胃灵丹对幽门螺杆菌体外抑菌试验
作者：杜平华 朱世真 陈涛
单位：杜平华 朱世真 陈涛(青岛市药品检验所 266071)
关键词：胃灵丹；幽门螺杆菌
药物分析杂志000107 摘 要：目的：分离培养幽门螺杆菌，为科学研究和药品质量检测提供先进和简便的方法。方法：通过对幽门螺杆菌实验的体外抑菌实验，为临床医疗提供可靠有效的药物。结果：抑菌浓度为0.39%，杀菌浓度为0.78%。结论：胃灵丹对幽门螺杆菌有较好抑菌作用。
Extrasomatic Antibacterial Test of Wei Ling Dan for Helicobacter Pylori
Du Pinghua，Zhu Shizhen and Chen Tao
, http://www.100md.com
(Qingdao Institute for Drug Control,266071)
Abstract：Objective：To separate and to cultivate helicobacter pylori,provide advanced and simple method for scientific research and drug control.Method:It pass through this antibacterial extrasomatic test for helicobacter pylori provided reliable and effective drug for clinical medicine.Results:The antibacterial concentration is 0.39% and the killbacterial concentration is 0.78%.Conclusion:Wei Ling Dan have a strong antibacter action of helicobacter pylori.
, 百拇医药
Key words：Wei Ling Dan,helicobacter pylori▲
幽门螺杆菌Helicobacter Pylori，简称HP，与胃溃疡、胃炎病变的密切关系已受到国内外专家普遍重视，并相继在细菌学和免疫学方面作了大量研究工作。我们用胃灵丹对80株幽门螺杆菌进行了体外抑菌试验，取得较满意结果。
1 材料和方法
样品：胃灵丹由青岛市医学院附属医院提供，胃得治由青岛海洋药物研究所提供。
培养基：布氏肉汤；改良SKirrow's培养基，按新编细菌检验用培养基手册配制。
药液制备：分别取胃灵丹及胃得治各10 g，分别加水100 mL，浸泡30 min后用文火煎煮2 h，放冷，过滤，滤渣再加水50 mL，文火煎煮30 min，过滤，合并滤液，加热浓缩至10 mL(每1 mL含原药1 g)其浓度即100%，于115 ℃灭菌20 min。备用。
, http://www.100md.com
菌株来源：取胃粘膜组织(由青岛医学院附属医院胃镜室提供)140例，均匀涂抹于SKirrow's培养基双碟上，置37 ℃微氧环境(使用德国bioMeerieux Generbox 加入催化剂，使成微氧环境，5%～8% CO2、5%～8% O2、33.6% H2)。孵育48 h后，经观察菌落菌体形态、生化反应及快速尿素酶试验，鉴定为幽门螺杆菌。
菌液制备：将所分离的幽门螺杆菌以布氏肉汤增菌48 h，再用10%葡萄糖液稀释至10-5(每1 mL约含1 000个菌)。
2 实验方法
采用试管2倍稀释法，即取无菌试管13支，每管加入布氏肉汤1 mL，第1支管加入上述煎煮药液1 mL，摇匀，倍比稀释至第11支管，第12和13支管不加药液，作加菌与不加菌对照试验。每管加稀释菌液10-4 0.1 mL，混匀，置37 ℃微氧环境培养48 h，观察结果。培养液混浊者为耐药，清晰透明者为敏感，然后按常规作抑菌和杀菌试验(取敏感管0.1 mL溶液，加入SKirrow's培养基双碟上划线，置37 ℃微氧培养48 h，有8个以上菌落生长者为抑菌，有8个以下生长者为杀菌)。
, 百拇医药
3 结果与讨论
3. 1 140例胃粘膜标本共检出幽门螺杆菌98株,阳性率70%(其中尿素酶阴性者14例)，快速尿素酶阳性109例，阳性率78%(其中培养阴性21例)。
3.2 对其中80株幽门螺杆菌作胃灵丹及胃得治药敏试验，结果胃灵丹最小抑菌浓度为0.1%～0.39%，最小杀菌浓度为0.2%～0.78%，相当于原药0.002～0.007 8 g.mL-1。胃得治抑菌及杀菌浓度均为3.12%～25%，相当于药液0.031 2～0.25 g.mL-1。胃灵丹和胃得治对幽门螺杆菌的MIC值见表1。
表1 胃灵丹和胃得治对幽门螺杆菌的MIC值 样品
株数
MIC值/g.mL-1
, 百拇医药
MIC50
MIC90
范围
胃灵丹
80
0.002
0.0039
0.001～0.0039
胃得治
80
0.0625
0.125
, 百拇医药
0.0312～0.25
3.3 试验表明胃灵丹对幽门螺杆菌具有较强的抑菌和杀菌作用，为临床治疗提供了可靠依据。
3.4 胃得治是海洋药物研究所研究的纯中药制剂，经专家鉴定对幽门螺杆菌有较强的抑菌和杀菌作用，以上对比试验表明，2者对幽门螺杆菌均具有较强的抑杀作用而胃灵丹更优于胃得治。
参考文献：
[1]俞树荣.微生物学和微生物学检验(高等医药院校教材).第二版.北京：人民卫生出版社，1997.219
[2]杜平华，吕文和.新编细菌检验用培养基手册.第一版.青岛海洋大学出版社，1994.106
[3]吕文和，于秀英，梁永信.胃和十二指肠粘膜幽门弯曲菌的检出与生物学特性探讨.上海医学检验杂志，1990，5(2):104
[4]吕文和，梁永信，宫兆忠.幽门弯曲菌感染的尿素酶试验与培养方法比较.中华医学检验杂志，1989，12(1)：39
[5]李影林，苏焯，张颖焐.临床微生物学及检验.第一版.吉林：吉林科学出版社，1991.320
[6]郑钧镛，王光宝，马绪荣.药品微生物学及检验技术.第一版.北京：人民卫生出版社，1989.149
收稿日期：1999-09-08, 百拇医药
单位：杜平华 朱世真 陈涛(青岛市药品检验所 266071)
关键词：胃灵丹；幽门螺杆菌
药物分析杂志000107 摘 要：目的：分离培养幽门螺杆菌，为科学研究和药品质量检测提供先进和简便的方法。方法：通过对幽门螺杆菌实验的体外抑菌实验，为临床医疗提供可靠有效的药物。结果：抑菌浓度为0.39%，杀菌浓度为0.78%。结论：胃灵丹对幽门螺杆菌有较好抑菌作用。
Extrasomatic Antibacterial Test of Wei Ling Dan for Helicobacter Pylori
Du Pinghua，Zhu Shizhen and Chen Tao
, http://www.100md.com
(Qingdao Institute for Drug Control,266071)
Abstract：Objective：To separate and to cultivate helicobacter pylori,provide advanced and simple method for scientific research and drug control.Method:It pass through this antibacterial extrasomatic test for helicobacter pylori provided reliable and effective drug for clinical medicine.Results:The antibacterial concentration is 0.39% and the killbacterial concentration is 0.78%.Conclusion:Wei Ling Dan have a strong antibacter action of helicobacter pylori.
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Key words：Wei Ling Dan,helicobacter pylori▲
幽门螺杆菌Helicobacter Pylori，简称HP，与胃溃疡、胃炎病变的密切关系已受到国内外专家普遍重视，并相继在细菌学和免疫学方面作了大量研究工作。我们用胃灵丹对80株幽门螺杆菌进行了体外抑菌试验，取得较满意结果。
1 材料和方法
样品：胃灵丹由青岛市医学院附属医院提供，胃得治由青岛海洋药物研究所提供。
培养基：布氏肉汤；改良SKirrow's培养基，按新编细菌检验用培养基手册配制。
药液制备：分别取胃灵丹及胃得治各10 g，分别加水100 mL，浸泡30 min后用文火煎煮2 h，放冷，过滤，滤渣再加水50 mL，文火煎煮30 min，过滤，合并滤液，加热浓缩至10 mL(每1 mL含原药1 g)其浓度即100%，于115 ℃灭菌20 min。备用。
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菌株来源：取胃粘膜组织(由青岛医学院附属医院胃镜室提供)140例，均匀涂抹于SKirrow's培养基双碟上，置37 ℃微氧环境(使用德国bioMeerieux Generbox 加入催化剂，使成微氧环境，5%～8% CO2、5%～8% O2、33.6% H2)。孵育48 h后，经观察菌落菌体形态、生化反应及快速尿素酶试验，鉴定为幽门螺杆菌。
菌液制备：将所分离的幽门螺杆菌以布氏肉汤增菌48 h，再用10%葡萄糖液稀释至10-5(每1 mL约含1 000个菌)。
2 实验方法
采用试管2倍稀释法，即取无菌试管13支，每管加入布氏肉汤1 mL，第1支管加入上述煎煮药液1 mL，摇匀，倍比稀释至第11支管，第12和13支管不加药液，作加菌与不加菌对照试验。每管加稀释菌液10-4 0.1 mL，混匀，置37 ℃微氧环境培养48 h，观察结果。培养液混浊者为耐药，清晰透明者为敏感，然后按常规作抑菌和杀菌试验(取敏感管0.1 mL溶液，加入SKirrow's培养基双碟上划线，置37 ℃微氧培养48 h，有8个以上菌落生长者为抑菌，有8个以下生长者为杀菌)。
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3 结果与讨论
3. 1 140例胃粘膜标本共检出幽门螺杆菌98株,阳性率70%(其中尿素酶阴性者14例)，快速尿素酶阳性109例，阳性率78%(其中培养阴性21例)。
3.2 对其中80株幽门螺杆菌作胃灵丹及胃得治药敏试验，结果胃灵丹最小抑菌浓度为0.1%～0.39%，最小杀菌浓度为0.2%～0.78%，相当于原药0.002～0.007 8 g.mL-1。胃得治抑菌及杀菌浓度均为3.12%～25%，相当于药液0.031 2～0.25 g.mL-1。胃灵丹和胃得治对幽门螺杆菌的MIC值见表1。
表1 胃灵丹和胃得治对幽门螺杆菌的MIC值 样品
株数
MIC值/g.mL-1
, 百拇医药
MIC50
MIC90
范围
胃灵丹
80
0.002
0.0039
0.001～0.0039
胃得治
80
0.0625
0.125
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0.0312～0.25
3.3 试验表明胃灵丹对幽门螺杆菌具有较强的抑菌和杀菌作用，为临床治疗提供了可靠依据。
3.4 胃得治是海洋药物研究所研究的纯中药制剂，经专家鉴定对幽门螺杆菌有较强的抑菌和杀菌作用，以上对比试验表明，2者对幽门螺杆菌均具有较强的抑杀作用而胃灵丹更优于胃得治。
参考文献：
[1]俞树荣.微生物学和微生物学检验(高等医药院校教材).第二版.北京：人民卫生出版社，1997.219
[2]杜平华，吕文和.新编细菌检验用培养基手册.第一版.青岛海洋大学出版社，1994.106
[3]吕文和，于秀英，梁永信.胃和十二指肠粘膜幽门弯曲菌的检出与生物学特性探讨.上海医学检验杂志，1990，5(2):104
[4]吕文和，梁永信，宫兆忠.幽门弯曲菌感染的尿素酶试验与培养方法比较.中华医学检验杂志，1989，12(1)：39
[5]李影林，苏焯，张颖焐.临床微生物学及检验.第一版.吉林：吉林科学出版社，1991.320
[6]郑钧镛，王光宝，马绪荣.药品微生物学及检验技术.第一版.北京：人民卫生出版社，1989.149
收稿日期：1999-09-08, 百拇医药