软组织肿瘤免疫组化诊断中常用抗体的特殊性及注意事项
作者：朱振龙 张钰 张荣 陈永军 魏守礼
单位：(河北医科大学病理学教研室，石家庄 050031)
关键词：软组织肿瘤；免疫组织化学；抗体；特殊性
临床与实验病理学杂志000120 中图分类号 R738.6 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(2000)01-0064-03
随着免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的不断深入和广泛应用，人们越来越多的发现所谓特异性标记物并非人们最初想的那么特异，而是出现了许多特殊性(或称异常表达)，并且这些特殊性在免疫组化结果分析中有着非常重要的意义，有必要对这些特殊性予以总结。笔者就软组织肿瘤免疫组化诊断中常用抗体的一些特殊性及注意事项简单介绍。
, http://www.100md.com 1 上皮性标记物
常用的有细胞角蛋白(cytokeratin)、上皮性膜抗原(EMA)及癌胚抗原(CEA)。他们常用于区分上皮性肿瘤与间叶性肿瘤。但在以下情况时应注意其特殊性：①间皮、肾小管及肾小囊壁层上皮属中胚层起源，却含有细胞角蛋白而不含有波形蛋白，眼晶状体属外胚层起源，却含有波形蛋白而不表达角蛋白〔1，2〕。②一般有上皮及间叶双相分化的肿瘤均有上皮性标记物及波形蛋白的共同表达；如间皮瘤、滑膜肉瘤及上皮样肉瘤等。③在恶性纤维组织细胞瘤〔3〕、脂肪肉瘤〔4〕、恶性(肾外)横纹肌样瘤、脊索瘤〔5〕、软骨脂肪瘤、上皮样血管瘤、平滑肌瘤、肌纤维母细胞瘤及一些小细胞骨肉瘤中也可表达细胞角蛋白〔6〕。④梭形细胞癌约有半数可以不表达上皮性标记物〔5〕。
2 波形蛋白(vimentin)
, 百拇医药
曾认为它是间叶源性肿瘤的普遍标记物，但现在发现它除了可有前文所提到的一些特殊性外，还应注意下列特殊表达：它可在肾癌、子宫内膜癌、甲状腺癌、卵巢癌、前列腺癌、乳腺癌、肺癌、肾上腺皮质及髓质癌、涎腺肿瘤、脉络丛肿瘤等肿瘤中表达〔7，8〕。有人提出低分子量角蛋白与波形蛋白共同表达提示肾、子宫内膜、前列腺、乳腺等部位肿瘤；高分子量角蛋白与波形蛋白共同表达则提示肺、卵巢、甲状腺肿瘤〔9，10〕。此外，恶性黑色素瘤也可表达波形蛋白，而且细胞越幼稚染色越强〔11〕。
3 肌源性肿瘤标记物
最常用的是结蛋白(desmin),它主要存在于骨骼肌和心肌的Z带、心肌的闰盘及平滑肌细胞的致密小体处(血管平滑肌除外)它在绝大多数横纹肌肉瘤中均有表达，但它在平滑肌肿瘤的表达阳性率却因肿瘤部位及分化程度的不同而不同，胃、小肠、软组织及皮肤的平滑肌肿瘤阳性率较低〔5〕。另外，在卵巢无性细胞瘤〔6〕及恶性纤维组织细胞瘤〔3〕中亦有表达。肌红蛋白(myoglobin)：在横纹肌肉瘤诊断中特异性虽强但敏感性较差，它的表达与胞浆分化有关，即分化高者阳性率高，因此在胚胎性横纹肌肉瘤的诊断中就应小心。此外，肌红蛋白还存在于一些向横纹肌细胞方向分化的组织中，如子宫或卵巢的混合型苗勒管瘤、肾母细胞瘤、三胚叶肿瘤等〔1〕。最后还应注意的是由于一些非肌源性肿瘤侵及横纹肌，使一些横纹肌被破坏而使肌红蛋白从肌纤维中逸出到这些非肌源性肿瘤细胞内，以致出现肌红蛋白阳性。并且附近的反应性组织细胞也因吞噬了逸出的肌红蛋白而发生阳性反应。肌动蛋白(actin):它并非胚层起源的标记物,它的阳性仅表示该细胞具有收缩功能，所以在软组织肿瘤的鉴别诊断中，肌动蛋白阳性并不能完全排除非肌源性肿瘤；但肌动蛋白阴性，却能排除横纹肌肉瘤；在梭形细胞肉瘤的鉴别诊断中肌动蛋白阳性，可排除纤维肉瘤的可能性。关于横纹肌肌球蛋白，应注意的是它分为Ⅰ型和Ⅱ型，即慢缩性和快缩性，这两型在横纹肌肉瘤的表达中阳性率明显不同，绝大多数横纹肌肉瘤对抗快肌球蛋白表达阳性，其阳性率甚至高于肌红蛋白，而抗慢肌球蛋白阳性率则较低，甚至为阴性〔12〕。最后需提醒注意的是平滑肌特异性肌动蛋白，它虽然主要标记平滑肌肿瘤，但也可以在肌上皮、血管周皮细胞及肌纤维母细胞中表达〔5〕。
, 百拇医药
4 纤维组织细胞标记物
常用的有α1-抗胰蛋白酶(AAT)和α1-抗糜蛋白酶(AACT)及溶菌酶。它们没有特异性，存在于许多细胞及肿瘤中，如单核巨噬细胞系统、粒细胞系统、多种上皮、软骨细胞、肾母细胞瘤、肾癌等。所以在应用时应与其它抗体联用，采取阴性与阳性互补的原则鉴别诊断。同时应注意在恶性纤维组织细胞瘤中虽有AAT、AACT及溶菌酶的表达，但这并不说明恶性纤维组织细胞瘤源于组织细胞。
5 神经性标记物
常用的有S-100蛋白；它的 阳性谱相当广泛，缺乏特异性。如它分布于星形细胞、室管膜细胞及其起源的肿瘤，也见于听神经瘤、朗格汉斯细胞组织细胞增生症、软骨瘤、脂肪瘤、透明细胞肉瘤、颗粒细胞瘤、黑色素瘤(特别是无色素性黑色素瘤)、脊素瘤、肝、脾和淋巴结等的树突状细胞、肌上皮细胞等，而且乳腺髓样癌也可阳性，甚至有报道在40.27%的肝硬化、64.13%的肝癌的石蜡切片中亦有明确表达〔6〕。但是值得一提的是，神经衣起源的肿瘤S-100蛋白阴性。另外，脑膜瘤、脉络丛乳头瘤及髓母细胞瘤的S-100蛋白阴性，但肿瘤中反应性星形细胞及髓母细胞瘤中分化性星形细胞，S-100蛋白仍可阳性。由于S-100蛋白的阳性谱如此广泛，使它早已失去了神经性标记物的特异性。现在就目前的资料来看，S-100蛋白一般在下列肿瘤的诊断和鉴别诊断中有较大价值：①确定雪旺细胞瘤、节细胞神经瘤、颗粒细胞瘤、黑色素瘤、软组织软骨肉瘤；②当肿瘤呈不典型车辐状或束状排列时，可作为雪旺细胞瘤与纤维组织细胞瘤的鉴别〔14〕。另一个神经性标记物为神经元特异性烯醇化酶(NSE)：它的特异性不强，除神经元外，还存在于神经纤维、神经内分泌细胞及其起源的肿瘤中，所以在使用时不可单独使用。
, 百拇医药
6 内皮性标记物
第八因子相关抗原(FⅧRAg)常作内皮的特异性标记物，但其敏感性不高，阳性率在50%～93%之间〔15〕，且其反应程序与分化程度有关。另外，荆豆凝集素在敏感性上虽优于FⅧRAg，但其特异性较差，且有人发现它与病人血型有关(O型血者几乎全为阳性，而其它血型者反应不等)，故不常用〔16〕。此外，CD31、CD34等作为内皮性标记物已受到重视，并可用于胃肠道间质瘤及隆突性皮肤纤维肉瘤的诊断〔5〕。
作者简介：朱振龙，男，34岁，硕士，讲师。主要研究方向：软组织肿瘤病理
参考文献
1，刘彦仿.免疫组织化学.北京：人民卫生出版社，1990：239～281
2，常福聚.中间丝分型在肿瘤诊断中的应用.国外医学肿瘤学分册，1986；4：193～196
, 百拇医药
3，林建韶，王新允，刘增辉等.免疫组化在多形性肉瘤诊断中的应用.中华病理学杂志，1990；19(1)：67～69
4，Dekunezian R, Zaatari GS, Austin GE. Immunohistochemical Staining for Apolipoprotein B in Human Sarcomas. Arch Pathol Lab Med, 1987； 111:433
5，林建韶，谭郁彬.软组织肿瘤诊断中免疫组织化学标记物的选择.中华病理学杂志，1997；26(1)：56～57
6，刘彦仿.免疫组织化学应用的十个问题.第二届中美病理新进展研讨会报告文集.1995：2～5
7，许红民.中间丝肿瘤鉴别法遇到新问题.国外医学肿瘤学分册，1988；2：79～81
, 百拇医药
8，赖日权，罗祝泉，安建成等.恶性上皮性肿瘤角蛋白和波形蛋白的表达.中华病理学杂志 ，1990；19(2)：119～120
9，Ramarkers F, Huysmans A, Moesker O et al. Monoclonal Antibody to Keratin Filaments Specific for Glandular Epithelia and their Tumors: Use in Surgical Pathology. Lab Invest, 1983；49:353
10，Ramarkers F. Cytokeratin Expression during Neoplastic Progression of Hum Transitional Cell Carcinoma as Detected by a Monoclonal and a Polyclonal Antibody. Lab Invest, 1985；52(1):31
, http://www.100md.com
11，张 农，张月娥，陈忠年等. 波形蛋白与肿瘤病理诊断的研究.中华病理学杂志，1990；19(2)：122～124
12，Eusebi V, Ceccarelli C, Gorza L et al. Immunocytochemistry of Rhabdomyosarcoma. The Use of Four different Markers. Am J Surg Pathol，1986；10(4):293～299
13，范维珂.S-100蛋白在肿瘤鉴别诊断中的应用.国外医学临床生物化学与检验学分册，1988；9(3)：16～21
14，冯本澄，戴亦然，肖振德.S-100蛋白在软组织肿瘤病理诊断中的应用.癌症，1987；6(3)：159～161
15，陈丽荣.软组织肉瘤标记物的研究和应用. 国外医学肿瘤学分册. 1988；4：212～215
16，Leader M, Callins M, Patel J et al. Staining for factor VIII related antigen and Ulex europaeus agglutinin I (UES-L)in 230 tumors .An assessment of their specificity for angiosarcoma and Kaposi's sarcoma. Histopathol,1986；10:1153～1162
收稿日期：1999-05-12, 百拇医药
单位：(河北医科大学病理学教研室，石家庄 050031)
关键词：软组织肿瘤；免疫组织化学；抗体；特殊性
临床与实验病理学杂志000120 中图分类号 R738.6 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(2000)01-0064-03
随着免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的不断深入和广泛应用，人们越来越多的发现所谓特异性标记物并非人们最初想的那么特异，而是出现了许多特殊性(或称异常表达)，并且这些特殊性在免疫组化结果分析中有着非常重要的意义，有必要对这些特殊性予以总结。笔者就软组织肿瘤免疫组化诊断中常用抗体的一些特殊性及注意事项简单介绍。
, http://www.100md.com 1 上皮性标记物
常用的有细胞角蛋白(cytokeratin)、上皮性膜抗原(EMA)及癌胚抗原(CEA)。他们常用于区分上皮性肿瘤与间叶性肿瘤。但在以下情况时应注意其特殊性：①间皮、肾小管及肾小囊壁层上皮属中胚层起源，却含有细胞角蛋白而不含有波形蛋白，眼晶状体属外胚层起源，却含有波形蛋白而不表达角蛋白〔1，2〕。②一般有上皮及间叶双相分化的肿瘤均有上皮性标记物及波形蛋白的共同表达；如间皮瘤、滑膜肉瘤及上皮样肉瘤等。③在恶性纤维组织细胞瘤〔3〕、脂肪肉瘤〔4〕、恶性(肾外)横纹肌样瘤、脊索瘤〔5〕、软骨脂肪瘤、上皮样血管瘤、平滑肌瘤、肌纤维母细胞瘤及一些小细胞骨肉瘤中也可表达细胞角蛋白〔6〕。④梭形细胞癌约有半数可以不表达上皮性标记物〔5〕。
2 波形蛋白(vimentin)
, 百拇医药
曾认为它是间叶源性肿瘤的普遍标记物，但现在发现它除了可有前文所提到的一些特殊性外，还应注意下列特殊表达：它可在肾癌、子宫内膜癌、甲状腺癌、卵巢癌、前列腺癌、乳腺癌、肺癌、肾上腺皮质及髓质癌、涎腺肿瘤、脉络丛肿瘤等肿瘤中表达〔7，8〕。有人提出低分子量角蛋白与波形蛋白共同表达提示肾、子宫内膜、前列腺、乳腺等部位肿瘤；高分子量角蛋白与波形蛋白共同表达则提示肺、卵巢、甲状腺肿瘤〔9，10〕。此外，恶性黑色素瘤也可表达波形蛋白，而且细胞越幼稚染色越强〔11〕。
3 肌源性肿瘤标记物
最常用的是结蛋白(desmin),它主要存在于骨骼肌和心肌的Z带、心肌的闰盘及平滑肌细胞的致密小体处(血管平滑肌除外)它在绝大多数横纹肌肉瘤中均有表达，但它在平滑肌肿瘤的表达阳性率却因肿瘤部位及分化程度的不同而不同，胃、小肠、软组织及皮肤的平滑肌肿瘤阳性率较低〔5〕。另外，在卵巢无性细胞瘤〔6〕及恶性纤维组织细胞瘤〔3〕中亦有表达。肌红蛋白(myoglobin)：在横纹肌肉瘤诊断中特异性虽强但敏感性较差，它的表达与胞浆分化有关，即分化高者阳性率高，因此在胚胎性横纹肌肉瘤的诊断中就应小心。此外，肌红蛋白还存在于一些向横纹肌细胞方向分化的组织中，如子宫或卵巢的混合型苗勒管瘤、肾母细胞瘤、三胚叶肿瘤等〔1〕。最后还应注意的是由于一些非肌源性肿瘤侵及横纹肌，使一些横纹肌被破坏而使肌红蛋白从肌纤维中逸出到这些非肌源性肿瘤细胞内，以致出现肌红蛋白阳性。并且附近的反应性组织细胞也因吞噬了逸出的肌红蛋白而发生阳性反应。肌动蛋白(actin):它并非胚层起源的标记物,它的阳性仅表示该细胞具有收缩功能，所以在软组织肿瘤的鉴别诊断中，肌动蛋白阳性并不能完全排除非肌源性肿瘤；但肌动蛋白阴性，却能排除横纹肌肉瘤；在梭形细胞肉瘤的鉴别诊断中肌动蛋白阳性，可排除纤维肉瘤的可能性。关于横纹肌肌球蛋白，应注意的是它分为Ⅰ型和Ⅱ型，即慢缩性和快缩性，这两型在横纹肌肉瘤的表达中阳性率明显不同，绝大多数横纹肌肉瘤对抗快肌球蛋白表达阳性，其阳性率甚至高于肌红蛋白，而抗慢肌球蛋白阳性率则较低，甚至为阴性〔12〕。最后需提醒注意的是平滑肌特异性肌动蛋白，它虽然主要标记平滑肌肿瘤，但也可以在肌上皮、血管周皮细胞及肌纤维母细胞中表达〔5〕。
, 百拇医药
4 纤维组织细胞标记物
常用的有α1-抗胰蛋白酶(AAT)和α1-抗糜蛋白酶(AACT)及溶菌酶。它们没有特异性，存在于许多细胞及肿瘤中，如单核巨噬细胞系统、粒细胞系统、多种上皮、软骨细胞、肾母细胞瘤、肾癌等。所以在应用时应与其它抗体联用，采取阴性与阳性互补的原则鉴别诊断。同时应注意在恶性纤维组织细胞瘤中虽有AAT、AACT及溶菌酶的表达，但这并不说明恶性纤维组织细胞瘤源于组织细胞。
5 神经性标记物
常用的有S-100蛋白；它的 阳性谱相当广泛，缺乏特异性。如它分布于星形细胞、室管膜细胞及其起源的肿瘤，也见于听神经瘤、朗格汉斯细胞组织细胞增生症、软骨瘤、脂肪瘤、透明细胞肉瘤、颗粒细胞瘤、黑色素瘤(特别是无色素性黑色素瘤)、脊素瘤、肝、脾和淋巴结等的树突状细胞、肌上皮细胞等，而且乳腺髓样癌也可阳性，甚至有报道在40.27%的肝硬化、64.13%的肝癌的石蜡切片中亦有明确表达〔6〕。但是值得一提的是，神经衣起源的肿瘤S-100蛋白阴性。另外，脑膜瘤、脉络丛乳头瘤及髓母细胞瘤的S-100蛋白阴性，但肿瘤中反应性星形细胞及髓母细胞瘤中分化性星形细胞，S-100蛋白仍可阳性。由于S-100蛋白的阳性谱如此广泛，使它早已失去了神经性标记物的特异性。现在就目前的资料来看，S-100蛋白一般在下列肿瘤的诊断和鉴别诊断中有较大价值：①确定雪旺细胞瘤、节细胞神经瘤、颗粒细胞瘤、黑色素瘤、软组织软骨肉瘤；②当肿瘤呈不典型车辐状或束状排列时，可作为雪旺细胞瘤与纤维组织细胞瘤的鉴别〔14〕。另一个神经性标记物为神经元特异性烯醇化酶(NSE)：它的特异性不强，除神经元外，还存在于神经纤维、神经内分泌细胞及其起源的肿瘤中，所以在使用时不可单独使用。
, 百拇医药
6 内皮性标记物
第八因子相关抗原(FⅧRAg)常作内皮的特异性标记物，但其敏感性不高，阳性率在50%～93%之间〔15〕，且其反应程序与分化程度有关。另外，荆豆凝集素在敏感性上虽优于FⅧRAg，但其特异性较差，且有人发现它与病人血型有关(O型血者几乎全为阳性，而其它血型者反应不等)，故不常用〔16〕。此外，CD31、CD34等作为内皮性标记物已受到重视，并可用于胃肠道间质瘤及隆突性皮肤纤维肉瘤的诊断〔5〕。
作者简介：朱振龙，男，34岁，硕士，讲师。主要研究方向：软组织肿瘤病理
参考文献
1，刘彦仿.免疫组织化学.北京：人民卫生出版社，1990：239～281
2，常福聚.中间丝分型在肿瘤诊断中的应用.国外医学肿瘤学分册，1986；4：193～196
, 百拇医药
3，林建韶，王新允，刘增辉等.免疫组化在多形性肉瘤诊断中的应用.中华病理学杂志，1990；19(1)：67～69
4，Dekunezian R, Zaatari GS, Austin GE. Immunohistochemical Staining for Apolipoprotein B in Human Sarcomas. Arch Pathol Lab Med, 1987； 111:433
5，林建韶，谭郁彬.软组织肿瘤诊断中免疫组织化学标记物的选择.中华病理学杂志，1997；26(1)：56～57
6，刘彦仿.免疫组织化学应用的十个问题.第二届中美病理新进展研讨会报告文集.1995：2～5
7，许红民.中间丝肿瘤鉴别法遇到新问题.国外医学肿瘤学分册，1988；2：79～81
, 百拇医药
8，赖日权，罗祝泉，安建成等.恶性上皮性肿瘤角蛋白和波形蛋白的表达.中华病理学杂志 ，1990；19(2)：119～120
9，Ramarkers F, Huysmans A, Moesker O et al. Monoclonal Antibody to Keratin Filaments Specific for Glandular Epithelia and their Tumors: Use in Surgical Pathology. Lab Invest, 1983；49:353
10，Ramarkers F. Cytokeratin Expression during Neoplastic Progression of Hum Transitional Cell Carcinoma as Detected by a Monoclonal and a Polyclonal Antibody. Lab Invest, 1985；52(1):31
, http://www.100md.com
11，张 农，张月娥，陈忠年等. 波形蛋白与肿瘤病理诊断的研究.中华病理学杂志，1990；19(2)：122～124
12，Eusebi V, Ceccarelli C, Gorza L et al. Immunocytochemistry of Rhabdomyosarcoma. The Use of Four different Markers. Am J Surg Pathol，1986；10(4):293～299
13，范维珂.S-100蛋白在肿瘤鉴别诊断中的应用.国外医学临床生物化学与检验学分册，1988；9(3)：16～21
14，冯本澄，戴亦然，肖振德.S-100蛋白在软组织肿瘤病理诊断中的应用.癌症，1987；6(3)：159～161
15，陈丽荣.软组织肉瘤标记物的研究和应用. 国外医学肿瘤学分册. 1988；4：212～215
16，Leader M, Callins M, Patel J et al. Staining for factor VIII related antigen and Ulex europaeus agglutinin I (UES-L)in 230 tumors .An assessment of their specificity for angiosarcoma and Kaposi's sarcoma. Histopathol,1986；10:1153～1162
收稿日期：1999-05-12, 百拇医药