注射用硝普钠中细菌内毒素的检查
作者：王志斌 邵燕 周建平
单位：王志斌 邵燕 周建平(北京市药品检验所 100035)
关键词：
药物分析杂志000124 鲎试剂用于细菌内毒素的检测，具有操作简单、灵敏度高、重现性好、实用性强等优点[1，2]。为了扩大应用品种，我们对注射用硝普钠进行了细菌内毒素检测的研究，以取代中国药典1995年版[3]规定的热原检查。
1 实验材料
鲎试剂：灵敏度为0.5 EU.mL-1，批号980416；0.125 EU.mL-1，批号980429(广东湛江海洋生物制品厂)；灵敏度为0.125 EU.mL-1，批号980604(厦门鲎试剂厂)。
, 百拇医药
细菌内毒素工作标准品：批号9801，9605，每支60 EU(中国药品生物制品检定所)。
注射用硝普钠：每支50 mg，批号960121，960206，960312(北京制药工业研究所试验药厂)。
电热恒温水浴箱(湖北省黄石市医疗器械厂)，H-1微型混合器(上海沪西仪器厂)，实验用玻璃仪器均250 ℃干烤1 h。
2 方法与结果
2.1 鲎试剂灵敏度的复核 参照中国药典1995年版操作，结果与标示灵敏度(λ)相符，结见表1。
表1 3种鲎试剂灵敏度复核结果 鲎试剂
批号
标示λ
, 百拇医药
/EU.mL-1
细菌内毒素浓度/EU.mL-1
0.5
0.25
0.125
0.06
0.03
阴性对照
实测值
980429
0.125
, 百拇医药 ++++
++++------------
0.125
980416
0.25
++++
++++------------
0.25
980604
0.125
++++
++++------------
, 百拇医药
0.125
2.2 注射用硝普钠的内毒素限值(L)：根据药品内毒素限值的计算方法：L=K.M-1，K=5.0 EU.kg-1，注射用硝普钠热原检查剂量M为1 mg.kg-1，确定其内毒素限值为5 EU.mg-1。
2.3 供试品干扰实验 分别取注射用硝普钠(每支50 mg)1支，用注射用水将样品复溶后稀释为0.2，0.1 mg.mL-1，分别取注射用硝普钠样品稀释液(0.1，0.2 mg.mL-1)将细菌内毒素工作标准品分别制成浓度为2.0λ，1.0λ，0.5λ，0.25λ 4个浓度，每一浓度平行做4管，依法检查。结果：用不同批号的注射用硝普钠样品稀释液和用注射用水稀释的2.0λ，1.0λ均为阳性，0.5λ，0.25λ均为阴性。表明不同批号的注射用硝普钠，在0.1，0.2 mg.mL-1浓度下，对不同批号、不同灵敏度鲎试剂实验无干扰，结果见表2。表2 注射用硝普钠对鲎试剂的干扰试验结果 样品
, http://www.100md.com
批号
鲎试剂
批 号
细菌内毒素浓度/EU.mL-1
0.5
0.25
0.125
0.06
0.03
阴性对照
实测值
水+内毒素
, http://www.100md.com
980416
++++
++++------------
0.25
960121
980416
++++
++++------------
0.25
960206
980416
++++
, 百拇医药
++++------------
0.25
960121*
980416
++++
++++--------
0.25
水+内毒素
980429
++++
++++------------
0.125
, http://www.100md.com
960121
980429
++++
++++------------
0.125
960312
980429
++++
++++------------
0.125
水+内毒素
980604
, http://www.100md.com
++++
++++------------
0.125
960206
980604
++++
++++------------
0.125
注：* 表示该组样品浓度为0.2 mg.mL-1，其它组均为0.1 mg.mL-1；水+内毒素组以水为阴性对照，其它组均以样品为阴性对照
3 讨论
, 百拇医药
3.1 干扰试验结果表明，3个批号的注射用硝普钠被稀释成0.1 mg.mL-1时，对2家3批鲎试剂无干扰作用。所以本品可用细菌内毒素检查法检查热原。
3.2 根据本品热原检查的家兔剂量(M=1 mg.kg-1)和我国细菌内毒素标准品的致热阈值(K=5 EU.kg-1)，计算出本品细菌内毒素的理论限值L<5 EU.mg-1。计算安全系数为5.6，所以本检查所得出的结论，可以保证临床用药安全。■
参考文献：
[1]吴招娣，黎易，李爱芬.用鲎试剂法检测复方氨基酸注射液热原的考察.药物分析杂志，1995，15(4)：44
[2]梁希月，李仁秋.注射用头孢噻肟钠细菌内毒素检测方法的研究.药物分析杂志，1997，17(5)：325
[3]中国药典.1995.二部：872
收稿日期：1999-02-23, 百拇医药
单位：王志斌 邵燕 周建平(北京市药品检验所 100035)
关键词：
药物分析杂志000124 鲎试剂用于细菌内毒素的检测，具有操作简单、灵敏度高、重现性好、实用性强等优点[1，2]。为了扩大应用品种，我们对注射用硝普钠进行了细菌内毒素检测的研究，以取代中国药典1995年版[3]规定的热原检查。
1 实验材料
鲎试剂：灵敏度为0.5 EU.mL-1，批号980416；0.125 EU.mL-1，批号980429(广东湛江海洋生物制品厂)；灵敏度为0.125 EU.mL-1，批号980604(厦门鲎试剂厂)。
, 百拇医药
细菌内毒素工作标准品：批号9801，9605，每支60 EU(中国药品生物制品检定所)。
注射用硝普钠：每支50 mg，批号960121，960206，960312(北京制药工业研究所试验药厂)。
电热恒温水浴箱(湖北省黄石市医疗器械厂)，H-1微型混合器(上海沪西仪器厂)，实验用玻璃仪器均250 ℃干烤1 h。
2 方法与结果
2.1 鲎试剂灵敏度的复核 参照中国药典1995年版操作，结果与标示灵敏度(λ)相符，结见表1。
表1 3种鲎试剂灵敏度复核结果 鲎试剂
批号
标示λ
, 百拇医药
/EU.mL-1
细菌内毒素浓度/EU.mL-1
0.5
0.25
0.125
0.06
0.03
阴性对照
实测值
980429
0.125
, 百拇医药 ++++
++++------------
0.125
980416
0.25
++++
++++------------
0.25
980604
0.125
++++
++++------------
, 百拇医药
0.125
2.2 注射用硝普钠的内毒素限值(L)：根据药品内毒素限值的计算方法：L=K.M-1，K=5.0 EU.kg-1，注射用硝普钠热原检查剂量M为1 mg.kg-1，确定其内毒素限值为5 EU.mg-1。
2.3 供试品干扰实验 分别取注射用硝普钠(每支50 mg)1支，用注射用水将样品复溶后稀释为0.2，0.1 mg.mL-1，分别取注射用硝普钠样品稀释液(0.1，0.2 mg.mL-1)将细菌内毒素工作标准品分别制成浓度为2.0λ，1.0λ，0.5λ，0.25λ 4个浓度，每一浓度平行做4管，依法检查。结果：用不同批号的注射用硝普钠样品稀释液和用注射用水稀释的2.0λ，1.0λ均为阳性，0.5λ，0.25λ均为阴性。表明不同批号的注射用硝普钠，在0.1，0.2 mg.mL-1浓度下，对不同批号、不同灵敏度鲎试剂实验无干扰，结果见表2。表2 注射用硝普钠对鲎试剂的干扰试验结果 样品
, http://www.100md.com
批号
鲎试剂
批 号
细菌内毒素浓度/EU.mL-1
0.5
0.25
0.125
0.06
0.03
阴性对照
实测值
水+内毒素
, http://www.100md.com
980416
++++
++++------------
0.25
960121
980416
++++
++++------------
0.25
960206
980416
++++
, 百拇医药
++++------------
0.25
960121*
980416
++++
++++--------
0.25
水+内毒素
980429
++++
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0.125
, http://www.100md.com
960121
980429
++++
++++------------
0.125
960312
980429
++++
++++------------
0.125
水+内毒素
980604
, http://www.100md.com
++++
++++------------
0.125
960206
980604
++++
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0.125
注：* 表示该组样品浓度为0.2 mg.mL-1，其它组均为0.1 mg.mL-1；水+内毒素组以水为阴性对照，其它组均以样品为阴性对照
3 讨论
, 百拇医药
3.1 干扰试验结果表明，3个批号的注射用硝普钠被稀释成0.1 mg.mL-1时，对2家3批鲎试剂无干扰作用。所以本品可用细菌内毒素检查法检查热原。
3.2 根据本品热原检查的家兔剂量(M=1 mg.kg-1)和我国细菌内毒素标准品的致热阈值(K=5 EU.kg-1)，计算出本品细菌内毒素的理论限值L<5 EU.mg-1。计算安全系数为5.6，所以本检查所得出的结论，可以保证临床用药安全。■
参考文献：
[1]吴招娣，黎易，李爱芬.用鲎试剂法检测复方氨基酸注射液热原的考察.药物分析杂志，1995，15(4)：44
[2]梁希月，李仁秋.注射用头孢噻肟钠细菌内毒素检测方法的研究.药物分析杂志，1997，17(5)：325
[3]中国药典.1995.二部：872
收稿日期：1999-02-23, 百拇医药