RP-HPLC法测定枸橼酸昔多芬片的含量
作者：刘雁鸣 杨汉初 缪建荣
单位：刘雁鸣 杨汉初 缪建荣(湖南省药品检验所 410001)
关键词：
药物分析杂志000126 枸橼酸昔多芬(Sildenafil Citrate,现译为枸橼酸西地非尔)，为新一代治疗性功能障碍的药物[1，2]，其原料及制剂在我国尚未使用。本文采用高效液相色谱法，以外标法测定枸橼酸昔多芬片的含量，操作简便快速，结果准确可靠。辅料及杂质降解物不干扰测定。
1 仪器与试药
Waters 2010系统，包括510泵，486紫外检测器，717自动进样器，Millennium 2010工作站。
枸橼酸昔多芬对照品(含量为99.95%)、枸橼酸昔多芬片(批号为：970401，970402，970403)均为试制品。甲醇、乙腈为色谱纯试剂，其余均为分析纯试剂。
, 百拇医药
2 色谱条件
2.1 检测波长的确定 取枸橼酸昔多芬对照品适量，加0.1 mol.L-1盐酸溶液制成20 μg.mL-1的溶液，在200～400 nm波长处扫描，在291 nm波长处有最大吸收。本文选择291 nm为检测波长。
2.2 色谱条件的确定 以硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol.L-1三乙胺溶液(用磷酸调节pH至3.5)-甲醇-乙腈(45∶33∶22)为流动相，流速为1mL.min-1，检测波长为291 nm。
3 线性关系
精密称取经105 ℃干燥至恒重的枸橼酸昔多芬对照品166.0 mg，置100 mL量瓶中，加0.1 mol.L-1盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL，置25 mL量瓶中，加0.1 mol.L-1盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。再分别量取上述各溶液20 μL，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。以枸橼酸昔多芬对照品的浓度C(μg.mL-1)为横坐标，以峰面积A为纵坐标，求得回归方程：
, 百拇医药
A=2.32×104C-1.26×106 r=0.994 9
表明在66.4～332.0 μg.mL-1浓度范围，峰面积与浓度呈良好的线性关系。
4 溶液稳定性试验
取线性关系试验项下的第3份溶液于室温下立即测定与分别放置2，8，24 h内测定，结果表明溶液在24 h内稳定，峰面积基本一致。
5 回收率试验
精密称取经105 ℃干燥至恒重的枸橼酸昔多芬对照品约18 mg，置100 mL量瓶中，称取模拟处方量混合辅料60 mg，照样品测定项下的方法测定，计算回收率，平均回收率为100.6%，RSD为0.52%，n=5。
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6 方法专属性试验
6.1 辅料对含量测定的影响 经实验辅料无吸收峰，对枸橼酸昔多芬的测定不产生干扰。
6.2 杂质及降解物对含量测定的影响 枸橼酸昔多芬样品中未见杂质吸收峰，将粗品(厂方提供)同法处理，进样20 μL，得色谱图(图1)。各杂质及降解物对枸橼酸昔多芬的定量无干扰。
图1 杂质及降解物对枸橼酸昔多芬片含量测定的影响
1.枸橼酸昔多芬
7 样品测定
照高效液相色谱法(中国药典1995年版二部附录ⅤD)测定。
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取枸橼酸昔多芬片20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于枸橼酸昔多芬20 mg)，置100 mL量瓶中，加0.1 mol.L-1盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取经105 ℃干燥至恒重的枸橼酸昔多芬对照品适量，精密称定，加0.1 mol.L-1盐酸溶液溶解并定量稀释制成0.2 mg.mL-1的溶液，作为对照品溶液。精密量取上述2溶液各20 μL，分别注入液相色谱仪，按外标法计算，即得。
按上述方法对批号为970401，970402，970403的枸橼酸昔多芬片的含量进行测定，结果分别为101.5%，100.0%，98.0%；RSD分别为0.56%，0.60%，0.49%，n=3。
本文提出了用反相高效液相色谱法测定枸橼酸昔多芬片的含量，经用紫外分光光度法同时测定含量，2者无明显差异。■
参考文献:
[1]马培奇.阳萎治疗药物的现状及其进展.中国医药情报，1998，4(5)：268
[2]Boolell M.A novel effective oral therapy for male erectile dysfunction.Brit J Urol,1998，78：217
收稿日期：1999-03-17, http://www.100md.com
单位：刘雁鸣 杨汉初 缪建荣(湖南省药品检验所 410001)
关键词：
药物分析杂志000126 枸橼酸昔多芬(Sildenafil Citrate,现译为枸橼酸西地非尔)，为新一代治疗性功能障碍的药物[1，2]，其原料及制剂在我国尚未使用。本文采用高效液相色谱法，以外标法测定枸橼酸昔多芬片的含量，操作简便快速，结果准确可靠。辅料及杂质降解物不干扰测定。
1 仪器与试药
Waters 2010系统，包括510泵，486紫外检测器，717自动进样器，Millennium 2010工作站。
枸橼酸昔多芬对照品(含量为99.95%)、枸橼酸昔多芬片(批号为：970401，970402，970403)均为试制品。甲醇、乙腈为色谱纯试剂，其余均为分析纯试剂。
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2 色谱条件
2.1 检测波长的确定 取枸橼酸昔多芬对照品适量，加0.1 mol.L-1盐酸溶液制成20 μg.mL-1的溶液，在200～400 nm波长处扫描，在291 nm波长处有最大吸收。本文选择291 nm为检测波长。
2.2 色谱条件的确定 以硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol.L-1三乙胺溶液(用磷酸调节pH至3.5)-甲醇-乙腈(45∶33∶22)为流动相，流速为1mL.min-1，检测波长为291 nm。
3 线性关系
精密称取经105 ℃干燥至恒重的枸橼酸昔多芬对照品166.0 mg，置100 mL量瓶中，加0.1 mol.L-1盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL，置25 mL量瓶中，加0.1 mol.L-1盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。再分别量取上述各溶液20 μL，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。以枸橼酸昔多芬对照品的浓度C(μg.mL-1)为横坐标，以峰面积A为纵坐标，求得回归方程：
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A=2.32×104C-1.26×106 r=0.994 9
表明在66.4～332.0 μg.mL-1浓度范围，峰面积与浓度呈良好的线性关系。
4 溶液稳定性试验
取线性关系试验项下的第3份溶液于室温下立即测定与分别放置2，8，24 h内测定，结果表明溶液在24 h内稳定，峰面积基本一致。
5 回收率试验
精密称取经105 ℃干燥至恒重的枸橼酸昔多芬对照品约18 mg，置100 mL量瓶中，称取模拟处方量混合辅料60 mg，照样品测定项下的方法测定，计算回收率，平均回收率为100.6%，RSD为0.52%，n=5。
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6 方法专属性试验
6.1 辅料对含量测定的影响 经实验辅料无吸收峰，对枸橼酸昔多芬的测定不产生干扰。
6.2 杂质及降解物对含量测定的影响 枸橼酸昔多芬样品中未见杂质吸收峰，将粗品(厂方提供)同法处理，进样20 μL，得色谱图(图1)。各杂质及降解物对枸橼酸昔多芬的定量无干扰。
图1 杂质及降解物对枸橼酸昔多芬片含量测定的影响
1.枸橼酸昔多芬
7 样品测定
照高效液相色谱法(中国药典1995年版二部附录ⅤD)测定。
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取枸橼酸昔多芬片20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于枸橼酸昔多芬20 mg)，置100 mL量瓶中，加0.1 mol.L-1盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取经105 ℃干燥至恒重的枸橼酸昔多芬对照品适量，精密称定，加0.1 mol.L-1盐酸溶液溶解并定量稀释制成0.2 mg.mL-1的溶液，作为对照品溶液。精密量取上述2溶液各20 μL，分别注入液相色谱仪，按外标法计算，即得。
按上述方法对批号为970401，970402，970403的枸橼酸昔多芬片的含量进行测定，结果分别为101.5%，100.0%，98.0%；RSD分别为0.56%，0.60%，0.49%，n=3。
本文提出了用反相高效液相色谱法测定枸橼酸昔多芬片的含量，经用紫外分光光度法同时测定含量，2者无明显差异。■
参考文献:
[1]马培奇.阳萎治疗药物的现状及其进展.中国医药情报，1998，4(5)：268
[2]Boolell M.A novel effective oral therapy for male erectile dysfunction.Brit J Urol,1998，78：217
收稿日期：1999-03-17, http://www.100md.com