IL-2术前皮下免疫治疗对晚期结肠癌病人免疫功能及生存期的影响
作者：杨春旭 李桂生
单位：广西柳州市工人医院肿瘤科 柳州 545005
关键词：白介素2；免疫治疗；结肠癌
广西医科大学学报000129
摘要 目的：观察术前IL-2皮下注射治疗对晚期实施姑息性手术的 结肠癌病人免疫功能及生存期的影响。方法：共收集可供分析的50例Dukes分期为D期的结肠癌病人，将其 分为术前IL-2治疗组和非IL-2治疗组。术后两组病人给予相同的化疗，疗程结束后检测外 周血T淋巴细胞亚群、NK细胞杀伤活性、可溶性IL-2受体(sIL-2R)，观察两组免疫功能的 变化。对两组病人同时进行2年的随访，观察生存期。结果：术前IL-2治疗组外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4 +水平及CD4+/CD8+比值，NK细胞杀伤活性明显高于不用IL-2组；可溶性IL-2 受体(sIL-2R)水平在使用IL-2组明显低于未用组。1年生存率用IL-2组也显著高于未用组 。结论：术前IL-2皮下注射治疗可以提高晚期结肠癌病人的免疫功能 ，中和外科手术诱发的免疫抑制，延长患者的生存期。
, http://www.100md.com
中国图书资料分类法分类号 R457.2
INFLUENCE OF PREOPERATIVE INTERLEUKIN-2 SUBCUTANEOUS IMMUNOTHERAPY ON IMMUNOLOG IC FUNCTION AND SURVIVAL TIME OF THE ADVANCED
Yang Chunxu,Li Quisheng
(Liuzhou City Workers' Hospital,Guangxi,Liuzhou 545005 China)
Abstract Objective：The changes of the immunologic function a nd survival time in advanced colorectal cancer patients by preoperative IL-2 su bcutaneous immunotherapy were investigated.Methods：50 colorectal cancer patients,Dukes' stage D,were ran domized to be treated with (studied group) or without IL-2 (Control group) preo peratively (60×104 IU/day Subcutaneus for 7 consecutive days).After operatio n the two groups were treated with the same chemotherapy (5-FU.folates),an the n determime T lymphocytes number (CD3+,CD4+,CD8+，CD4+/CD8+ ratio),nature killer (NK) cell activity and solutable IL-2 receptor (sIL-2R) l evel. The patients were followed up for 2 years.Results：T lymphocytes (CD3+,CD4+,CD4+/CD8+ ra tio),NK cell activity was significantly higher in IL-2 group than in control.T he survival rate at 1 year was significantly greater in IL-2 group than in cont rols.Conclusion：Preoperative interleukin-2 subcutaneous immunothe rapy can improve immunologic function and prolong survival time in advanced colo rectal cancer patients.
, 百拇医药
Key words interleukin-2;immunotherapy;colorectal cancer
很多研究表明，外科手术可以减少T淋巴细胞和NK细胞的数量和活性。由于在控制肿瘤 发展过程中，宿主免疫防卫的重要性，因而调整接受手术治疗的癌症病人在手术期间的免疫 功能(如通过术前注射IL-2等)是否可影响肿瘤性疾病的临床病程是肿瘤防治研究中值得关 注和解决的问题。尽管已有一些相关资料报道涉及此类问题，但仍不充分，有待更多的临床 研究来证实。本研究的目的是评估术前使用及不使用IL-2免疫治疗的晚期结肠癌病人术后 免疫功能及生存时间的变化，以探讨IL-2的术前应用对晚期结肠癌病人的影响，为肿瘤病 人的生物治疗提供依据。
1 材料与方法
1.1研究对象：选择本院1995～1997年可供分析的50例经病理诊断确诊,Dukes分期为D期，入院后计划给予姑息手术的晚期结肠癌病人。患者术前给予CT扫描以确定病变部位及大小并随机化分组。因腹部其它原因进行过手术的病人及为消除输血对免疫反应可能造成的影响，因严重贫血而术前需要输血的病人均被排出在外。50例病人按住院号尾数不同随机化分为术前用IL-2免疫治疗组(单号)及不用组(双号)。
, 百拇医药
1.2 药物及使用方法：重组人IL-2采用北京四环药厂产品。IL-2的使用方法为:80万单 位，2次/d，皮下注射(早8:00，下午8:00各1次)，连用6 d，从最后1次IL-2注射算起的30 d内，给患者进行手术。
术前所有患者均未接受过免疫治疗和化疗。术后,所有病人接受5-Fu-四氢乙酸化疗。 5-Fu或四氢乙酸静脉用药分别为：每天400 mg/m2，每天200 mg/m2，连用5 d为 1个化疗周期。手术后1个月内病人接受化疗，每28 d重复进行1次，共进行6个化疗周期。化 疗的平均周期数两组相同。疾病进展或出现毒性者中止化疗，给予支持疗法。
1.3 观察指标：①生存期：对两组病人同时进行2年的随访。平均随访期和最低随访期分 别是23个月(范围12～52个月)和1年。稳定生存期和总生存期的计算时间从手术期开始算；② 免疫功能指标：为评估手术期间的免疫功能变化，手术当天的上午和术后的3，7，14 d分别 收集静脉血标本。对每个血标本，我们测定了T淋巴细胞亚群、NK细胞杀伤活性、可溶性IL -2受体(sIL-2R)，观察两组免疫功能的变化。
, 百拇医药
1.4 免疫学指标的检测方法：①外周血T淋巴细胞亚群检测采用间接免疫荧光法，OKT系列 单抗由北京医科大学免疫教研室提供；②NK细胞杀伤活性测定采用3H-TDR释放法 ；③可溶性IL-2受体(sIL-2R)采用双抗体夹心ELISA法，北京邦定公司提供试剂盒。
1.5 统计学处理方法：用χ2和t检验对结果进行统计分析。
2 结 果
2.1 患者的可比性：两组病人在主要的变量上是平衡的。总例数使用IL-2组24例,对照组26例,平均年龄IL-2组为59岁,对照组57岁,卡氏评分平均分均为80分。
2.2 副反应及并发症：①发热：术前用IL-2治疗的病人有54%出现了不同程度的发热，体温高于38℃，类似流感症状，但没有神经或外科系统的并发症发生；②感染及伤口渗血：IL-2组只有1例出现肺部感染，而对照组中全身感染有4例，局部伤口渗血有4例，两组相比感染及局部渗血并发症IL-2组显著低于对照组(P<0.05)。
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2.3 免疫功能的变化：对照组与术前IL-2治疗组外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4 +、CD8+水平及CD4+/CD8+比值，NK细胞杀伤活性(%),可溶性IL-2受体水平 见表1。
表1 对照组与术前IL-2治疗组外周血T淋巴细胞亚群、CD3+ 、CD4+水平及CD4+/CD8+比值，NK细胞杀伤活性(%),可溶性IL-2受体水平比 较(
±s) 组 别
n
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CD3+
(%)
CD4+
(%)
CD8+
(%)
CD4+/C D8+
NK活性
(%)
sIL-2R
, 百拇医药
(IU/L)
对照组
26
58.35±3.9
29.8±3.2
31.2±2.2
0 .92±0.2
19.8±4.2
0.921±0.098
IL-2
治疗组
24
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67.40±3.1
38.5±3.8
22.02±2.8
1.7 8±0.3
28.7±5.2
0.783±0.080
两组各项指标相比,差别有非常显著性(P<0.01)
(治疗组各项指标检测结果取术后3,7,14 d检测结果的平均值)
2.4 近期疗效：按WHO标准，无完全缓解(CR)病人，但部分缓解率(PR)IL-2组高于对照组 ，但这种差别尚无统计学上的显著性。
, http://www.100md.com 2.5 生存率比较：平均生存期IL-2组(21±2)个月,显著长于对照组(12±2)个月(P< 0.01)；无进展生存期(稳定期)IL-2组也显著长于对照组[(13±2)个月，(6±1)个月， P<0.05]；对照组病人存活期无1例超过2年，相比之下，IL-2组则有4例的病人生存 期超过3年。
3 讨 论
恶性肿瘤的治疗已经由单一模式走向综合治疗模式，并在许多肿瘤的治疗中取得明显的 成效[1]。其中生物治疗在各种其它治疗方法中所起到的独特免疫重建作用更是日 益受到人们的普遍关注，相关的研究和应用也日益增多，某些临床应用已显示出具有明显的 疗效[2]。但细胞因子作为一种免疫调节剂在晚期癌症病人的治疗中有何作用及如 何应用尚有待进一步明确[3]。本次临床研究结果显示，IL-2治疗组外周血T淋巴 细胞亚群CD3+、CD4+水平及CD4+/CD8+比值，NK细胞杀伤活性(%)高于对 照组,而CD8+,sIL-2R水平低于对照组,目前认为CD3+细胞、NK细胞，主要是杀伤细 胞，CD4+细胞主要是辅助细胞，CD8+细胞相当于抑制性细胞而sIL-2R属于免疫抑 制性因子，这些指标的变化，直接与机体免疫功能的状况有关,提示术前IL-2的免疫治疗可 以中和晚期结肠癌病人姑息手术治疗所诱发的免疫抑制，提高患者的免疫功能,和文献报道 一致[4]。我们的研究结果还显示，IL-2一般注射6 d，就可以充分防止手术所诱 发的免疫抑制。由于IL-2的外源性注射既刺激了其他内源性免疫调节因子的产生，也刺激T 辅助细胞的产生及激活NK细胞，后者又进一步导致IL-2的分泌，因此，IL-2术前所诱发的 内源性细胞因子的分泌可以使病人能够抵御由外科手术所导致的免疫损害,提高晚期结肠癌 病人的免疫功能。此外，本研究还提示，IL-2的术前注射可以提高晚期结肠癌病 人的生存期,这和机体的免疫功能得到调整有关。 尽管一些未知的对预后可能造成影响的因 素不能完全排除， 但由于两组人群在主要的预后变量和术后的处理方面是可比的，因此， 术前使用IL-2后所致的生存期延长，在很大程度上是依赖于使用了IL-2。
, 百拇医药
参 考 文 献
1，O'Connell MJ,Laurie JA,Kahn M,et al.Prospectively randomized trial of postoperative adjuvant chemotherapy in patients with high-risk colon cancer.J Clin Oncol，1998，16(1):295-300.
2，Riethmuller G,Holz E,Schmiegel W,et al.Monoclonal antibody therapy fo r resected Dukes'C colorectal cancer:Seven-year outcome of a multicenter random ized tral. J Clin Oncol，1998，16(5):1 788-1 794.
3，Palmeri S,Meli M,Danova M,et al.5-Fluorouracil plus interferon alpha -2a compared to 5-Fluorouracil alone in the treatment of advanced colon carcin oma:a multicentric randomized study.J Cancer Res Clin Oncol，1998，124(3～4):191 -198.
4，Tagliaterri P,Barile C,Caraglia M,et al.Daily low-dose subcutaneous recombinant interleukin-2 by alternate weekly administration:antitumor activity and immunomodulatory effects.Am J Clin Oncol，1998，21(1):48-53.
收稿日期：1999-06-20, 百拇医药
单位：广西柳州市工人医院肿瘤科 柳州 545005
关键词：白介素2；免疫治疗；结肠癌
广西医科大学学报000129
摘要 目的：观察术前IL-2皮下注射治疗对晚期实施姑息性手术的 结肠癌病人免疫功能及生存期的影响。方法：共收集可供分析的50例Dukes分期为D期的结肠癌病人，将其 分为术前IL-2治疗组和非IL-2治疗组。术后两组病人给予相同的化疗，疗程结束后检测外 周血T淋巴细胞亚群、NK细胞杀伤活性、可溶性IL-2受体(sIL-2R)，观察两组免疫功能的 变化。对两组病人同时进行2年的随访，观察生存期。结果：术前IL-2治疗组外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4 +水平及CD4+/CD8+比值，NK细胞杀伤活性明显高于不用IL-2组；可溶性IL-2 受体(sIL-2R)水平在使用IL-2组明显低于未用组。1年生存率用IL-2组也显著高于未用组 。结论：术前IL-2皮下注射治疗可以提高晚期结肠癌病人的免疫功能 ，中和外科手术诱发的免疫抑制，延长患者的生存期。
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中国图书资料分类法分类号 R457.2
INFLUENCE OF PREOPERATIVE INTERLEUKIN-2 SUBCUTANEOUS IMMUNOTHERAPY ON IMMUNOLOG IC FUNCTION AND SURVIVAL TIME OF THE ADVANCED
Yang Chunxu,Li Quisheng
(Liuzhou City Workers' Hospital,Guangxi,Liuzhou 545005 China)
Abstract Objective：The changes of the immunologic function a nd survival time in advanced colorectal cancer patients by preoperative IL-2 su bcutaneous immunotherapy were investigated.Methods：50 colorectal cancer patients,Dukes' stage D,were ran domized to be treated with (studied group) or without IL-2 (Control group) preo peratively (60×104 IU/day Subcutaneus for 7 consecutive days).After operatio n the two groups were treated with the same chemotherapy (5-FU.folates),an the n determime T lymphocytes number (CD3+,CD4+,CD8+，CD4+/CD8+ ratio),nature killer (NK) cell activity and solutable IL-2 receptor (sIL-2R) l evel. The patients were followed up for 2 years.Results：T lymphocytes (CD3+,CD4+,CD4+/CD8+ ra tio),NK cell activity was significantly higher in IL-2 group than in control.T he survival rate at 1 year was significantly greater in IL-2 group than in cont rols.Conclusion：Preoperative interleukin-2 subcutaneous immunothe rapy can improve immunologic function and prolong survival time in advanced colo rectal cancer patients.
, 百拇医药
Key words interleukin-2;immunotherapy;colorectal cancer
很多研究表明，外科手术可以减少T淋巴细胞和NK细胞的数量和活性。由于在控制肿瘤 发展过程中，宿主免疫防卫的重要性，因而调整接受手术治疗的癌症病人在手术期间的免疫 功能(如通过术前注射IL-2等)是否可影响肿瘤性疾病的临床病程是肿瘤防治研究中值得关 注和解决的问题。尽管已有一些相关资料报道涉及此类问题，但仍不充分，有待更多的临床 研究来证实。本研究的目的是评估术前使用及不使用IL-2免疫治疗的晚期结肠癌病人术后 免疫功能及生存时间的变化，以探讨IL-2的术前应用对晚期结肠癌病人的影响，为肿瘤病 人的生物治疗提供依据。
1 材料与方法
1.1研究对象：选择本院1995～1997年可供分析的50例经病理诊断确诊,Dukes分期为D期，入院后计划给予姑息手术的晚期结肠癌病人。患者术前给予CT扫描以确定病变部位及大小并随机化分组。因腹部其它原因进行过手术的病人及为消除输血对免疫反应可能造成的影响，因严重贫血而术前需要输血的病人均被排出在外。50例病人按住院号尾数不同随机化分为术前用IL-2免疫治疗组(单号)及不用组(双号)。
, 百拇医药
1.2 药物及使用方法：重组人IL-2采用北京四环药厂产品。IL-2的使用方法为:80万单 位，2次/d，皮下注射(早8:00，下午8:00各1次)，连用6 d，从最后1次IL-2注射算起的30 d内，给患者进行手术。
术前所有患者均未接受过免疫治疗和化疗。术后,所有病人接受5-Fu-四氢乙酸化疗。 5-Fu或四氢乙酸静脉用药分别为：每天400 mg/m2，每天200 mg/m2，连用5 d为 1个化疗周期。手术后1个月内病人接受化疗，每28 d重复进行1次，共进行6个化疗周期。化 疗的平均周期数两组相同。疾病进展或出现毒性者中止化疗，给予支持疗法。
1.3 观察指标：①生存期：对两组病人同时进行2年的随访。平均随访期和最低随访期分 别是23个月(范围12～52个月)和1年。稳定生存期和总生存期的计算时间从手术期开始算；② 免疫功能指标：为评估手术期间的免疫功能变化，手术当天的上午和术后的3，7，14 d分别 收集静脉血标本。对每个血标本，我们测定了T淋巴细胞亚群、NK细胞杀伤活性、可溶性IL -2受体(sIL-2R)，观察两组免疫功能的变化。
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1.4 免疫学指标的检测方法：①外周血T淋巴细胞亚群检测采用间接免疫荧光法，OKT系列 单抗由北京医科大学免疫教研室提供；②NK细胞杀伤活性测定采用3H-TDR释放法 ；③可溶性IL-2受体(sIL-2R)采用双抗体夹心ELISA法，北京邦定公司提供试剂盒。
1.5 统计学处理方法：用χ2和t检验对结果进行统计分析。
2 结 果
2.1 患者的可比性：两组病人在主要的变量上是平衡的。总例数使用IL-2组24例,对照组26例,平均年龄IL-2组为59岁,对照组57岁,卡氏评分平均分均为80分。
2.2 副反应及并发症：①发热：术前用IL-2治疗的病人有54%出现了不同程度的发热，体温高于38℃，类似流感症状，但没有神经或外科系统的并发症发生；②感染及伤口渗血：IL-2组只有1例出现肺部感染，而对照组中全身感染有4例，局部伤口渗血有4例，两组相比感染及局部渗血并发症IL-2组显著低于对照组(P<0.05)。
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2.3 免疫功能的变化：对照组与术前IL-2治疗组外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4 +、CD8+水平及CD4+/CD8+比值，NK细胞杀伤活性(%),可溶性IL-2受体水平 见表1。
表1 对照组与术前IL-2治疗组外周血T淋巴细胞亚群、CD3+ 、CD4+水平及CD4+/CD8+比值，NK细胞杀伤活性(%),可溶性IL-2受体水平比 较(
±s) 组 别n
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CD3+
(%)
CD4+
(%)
CD8+
(%)
CD4+/C D8+
NK活性
(%)
sIL-2R
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(IU/L)
对照组
26
58.35±3.9
29.8±3.2
31.2±2.2
0 .92±0.2
19.8±4.2
0.921±0.098
IL-2
治疗组
24
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67.40±3.1
38.5±3.8
22.02±2.8
1.7 8±0.3
28.7±5.2
0.783±0.080
两组各项指标相比,差别有非常显著性(P<0.01)
(治疗组各项指标检测结果取术后3,7,14 d检测结果的平均值)
2.4 近期疗效：按WHO标准，无完全缓解(CR)病人，但部分缓解率(PR)IL-2组高于对照组 ，但这种差别尚无统计学上的显著性。
, http://www.100md.com 2.5 生存率比较：平均生存期IL-2组(21±2)个月,显著长于对照组(12±2)个月(P< 0.01)；无进展生存期(稳定期)IL-2组也显著长于对照组[(13±2)个月，(6±1)个月， P<0.05]；对照组病人存活期无1例超过2年，相比之下，IL-2组则有4例的病人生存 期超过3年。
3 讨 论
恶性肿瘤的治疗已经由单一模式走向综合治疗模式，并在许多肿瘤的治疗中取得明显的 成效[1]。其中生物治疗在各种其它治疗方法中所起到的独特免疫重建作用更是日 益受到人们的普遍关注，相关的研究和应用也日益增多，某些临床应用已显示出具有明显的 疗效[2]。但细胞因子作为一种免疫调节剂在晚期癌症病人的治疗中有何作用及如 何应用尚有待进一步明确[3]。本次临床研究结果显示，IL-2治疗组外周血T淋巴 细胞亚群CD3+、CD4+水平及CD4+/CD8+比值，NK细胞杀伤活性(%)高于对 照组,而CD8+,sIL-2R水平低于对照组,目前认为CD3+细胞、NK细胞，主要是杀伤细 胞，CD4+细胞主要是辅助细胞，CD8+细胞相当于抑制性细胞而sIL-2R属于免疫抑 制性因子，这些指标的变化，直接与机体免疫功能的状况有关,提示术前IL-2的免疫治疗可 以中和晚期结肠癌病人姑息手术治疗所诱发的免疫抑制，提高患者的免疫功能,和文献报道 一致[4]。我们的研究结果还显示，IL-2一般注射6 d，就可以充分防止手术所诱 发的免疫抑制。由于IL-2的外源性注射既刺激了其他内源性免疫调节因子的产生，也刺激T 辅助细胞的产生及激活NK细胞，后者又进一步导致IL-2的分泌，因此，IL-2术前所诱发的 内源性细胞因子的分泌可以使病人能够抵御由外科手术所导致的免疫损害,提高晚期结肠癌 病人的免疫功能。此外，本研究还提示，IL-2的术前注射可以提高晚期结肠癌病 人的生存期,这和机体的免疫功能得到调整有关。 尽管一些未知的对预后可能造成影响的因 素不能完全排除， 但由于两组人群在主要的预后变量和术后的处理方面是可比的，因此， 术前使用IL-2后所致的生存期延长，在很大程度上是依赖于使用了IL-2。
, 百拇医药
参 考 文 献
1，O'Connell MJ,Laurie JA,Kahn M,et al.Prospectively randomized trial of postoperative adjuvant chemotherapy in patients with high-risk colon cancer.J Clin Oncol，1998，16(1):295-300.
2，Riethmuller G,Holz E,Schmiegel W,et al.Monoclonal antibody therapy fo r resected Dukes'C colorectal cancer:Seven-year outcome of a multicenter random ized tral. J Clin Oncol，1998，16(5):1 788-1 794.
3，Palmeri S,Meli M,Danova M,et al.5-Fluorouracil plus interferon alpha -2a compared to 5-Fluorouracil alone in the treatment of advanced colon carcin oma:a multicentric randomized study.J Cancer Res Clin Oncol，1998，124(3～4):191 -198.
4，Tagliaterri P,Barile C,Caraglia M,et al.Daily low-dose subcutaneous recombinant interleukin-2 by alternate weekly administration:antitumor activity and immunomodulatory effects.Am J Clin Oncol，1998，21(1):48-53.
收稿日期：1999-06-20, 百拇医药