影响口服液质量因素探讨
作者：万伟中 朱育凤
单位：万伟中(江苏省中医院，江苏 南京 210029)；朱育凤(江苏省中医院，江苏 南京 210029)
关键词：杞菊地黄口服液；芍药甙；丹皮；正交试验法；高效液相色谱
时珍国医国药000122 提 要：为探讨影响口服液质量因素(浸提工艺，原药材影响)。选用芍药甙作为检测指标，采用高效液相法测定方法，用正交试验法优化口服液浸提工艺，对几批成品及原药材进行含量测定。认定口服液质量与工艺、原药材有关。
中图分类号：R283 文献标识码：A
文章编号：1008-0805(2000)01-0027-01▲
杞菊地黄口服液由丹皮、杞子、熟地、山萸肉、泽泻、茯苓等药材组方精制而成，临床效果良好。笔者从事灭菌口服液制剂10余年，认为虽然口服液生产工艺相对固定，但还应视具体组方、有效成分而定。本文采用芍药甙作为检测指标进行正交试验优化工艺。
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1 仪器与试药
高效液相色谱仪 Waters 510 HPL(puml)，Waters 486 ov 检测器，746 Dcta Module 色谱柱为 HyPERSILBDS,C1810 μm，4.6×200 nm(大连物化所)流动相为乙腈-水(15∶85)，流速1.0 ml/min。室温测定波长230 nm，灵敏度0.1，纸速0.25 cm/min，芍药甙购自中国药品生物制品检定所，乙腈为色谱纯(北京昌化精细化工厂)；丹皮购自南京市药材公司；杞菊地黄口服液本院制剂部生产。
正交试验所用原药材为980917，按组方比例配制小样试验。
2 方法与结果
2.1 正交试验优选浸提工艺：根据组方，丹皮、菊花应水蒸气蒸馏提丹皮酚挥发油(两药已浸泡)。为考察浸泡因素，本小样试验不单独处理。确定浸泡时间、煎煮次数、加水量、煎煮时间、醇沉浓度为因素水平，分别为A，B，C，D，E。取方中8味药按表1确立因素水平加水煮，去渣，浓缩，加95%乙醇沉淀，滤过，滤液浓缩至无醇味，水沉，过滤配液得试样。每10 ml 含0.5 g丹皮药材。按质标研究方法测定各试样中芍药甙含量见表1。结果经方差分析表明，影响芍药甙含量主要因素为煎煮次数，浸泡与否，醇沉浓度，其中煎煮次数B有极显著影响( P≤0.01)，加水量与煎煮时间影响不大。结合 Ki 水平及生产实际，确立最佳分离工艺为 A2，B2，C2，D2，E2 即药材加水10倍浸泡1 h，煎煮2次，1.5 h/次，煎液浓缩后用95%乙醇沉淀达68%左右静上，为提取工艺[1]。
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表1 L8(27)正交试验表 NO
A
t/h
B
C
D
t/h
E
(%)
F
G
芍药甙含量
C/μg.ml-1
, http://www.100md.com
1
1(0)
1(1)
1(10倍)
1(1)
1(78)
1
1
41
2
1
1
1
, 百拇医药 2(1.5)
2(68)
2
2
50
3
1
2(2)
2
1
1
2
2
55
, 百拇医药
4
1
2
2
2
2
1
1
60
5
2(1)
1
2
1
, 百拇医药
2
1
2
43
6
2
1
2
2
1
2
1
47
7
, 百拇医药
2
2
1
1
2
2
1
75
8
2
2
1
2
1
, 百拇医药
1
2
64
KI
206
182
220
214
207
208
223
KL
229
, 百拇医药 253
215
221
228
227
272
66.125
630.12
3.125
6.125
55.125
45.125
, http://www.100md.com
0.125
2.2 杞菊地黄口服液、丹皮含量测定
2.2.1 供试品溶液制备：精密吸取样品液5 ml，置分液漏斗中，用水-饱和正丁醇提取4次，5 ml/次，分取上层溶液，水浴蒸干，残渣加流动相液适量溶解，移置10 ml 量瓶中，并稀释至刻度，摇匀取样10 ml，进样测定
取丹皮10 g，加水煎煮2次制成100 ml药液，取5 ml按A制法取样测定。每10 ml含1 g药材丹皮。
丹皮水煎液浓缩醇沉后制成供试液，同法测定。
2.2.2 标准曲线制备：精密称取芍药甙5.5 mg，溶于50%乙醇至50 ml 量瓶中，分别吸取0.25，0.50，0.75，1.0，1.5 ml于10 ml量瓶中并加水至刻度摇匀，加标准溶液分别吸取上述5种芍药甙溶液依次进样25 μg，按前述条件测定，记录积分值以进样量为横坐标积分植为纵坐标，绘制标准曲线，得一通过原点直线，回归方程为 Y=2 836.5+2 440.795 X， γ=0.999 9[2]。
, 百拇医药
2.2.3 重复性试验：按样品测定项下方法对同一批号分别取样平行测定5次，求得含量， RSD为1.78%。
2.2.4 样品测定结果：见表2。表2 样品测定结果 测定项
连丹
连丹(醇)
刮丹
刮丹(醇)
990114
990518
990627
每10 ml芍药甙
含量/mg
, http://www.100md.com
3.033
2.705
1.327
1.205
0.44
0.54
0.90
RSD(%)
1.81
1.71
2.20
2.31
1.46
, 百拇医药
2.83
1.05
2.2.5 加样回收率试验：分别吸取口服液样品适量，加入一定量芍药标准品，按供试液法制备，进行测定计算，结果见表3。表3 加样回收率试验结果 样品含量
芍药甙加入量/mg
实测量/mg
回收率(%)
平均回收率(%)
0.022
1.008
1.018
98.8
, 百拇医药
0.022
1.008
1.024
99.4
0.033
1.008
1.028
98.7
98.8
0.033
1.008
1.026
98.5
, 百拇医药
0.038
1.008
1.030
984
0.038
1.008
1.036
99.0
3 讨论
3.1 本文中小样试验丹皮、菊花、茯苓未作特殊处理，实际生产中应将丹皮、菊花水蒸气蒸馏提取丹皮酚挥发油，茯苓含多糖不醇沉。除丹皮外，尚有其他有效成分，其中山萸肉主要成分为马钱素，属于单萜类与熟地黄的单萜类梓醇分子，特征极相似，分子量与泽泻有效成分(泽泻醇)相似，因此笔者建议可否用马钱素作为主要成分检测考察其最佳工艺。
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3.2 笔者近10年采用同一工艺生产了近40批口服液，由于每批原药材质量有差异，每次配液时中间体 pH 不定，常在28～3.5之间，因成品 pH 标准为3.0～4.5，故加入少量1mol/LNaOH间pH3.1～3.5，消毒后 pH略下降0.05～0.1。经试验，对芍药甙含量影响 不大，芍药甙不易水解，不含酚 OH，适当调节 pH，对含量影响不大。
3.3 从表中可见，丹皮两品种芍药甙含量相差很大 ，生产中应以含量高的连丹作原料药，成品含量可达每 ml 含0.09 mg 以上，原药材含量可 达0.25%～0.30%，醇处理后含量有所下降。由此可见：影响口服液质量，除生产工艺外，原 药材质量更重要，投料时一定要选用固定产地药材，进行原药材定性定量检测，并寻求最佳 工艺生产，确保临床用药需要。■
作者简介：万伟中(1964-)，男(汉族)，江苏省常州人，现任江苏省中医院主管药师，学士学位.
参考文献：
[1]狄留庆，范欣生，范碧亭，等.止咳雾化液的制备及其质量标准研究[J]. 南京中医药大学学报，1999，15(2)∶88
[2]李淑芝，郭亚健，徐艳春，等.不同煎煮条件对芍药甙煎出量的影响[J].中成药， 1999，21(3)∶115
收稿日期：1999-07-26；
修订日期：1999-10-11；, 百拇医药
单位：万伟中(江苏省中医院，江苏 南京 210029)；朱育凤(江苏省中医院，江苏 南京 210029)
关键词：杞菊地黄口服液；芍药甙；丹皮；正交试验法；高效液相色谱
时珍国医国药000122 提 要：为探讨影响口服液质量因素(浸提工艺，原药材影响)。选用芍药甙作为检测指标，采用高效液相法测定方法，用正交试验法优化口服液浸提工艺，对几批成品及原药材进行含量测定。认定口服液质量与工艺、原药材有关。
中图分类号：R283 文献标识码：A
文章编号：1008-0805(2000)01-0027-01▲
杞菊地黄口服液由丹皮、杞子、熟地、山萸肉、泽泻、茯苓等药材组方精制而成，临床效果良好。笔者从事灭菌口服液制剂10余年，认为虽然口服液生产工艺相对固定，但还应视具体组方、有效成分而定。本文采用芍药甙作为检测指标进行正交试验优化工艺。
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1 仪器与试药
高效液相色谱仪 Waters 510 HPL(puml)，Waters 486 ov 检测器，746 Dcta Module 色谱柱为 HyPERSILBDS,C1810 μm，4.6×200 nm(大连物化所)流动相为乙腈-水(15∶85)，流速1.0 ml/min。室温测定波长230 nm，灵敏度0.1，纸速0.25 cm/min，芍药甙购自中国药品生物制品检定所，乙腈为色谱纯(北京昌化精细化工厂)；丹皮购自南京市药材公司；杞菊地黄口服液本院制剂部生产。
正交试验所用原药材为980917，按组方比例配制小样试验。
2 方法与结果
2.1 正交试验优选浸提工艺：根据组方，丹皮、菊花应水蒸气蒸馏提丹皮酚挥发油(两药已浸泡)。为考察浸泡因素，本小样试验不单独处理。确定浸泡时间、煎煮次数、加水量、煎煮时间、醇沉浓度为因素水平，分别为A，B，C，D，E。取方中8味药按表1确立因素水平加水煮，去渣，浓缩，加95%乙醇沉淀，滤过，滤液浓缩至无醇味，水沉，过滤配液得试样。每10 ml 含0.5 g丹皮药材。按质标研究方法测定各试样中芍药甙含量见表1。结果经方差分析表明，影响芍药甙含量主要因素为煎煮次数，浸泡与否，醇沉浓度，其中煎煮次数B有极显著影响( P≤0.01)，加水量与煎煮时间影响不大。结合 Ki 水平及生产实际，确立最佳分离工艺为 A2，B2，C2，D2，E2 即药材加水10倍浸泡1 h，煎煮2次，1.5 h/次，煎液浓缩后用95%乙醇沉淀达68%左右静上，为提取工艺[1]。
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表1 L8(27)正交试验表 NO
A
t/h
B
C
D
t/h
E
(%)
F
G
芍药甙含量
C/μg.ml-1
, http://www.100md.com
1
1(0)
1(1)
1(10倍)
1(1)
1(78)
1
1
41
2
1
1
1
, 百拇医药 2(1.5)
2(68)
2
2
50
3
1
2(2)
2
1
1
2
2
55
, 百拇医药
4
1
2
2
2
2
1
1
60
5
2(1)
1
2
1
, 百拇医药
2
1
2
43
6
2
1
2
2
1
2
1
47
7
, 百拇医药
2
2
1
1
2
2
1
75
8
2
2
1
2
1
, 百拇医药
1
2
64
KI
206
182
220
214
207
208
223
KL
229
, 百拇医药 253
215
221
228
227
272
66.125
630.12
3.125
6.125
55.125
45.125
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0.125
2.2 杞菊地黄口服液、丹皮含量测定
2.2.1 供试品溶液制备：精密吸取样品液5 ml，置分液漏斗中，用水-饱和正丁醇提取4次，5 ml/次，分取上层溶液，水浴蒸干，残渣加流动相液适量溶解，移置10 ml 量瓶中，并稀释至刻度，摇匀取样10 ml，进样测定
取丹皮10 g，加水煎煮2次制成100 ml药液，取5 ml按A制法取样测定。每10 ml含1 g药材丹皮。
丹皮水煎液浓缩醇沉后制成供试液，同法测定。
2.2.2 标准曲线制备：精密称取芍药甙5.5 mg，溶于50%乙醇至50 ml 量瓶中，分别吸取0.25，0.50，0.75，1.0，1.5 ml于10 ml量瓶中并加水至刻度摇匀，加标准溶液分别吸取上述5种芍药甙溶液依次进样25 μg，按前述条件测定，记录积分值以进样量为横坐标积分植为纵坐标，绘制标准曲线，得一通过原点直线，回归方程为 Y=2 836.5+2 440.795 X， γ=0.999 9[2]。
, 百拇医药
2.2.3 重复性试验：按样品测定项下方法对同一批号分别取样平行测定5次，求得含量， RSD为1.78%。
2.2.4 样品测定结果：见表2。表2 样品测定结果 测定项
连丹
连丹(醇)
刮丹
刮丹(醇)
990114
990518
990627
每10 ml芍药甙
含量/mg
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3.033
2.705
1.327
1.205
0.44
0.54
0.90
RSD(%)
1.81
1.71
2.20
2.31
1.46
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2.83
1.05
2.2.5 加样回收率试验：分别吸取口服液样品适量，加入一定量芍药标准品，按供试液法制备，进行测定计算，结果见表3。表3 加样回收率试验结果 样品含量
芍药甙加入量/mg
实测量/mg
回收率(%)
平均回收率(%)
0.022
1.008
1.018
98.8
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0.022
1.008
1.024
99.4
0.033
1.008
1.028
98.7
98.8
0.033
1.008
1.026
98.5
, 百拇医药
0.038
1.008
1.030
984
0.038
1.008
1.036
99.0
3 讨论
3.1 本文中小样试验丹皮、菊花、茯苓未作特殊处理，实际生产中应将丹皮、菊花水蒸气蒸馏提取丹皮酚挥发油，茯苓含多糖不醇沉。除丹皮外，尚有其他有效成分，其中山萸肉主要成分为马钱素，属于单萜类与熟地黄的单萜类梓醇分子，特征极相似，分子量与泽泻有效成分(泽泻醇)相似，因此笔者建议可否用马钱素作为主要成分检测考察其最佳工艺。
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3.2 笔者近10年采用同一工艺生产了近40批口服液，由于每批原药材质量有差异，每次配液时中间体 pH 不定，常在28～3.5之间，因成品 pH 标准为3.0～4.5，故加入少量1mol/LNaOH间pH3.1～3.5，消毒后 pH略下降0.05～0.1。经试验，对芍药甙含量影响 不大，芍药甙不易水解，不含酚 OH，适当调节 pH，对含量影响不大。
3.3 从表中可见，丹皮两品种芍药甙含量相差很大 ，生产中应以含量高的连丹作原料药，成品含量可达每 ml 含0.09 mg 以上，原药材含量可 达0.25%～0.30%，醇处理后含量有所下降。由此可见：影响口服液质量，除生产工艺外，原 药材质量更重要，投料时一定要选用固定产地药材，进行原药材定性定量检测，并寻求最佳 工艺生产，确保临床用药需要。■
作者简介：万伟中(1964-)，男(汉族)，江苏省常州人，现任江苏省中医院主管药师，学士学位.
参考文献：
[1]狄留庆，范欣生，范碧亭，等.止咳雾化液的制备及其质量标准研究[J]. 南京中医药大学学报，1999，15(2)∶88
[2]李淑芝，郭亚健，徐艳春，等.不同煎煮条件对芍药甙煎出量的影响[J].中成药， 1999，21(3)∶115
收稿日期：1999-07-26；
修订日期：1999-10-11；, 百拇医药