal tubular damage.
[Key words]renal disease ;plasma and urinary endothelin
内皮素(ET)是目前已知的体内作用最强和作用时间最持久的缩血管物质。目前，人们关注较多的是循环中的ET，而对尿中ET研究颇少。有资料表明内皮素可在人体血浆及尿中检测到。为此，我们观察60例各种慢性肾脏疾病患者的血、尿ET，并检测内生肌酐清除率(Ccr),以探讨其含量的变化与慢性肾脏病的可能关系。
, 百拇医药
1 资料与方法
1.1 病例选择选择 本院1998～1999年5月的住院患者60例。根据原发病分为3组。慢性肾炎组33例，男12例，女21例；年龄14～54岁，平均(39.91±11.63)岁。其中28例经肾活检证实，IgA肾病18例，系膜增生性肾炎10例。肾病综合征组13例，男6例，女7例；年龄18～52岁，平均(32±11.26)岁，其中9例经肾活检证实，IgA肾病3例，膜性肾病2例，膜增生性肾炎3例，IgM肾病1例。慢性肾衰组14例，男6例，女8例；年龄15～69岁，平均(49.86±16.26)岁；原发病分别为高血压肾硬化1例，糖尿病肾病2例，系统性红斑狼疮3例，慢性肾炎8例。正常对照组30例，男18例，女12例，年龄23～61岁，平均(38.75±18.36)岁，均为本院健康体检者。
1.2 方法 按常规方法留取7PM～7AM12h尿液于容器中算尿总量，容器中加2ml冰醋酸，摇匀后取3ml送检，煮沸后-20℃低温冰箱保存待测。留尿日晨6时取空腹静脉血2ml，置于预冷的含有10%EDTA二钠30μl和40μl抑肽酶的试管中混匀，4℃离心2000转/min。离心10min,取上清液于-20℃保存。用放射免疫法测定，药盒由北京解放军总医院东亚免疫研究所提供，严格按试剂说明书操作。用苦味酸法测定血、尿肌酐、计算Ccr。并计算ET负荷=ET血浆浓度(PET)×Ccr，为近端肾小管ET的滤过负荷；ET丢失=ET尿浓度(UET)×尿流率，为每分钟尿液ET排泌量；差值=ET负荷-ET丢失，为反映肾小管重吸收和/或降解ET的功能。
, 百拇医药
1.3 系膜增生的病理组织分级将肾活检患者的肾小球系膜细胞增生程度分为4级[1]。Ⅰ级：肾小球形态基本正常，仅见轻度系膜基质增多或伴有局灶节段性系膜细胞轻度增生。Ⅱ级：局灶节段性系膜细胞中度增生或弥漫性系膜细胞轻度增生。Ⅲ级：弥漫性系膜细胞中度增生伴个别肾小球新月体形成。Ⅳ级：弥漫性系膜细胞重度增生伴轻多肾小球新月体形成。
1.4 统计方法所有结果均用均数±标准差表示，并对两样本的比较用t检验。
2 结果
从表1可以看出，各组病人PET均明显增多(P<0.01)，其中肾病综合征组最高。肾病综合征组与慢性肾衰组的UET比慢性肾炎组高(P<0.01)其中肾病综合征组最高，其ET负荷，ET丢失，其差值都最高。慢性肾衰组与肾病综合征组的ET丢失没有显著性差异(P<0.05)。从表2可以看出，慢性肾衰组PET最高，与病理Ⅳ级无显著性(P>0.05)。病理Ⅳ级的UET最高，与慢性肾衰组无显著性(P>0.05)。将病理分级与UET进行等级相关分析，P<0.01，有相关性。而PET与病理分级无相关性，P>0.05。
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3 讨论
内皮细胞是含成和分泌ET的主要组织细胞，血浆中ET不被分解，主要通过肾脏迅速清除，静注125I-ET的血浆半衰期仅2min，血中ET自由经肾小球滤过，其中绝大部分被近曲小管刷状缘中性内肽酶所分解。125I标记血浆中ET，尿中出现率甚低(0.27%～0.3%)[2]，Benigni等[3]和Berbinshi等[4]也发现类似结果，提示UET并非血管内皮细胞产生经循环由肾小球滤过获得，主要来自肾脏，反映肾内代谢率[2]。动物实验及临床研究表明肾小球内皮细胞，系膜细胞和肾小管上皮细胞具有合成ET的能力[4]，而且ET可促进系膜细胞的增生和细胞外基质的合成[5]。Benigni等[6]证实内皮素受体拮抗剂可显著减少慢性肾衰模型大鼠尿蛋白量，减轻肾小球损伤和保护肾功能。
本组资料表1可发现，所有患者PET增高(与正常对照组比，P<0.01)。肾病综合征组与慢性肾衰组的UET比慢性肾炎组高(P<0.01)，与余氏[7]报道一致。可能与各种炎症刺激、凝血等病理情况，以及各种细胞因子如IL-1，TNF等活性增强有关，它们刺激肾组织内多种细胞内皮素合成增多。但PE与各类型慢性肾脏疾病关系如何?我们设计了ET负荷(近端肾小管ET滤过负荷)，ET丢失(每分钟尿ET排泌量)，差值(反映肾小管重吸收和/或降解ET的功能)。A组(慢性肾衰组)虽然其PET增高，但ET负荷降低(D和B、C比，P<0.01)。尿中丢失增多(D与B比，P<0.01；D与C比，P>0.05)，差值最少，提示肾脏合成ET增加，差值的减少进一步说明经肾小管重吸收或降解ET功能减退。B级(肾病综合征组)ET负荷、差值均最高，但ET丢失(C与B比，P<0.01；C与D比，P<0.05)与慢性肾衰组无显著性差异，提示肾小管重吸收ET能力增加。C组(慢性肾炎组)，ET负荷、差值比慢性肾衰组高(B与D比，P<0.01)，而ET丢失比慢性肾衰组少(B与D比，P<0.01)，提示肾近曲小管重吸收或降解ET功能比慢性肾衰组强。从以上资料结果可看出，所有病人PET增高，提示可能存在肾外ET合成增加，UET能较客观反映患者肾脏功能的改变，并能反映肾小管的损伤状况。从表2可以看到，随着病理分级程度增高，PET、UET有增高趋势，慢性肾衰组PET最高，而UET病理Ⅳ级排出最多。对于慢性肾衰组，由于各种肾实质细胞的破坏，分泌内皮素的细胞遭到破坏，故UET排出减少。将Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级病理损害与PET、UET行等级相关分析，PET，P>0.05；UET，P<0.01。提示尿ET的排泌量与肾脏受损程度呈正相关(未发生肾功能不全时)，与国外报道相一致[6]。根据我们研究的结果，作者认为在所有慢性肾脏疾病患者均有内皮素合成增多，尿内皮素比血内皮素更能明确反映肾脏病理损害程度，且能反映肾小管的损伤程度，是肾小管功能损害的一个指标。尿内皮素的变化与肾损害有明显相关关系。但内皮素合成增加在肾脏疾患、肾功能减退中是作为致病因素，抑或是疾病进展的结果，尚有待进一步研究。
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表1 各类型肾脏病者PET、UET、ET负荷、ET丢失及差值水平的变化(
±s) 组别
例数
PET
(pg/ml)
UET
(ng/12h)
Ccr
(ml.min-1/73m2)
ET负荷
(ng/min)
, 百拇医药
ET丢失
(pg/ml)
差值
(ng/min)
A
14
32.14±16.62
B
13
69.4±32.07
14.76±10.16
85.51±12.91
, http://www.100md.com 5.83±2.77△
20.5±14.1
5.81±2.77△
C
10
126.83±73.43*
62.61±58.84*
84.74±6.51＃
13.4±9.51*
70.4±46.87*
, 百拇医药
8.99±4.99*＃
D
14
120.13±46.7△
32.25±21.76△
28.75±13.43△
3.56±1.66
44.79±30.22△
3.24±1.73
注：A:正常对照组;B:慢性肾炎组;C:肾病综合征组;D:慢性肾衰组
, http://www.100md.com
B比C，*P<0.01；B与D比，△P<0.01；C与D比，＃P<0.01
表2 系膜细胞增生病理分级与PET、UET的关系(±s) 病理
分级
例数
年龄(岁)
PET
(pg/ml)
UET(ng/12h)
Ⅱ
14
, http://www.100md.com
40.9±11.6
69.38±28.73
12.21±6.45
Ⅲ
13
37.8±10.2
71.47±40.91
17.84±13.17
Ⅳ
10
28.1±9.99
98.58±44.97
, 百拇医药
66.37±65.5*△
慢性肾衰组
14
49.9±16.3
120.13±46.7*
32.25±21.76*＃
注：慢性肾衰组和Ⅳ与Ⅱ比，*P<0.01;Ⅲ与Ⅳ比,△P<0.05;Ⅲ与慢性肾衰组比,＃P<0.05
作者简介：郑京(1964-)，男，主治医师。研究方向：肾脏疾病、狼疮性肾炎、糖尿病中西医结合治疗。
参考文献
, http://www.100md.com
[1]张明，郭慕依，张秀荣等.肾小球系膜增生机制的免疫组化研究[J].中华肾脏病杂志，1995，11(4)：208～210
[2] Anggard E,Harris EN,King DL,et al.The fate of radioiodi-nated endothelin-1 and endothelin- 3 in rats[J].J Cardio vasc Pharmacol,1989,(supple 5):S46
[3] Benigi A,Perico N,Gaspari F,et al .Increased renal en-dothelin production in rats with reduced renal mass[J].Am J Physiol ,1991,260(3):F311～ 339
[4] Kon V,Yoshioka T,Fogo A,et al.Glomerular action of en-dothelin in vivo[J].J Clin Invest ,1989,83:1 762
, 百拇医药
[5] Simonson MS,Wann S, Mene P,et al. Endothelin stimulates phospholipase C,Na/H exchange,fos expression,and mitogen-esis in rat mesanginal cells[J].J Clin Invest,1989,83:708
[6] Benigni A,Zoja C, Corno D,et al.A specific endothelin ubtype A receptor antagonist protects against injury in renal diseases progression[J].Kidney Int,1993,44:440
[7]余学清，李惠群，叶任高等.慢性肾脏疾病患者尿中内皮素变化及其临床意义[J].中华肾脏病杂志，1995，11(2)：91～93
[收稿日期]1999-10-5, 百拇医药
单位：作福建省人民医院，福建福州350004
关键词：肾脏病；血、尿内皮素
现代康复/991231
[摘要]目的：探讨血、尿内皮素在慢性肾炎中的作用。方法：检测正常人、慢性肾小球肾炎患者血内皮素(PET)和12h尿内皮素排泄量(UET)、内生肌酐清除率(Ccr)。结果：所有患者PET、UET水平均升高。UET与病理分级有相关性，PET与病理分级无相关性。结论：内皮素参与慢性肾小球肾炎进展，尿内皮素比血内皮素更能明确反映肾脏病理损害程度且能反映肾小管的损伤程度，是肾小管功能损害的一个指标。
[中图分类号]
[文献标识码]B
, 百拇医药
[文章编号]1007-5496(1999)12-1409-02
Changes of plasma endothelin and urinary excretion
rate of endothelin in patients of chronic glomerulonephritis
ZHENG Jing,WANG Zhi,YUAN Shi-wei,et al.
Fujian Province People's Hospital,Fujian 350004,China
[Abstract]Objective： To elucidate the effects on progressive renal disease of plasma endothelin(PET) and urinary excretion rate of endothelin in patients of chronic glomerulonephritis.Method： PET,UET/12 h creatinine clearance(Ccr) in 60 patients with chronic glomerulonephritis and in 30 normal persons were measured.Results： The level of PET and UET in all patients was markedly elevated.Relativity between UET and pathologic grading was found .Non-relativity
, 百拇医药
between PET and pathologic grading was found.Conclusion： Endothelin plays an important role in progressive renal disease.UET shows the degree of damage and changes of functions more clearly than PET. Besides,UET reflects the position of damage and is a sensitive marker of renal tubular damage.
[Key words]renal disease ;plasma and urinary endothelin
内皮素(ET)是目前已知的体内作用最强和作用时间最持久的缩血管物质。目前，人们关注较多的是循环中的ET，而对尿中ET研究颇少。有资料表明内皮素可在人体血浆及尿中检测到。为此，我们观察60例各种慢性肾脏疾病患者的血、尿ET，并检测内生肌酐清除率(Ccr),以探讨其含量的变化与慢性肾脏病的可能关系。
, 百拇医药
1 资料与方法
1.1 病例选择选择 本院1998～1999年5月的住院患者60例。根据原发病分为3组。慢性肾炎组33例，男12例，女21例；年龄14～54岁，平均(39.91±11.63)岁。其中28例经肾活检证实，IgA肾病18例，系膜增生性肾炎10例。肾病综合征组13例，男6例，女7例；年龄18～52岁，平均(32±11.26)岁，其中9例经肾活检证实，IgA肾病3例，膜性肾病2例，膜增生性肾炎3例，IgM肾病1例。慢性肾衰组14例，男6例，女8例；年龄15～69岁，平均(49.86±16.26)岁；原发病分别为高血压肾硬化1例，糖尿病肾病2例，系统性红斑狼疮3例，慢性肾炎8例。正常对照组30例，男18例，女12例，年龄23～61岁，平均(38.75±18.36)岁，均为本院健康体检者。
1.2 方法 按常规方法留取7PM～7AM12h尿液于容器中算尿总量，容器中加2ml冰醋酸，摇匀后取3ml送检，煮沸后-20℃低温冰箱保存待测。留尿日晨6时取空腹静脉血2ml，置于预冷的含有10%EDTA二钠30μl和40μl抑肽酶的试管中混匀，4℃离心2000转/min。离心10min,取上清液于-20℃保存。用放射免疫法测定，药盒由北京解放军总医院东亚免疫研究所提供，严格按试剂说明书操作。用苦味酸法测定血、尿肌酐、计算Ccr。并计算ET负荷=ET血浆浓度(PET)×Ccr，为近端肾小管ET的滤过负荷；ET丢失=ET尿浓度(UET)×尿流率，为每分钟尿液ET排泌量；差值=ET负荷-ET丢失，为反映肾小管重吸收和/或降解ET的功能。
, 百拇医药
1.3 系膜增生的病理组织分级将肾活检患者的肾小球系膜细胞增生程度分为4级[1]。Ⅰ级：肾小球形态基本正常，仅见轻度系膜基质增多或伴有局灶节段性系膜细胞轻度增生。Ⅱ级：局灶节段性系膜细胞中度增生或弥漫性系膜细胞轻度增生。Ⅲ级：弥漫性系膜细胞中度增生伴个别肾小球新月体形成。Ⅳ级：弥漫性系膜细胞重度增生伴轻多肾小球新月体形成。
1.4 统计方法所有结果均用均数±标准差表示，并对两样本的比较用t检验。
2 结果
从表1可以看出，各组病人PET均明显增多(P<0.01)，其中肾病综合征组最高。肾病综合征组与慢性肾衰组的UET比慢性肾炎组高(P<0.01)其中肾病综合征组最高，其ET负荷，ET丢失，其差值都最高。慢性肾衰组与肾病综合征组的ET丢失没有显著性差异(P<0.05)。从表2可以看出，慢性肾衰组PET最高，与病理Ⅳ级无显著性(P>0.05)。病理Ⅳ级的UET最高，与慢性肾衰组无显著性(P>0.05)。将病理分级与UET进行等级相关分析，P<0.01，有相关性。而PET与病理分级无相关性，P>0.05。
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3 讨论
内皮细胞是含成和分泌ET的主要组织细胞，血浆中ET不被分解，主要通过肾脏迅速清除，静注125I-ET的血浆半衰期仅2min，血中ET自由经肾小球滤过，其中绝大部分被近曲小管刷状缘中性内肽酶所分解。125I标记血浆中ET，尿中出现率甚低(0.27%～0.3%)[2]，Benigni等[3]和Berbinshi等[4]也发现类似结果，提示UET并非血管内皮细胞产生经循环由肾小球滤过获得，主要来自肾脏，反映肾内代谢率[2]。动物实验及临床研究表明肾小球内皮细胞，系膜细胞和肾小管上皮细胞具有合成ET的能力[4]，而且ET可促进系膜细胞的增生和细胞外基质的合成[5]。Benigni等[6]证实内皮素受体拮抗剂可显著减少慢性肾衰模型大鼠尿蛋白量，减轻肾小球损伤和保护肾功能。
本组资料表1可发现，所有患者PET增高(与正常对照组比，P<0.01)。肾病综合征组与慢性肾衰组的UET比慢性肾炎组高(P<0.01)，与余氏[7]报道一致。可能与各种炎症刺激、凝血等病理情况，以及各种细胞因子如IL-1，TNF等活性增强有关，它们刺激肾组织内多种细胞内皮素合成增多。但PE与各类型慢性肾脏疾病关系如何?我们设计了ET负荷(近端肾小管ET滤过负荷)，ET丢失(每分钟尿ET排泌量)，差值(反映肾小管重吸收和/或降解ET的功能)。A组(慢性肾衰组)虽然其PET增高，但ET负荷降低(D和B、C比，P<0.01)。尿中丢失增多(D与B比，P<0.01；D与C比，P>0.05)，差值最少，提示肾脏合成ET增加，差值的减少进一步说明经肾小管重吸收或降解ET功能减退。B级(肾病综合征组)ET负荷、差值均最高，但ET丢失(C与B比，P<0.01；C与D比，P<0.05)与慢性肾衰组无显著性差异，提示肾小管重吸收ET能力增加。C组(慢性肾炎组)，ET负荷、差值比慢性肾衰组高(B与D比，P<0.01)，而ET丢失比慢性肾衰组少(B与D比，P<0.01)，提示肾近曲小管重吸收或降解ET功能比慢性肾衰组强。从以上资料结果可看出，所有病人PET增高，提示可能存在肾外ET合成增加，UET能较客观反映患者肾脏功能的改变，并能反映肾小管的损伤状况。从表2可以看到，随着病理分级程度增高，PET、UET有增高趋势，慢性肾衰组PET最高，而UET病理Ⅳ级排出最多。对于慢性肾衰组，由于各种肾实质细胞的破坏，分泌内皮素的细胞遭到破坏，故UET排出减少。将Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级病理损害与PET、UET行等级相关分析，PET，P>0.05；UET，P<0.01。提示尿ET的排泌量与肾脏受损程度呈正相关(未发生肾功能不全时)，与国外报道相一致[6]。根据我们研究的结果，作者认为在所有慢性肾脏疾病患者均有内皮素合成增多，尿内皮素比血内皮素更能明确反映肾脏病理损害程度，且能反映肾小管的损伤程度，是肾小管功能损害的一个指标。尿内皮素的变化与肾损害有明显相关关系。但内皮素合成增加在肾脏疾患、肾功能减退中是作为致病因素，抑或是疾病进展的结果，尚有待进一步研究。
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表1 各类型肾脏病者PET、UET、ET负荷、ET丢失及差值水平的变化(
±s) 组别例数
PET
(pg/ml)
UET
(ng/12h)
Ccr
(ml.min-1/73m2)
ET负荷
(ng/min)
, 百拇医药
ET丢失
(pg/ml)
差值
(ng/min)
A
14
32.14±16.62
B
13
69.4±32.07
14.76±10.16
85.51±12.91
, http://www.100md.com 5.83±2.77△
20.5±14.1
5.81±2.77△
C
10
126.83±73.43*
62.61±58.84*
84.74±6.51＃
13.4±9.51*
70.4±46.87*
, 百拇医药
8.99±4.99*＃
D
14
120.13±46.7△
32.25±21.76△
28.75±13.43△
3.56±1.66
44.79±30.22△
3.24±1.73
注：A:正常对照组;B:慢性肾炎组;C:肾病综合征组;D:慢性肾衰组
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B比C，*P<0.01；B与D比，△P<0.01；C与D比，＃P<0.01
表2 系膜细胞增生病理分级与PET、UET的关系(
±s) 病理分级
例数
年龄(岁)
PET
(pg/ml)
UET(ng/12h)
Ⅱ
14
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40.9±11.6
69.38±28.73
12.21±6.45
Ⅲ
13
37.8±10.2
71.47±40.91
17.84±13.17
Ⅳ
10
28.1±9.99
98.58±44.97
, 百拇医药
66.37±65.5*△
慢性肾衰组
14
49.9±16.3
120.13±46.7*
32.25±21.76*＃
注：慢性肾衰组和Ⅳ与Ⅱ比，*P<0.01;Ⅲ与Ⅳ比,△P<0.05;Ⅲ与慢性肾衰组比,＃P<0.05
作者简介：郑京(1964-)，男，主治医师。研究方向：肾脏疾病、狼疮性肾炎、糖尿病中西医结合治疗。
参考文献
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[1]张明，郭慕依，张秀荣等.肾小球系膜增生机制的免疫组化研究[J].中华肾脏病杂志，1995，11(4)：208～210
[2] Anggard E,Harris EN,King DL,et al.The fate of radioiodi-nated endothelin-1 and endothelin- 3 in rats[J].J Cardio vasc Pharmacol,1989,(supple 5):S46
[3] Benigi A,Perico N,Gaspari F,et al .Increased renal en-dothelin production in rats with reduced renal mass[J].Am J Physiol ,1991,260(3):F311～ 339
[4] Kon V,Yoshioka T,Fogo A,et al.Glomerular action of en-dothelin in vivo[J].J Clin Invest ,1989,83:1 762
, 百拇医药
[5] Simonson MS,Wann S, Mene P,et al. Endothelin stimulates phospholipase C,Na/H exchange,fos expression,and mitogen-esis in rat mesanginal cells[J].J Clin Invest,1989,83:708
[6] Benigni A,Zoja C, Corno D,et al.A specific endothelin ubtype A receptor antagonist protects against injury in renal diseases progression[J].Kidney Int,1993,44:440
[7]余学清，李惠群，叶任高等.慢性肾脏疾病患者尿中内皮素变化及其临床意义[J].中华肾脏病杂志，1995，11(2)：91～93
[收稿日期]1999-10-5, 百拇医药