柳穿鱼中的甾类化合物
作者：华会明 李铣 张海泉
单位：华会明(沈阳药科大学中药系1994级学生); 李铣(沈阳药科大学中药系1994级学生); 张海泉(沈阳药科大学中药系，沈阳 110015)
关键词：柳穿鱼；甾类；豆甾酮；麦角甾醇
沈阳药科大学学报000112 摘 要：从柳穿鱼(Linaria vulgaris Mill.)的干燥全草中分得7种甾类化合物，通过光谱解析鉴定其它结构为6β-羟基-豆甾-4-烯-3-酮(Ⅰ)、3β-羟基豆甾-5-烯-7-酮(Ⅱ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、胡萝卜苷棕榈酸酯(Ⅴ)、5α，8α-表二氧化麦角甾-6，22-二烯-3β-醇(Ⅵ)、麦角甾-7，22-二烯-3β，5α，6β-三醇(Ⅶ).其中Ⅰ，Ⅱ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ，Ⅶ为首次自该属植物分得.
分类号：R932
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Steroids from Linaria vulgaris Mill.
Hua Huiming,Li Xian,(Department of Traditional Chinese Medicines,)
Zhang Haiquan
(Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015)
Abstract：Seven steroids were isolated from the whole plant of Linaria vulgaris Mill.Their structures were identified as 6β-hydroxystigmast-4-en-3-one,3β-hydroxystigmast-5-en-7-one，β-sitosterol,daucosterol,daucosterol palmitate,5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene-3β-ol and ergosta-7，22-diene-3β，5α，6β-triol by the chemical and spectral analysis.
, 百拇医药
Key words：Linaria vulgaris Mill.；steroids;stigmastone;ergostanol▲
柳穿鱼(Linaria vulgaris Mill.)是玄参科(Scdrophulariaceae)柳穿鱼属(Linaria)植物，主要分布于我国东北三省和内蒙古地区.药用全草，具有清热解毒，散瘀消肿等功效.民间用于镇咳、祛痰、平喘、利尿，治头痛、头晕、黄疸、痔疮、便秘、皮肤病、烫伤等〔1〕.国外民间用柳穿鱼属植物作利尿剂、轻泻剂、解痉、利胆和抗炎药，用于治疗膀胱炎、出血、皮疹等〔2〕.已从该属植物中分得黄酮、环烯醚萜、二萜和生物碱类成分.我们通过对柳穿鱼的化学成分进行系统的研究，分得了7种甾类化合物，根据理化性质和光谱分析，鉴定了它们的结构是6β-羟基-豆甾-4-烯-3-酮(6β-hydroxystigmast-4-en-3-one,Ⅰ)、3β-羟基豆甾-5-烯-7-酮(3β-hydroxystigmast-5-en-7-one,Ⅱ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅲ)、胡萝卜苷(daucosterol,Ⅳ)、胡萝卜苷棕榈酸酯(daucosterol palmitate,Ⅴ)、5α，8α-表二氧化麦角甾-6，22-二烯-3β醇(5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene-3β-ol，Ⅵ)、麦角甾-7，22-二烯-3β，5α，6β-三醇(ergosta-7,22-diene-3β，5α，6β-triol,Ⅶ).其中Ⅰ，Ⅱ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ，Ⅶ为首次自该属植物分得.Ⅲ和Ⅳ经与已知物对照而得到鉴定.
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1 仪器与材料
熔点测定用日本Yanaco MP-S3型显微熔点测定仪(未校正)；IR测定用Bruker IR S-55型红外分光光度计；NMR谱用Bruker-AC(E)-300型核磁共振光谱仪测定(TMS作内标)；MS用VG-70SE磁式质谱仪.TLC和柱色谱用硅胶均由青岛海洋化工厂生产.
植物材料来自黑龙江省哈尔滨市郊及泰康县，原植物为柳穿鱼(学名Linaria valgaris Mill.).
2 提取与分离
柳穿鱼干燥全草(10kg)粉碎后，用95%的乙醇回流提取3次，浓缩后，加水调至醇浓度为70%，沉降叶绿素，滤除沉淀，回收溶剂得乙醇提取物.将总提取物加适量水，依次用石油醚、CHCl3、EtOAc和n-BuOH萃取.石油醚萃取物(67g)经硅胶柱色谱，以石油醚-丙酮不同比例的混合溶剂和甲醇洗脱.石油醚-丙酮(95∶5)洗脱部分得晶Ⅲ(700mg)；(93∶7)洗脱部分的213～221流份经二次硅胶柱色谱，以CHCl3-Me2CO(98∶2)洗脱得晶Ⅱ(5mg)；(9∶1)洗脱部分的222～242流份经二次硅胶柱色谱，以CHCl3-Me2CO(98∶2)洗脱得Ⅵ(21mg)，243～255流份以CHCl3-Me2CO(98∶2)洗脱得Ⅰ(14 mg)；(7∶3)洗脱部分的11～320流份经二次硅胶柱色谱，以CHCl3-Me2CO(9∶1)洗脱得粉末Ⅴ(49 mg)；(5∶5)洗脱部分的337～356流份经二次硅胶柱色谱，以CHCl3-Me2CO(95∶5)洗脱得粉末Ⅶ(5 mg).甲醇洗脱部分得粉末Ⅳ(30 mg).
, 百拇医药
3 结构鉴定
化合物Ⅰ 淡黄色片状结晶，mp 203～205℃(MeOH).EIMS给出分子量为428，结合13C-NMR信号，推测分子式为C29H48O2.DEPT谱显示在有6个CH3，10个CH2，9个CH和4个季碳，表明为甾醇类化合物.IR光谱(1692，1630cm-1)及13C-NMR信号200.35(s)，168.44(s)，126.38(d)示有α、β-不饱和羰基.1H-NMR的δ5.84(s)为烯氢质子.将其13C-NMR数据与6β-OH胆甾烯酮比较〔3〕，化合物Ⅰ具有相同的母核，所不同的是侧链上多一个乙基，经HMQC和HMBC谱归属其化学位移(见表1)，并确证其结构.1H-NMRδ信号4.37(brs)进一步说明6-OH为β-取向〔4〕.故鉴定Ⅰ为6β-hydroxystigmast-4-en-3-one，该化合物曾自宽叶香蒲Typha latifolia中分得〔4〕.EMS m/z:428(M+)，414(M+-CH2)，365，323，287(M+-side chain),245.IR νKBrmaxcm-1：3475，2956，1692，1630，1465，1384，1245，1038，877.1H-NMR(300 MHz，CDCl3)和13C-NMR(75.4 MHz,CDCl3)见表1.
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Tab.1 NMR chemical shifts of compounds Ⅰ,Ⅱ,Ⅴ,Ⅵ and Ⅶ
No
δH(Hz)(Ⅰ)
δC(Ⅰ)
δC(Ⅱ)
δC(Ⅴ)
δH(Hz)(Ⅵ)
δC(Ⅵ)
δC(Ⅶ)
1
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2.04，1.75 m
37.16 t
36.42 t
37.42
1.95，1.61 m
34.74 t
32.65
2
2.38，2.51 m
34.30 t
31.27 t
29.41
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1.51 m
30.17 t
33.84
3
200.35 s
70.52 d
74.96
3.97 m
66.50 d
67.60
4
5.83 s
126.38 d
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41.87 t
39.19
2.12，1.91 m
37.00 t
41.99
5
168.44 s
165.02 s
140.79
82.17 s
76.14
6
, 百拇医药 4.37 brs
73.35 d
126.17 d
121.70
6.24 d(8.5)
135.44 d
74.27
7
1.25 m
38.63 t
202.21 s
31.91
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6.51 d(8.5)
130.78 d
120.50
8
1.98 m
29.77 d
45.47 d
31.91
79.44 s
141.56
9
0.90 m
, 百拇医药 53.69 d
50.04 d
50.22
1.50 m
51.16 d
43.76
10
38.03 s
38.32 s
36.75
2.12，1.91 m
37.00 s
, 百拇医药 38.08
11
1.51 m
21.02 t
21.28 t
21.12
1.59，1.41 m
20.66 t
22.42
12
2.04，1.15 m
39.66 t
, 百拇医药 38.78 t
39.79
1.26，1.22 m
39.40 t
39.91
13
42.56 s
43.16 s
42.29
44.60 s
43.76
14
1.03 m
, 百拇医药
55.94 d
50.04 d
56.67
1.59 m
51.73 d
55.26
15
24.19 t
26.36 t
25.17
1.22 m
23.44 t
, 百拇医药 23.48
16
28.20 t
28.57 t
28.35
28.65 t
28.48
17
1.10 m
56.13 d
54.81 d
56.11
1.22 m
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56.27 d
56.13
18
0.74 s
12.04 q
12.00 q
11.94
0.82 s
12.90 q
12.52
19
1.38 s
19.54 q
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17.53 q
18.81
0.89 s
18.19 q
18.81
20
36.15 d
36.12 d
36.21
1.95 m
39.73 d
40.87
, 百拇医药 21
0.92 d(6.4)
18.76 q
18.97 q
18.99
1.0 d(6.5)
20.90 q
21.41
22
33.95 t
34.03 t
34.00
, 百拇医药 5.16 dd
135.23 d
136.20
(15.0，7.8)
23
1.15 m
26.18 t
26.23 t
26.19
5.20 dd
132.36 d
132.11
, 百拇医药
(15.0，7.0)
24
45.90 d
45.92 d
45.83
1.87 m
42.82 d
43.08
25
1.29 m
29.23 d
29.24 d
, 百拇医药 29.25
33.10 d
33.34
26
0.85 d(6.6)
19.81 q
19.81 q
19.76
0.81 d(6.7)
19.65 q
19.84
27
, 百拇医药 0.82 d(6.6)
19.07 q
19.09 q
19.22
0.83 d(6.7)
19.96 q
20.15
28
1.65 m
23.13 t
23.13 t
23.18
, 百拇医药
0.90 d(7.0)
17.58 q
17.83
29
0.82 t
12.04 q
12.00 q
11.77
化合物Ⅱ 无色片状结晶，mp 127～128℃(MeOH).EMIS m/z：428(M+)，414(M+-CH2)，410(M+-H2O)，395(M+-CH3-H2O)，287(M+-side chain).IR νKBrmaxcm-1：3529(羟基)，2935，2869，1672(羰基)，1657，1462，1383，1066，948.1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ:5.69(s,1H，H-6)，3.68(m,1H,H-3α)，1.20(s,3H,Me-19)，0.92(d,3H,J=6.4 Hz，Me-21)，0.85(d,J=7.2 Hz，3H，Me-29)，0.83(d,J=6.6 Hz，3H，Me-26)，0.81(d，J=6.6 Hz，3H，Me-27)，0.68(s，3H，Me-18).13C-NMR(75.4 MHz，CDCl3)见表1.其1H-NMR和13C-NMR与已知化合物3β-hydroxystigmast-5-en-7-one的光谱数据一致〔4〕，故化合物Ⅱ鉴定为3β-羟基豆甾-5-烯-7-酮.
, 百拇医药
化合物Ⅴ 白色粉末(MeOH).IR光谱示有羟基(3416 cm-1)和酯羰基(1734 cm-1).1H-NMR示有烯氢质子信号δ5.38(m,1H),6个甲基质子信号及长链烷烃质子信号1.25(brs).13C-NMR给出与β-谷甾醇相应的碳信号〔4〕，只是C-3向低场位移3.2，C-2和C-4分别向高场位移2.4，3.0，表明3-OH苷化.此外，还显示一组葡萄糖碳信号(102.64，78.54，78.20，74.96，71.50，64.48)及一系列长链脂肪酰基的碳信号〔173.39，34.30，29.83(CH2)n，22.72，14.06〕.化合物Ⅴ经碱水解，得到类白色固体，TLC检识为胡萝卜苷；水层经酸中和，CHCl3萃取得到长链脂肪酸，MS鉴定为十六烷酸(棕榈酸).Glu的C-6′较β-葡萄糖甲苷的C-6信号向低场位移2.6，说明十六烷酰基连接在C-6′位上.Glu的端基质子信号5.00(d，J=7.5 Hz)表明为β-D-葡萄糖.故化合物Ⅴ鉴定为3-O-(6′-O-棕榈酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)豆甾-5-烯，即胡萝卜苷棕榈酸酯.IR νKBrmaxcm-1：3416，2923，2851，1734，1637，1467，1379，1173，1080，1017，721.1H-NMR(300 MHz,Py-d5)δ：5.38(m，1H，H-6)，5.00(d，J=7.5 Hz，1H，Glu-1′)，3.90(m,1H，H-3)，1.24～1.25〔brs,(CH2)n and Me-19〕，0.99(d，J=6.2 Hz，3H，Me-21)，0.95(t,3H，Me-18″)，0.81～0.85(m,9H,Me-26，27，28)，0.67(s，3H，Me-18).13C-NMR(75.4 MHz，Py-d5)见表1.
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化合物Ⅴ的碱水解：取样品10 mg，加1 mL 2.5%KOH甲醇溶液和0.5 mL吡啶，室温搅拌6 h，反应后减压蒸馏除去溶剂，加水和CHCl3萃取，水层析出沉淀，过滤得类白色固体，TLC检识为胡萝卜苷.水层以稀盐酸中和，析出沉淀，用CHCl3萃取，得蜡状固体.其EIMS m/z：256(M+)，129，73，43，29.
化合物Ⅵ 无色针状结晶，mp175～177℃(CHCl3).IR光谱示有羟基(3519 cm-1和双键(1654 cm-1).1H-NMR示有6个甲基，一个顺式双键δ6.24，6.51(d，J=8.5 Hz)，一个反式双键δ5.16(dd,J=15.0，7.8 Hz)，5.20(dd，J=15.0，7.0 Hz)及一个连氧碳上质子信号δ3.97(m).DEPT和HMQC谱显示有4个季碳，11个亚甲基，7个次甲基和6个甲基，表明该化合物为C28甾体类化合物.13C-NMR给出与麦角甾醇侧链相同的碳信号，并显示有3个连氧碳信号(66.50 d，82.17 s，79.44 s)，后两个季碳信号应为角上碳信号.经HMQC和HMBC谱分析，归属了化学位移，顺式双键处于C-6，7位，反式双键位于C-22，23位，两个连氧季碳为C-5和C-8.由其分子量428，推测分子式为C28H14O3，推测5，8位两个氧成环.MS给出碎片峰396(M+-O2)证实了二氧桥的存在.比较文献中的5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene-3β-ol及其(5β，8β)异构体〔5〕，鉴定化合物Ⅵ为5α，8α-表二氧化麦角甾-6，22-二烯-3β-醇.EIMS m/z:428(M+)，410(M+-H2O)，396(M+-O2)，363(M+-O2-H2O-Me)，253，251.IR νKBrmaxcm-1：3519，3384(OH)，2956，2870，1654，1457，1378，1074，1044，967.1H-NMR(300 MHz，CDCl3)和13C-NMR(75.4 MHz，CDCl3)见表1.
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化合物Ⅶ 白色粉末，mp 246～248℃(MeOH-Me2CO).1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ：5.34(brd,J=5.0 Hz，1H，H-7)，5.22(dd，J=15.3，8.1 Hz,1H,H-23)，5.15(dd,J=15.3，7.5 Hz,1H,H-22)，4.08(m,1H,H-3α)，3.62(d，J=5.0 Hz，1H，H-6)，1.08(s，3H，Me-19)，1.02(d,J=6.6 Hz，3H，Me-21)，0.91(d,J=6.9 Hz，3H，Me-28)，0.84(d,J=6.6 Hz，3H，Me-26 or 27)，0.82(d，J=6.7 Hz，3H，Me-27 or 26)，0.60(s，3H，Me-18).13C-NMR(75.4 MHz，CDCl3)见表1.其1H-NMR和13C-NMR与从海绵Spongionella gracilis中分得的ergosta-7，22-dien-3β，5α，6β-triol的光谱数据基本一致〔6〕，故化合物Ⅶ得到鉴定.
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致谢 本校生药教研室苏世文教授鉴定植物材料，测试中心李文工程师代测核磁共振谱，中国科学院沈阳应用生态研究所于殿臣研究员代测质谱.■
参考文献：
[1]江苏新医学院.中药大辞典：下册.上海：上海人民出版社，1977.1526
[2]Handjieva N V,Ilieva E I,Spassov S l,et al.Iridoid glycosides from Linaria species.Tetrahedron,1993,49(41):9261～9266
[3]龚运淮.天然有机化合物的13C核磁共振化学位移.昆明：云南科技出版社，1986.242
[4]Greca M D,Monaco P,Previtera L.Stigmasterols from Typha latifolia.J Nat Prod，1990,53(6):1430～1435
[5]Greca M D,Mangoni L,Molinaro A,et al.5β，8β-Epidioxyergosta-6，2-dien-3β-ol from Typha latifolia.Gazz Chim Ital,1990,120:391～392
[6]Piccialli V,Sica D.Four new trihydroxylated sterols from the sponge Spongionella gracilis.J Nat Prod,1987,50(5):915～920
收稿日期：1999-05-28, 百拇医药
单位：华会明(沈阳药科大学中药系1994级学生); 李铣(沈阳药科大学中药系1994级学生); 张海泉(沈阳药科大学中药系，沈阳 110015)
关键词：柳穿鱼；甾类；豆甾酮；麦角甾醇
沈阳药科大学学报000112 摘 要：从柳穿鱼(Linaria vulgaris Mill.)的干燥全草中分得7种甾类化合物，通过光谱解析鉴定其它结构为6β-羟基-豆甾-4-烯-3-酮(Ⅰ)、3β-羟基豆甾-5-烯-7-酮(Ⅱ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、胡萝卜苷棕榈酸酯(Ⅴ)、5α，8α-表二氧化麦角甾-6，22-二烯-3β-醇(Ⅵ)、麦角甾-7，22-二烯-3β，5α，6β-三醇(Ⅶ).其中Ⅰ，Ⅱ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ，Ⅶ为首次自该属植物分得.
分类号：R932
, http://www.100md.com
Steroids from Linaria vulgaris Mill.
Hua Huiming,Li Xian,(Department of Traditional Chinese Medicines,)
Zhang Haiquan
(Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015)
Abstract：Seven steroids were isolated from the whole plant of Linaria vulgaris Mill.Their structures were identified as 6β-hydroxystigmast-4-en-3-one,3β-hydroxystigmast-5-en-7-one，β-sitosterol,daucosterol,daucosterol palmitate,5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene-3β-ol and ergosta-7，22-diene-3β，5α，6β-triol by the chemical and spectral analysis.
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Key words：Linaria vulgaris Mill.；steroids;stigmastone;ergostanol▲
柳穿鱼(Linaria vulgaris Mill.)是玄参科(Scdrophulariaceae)柳穿鱼属(Linaria)植物，主要分布于我国东北三省和内蒙古地区.药用全草，具有清热解毒，散瘀消肿等功效.民间用于镇咳、祛痰、平喘、利尿，治头痛、头晕、黄疸、痔疮、便秘、皮肤病、烫伤等〔1〕.国外民间用柳穿鱼属植物作利尿剂、轻泻剂、解痉、利胆和抗炎药，用于治疗膀胱炎、出血、皮疹等〔2〕.已从该属植物中分得黄酮、环烯醚萜、二萜和生物碱类成分.我们通过对柳穿鱼的化学成分进行系统的研究，分得了7种甾类化合物，根据理化性质和光谱分析，鉴定了它们的结构是6β-羟基-豆甾-4-烯-3-酮(6β-hydroxystigmast-4-en-3-one,Ⅰ)、3β-羟基豆甾-5-烯-7-酮(3β-hydroxystigmast-5-en-7-one,Ⅱ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅲ)、胡萝卜苷(daucosterol,Ⅳ)、胡萝卜苷棕榈酸酯(daucosterol palmitate,Ⅴ)、5α，8α-表二氧化麦角甾-6，22-二烯-3β醇(5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene-3β-ol，Ⅵ)、麦角甾-7，22-二烯-3β，5α，6β-三醇(ergosta-7,22-diene-3β，5α，6β-triol,Ⅶ).其中Ⅰ，Ⅱ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ，Ⅶ为首次自该属植物分得.Ⅲ和Ⅳ经与已知物对照而得到鉴定.
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1 仪器与材料
熔点测定用日本Yanaco MP-S3型显微熔点测定仪(未校正)；IR测定用Bruker IR S-55型红外分光光度计；NMR谱用Bruker-AC(E)-300型核磁共振光谱仪测定(TMS作内标)；MS用VG-70SE磁式质谱仪.TLC和柱色谱用硅胶均由青岛海洋化工厂生产.
植物材料来自黑龙江省哈尔滨市郊及泰康县，原植物为柳穿鱼(学名Linaria valgaris Mill.).
2 提取与分离
柳穿鱼干燥全草(10kg)粉碎后，用95%的乙醇回流提取3次，浓缩后，加水调至醇浓度为70%，沉降叶绿素，滤除沉淀，回收溶剂得乙醇提取物.将总提取物加适量水，依次用石油醚、CHCl3、EtOAc和n-BuOH萃取.石油醚萃取物(67g)经硅胶柱色谱，以石油醚-丙酮不同比例的混合溶剂和甲醇洗脱.石油醚-丙酮(95∶5)洗脱部分得晶Ⅲ(700mg)；(93∶7)洗脱部分的213～221流份经二次硅胶柱色谱，以CHCl3-Me2CO(98∶2)洗脱得晶Ⅱ(5mg)；(9∶1)洗脱部分的222～242流份经二次硅胶柱色谱，以CHCl3-Me2CO(98∶2)洗脱得Ⅵ(21mg)，243～255流份以CHCl3-Me2CO(98∶2)洗脱得Ⅰ(14 mg)；(7∶3)洗脱部分的11～320流份经二次硅胶柱色谱，以CHCl3-Me2CO(9∶1)洗脱得粉末Ⅴ(49 mg)；(5∶5)洗脱部分的337～356流份经二次硅胶柱色谱，以CHCl3-Me2CO(95∶5)洗脱得粉末Ⅶ(5 mg).甲醇洗脱部分得粉末Ⅳ(30 mg).
, 百拇医药
3 结构鉴定
化合物Ⅰ 淡黄色片状结晶，mp 203～205℃(MeOH).EIMS给出分子量为428，结合13C-NMR信号，推测分子式为C29H48O2.DEPT谱显示在有6个CH3，10个CH2，9个CH和4个季碳，表明为甾醇类化合物.IR光谱(1692，1630cm-1)及13C-NMR信号200.35(s)，168.44(s)，126.38(d)示有α、β-不饱和羰基.1H-NMR的δ5.84(s)为烯氢质子.将其13C-NMR数据与6β-OH胆甾烯酮比较〔3〕，化合物Ⅰ具有相同的母核，所不同的是侧链上多一个乙基，经HMQC和HMBC谱归属其化学位移(见表1)，并确证其结构.1H-NMRδ信号4.37(brs)进一步说明6-OH为β-取向〔4〕.故鉴定Ⅰ为6β-hydroxystigmast-4-en-3-one，该化合物曾自宽叶香蒲Typha latifolia中分得〔4〕.EMS m/z:428(M+)，414(M+-CH2)，365，323，287(M+-side chain),245.IR νKBrmaxcm-1：3475，2956，1692，1630，1465，1384，1245，1038，877.1H-NMR(300 MHz，CDCl3)和13C-NMR(75.4 MHz,CDCl3)见表1.
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Tab.1 NMR chemical shifts of compounds Ⅰ,Ⅱ,Ⅴ,Ⅵ and Ⅶ
No
δH(Hz)(Ⅰ)
δC(Ⅰ)
δC(Ⅱ)
δC(Ⅴ)
δH(Hz)(Ⅵ)
δC(Ⅵ)
δC(Ⅶ)
1
, 百拇医药
2.04，1.75 m
37.16 t
36.42 t
37.42
1.95，1.61 m
34.74 t
32.65
2
2.38，2.51 m
34.30 t
31.27 t
29.41
, http://www.100md.com
1.51 m
30.17 t
33.84
3
200.35 s
70.52 d
74.96
3.97 m
66.50 d
67.60
4
5.83 s
126.38 d
, http://www.100md.com
41.87 t
39.19
2.12，1.91 m
37.00 t
41.99
5
168.44 s
165.02 s
140.79
82.17 s
76.14
6
, 百拇医药 4.37 brs
73.35 d
126.17 d
121.70
6.24 d(8.5)
135.44 d
74.27
7
1.25 m
38.63 t
202.21 s
31.91
, http://www.100md.com
6.51 d(8.5)
130.78 d
120.50
8
1.98 m
29.77 d
45.47 d
31.91
79.44 s
141.56
9
0.90 m
, 百拇医药 53.69 d
50.04 d
50.22
1.50 m
51.16 d
43.76
10
38.03 s
38.32 s
36.75
2.12，1.91 m
37.00 s
, 百拇医药 38.08
11
1.51 m
21.02 t
21.28 t
21.12
1.59，1.41 m
20.66 t
22.42
12
2.04，1.15 m
39.66 t
, 百拇医药 38.78 t
39.79
1.26，1.22 m
39.40 t
39.91
13
42.56 s
43.16 s
42.29
44.60 s
43.76
14
1.03 m
, 百拇医药
55.94 d
50.04 d
56.67
1.59 m
51.73 d
55.26
15
24.19 t
26.36 t
25.17
1.22 m
23.44 t
, 百拇医药 23.48
16
28.20 t
28.57 t
28.35
28.65 t
28.48
17
1.10 m
56.13 d
54.81 d
56.11
1.22 m
, http://www.100md.com
56.27 d
56.13
18
0.74 s
12.04 q
12.00 q
11.94
0.82 s
12.90 q
12.52
19
1.38 s
19.54 q
, http://www.100md.com
17.53 q
18.81
0.89 s
18.19 q
18.81
20
36.15 d
36.12 d
36.21
1.95 m
39.73 d
40.87
, 百拇医药 21
0.92 d(6.4)
18.76 q
18.97 q
18.99
1.0 d(6.5)
20.90 q
21.41
22
33.95 t
34.03 t
34.00
, 百拇医药 5.16 dd
135.23 d
136.20
(15.0，7.8)
23
1.15 m
26.18 t
26.23 t
26.19
5.20 dd
132.36 d
132.11
, 百拇医药
(15.0，7.0)
24
45.90 d
45.92 d
45.83
1.87 m
42.82 d
43.08
25
1.29 m
29.23 d
29.24 d
, 百拇医药 29.25
33.10 d
33.34
26
0.85 d(6.6)
19.81 q
19.81 q
19.76
0.81 d(6.7)
19.65 q
19.84
27
, 百拇医药 0.82 d(6.6)
19.07 q
19.09 q
19.22
0.83 d(6.7)
19.96 q
20.15
28
1.65 m
23.13 t
23.13 t
23.18
, 百拇医药
0.90 d(7.0)
17.58 q
17.83
29
0.82 t
12.04 q
12.00 q
11.77
化合物Ⅱ 无色片状结晶，mp 127～128℃(MeOH).EMIS m/z：428(M+)，414(M+-CH2)，410(M+-H2O)，395(M+-CH3-H2O)，287(M+-side chain).IR νKBrmaxcm-1：3529(羟基)，2935，2869，1672(羰基)，1657，1462，1383，1066，948.1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ:5.69(s,1H，H-6)，3.68(m,1H,H-3α)，1.20(s,3H,Me-19)，0.92(d,3H,J=6.4 Hz，Me-21)，0.85(d,J=7.2 Hz，3H，Me-29)，0.83(d,J=6.6 Hz，3H，Me-26)，0.81(d，J=6.6 Hz，3H，Me-27)，0.68(s，3H，Me-18).13C-NMR(75.4 MHz，CDCl3)见表1.其1H-NMR和13C-NMR与已知化合物3β-hydroxystigmast-5-en-7-one的光谱数据一致〔4〕，故化合物Ⅱ鉴定为3β-羟基豆甾-5-烯-7-酮.
, 百拇医药
化合物Ⅴ 白色粉末(MeOH).IR光谱示有羟基(3416 cm-1)和酯羰基(1734 cm-1).1H-NMR示有烯氢质子信号δ5.38(m,1H),6个甲基质子信号及长链烷烃质子信号1.25(brs).13C-NMR给出与β-谷甾醇相应的碳信号〔4〕，只是C-3向低场位移3.2，C-2和C-4分别向高场位移2.4，3.0，表明3-OH苷化.此外，还显示一组葡萄糖碳信号(102.64，78.54，78.20，74.96，71.50，64.48)及一系列长链脂肪酰基的碳信号〔173.39，34.30，29.83(CH2)n，22.72，14.06〕.化合物Ⅴ经碱水解，得到类白色固体，TLC检识为胡萝卜苷；水层经酸中和，CHCl3萃取得到长链脂肪酸，MS鉴定为十六烷酸(棕榈酸).Glu的C-6′较β-葡萄糖甲苷的C-6信号向低场位移2.6，说明十六烷酰基连接在C-6′位上.Glu的端基质子信号5.00(d，J=7.5 Hz)表明为β-D-葡萄糖.故化合物Ⅴ鉴定为3-O-(6′-O-棕榈酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)豆甾-5-烯，即胡萝卜苷棕榈酸酯.IR νKBrmaxcm-1：3416，2923，2851，1734，1637，1467，1379，1173，1080，1017，721.1H-NMR(300 MHz,Py-d5)δ：5.38(m，1H，H-6)，5.00(d，J=7.5 Hz，1H，Glu-1′)，3.90(m,1H，H-3)，1.24～1.25〔brs,(CH2)n and Me-19〕，0.99(d，J=6.2 Hz，3H，Me-21)，0.95(t,3H，Me-18″)，0.81～0.85(m,9H,Me-26，27，28)，0.67(s，3H，Me-18).13C-NMR(75.4 MHz，Py-d5)见表1.
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化合物Ⅴ的碱水解：取样品10 mg，加1 mL 2.5%KOH甲醇溶液和0.5 mL吡啶，室温搅拌6 h，反应后减压蒸馏除去溶剂，加水和CHCl3萃取，水层析出沉淀，过滤得类白色固体，TLC检识为胡萝卜苷.水层以稀盐酸中和，析出沉淀，用CHCl3萃取，得蜡状固体.其EIMS m/z：256(M+)，129，73，43，29.
化合物Ⅵ 无色针状结晶，mp175～177℃(CHCl3).IR光谱示有羟基(3519 cm-1和双键(1654 cm-1).1H-NMR示有6个甲基，一个顺式双键δ6.24，6.51(d，J=8.5 Hz)，一个反式双键δ5.16(dd,J=15.0，7.8 Hz)，5.20(dd，J=15.0，7.0 Hz)及一个连氧碳上质子信号δ3.97(m).DEPT和HMQC谱显示有4个季碳，11个亚甲基，7个次甲基和6个甲基，表明该化合物为C28甾体类化合物.13C-NMR给出与麦角甾醇侧链相同的碳信号，并显示有3个连氧碳信号(66.50 d，82.17 s，79.44 s)，后两个季碳信号应为角上碳信号.经HMQC和HMBC谱分析，归属了化学位移，顺式双键处于C-6，7位，反式双键位于C-22，23位，两个连氧季碳为C-5和C-8.由其分子量428，推测分子式为C28H14O3，推测5，8位两个氧成环.MS给出碎片峰396(M+-O2)证实了二氧桥的存在.比较文献中的5α，8α-epidioxyergosta-6，22-diene-3β-ol及其(5β，8β)异构体〔5〕，鉴定化合物Ⅵ为5α，8α-表二氧化麦角甾-6，22-二烯-3β-醇.EIMS m/z:428(M+)，410(M+-H2O)，396(M+-O2)，363(M+-O2-H2O-Me)，253，251.IR νKBrmaxcm-1：3519，3384(OH)，2956，2870，1654，1457，1378，1074，1044，967.1H-NMR(300 MHz，CDCl3)和13C-NMR(75.4 MHz，CDCl3)见表1.
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化合物Ⅶ 白色粉末，mp 246～248℃(MeOH-Me2CO).1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ：5.34(brd,J=5.0 Hz，1H，H-7)，5.22(dd，J=15.3，8.1 Hz,1H,H-23)，5.15(dd,J=15.3，7.5 Hz,1H,H-22)，4.08(m,1H,H-3α)，3.62(d，J=5.0 Hz，1H，H-6)，1.08(s，3H，Me-19)，1.02(d,J=6.6 Hz，3H，Me-21)，0.91(d,J=6.9 Hz，3H，Me-28)，0.84(d,J=6.6 Hz，3H，Me-26 or 27)，0.82(d，J=6.7 Hz，3H，Me-27 or 26)，0.60(s，3H，Me-18).13C-NMR(75.4 MHz，CDCl3)见表1.其1H-NMR和13C-NMR与从海绵Spongionella gracilis中分得的ergosta-7，22-dien-3β，5α，6β-triol的光谱数据基本一致〔6〕，故化合物Ⅶ得到鉴定.
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致谢 本校生药教研室苏世文教授鉴定植物材料，测试中心李文工程师代测核磁共振谱，中国科学院沈阳应用生态研究所于殿臣研究员代测质谱.■
参考文献：
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收稿日期：1999-05-28, 百拇医药