乳疾灵长期毒性的实验观察
作者：王文智 冯继慧 詹华
单位：王文智(河北省沧州唐圣药业有限公司 沧州 061000)；冯继慧(邢台矿业集团总医院药剂科)；詹华(保定市药检所)
关键词：乳疾灵/中草药；乳疾灵/毒性；大鼠
河北医科大学学报000114分类号：R285.1▲
乳疾灵颗粒为国家中药保护品种，由淫羊藿、丹参、鸡血藤等多味中药配伍制成,主要用于治疗乳腺增生症。为考察本品长期给药是否会产生蓄积毒性，参照有关文献进行了大鼠毒性观察。
1 材料与方法
1.1 供试药物：乳疾灵浸膏干燥粉， 由河北省邢台制药厂提供，批号：981024，灌胃时用蒸馏水配成50 %的混悬液(摇匀)。
, 百拇医药
1.2 实验动物：大鼠，Wistar种， 合格证书：医动字大鼠第04036号，体质量130～150 g，雌雄各半，由河北医科大学实验动物中心提供。
1.3 仪器与试剂：SBA-300生化自动分析仪；Ac-900 全自动血球计数仪。生化试剂均为市售品。
1.4 实验方法：取体质量130～150 g大鼠160只，雌雄各半。按体质量、性别随机分为4组，每组40只;药物组分3个剂量组(低、中、高)分别给予乳疾灵1、3、6 g/kg(相当于临床剂量的10、30、60倍)，1次/d 灌胃，连续6个月;对照组给予等量的蒸馏水。每周称取体质量1次，共称11周。给药3个月后，各组随机取雌雄各10只，测心电图，然后摘眼球取血，进行血液细胞学、血液系列生化检查;断头处死动物，肉眼观察主要脏器，摘心、肝、肾、脾、胸腺、肾上腺、睾丸，卵巢称取质量，计算脏器系数，肝、肾进行病理检查。给药6个月后用同样方法检测剩余的80 只大鼠。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 对体质量的影响:实验过程中，各组动物摄食、排泄、活动、毛色等未见异常，体质量增长情况与对照组比较无显著性差异(P>0.05)，见表1。
表1 乳疾灵对大鼠体质量增长的影响
(n=20,
±s,m/g) 给药时间
(周)
对照组
低剂量组
中剂量组
高剂量组
, http://www.100md.com 给药前
134.6±15.1
137.2±18.2
135.8±19.6
135.2±15.5
1
174.2±19.8
176.2±22.3
175.6±21.2
175.4±14.2
2
209.6±26.1
, 百拇医药
218.2±29.8
214.8±32.7
214.2±30.8
3
249.8±36.9
259.7±53.1
257.7±50.2
253.7±28.7
4
271.4±42.0
287.2±58.2
280.3±48.8
, 百拇医药
281.6±49.6
5
298.7±38.7
300.8±54.8
300.6±52.3
298.9±49.2
6
312.7±52.3
326.5±53.7
319.8±51.7
307.6±50.3
7
, 百拇医药
321.8±53.7
334.3±57.2
327.6±56.7
329.7±53.2
8
340.8±52.9
342.8±66.8
335.8±52.7
337.6±54.8
9
353.1±64.8
356.2±64.7
, 百拇医药
349.7±58.6
350.2±56.8
10
365.0±68.7
368.7±65.2
360.8±67.4
363.3±66.7
11
374.0±70.4
380.8±80.6
379.9±78.7
388.2±79.7
, 百拇医药
2.2 对主要脏器的影响:各组动物心、肝、肾、脾、胸腺、肾上腺、睾丸、卵巢形态及色泽均正常，用组织天平称取质量并计算脏器系数,结果见表2。各种脏器系数无论各组间比较还是给药前后比较均未见明显差异(P>0.05)。各组动物肝、 肾组织作常规石腊切片，并染色，进行光镜检查，结果表明给药3个月和6个月后，肝、肾组织与相应对照组比较，亦均无明显差异(P>0.05)。表2 乳疾灵对大鼠脏器系数的影响
(n=10,±s)
对照组
低剂量组
中剂量组
高剂量组
给药3个月后
, 百拇医药
心
0.341±0.032
0.342±0.038
0.339±0.041
0.340±0.040
肝
3.118±0.524
3.188±0.652
3.098±0.483
3.108±0.512
脾
0.194±0.042
, http://www.100md.com
0.192±0.036
0.189±0.041
0.190±0.044
肺
0.682±0.151
0.651±0.119
0.701±0.184
0.694±0.121
肾
0.761±0.078
0.790±0.146
0.786±0.102
, 百拇医药
0.781±0.112
肾上腺
0.024±0.008
0.022±0.006
0.023±0.007
0.023±0.009
睾丸
0.887±0.048
0.878±0.228
0.884±0.216
0.891±0.204
, 百拇医药 子宫
0.269±0.058
0.281±0.092
0.271±0.081
0.279±0.049
给药6个月后
心
0.364±0.041
0.338±0.040
0.366±0.057
0.318±0.038
肝
, 百拇医药
2.758±0.161
2.941±0.641
2.851±0.229
2.862±0.148
脾
0.176±0.015
0.168±0.023
0.181±0.029
0.175±0.023
肺
0.613±0.152
0.628±0.248
, 百拇医药
0.625±0.321
0.608±0.341
肾
0.718±0.081
0.709±0.078
0.734±0.091
0.721±0.083
肾上腺
0.022±0.004
0.018±0.003
0.025±0.007
0.020±0.006
, 百拇医药
睾丸
0.791±0.081
0.782±0.127
0.894±0.086
0.807±0.094
子宫
0.284±0.098
0.217±0.049
0.243±0.071
0.228±0.111
2.3 对血液生化指标的影响[1]:各组动物眼眶取血测血常规，另取血3 ml， 离心后取血清用自动生化分析仪进行生化指标测定：用酶连续检测法测谷丙转氨酶、谷草转氨酶和碱性磷酸酶,苦味酸法测肌酐,尿素酶法测尿素氮,酶终点法测血糖和总胆固醇,双缩脲法测总蛋白,溴甲酚绿法测白蛋白。停药后恢复期的测定方法同上，结果见表3。给药两组的肝、肾功能、碱性磷酸酶、总胆固醇等9项生化指标均在正常范围内，且与对照组在同一水平，无显著性差异(P>0.05)。
, http://www.100md.com
表3 乳疾灵对大鼠血液生化指标的影响
(n=10,±s)
对照组
低剂量组
中剂量组
高剂量组
给药3个月后
谷丙转氨酶(λB/U.L-1)
56.02±10.28
55.88±12.12
, http://www.100md.com
56.75±19.62
55.35±18.91
谷草转氨酶(λB/U.L-1)
188.22±38.11
184.17±36.21
178.28±38.41
186.48±38.47
碱性磷酸酶(λB/U.L-1)
163.84±61.41
, 百拇医药 165.11±52.50
141.48±38.39
159.68±42.38
尿素氮(CB/mmol.L-1)
7.68±0.68
7.37±0.89
7.87±0.75
7.51±0.70
肌酐(CB/μmol.L-1)
52.16±7.07
, 百拇医药
54.81±9.72
49.50±7.96
53.04±8.84
血糖(CB/mmol.L-1)
4.80±0.83
5.02±1.13
4.53±0.07
4.72±0.78
总胆固醇(CB/mmol.L-1)
2.05±0.32
, 百拇医药
2.09±0.40
1.99±0.33
2.01±0.47
总蛋白(ρB/g.L-1)
58.20±3.70
57.20±3.80
59.40±4.20
57.70±3.60
白蛋白(ρB/g.L-1)
36.40±2.80
, http://www.100md.com
35.80±2.20
36.30±3.80
35.40±2.60
给药6个月后
谷丙转氨酶(λB/U.L-1)
64.72±7.41
66.00±11.92
64.38±9.78
65.21±7.47
谷草转氨酶(λB/U.L-1)
, 百拇医药
172.48±34.27
186.48±28.47
171.94±35.62
190.21±43.04
碱性磷酸酶(λB/U.L-1)
158.20±26.48
157.00±40.21
162.59±46.71
156.81±30.21
尿素氮(CB/mmol.L-1)
, 百拇医药
7.01±1.12
7.35±1.03
6.67±0.77
6.60±1.49
肌酐(CB/μmol.L-1)
62.76±15.91
61.00±10.61
61.88±18.56
54.81±9.72
血糖(CB/mmol.L-1)
, 百拇医药
4.51±0.77
4.37±0.78
4.67±0.55
4.43±0.57
总胆固醇(CB/mmol.L-1)
2.25±0.50
2.19±0.50
2.40±0.67
2.19±0.91
总蛋白(ρB/g.L-1)
, 百拇医药
56.50±3.80
62.70±12.50
58.60±4.10
62.50±9.80
白蛋白(ρB/g.L-1)
38.20±1.10
37.90±1.90
37.60±0.60
38.60±1.60
2.4 对血液细胞学的影响:最后1次给药结束后，对次日要取血测定的大鼠提前16 h禁食不禁水。实验当天， 大鼠麻醉后由眼眶取血20 μl，立即放入稀释液中，用AC-900 全自动血球计数仪对各组动物的红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板和白细胞分类进行测定。停药后恢复期的测定方法同上，结果见表4。表4 乳疾灵对大鼠血常规的影响
, 百拇医药
(±s)
对照组
低剂量组
高剂量组
给药6个月后(n=14)
白细胞(×109/L)
11.42±2.1
12.00±1.73
10.98±1.56
红细胞(×1012/L)
, 百拇医药
7.28±0.41
7.04±0.62
7.38±0.45
血小板(×109/L)
292.70±57.92
288.83±64.82
268.37±51.71
血红蛋白(g/L)
138.18±6.84
141.38±10.12
136.87±7.47
, 百拇医药
恢复期(n=6)
白细胞(×109/L)
10.72±4.13
10.25±2.62
10.76±6.21
红细胞(×1012/L)
7.72±0.83
7.84±0.56
7.28±0.61
血小板(×109/L)
288.74±86.12
, 百拇医药
290.21±80.21
283.60±92.71
血红蛋白(g/L)
133.8±6.74
135.6±8.12
132.72±9.41
3 讨 论
乳疾灵由具补血益气、祛风除湿、滋阴补肾作用[2]的多味中药材制成，无毒剧类药材，具舒肝解郁、调理冲任、散结消痛之功效，因此毒性极低，临床用于肝郁气滞、痰瘀互结、冲任失调引起的乳腺增生症[3]。
本研究乳疾灵以1、3、6 g/(kg.d)(相当于临床剂量的10、30、60倍)给大鼠灌胃，连续6个月。给药期间动物的摄食、排泄、活动和毛色均正常，体质量增长情况与对照组比较无显著性差异；给药结束和停药2周后所测血常规和肝、 肾功能等血液生化指标及主要脏器系数均在正常范围内波动，且与对照组无显著性差异；系统尸解各组动物的脏器均无异常改变，病理组织学检查均未发现阳性病理改变。以上试验表明乳疾灵对动物长期给药后没有蓄积毒性，对血常规和血液生化各项指标以及内脏器官均无影响，长期口服给药是安全的。■
参考文献：
[1]徐远祥，蒋国林.肾康平丸的急、慢性毒性实验研究.中成药，1994，16(11)：37
[2]凌一揆，颜正华.中药学.上海科学技术出版社，1985.154
[3]张四岩，安亚辉，梁兰萍.HPLC法测定乳疾灵颗粒中淫羊藿甙含量.中国药师，1999，2(5)：263
收稿日期：1999-12-06, 百拇医药
单位：王文智(河北省沧州唐圣药业有限公司 沧州 061000)；冯继慧(邢台矿业集团总医院药剂科)；詹华(保定市药检所)
关键词：乳疾灵/中草药；乳疾灵/毒性；大鼠
河北医科大学学报000114分类号：R285.1▲
乳疾灵颗粒为国家中药保护品种，由淫羊藿、丹参、鸡血藤等多味中药配伍制成,主要用于治疗乳腺增生症。为考察本品长期给药是否会产生蓄积毒性，参照有关文献进行了大鼠毒性观察。
1 材料与方法
1.1 供试药物：乳疾灵浸膏干燥粉， 由河北省邢台制药厂提供，批号：981024，灌胃时用蒸馏水配成50 %的混悬液(摇匀)。
, 百拇医药
1.2 实验动物：大鼠，Wistar种， 合格证书：医动字大鼠第04036号，体质量130～150 g，雌雄各半，由河北医科大学实验动物中心提供。
1.3 仪器与试剂：SBA-300生化自动分析仪；Ac-900 全自动血球计数仪。生化试剂均为市售品。
1.4 实验方法：取体质量130～150 g大鼠160只，雌雄各半。按体质量、性别随机分为4组，每组40只;药物组分3个剂量组(低、中、高)分别给予乳疾灵1、3、6 g/kg(相当于临床剂量的10、30、60倍)，1次/d 灌胃，连续6个月;对照组给予等量的蒸馏水。每周称取体质量1次，共称11周。给药3个月后，各组随机取雌雄各10只，测心电图，然后摘眼球取血，进行血液细胞学、血液系列生化检查;断头处死动物，肉眼观察主要脏器，摘心、肝、肾、脾、胸腺、肾上腺、睾丸，卵巢称取质量，计算脏器系数，肝、肾进行病理检查。给药6个月后用同样方法检测剩余的80 只大鼠。
, 百拇医药
2 结 果
2.1 对体质量的影响:实验过程中，各组动物摄食、排泄、活动、毛色等未见异常，体质量增长情况与对照组比较无显著性差异(P>0.05)，见表1。
表1 乳疾灵对大鼠体质量增长的影响
(n=20,
±s,m/g) 给药时间(周)
对照组
低剂量组
中剂量组
高剂量组
, http://www.100md.com 给药前
134.6±15.1
137.2±18.2
135.8±19.6
135.2±15.5
1
174.2±19.8
176.2±22.3
175.6±21.2
175.4±14.2
2
209.6±26.1
, 百拇医药
218.2±29.8
214.8±32.7
214.2±30.8
3
249.8±36.9
259.7±53.1
257.7±50.2
253.7±28.7
4
271.4±42.0
287.2±58.2
280.3±48.8
, 百拇医药
281.6±49.6
5
298.7±38.7
300.8±54.8
300.6±52.3
298.9±49.2
6
312.7±52.3
326.5±53.7
319.8±51.7
307.6±50.3
7
, 百拇医药
321.8±53.7
334.3±57.2
327.6±56.7
329.7±53.2
8
340.8±52.9
342.8±66.8
335.8±52.7
337.6±54.8
9
353.1±64.8
356.2±64.7
, 百拇医药
349.7±58.6
350.2±56.8
10
365.0±68.7
368.7±65.2
360.8±67.4
363.3±66.7
11
374.0±70.4
380.8±80.6
379.9±78.7
388.2±79.7
, 百拇医药
2.2 对主要脏器的影响:各组动物心、肝、肾、脾、胸腺、肾上腺、睾丸、卵巢形态及色泽均正常，用组织天平称取质量并计算脏器系数,结果见表2。各种脏器系数无论各组间比较还是给药前后比较均未见明显差异(P>0.05)。各组动物肝、 肾组织作常规石腊切片，并染色，进行光镜检查，结果表明给药3个月和6个月后，肝、肾组织与相应对照组比较，亦均无明显差异(P>0.05)。表2 乳疾灵对大鼠脏器系数的影响
(n=10,
±s)对照组
低剂量组
中剂量组
高剂量组
给药3个月后
, 百拇医药
心
0.341±0.032
0.342±0.038
0.339±0.041
0.340±0.040
肝
3.118±0.524
3.188±0.652
3.098±0.483
3.108±0.512
脾
0.194±0.042
, http://www.100md.com
0.192±0.036
0.189±0.041
0.190±0.044
肺
0.682±0.151
0.651±0.119
0.701±0.184
0.694±0.121
肾
0.761±0.078
0.790±0.146
0.786±0.102
, 百拇医药
0.781±0.112
肾上腺
0.024±0.008
0.022±0.006
0.023±0.007
0.023±0.009
睾丸
0.887±0.048
0.878±0.228
0.884±0.216
0.891±0.204
, 百拇医药 子宫
0.269±0.058
0.281±0.092
0.271±0.081
0.279±0.049
给药6个月后
心
0.364±0.041
0.338±0.040
0.366±0.057
0.318±0.038
肝
, 百拇医药
2.758±0.161
2.941±0.641
2.851±0.229
2.862±0.148
脾
0.176±0.015
0.168±0.023
0.181±0.029
0.175±0.023
肺
0.613±0.152
0.628±0.248
, 百拇医药
0.625±0.321
0.608±0.341
肾
0.718±0.081
0.709±0.078
0.734±0.091
0.721±0.083
肾上腺
0.022±0.004
0.018±0.003
0.025±0.007
0.020±0.006
, 百拇医药
睾丸
0.791±0.081
0.782±0.127
0.894±0.086
0.807±0.094
子宫
0.284±0.098
0.217±0.049
0.243±0.071
0.228±0.111
2.3 对血液生化指标的影响[1]:各组动物眼眶取血测血常规，另取血3 ml， 离心后取血清用自动生化分析仪进行生化指标测定：用酶连续检测法测谷丙转氨酶、谷草转氨酶和碱性磷酸酶,苦味酸法测肌酐,尿素酶法测尿素氮,酶终点法测血糖和总胆固醇,双缩脲法测总蛋白,溴甲酚绿法测白蛋白。停药后恢复期的测定方法同上，结果见表3。给药两组的肝、肾功能、碱性磷酸酶、总胆固醇等9项生化指标均在正常范围内，且与对照组在同一水平，无显著性差异(P>0.05)。
, http://www.100md.com
表3 乳疾灵对大鼠血液生化指标的影响
(n=10,
±s)对照组
低剂量组
中剂量组
高剂量组
给药3个月后
谷丙转氨酶(λB/U.L-1)
56.02±10.28
55.88±12.12
, http://www.100md.com
56.75±19.62
55.35±18.91
谷草转氨酶(λB/U.L-1)
188.22±38.11
184.17±36.21
178.28±38.41
186.48±38.47
碱性磷酸酶(λB/U.L-1)
163.84±61.41
, 百拇医药 165.11±52.50
141.48±38.39
159.68±42.38
尿素氮(CB/mmol.L-1)
7.68±0.68
7.37±0.89
7.87±0.75
7.51±0.70
肌酐(CB/μmol.L-1)
52.16±7.07
, 百拇医药
54.81±9.72
49.50±7.96
53.04±8.84
血糖(CB/mmol.L-1)
4.80±0.83
5.02±1.13
4.53±0.07
4.72±0.78
总胆固醇(CB/mmol.L-1)
2.05±0.32
, 百拇医药
2.09±0.40
1.99±0.33
2.01±0.47
总蛋白(ρB/g.L-1)
58.20±3.70
57.20±3.80
59.40±4.20
57.70±3.60
白蛋白(ρB/g.L-1)
36.40±2.80
, http://www.100md.com
35.80±2.20
36.30±3.80
35.40±2.60
给药6个月后
谷丙转氨酶(λB/U.L-1)
64.72±7.41
66.00±11.92
64.38±9.78
65.21±7.47
谷草转氨酶(λB/U.L-1)
, 百拇医药
172.48±34.27
186.48±28.47
171.94±35.62
190.21±43.04
碱性磷酸酶(λB/U.L-1)
158.20±26.48
157.00±40.21
162.59±46.71
156.81±30.21
尿素氮(CB/mmol.L-1)
, 百拇医药
7.01±1.12
7.35±1.03
6.67±0.77
6.60±1.49
肌酐(CB/μmol.L-1)
62.76±15.91
61.00±10.61
61.88±18.56
54.81±9.72
血糖(CB/mmol.L-1)
, 百拇医药
4.51±0.77
4.37±0.78
4.67±0.55
4.43±0.57
总胆固醇(CB/mmol.L-1)
2.25±0.50
2.19±0.50
2.40±0.67
2.19±0.91
总蛋白(ρB/g.L-1)
, 百拇医药
56.50±3.80
62.70±12.50
58.60±4.10
62.50±9.80
白蛋白(ρB/g.L-1)
38.20±1.10
37.90±1.90
37.60±0.60
38.60±1.60
2.4 对血液细胞学的影响:最后1次给药结束后，对次日要取血测定的大鼠提前16 h禁食不禁水。实验当天， 大鼠麻醉后由眼眶取血20 μl，立即放入稀释液中，用AC-900 全自动血球计数仪对各组动物的红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板和白细胞分类进行测定。停药后恢复期的测定方法同上，结果见表4。表4 乳疾灵对大鼠血常规的影响
, 百拇医药
(
±s)对照组
低剂量组
高剂量组
给药6个月后(n=14)
白细胞(×109/L)
11.42±2.1
12.00±1.73
10.98±1.56
红细胞(×1012/L)
, 百拇医药
7.28±0.41
7.04±0.62
7.38±0.45
血小板(×109/L)
292.70±57.92
288.83±64.82
268.37±51.71
血红蛋白(g/L)
138.18±6.84
141.38±10.12
136.87±7.47
, 百拇医药
恢复期(n=6)
白细胞(×109/L)
10.72±4.13
10.25±2.62
10.76±6.21
红细胞(×1012/L)
7.72±0.83
7.84±0.56
7.28±0.61
血小板(×109/L)
288.74±86.12
, 百拇医药
290.21±80.21
283.60±92.71
血红蛋白(g/L)
133.8±6.74
135.6±8.12
132.72±9.41
3 讨 论
乳疾灵由具补血益气、祛风除湿、滋阴补肾作用[2]的多味中药材制成，无毒剧类药材，具舒肝解郁、调理冲任、散结消痛之功效，因此毒性极低，临床用于肝郁气滞、痰瘀互结、冲任失调引起的乳腺增生症[3]。
本研究乳疾灵以1、3、6 g/(kg.d)(相当于临床剂量的10、30、60倍)给大鼠灌胃，连续6个月。给药期间动物的摄食、排泄、活动和毛色均正常，体质量增长情况与对照组比较无显著性差异；给药结束和停药2周后所测血常规和肝、 肾功能等血液生化指标及主要脏器系数均在正常范围内波动，且与对照组无显著性差异；系统尸解各组动物的脏器均无异常改变，病理组织学检查均未发现阳性病理改变。以上试验表明乳疾灵对动物长期给药后没有蓄积毒性，对血常规和血液生化各项指标以及内脏器官均无影响，长期口服给药是安全的。■
参考文献：
[1]徐远祥，蒋国林.肾康平丸的急、慢性毒性实验研究.中成药，1994，16(11)：37
[2]凌一揆，颜正华.中药学.上海科学技术出版社，1985.154
[3]张四岩，安亚辉，梁兰萍.HPLC法测定乳疾灵颗粒中淫羊藿甙含量.中国药师，1999，2(5)：263
收稿日期：1999-12-06, 百拇医药