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编号:10238208
绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠胃、肠、肝组织中SOD、GSH-PX、ATPase、MDA含量的影响
http://www.100md.com 《咸宁学院学报(医学版)》 2000年第1期
     作者:王秋桂 何丽娅 陈业文 吴基良

    单位:王秋桂 陈业文(咸宁医学院组织胚胎学教研室);何丽娅(咸宁医学院生物化学教研室);吴基良(咸宁医学院临床药学系药理学教研室)

    关键词:烫伤;绞股蓝;过氧化脂质;腺苷三磷酸类

    咸宁医学院学报000106 摘 要 目的:观察严重烫伤大鼠胃、小肠、肝组织超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX),丙二醛(MDA)、ATPase含量的变化及绞股蓝总皂甙(GP)的防治效果。方法:选用健康Wistar大鼠85只,随机分成①正常对照组(5只);②烫伤对照组(40只);③烫伤治疗组(40只)。烫伤后分别于4、8、24、48h几个不同时相点(每个时相点10只)取出胃、小肠、肝组织分别制成匀浆,测定SOD、GSH-PX、MDA、ATPase的含量。结果:烫伤后胃、小肠、肝组织中SOD、GSH-PX、ATPase呈进行性下降,MDA的含量明显上升,各时相点与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01)。采用绞股蓝总皂甙治疗后,SOD、GSH-PX、ATPase逐渐回升,MDA的含量明显下降,各时相点与烫伤对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:①严重烫伤对远隔局部的重要器官有损害作用。②绞股蓝总皂甙能提高机体的抗氧化能力,抑制脂质过氧化产物的形成。对膜性结构有明显保护作用。
, 百拇医药
    中图分类号 R285.5 文献标识码 A 文章编号 1008-0635(2000)01-0017-04

    Effects of Gynostemma Pentaphyllum on the Contents of SOD,GSH-PX,ATPase,MDA in Stomach,Intestine and Liver of Severely Burned Rats

    WANG Qiugui,CHENG Yewen et al

    (Department of Histology and Embryology,Xianning Medical College,Xianning 437100)

    HE Liya

    (Department of Biochemistry,Xianning Medical College,Xianning 437100)
, 百拇医药
    ABSTRACT Objective To observe the effects of gynostemma pentaphyllum (GP) on the contents of SOD,GSH-PX,ATPase and MDA in stomach,intestine and liver of severely burned rats.Methods Divide the rats randomly into three groups:①normal group;②non-treated burned group;③treated bnrned group.Tissues of stomach,intestine and liver were gathered and homogenized respectively at 4,8,24,48h after burn,and the contents of SOD,GSH-PX,ATPase and MDA were assayed.Results The contents of SOD,GSH-PX,ATPase in stomach,intesine and liver of non-treated burned group were progressively decreased while MDA obviously enhanced in comparison with that of the normal group (P<0.01).After the treatment with GP,the contents of SOD,GSH-PX and ATPase were significantly higher but MDA lower than that of non-treated burned group (P<0.01).Conclusion Decrease of SOD,GSH-PX and ATPase may reflect the distant organ damages caused by severe burn,and GP can enhance SOD,GSH-PX and ATPase activity,reduce lipid peroxide in stomach,intestine and liver tissues of severely burned rats.
, 百拇医药
    KEY WORDS Burn;Gynostemma pentaphyllum;Lipid peroxide;Adenosine-triphophatase

    严重烧伤所致消化系统损害的首要因素为血液灌流不良,尤其是胃肠道缺血[1]。胃肠缺血对全身的影响是广泛而深刻的,其不仅能造成肠道通透性增加,肠腔内细菌和毒素移位,还释放大量炎症介质。针对严重热损伤的这一特征,本文根据绞股蓝总皂甙能扩张血管,增加脏器的血流量,抗缺氧等药物作用[2]。观察了严重烫伤大鼠胃、小肠、肝组织SOD、GSH-PX、ATPase、MDA的变化及绞股蓝总皂甙的防治效果,为临床合理应用提供实验依据。

    1 材料与方法

    选用健康Wistar大鼠85只,(由本院动物室提供)雌雄不拘,体重250g,实验前禁食24h,自由饮水。动物随机分成①正常对照组5只;②烫伤组40只,以10%水合氯醛腹腔麻醉,用8%Na2S对颈、背、体侧部脱毛,待动物清醒后,脱毛区浸入100℃沸水中16s,造成40%Ⅲ度烫伤模型。③治疗组40只,烫伤后立即腹腔注射GP(50mg/kg),以后每8小时重复一次。②③组动物分别于烫后4、8、24、48h等几个不同时相点抽血致死,取胃、小肠、肝组织匀浆。测定SOD[3]、GSH-PX[4]、MDA[5]、ATPase[6]的含量。实验数据以均数±标准差(±s)表示,进行t检验。
, http://www.100md.com
    2 结 果

    2.1组织SOD、GSH-PX、MDA含量的变化

    大鼠严重烫伤后胃、小肠、肝组织SOD、GSH-PX活性呈进行性下降,而MDA含量明显上升,与对照组比较有显著性差异(P<0.001)。采用绞股蓝总皂甙治疗后,各时相点SOD、GSH-PX活性随治疗时间延长逐渐升高,而MDA的含量逐渐下降,与烫伤组比较,有显著性差异(P<0.01),见表1、2、3。

    2.2 组织ATPase活性变化

    大鼠严重烫伤后胃、小肠、肝组织ATPase活性呈进行性下降,与对照组比较有显著性差异(P<0.01),经治疗后,各时相点ATPase活性随治疗时间的延长逐渐回升,与烫伤组比较,有显著性差异(P<0.01)表4、5。

    表1 绞股蓝总皂甙对烫伤大鼠胃、小肠、肝组织SOD活性影响(±s,n=10,u/ml)
, 百拇医药
    对照组

    (n=5)

    烫 伤 组

    治 疗 组

    4h

    8h

    24h

    48h

    4h

    8h

    24h

    48h

    胃
, 百拇医药
    4.51±

    3.06±

    2.09±

    1.14±

    0.71±

    4.49±

    4.91±

    4.99±

    5.08±

    0.32

    0.22

    0.21
, 百拇医药
    0.68

    0.56

    0.41*

    0.35*

    0.30*

    0.15*

    肠

    4.48±

    3.28±

    2.66±

    1.99±
, 百拇医药
    0.83±

    4.46±

    4.94±

    5.05±

    5.65±

    0.57

    0.51

    0.61

    0.28

    0.52

    0.41*
, 百拇医药
    0.11*

    0.19*

    0.17*

    肝

    9.34±

    7.74±

    5.88±

    4.39±

    2.68±

    8.70±

    8.86±

    9.23±
, 百拇医药
    9.56±

    0.31

    0.77

    0.76

    0.68

    0.81

    0.31*

    0.50*

    0.21*

    0.38*

    与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较*P<0.01表2 绞股蓝总皂甙对烫伤大鼠胃、小肠、肝组织GSH-PX活性影响(±s,n=10,ng/mg)
, http://www.100md.com
    对照组

    (n=5)

    烫 伤 组

    治 疗 组

    4h

    8h

    24h

    48h

    4h

    8h

    24h

    48h

    胃
, http://www.100md.com
    53.29±

    50.47±

    47.59±

    49.26±

    41.90±

    53.24±

    56.90±

    59.27±

    63.01±

    1.03

    1.43

    0.65
, 百拇医药
    1.83

    1.03

    0.57*

    1.43*

    1.10*

    1.68*

    肠

    50.56±

    46.92±

    43.52±

    40.32±
, 百拇医药
    37.06±

    50.75±

    53.29±

    56.43±

    58.71±

    4.03

    1.01

    1.17

    1.11

    1.25

    0.77*
, 百拇医药
    0.88*

    1.22*

    1.23*

    肝

    84.83±

    81.37±

    74.23±

    71.01±

    69.02±

    84.66±

    87.79±

    90.47±
, 百拇医药
    94.41±

    8.34

    1.31

    4.19

    2.24

    1.34

    0.51*

    1.33*

    0.86*

    1.59*

    与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较*P<0.01表3 绞股蓝总皂甙对烫伤大鼠胃、小肠、肝组织MDA活性影响(±s,n=10,nmol/mg)
, 百拇医药
    对照组

    (n=5)

    烫 伤 组

    治 疗 组

    4h

    8h

    24h

    48h

    4h

    8h

    24h

    48h

    胃
, http://www.100md.com
    2.55±

    3.56±

    5.29±

    7.43±

    8.09±

    2.51±

    2.88±

    2.94±

    3.18±

    0.21

    0.11

    0.36
, http://www.100md.com
    0.35

    0.94

    0.24*

    0.25*

    0.41*

    0.74*

    肠

    3.19±

    5.37±

    6.91±

    7.72±
, 百拇医药
    9.73±

    3.19±

    3.89±

    4.06±

    4.23±

    0.25

    0.71

    0.14

    0.68

    0.74

    0.33*
, http://www.100md.com
    0.33*

    0.49*

    0.40*

    肝

    4.29±

    6.37±

    8.81±

    10.90±

    12.75±

    5.31±

    5.17±

    5.09±
, 百拇医药
    4.38±

    0.79

    0.45

    0.59

    0.64

    0.91

    0.43*

    0.42*

    0.32*

    0.66*

    与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较*P<0.01表4 绞股蓝总皂甙对烫伤大鼠胃、小肠、肝组织Na+-K+ATPase活性影响(±s,n=10,nmol.pi-1min-1pro)
, 百拇医药
    对照组

    (n=5)

    烫 伤 组

    治 疗 组

    4h

    8h

    24h

    48h

    4h

    8h

    24h

    48h

    胃
, 百拇医药
    15.51±

    13.72±

    11.37±

    8.61±

    6.28±

    15.19±

    15.48±

    15.96±

    16.48±

    0.47

    0.62

    0.56
, http://www.100md.com
    0.73

    0.80

    0.33*

    0.50*

    0.28*

    0.51*

    肠

    14.72±

    11.98±

    8.79±

    6.39±
, http://www.100md.com
    4.24±

    14.45±

    14.79±

    15.01±

    15.83±

    0.55

    0.74

    0.55

    0.67

    0.56

    0.45*
, http://www.100md.com
    0.45*

    0.35*

    0.44*

    肝

    22.85±

    20.28±

    18.11±

    15.80±

    12.51±

    22.35±

    22.86±

    23.01±
, http://www.100md.com
    23.37±

    0.39

    0.45

    0.58

    0.35

    0.83

    0.42*

    0.26*

    0.59*

    0.52*

    与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较*P<0.01表5 绞股蓝总皂甙对烫伤大鼠胃、小肠、肝组织Ca+-ATPase活性影响(±s,n=10,nmol.pi-1min-1pro)
, 百拇医药
    对照组

    (n=5)

    烫 伤 组

    治 疗 组

    4h

    8h

    24h

    48h

    4h

    8h

    24h

    48h

    胃
, http://www.100md.com
    28.85±

    25.82±

    22.89±

    20.05±

    17.71±

    28.08±

    28.88±

    29.24±

    30.28±

    0.35

    0.58

    0.26
, 百拇医药
    0.47

    0.73

    0.77*

    0.42*

    0.31*

    0.65*

    肠

    26.88±

    23.75±

    20.87±

    17.96±
, http://www.100md.com
    15.02±

    24.19±

    24.79±

    26.41±

    26.98±

    0.50

    0.42

    0.44

    0.54

    0.43

    0.32*
, 百拇医药
    0.31*

    0.57*

    0.59*

    肝

    33.94±

    30.72±

    28.08±

    25.74±

    23.61±

    33.47±

    34.02±

    34.21±
, 百拇医药
    34.74±

    0.81

    0.10

    0.82

    0.52

    0.51

    0.44*

    0.36*

    0.69*

    0.48*

    与对照组比较△P<0.01,与烫伤组比较*P<0.013 讨 论
, 百拇医药
    严重烧伤所致消化系统损害的首要因素为血液灌流不良,尤其是胃、肠道缺血[1]。缺血时,ATP代谢障碍、大量ATP分解导致黄嘌呤氧化酶和次黄嘌呤在缺血组织中聚积,缺血缺氧组织中氧张力突然增加,产生大量自由基。进而消耗机体抗自由基的SOD、GSH-PX,出现SOD,GSH-PX活性呈进行性下降。同时大量.O2与H2O反应形成氧化活性极强的.OH,.OH作用于组织细胞膜性结构中的膜脂不饱和脂肪酸,引起脂质过氧化反应,致使烫伤后组织MDA含量增多。

    本实验结果表明,严重烫伤后大鼠胃、小肠、肝组织ATPase活性呈进行性下降。有研究表明,脂质过氧化产物MDA也可与氨基酸反应和蛋白质交联而损伤蛋白[7]。相关分析提示Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活力与MDA水平呈显著负相关[8]。表明自由基及MDA是造成膜性结构ATPase损伤的一个重要因素,Na+-K+-ATPase是一种含硫基(-SH)的酶,自由基和脂质过氧化物最容易氧化蛋白酶中的SH,形成二硫键;MDA与ATPase中氨基等功能基团形成希夫氏碱,从而使酶活性下降。其中Ca2+-ATPase活性降低可造成Ca2+在细胞内聚积,膜上Ca2+增加,细胞膜变硬、流动性降低,这必然破坏细胞膜性结构。组织细胞的正常结构和功能有赖于细胞膜两侧相对稳定的离子梯度,而ATPase在维持离子梯度中有着重要作用,这可能与临床上严重烫伤后多器官功能不全密切相关。
, 百拇医药
    采用绞股蓝总皂甙治疗后,SOD、GSH-PX、ATPase含量逐渐上升,MDA含量下降。说明GP能提高SOD、GSH-PX、ATPase活性,并具有抗指质过氧化,保护抗氧化酶系统的作用。综上所述,这些作用可能与GP护张血管,增加脏器血流量有关[2]

    参考文献

    1,崔晓林,盛志勇,郭振荣,等.严重烧伤抗休克时胃肠粘膜内缺血的研究.中华整形烧伤外科杂志,1998;14(4):262

    2,丁树利,朱兆仪,绞股蓝的研究进展.国外医药,植物药分册,1991;6(3):99

    3,邓碧玉,彭勤生,李文杰.改良的连苯三酚自氧化测定超氧化物歧化酶活性的方法.生物化学与生物进展,1991;18(2):163

    4,夏奕明,朱连珍.血和组织中谷胱甘肽过氧化酶活力测定.卫生研究,1987;16(4):29
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    6,徐友涵,宋逵华.一种简便、灵活的ATPase活性测定法,生物化学与生物物理进展,1986;13(4):64

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    8,HAN Qing-bong,SHU HU-Ying,WANG Jian,et al.study on the effects of "Foshousan/plus danshen in preventing IUGR rats with passive smoking from peroxidation in erythrocyte lipid.J of Tongji Med Univ,1995;15(2):120

    (收稿:1999-08-26), 百拇医药