健延龄胶囊中大黄素大黄素甲醚含量测定
作者：朱 瑾 吴德康
单位：朱 瑾(苏州雷允上(苏州)药业有限公司，江苏 苏州 215003)；吴德康(南京中医药大学，江苏 南京 210029)
关键词：健延龄胶囊；大黄素；大黄素甲醚；含量测定
时珍国医国药000124 提 要：采用薄层扫描法测定了10批样品，大黄素平均含量为1.993‰，平均回收率99.08%， RSD为3.084%；大黄素甲醚平均含量为0.845‰，平均回收率99.12%， RSD为2.818%。该方法可以作为健延龄胶囊的质量控制依据。
中图分类号：R284.2 文献标识码：A
文章编号：1008-0805(2000)01-0029-01■
健延龄胶囊由制首乌、熟地黄、珍珠等中药制成，具有填精髓、养气血、调脏腑、固本原的功效。君药何首乌投料量大，为主要补药，应用薄层层析，扫描测定主要成分大黄素、大黄素甲醚的含量。该方法重现性好、专属性强，简便可靠。
, 百拇医药
1 实验材料
1.1 药品：健延龄胶囊，空白对照品及制首乌均由苏州雷允上制药厂提供。
1.2 试剂：对照品购自中国药品生物制品检定所，其中大黄素批号为756-8902；大黄素甲醚批号为758-9301；甲醇、乙醚、盐酸、氯仿、石油醚(30～60℃)、甲酸乙酯、正己烷、醋酸乙酯均为分析纯；硅胶H为青岛海洋化工厂产品，0.5% CMC-Na溶液。
1.3 仪器：日本岛津CS-930薄层扫描仪。
2 方法及结果
2.1 定性分析
2.1.1 标准液的制备：精密称取大黄素标准品，加甲醇2 ml，使成每ml含0.680 mg的溶液；精密称取大黄素甲醚标准品，加氯仿2 ml，使成每ml含0.602 mg的溶液，作为标准液。
, 百拇医药
2.1.2 样品液的制备：取本品20粒，倾出内容物，研细，取5 g，精密称定，加甲醇10 ml，置90℃水浴回流3 h，滤过，滤液回收甲醇，再蒸干，残渣加水20 ml使溶解，加盐酸2 ml，置水浴上回流30 min，立即冷却，用乙醚萃取5次，依次为50，40，30，20，20 ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加氯仿溶解使成2 ml，作为供试液。
2.1.3 制首乌对照液的制备：制备方法同2.1.2。
2.1.4 空白对照液的制备：制备方法同2.1.2。
2.1.5 展开剂的选择[1]：选用石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)作为展开剂(展开剂配制后有分层现象，放置30 min，吸取上层液使用)上行展开，展距为7 cm。
2.1.6 薄层板的制备：硅胶H加0.5%CMC-Na混匀制板，厚度300 μm，玻板规格10 cm×20 cm。
, 百拇医药
2.1.7 薄层层析：吸取大黄素、大黄素甲醚标准液、制首乌对照液、空白对照液、样品液各3 μl，点样于同一薄层板上，按上述条件展开，取出晾干，荧光灯下检视，结果样品与对照药材大黄素，大黄素甲醚的相应位置上显相同的黄色斑点。
2.2 定量分析
2.2.1 扫描条件[2]：吸收波长 λ=440 nm, SX=3，狭缝1.2 mm×1.2 mm，反射吸收法锯齿扫描。
2.2.2 标准曲线：精密吸取标准液1，2，3，4，5，6 μl点于同一薄层板上，按上述条件展开，扫描测定各斑点的峰面积值，以峰面积值为纵坐标，点样量为横坐标，得回归方程为：大黄素 Y=1 023.58+5 171.65 X， λ=0.994。线性范围为0.680～4.080 μg。大黄素甲醚 Y=-166.19+4 952.90 X， λ=0.996，线性范围为0.602～3.612 μg。
, 百拇医药
2.2.3 稳定性试验：精密吸取样品液3 μl，点样，按上述条件展开，自0 h开始，间隔一段时间扫描，2 h内重复测定7次，峰面积值 RSD大黄素为1.54%，大黄素甲醚为2.01%。
2.2.4 精密度试验：精密吸取等量样品液点于同一薄板上，按上述条件展开，扫描。结果，大黄素 RSD为1.54%，大黄素甲醚 RSD为2.01%。
2.2.5 重现性试验：精密称取同一批号样品6份，各约5 g，按样品液制备方法制得供试液，精密吸取供试液3 μl及标准液2 μl，2 μl点于同一薄板上，按上述条件展开，扫描测定。结果大黄素 RSD 为1.63%，大黄素甲醚 RSD为3.23%。
2.2.6 回收率试验：分别精密称取同一样品2 g，5份，各精密加入大黄素，大黄素甲醚对照品，按样品液的制备方法制备。精密吸取3 μl及对照品液2 μl，4 μl点于同一薄板，按上述条件展开，薄层扫描定量，计算回收率。结果见表1、表2。
, 百拇医药
表1 大黄素回收率试验 序号
加样量/mg
回收量/mg
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1
0.292 3
0.281 3
96.24
, 百拇医药
2
0.311 2
0.316 0
101.55
3
0.309 8
0.302 5
97.64
99.08
3.094
4
0.304 5
0.299 1
, 百拇医药
98.22
5
0.320 8
0.332 8
103.74
表2 大黄素甲醚回收率试验 序号
加样量/mg
回收量/mg
回收率
(%)
平均回收率
(%)
, 百拇医药 RSD
(%)
1
0.382 4
0.375 2
98.13
2
0.381 7
0.380 5
99.68
3
0.384 5
0.399 1
, http://www.100md.com
103.81
99.12
2.818
4
0.401 2
0.390 3
97.29
5
0.410 4
0.402 0
97.96
2.2.7 样品中大黄素、大黄素甲醚的含量测定：精密称取10个批号中样品各约5 g，按样品液的制备方法制得供试液，精密吸取样品液及对照品液各2 μl，4 μl点于同一薄板上，按上述条件展开，薄层扫描定量，结果见表3。表3 不同批号样品含量测定结果( n=3) 批号
, 百拇医药
大黄素
大黄素甲醚
平均含量(10-1%)
RSD(%)
平均含量(10-1%)
RSD(%)
1
2.009 3
0.23
0.879 3
1.18
2
, 百拇医药
2.150 7
2.10
0.902 0
3.14
3
2.073 3
2.77
0.725 3
2.86
4
2.206 3
2.99
0.841 3
, http://www.100md.com
3.45
5
1.792 0
4.21
0.732 5
3.59
6
1.642 0
3.28
0.754 0
2.53
7
2.084 0
, http://www.100md.com
2.37
0.799 3
4.84
8
1.871 3
1.04
0.822 7
3.29
9
1.944 7
0.68
0.984 0
4.08
, http://www.100md.com
10
2.150 0
0.56
1.010 0
1.19
3 小结
采用薄层扫描法测定健延龄胶囊中大黄素、大黄素甲醚的含量，方法简便且快速。依据含量最低下限一般为10批号中样品的平均含量为80%的原则，那么10批号样品中大黄素平均含量为1.993‰，含量限度应该不少于1.594 4×10-1%；大黄素甲醚平均含量为0.845 0×10-1%，含量限度应该不少于0.676 0×10-1%。
作者简介：朱 瑾(1968-)，男(汉族)，江苏省苏州市人，现任雷允上(苏州)药业有限公司工程师，学士学位.
参考文献：
[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典中药薄层色谱彩色图集[M].广州：广东科技出版社，1993∶22，23，51，116
[2]刘汉清，石珊珊.首乌片蒽醌类化合物的薄层扫描定量[J].中成药，1989，11(5)∶12
收稿日期：1999-06-22；
修订日期：1999-10-23；, http://www.100md.com
单位：朱 瑾(苏州雷允上(苏州)药业有限公司，江苏 苏州 215003)；吴德康(南京中医药大学，江苏 南京 210029)
关键词：健延龄胶囊；大黄素；大黄素甲醚；含量测定
时珍国医国药000124 提 要：采用薄层扫描法测定了10批样品，大黄素平均含量为1.993‰，平均回收率99.08%， RSD为3.084%；大黄素甲醚平均含量为0.845‰，平均回收率99.12%， RSD为2.818%。该方法可以作为健延龄胶囊的质量控制依据。
中图分类号：R284.2 文献标识码：A
文章编号：1008-0805(2000)01-0029-01■
健延龄胶囊由制首乌、熟地黄、珍珠等中药制成，具有填精髓、养气血、调脏腑、固本原的功效。君药何首乌投料量大，为主要补药，应用薄层层析，扫描测定主要成分大黄素、大黄素甲醚的含量。该方法重现性好、专属性强，简便可靠。
, 百拇医药
1 实验材料
1.1 药品：健延龄胶囊，空白对照品及制首乌均由苏州雷允上制药厂提供。
1.2 试剂：对照品购自中国药品生物制品检定所，其中大黄素批号为756-8902；大黄素甲醚批号为758-9301；甲醇、乙醚、盐酸、氯仿、石油醚(30～60℃)、甲酸乙酯、正己烷、醋酸乙酯均为分析纯；硅胶H为青岛海洋化工厂产品，0.5% CMC-Na溶液。
1.3 仪器：日本岛津CS-930薄层扫描仪。
2 方法及结果
2.1 定性分析
2.1.1 标准液的制备：精密称取大黄素标准品，加甲醇2 ml，使成每ml含0.680 mg的溶液；精密称取大黄素甲醚标准品，加氯仿2 ml，使成每ml含0.602 mg的溶液，作为标准液。
, 百拇医药
2.1.2 样品液的制备：取本品20粒，倾出内容物，研细，取5 g，精密称定，加甲醇10 ml，置90℃水浴回流3 h，滤过，滤液回收甲醇，再蒸干，残渣加水20 ml使溶解，加盐酸2 ml，置水浴上回流30 min，立即冷却，用乙醚萃取5次，依次为50，40，30，20，20 ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加氯仿溶解使成2 ml，作为供试液。
2.1.3 制首乌对照液的制备：制备方法同2.1.2。
2.1.4 空白对照液的制备：制备方法同2.1.2。
2.1.5 展开剂的选择[1]：选用石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)作为展开剂(展开剂配制后有分层现象，放置30 min，吸取上层液使用)上行展开，展距为7 cm。
2.1.6 薄层板的制备：硅胶H加0.5%CMC-Na混匀制板，厚度300 μm，玻板规格10 cm×20 cm。
, 百拇医药
2.1.7 薄层层析：吸取大黄素、大黄素甲醚标准液、制首乌对照液、空白对照液、样品液各3 μl，点样于同一薄层板上，按上述条件展开，取出晾干，荧光灯下检视，结果样品与对照药材大黄素，大黄素甲醚的相应位置上显相同的黄色斑点。
2.2 定量分析
2.2.1 扫描条件[2]：吸收波长 λ=440 nm, SX=3，狭缝1.2 mm×1.2 mm，反射吸收法锯齿扫描。
2.2.2 标准曲线：精密吸取标准液1，2，3，4，5，6 μl点于同一薄层板上，按上述条件展开，扫描测定各斑点的峰面积值，以峰面积值为纵坐标，点样量为横坐标，得回归方程为：大黄素 Y=1 023.58+5 171.65 X， λ=0.994。线性范围为0.680～4.080 μg。大黄素甲醚 Y=-166.19+4 952.90 X， λ=0.996，线性范围为0.602～3.612 μg。
, 百拇医药
2.2.3 稳定性试验：精密吸取样品液3 μl，点样，按上述条件展开，自0 h开始，间隔一段时间扫描，2 h内重复测定7次，峰面积值 RSD大黄素为1.54%，大黄素甲醚为2.01%。
2.2.4 精密度试验：精密吸取等量样品液点于同一薄板上，按上述条件展开，扫描。结果，大黄素 RSD为1.54%，大黄素甲醚 RSD为2.01%。
2.2.5 重现性试验：精密称取同一批号样品6份，各约5 g，按样品液制备方法制得供试液，精密吸取供试液3 μl及标准液2 μl，2 μl点于同一薄板上，按上述条件展开，扫描测定。结果大黄素 RSD 为1.63%，大黄素甲醚 RSD为3.23%。
2.2.6 回收率试验：分别精密称取同一样品2 g，5份，各精密加入大黄素，大黄素甲醚对照品，按样品液的制备方法制备。精密吸取3 μl及对照品液2 μl，4 μl点于同一薄板，按上述条件展开，薄层扫描定量，计算回收率。结果见表1、表2。
, 百拇医药
表1 大黄素回收率试验 序号
加样量/mg
回收量/mg
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1
0.292 3
0.281 3
96.24
, 百拇医药
2
0.311 2
0.316 0
101.55
3
0.309 8
0.302 5
97.64
99.08
3.094
4
0.304 5
0.299 1
, 百拇医药
98.22
5
0.320 8
0.332 8
103.74
表2 大黄素甲醚回收率试验 序号
加样量/mg
回收量/mg
回收率
(%)
平均回收率
(%)
, 百拇医药 RSD
(%)
1
0.382 4
0.375 2
98.13
2
0.381 7
0.380 5
99.68
3
0.384 5
0.399 1
, http://www.100md.com
103.81
99.12
2.818
4
0.401 2
0.390 3
97.29
5
0.410 4
0.402 0
97.96
2.2.7 样品中大黄素、大黄素甲醚的含量测定：精密称取10个批号中样品各约5 g，按样品液的制备方法制得供试液，精密吸取样品液及对照品液各2 μl，4 μl点于同一薄板上，按上述条件展开，薄层扫描定量，结果见表3。表3 不同批号样品含量测定结果( n=3) 批号
, 百拇医药
大黄素
大黄素甲醚
平均含量(10-1%)
RSD(%)
平均含量(10-1%)
RSD(%)
1
2.009 3
0.23
0.879 3
1.18
2
, 百拇医药
2.150 7
2.10
0.902 0
3.14
3
2.073 3
2.77
0.725 3
2.86
4
2.206 3
2.99
0.841 3
, http://www.100md.com
3.45
5
1.792 0
4.21
0.732 5
3.59
6
1.642 0
3.28
0.754 0
2.53
7
2.084 0
, http://www.100md.com
2.37
0.799 3
4.84
8
1.871 3
1.04
0.822 7
3.29
9
1.944 7
0.68
0.984 0
4.08
, http://www.100md.com
10
2.150 0
0.56
1.010 0
1.19
3 小结
采用薄层扫描法测定健延龄胶囊中大黄素、大黄素甲醚的含量，方法简便且快速。依据含量最低下限一般为10批号中样品的平均含量为80%的原则，那么10批号样品中大黄素平均含量为1.993‰，含量限度应该不少于1.594 4×10-1%；大黄素甲醚平均含量为0.845 0×10-1%，含量限度应该不少于0.676 0×10-1%。
作者简介：朱 瑾(1968-)，男(汉族)，江苏省苏州市人，现任雷允上(苏州)药业有限公司工程师，学士学位.
参考文献：
[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典中药薄层色谱彩色图集[M].广州：广东科技出版社，1993∶22，23，51，116
[2]刘汉清，石珊珊.首乌片蒽醌类化合物的薄层扫描定量[J].中成药，1989，11(5)∶12
收稿日期：1999-06-22；
修订日期：1999-10-23；, http://www.100md.com