急性脑梗塞的红细胞膜流动性及生化指标改变
作者：许艳 高佩琦 马波 梁庆成 赵永波
单位：许艳(哈尔滨医科大学 生物物理教研室)； 高佩琦(哈尔滨医科大学 生物物理教研室)； 马波(哈尔滨医科大学 生物物理教研室) ； 梁庆成(哈尔滨医科大学附属第二医院，黑龙江 哈尔滨 150086)； 赵永波(哈尔滨医科大学附属第二医院，黑龙江 哈尔滨 150086)
关键词：脑梗塞；荧光偏振度；过氧化脂质；超氧化物歧化酶
哈尔滨医科大学学报000110 摘 要：目的 探讨急性脑梗塞(ACI)的发病机制及治疗措施。方法 采用测定ACI患者血浆粘度(ηp)、纤维蛋白原含量(Fg)、红细胞膜荧光偏振度P、过氧化脂质(LPO)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性等指标进行对比研究。结果 与同龄健康组比较，ACI患者ηp、Fg、LPO水平均显著升高(P<0.05)，SOD活性显著降低(P<0.01)。红细胞膜流动性下降。结论 本研究对深入探讨ACI发病机制有一定意义。
, 百拇医药
分类号：R743.33 文献标识码：A
文章编号：1000-1905(2000)01-0024-02
Changes of membrane fluidity of erythrocytes and some biochemical
indexes in patients with acute cerebral infarction
XU Yan GAO Pei-qi MA Bo
(Department of Biophysics,Harbin Medical University,Harbin 150086,China)
Abstract：Objective To explore the mechanism and the cure manner in acute cerebral infarction (ACI).Methods The indexes of plasma viscosity(ηp),plasminogen(Fg),the fluorescance polarization of membrane (P),lipide peroxidation (LPO) level,and superoxide dismutase (SOD) activity were studied in patients with ACI as well as the control group.Results The ηp,Fg,LPO level significantly increased (P<0.01) in the patients while the activity of SOD and the membrane fluidity significantly decreased (P<0.01).Conclusion The experiments may play an important role in the mechanism of ACI.
, 百拇医药
Key words：cerebral infarction;fluorescance polarization;LPO;SOD▲
近年来急性脑梗塞(ACI)的发病率呈上升趋势，由于宏观血液流变学特异性不强[1]，本文从亚细胞水平研究ACI红细胞膜流动性及过氧化脂质(LPO)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性的改变，为ACI防治提供基础资料。
1 临床资料
1.1 研究对象
经头颅CT确诊为ACI的患者30例(男21例，女9例)，年龄40～70岁，均为我校二院神经科住院患者。健康对照组28例(男16例，女12例)，年龄38～69岁。
1.2 血浆粘度及纤维蛋白含量测定
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脑梗塞患者晨起空腹采血4ml，肝素抗凝，用0.38mm管径垂直式毛细管式粘度计(本教研室自行研制生产，获黑龙江省科技进步三等奖)测定血浆粘度，血浆放在温式(wintrobe)血沉管中60℃温育30min。离心测纤维蛋白含量。
1.3 红细胞膜流动性检测
用一步低渗溶血法提取红细胞膜，然后用LOWRY法测蛋白浓度(50μg/ml)，DPH(美国sigma公司出品)荧光标记，于Ex=362nm,Em=432nm时测量荧光偏振度P。
1.4 过氧化脂质测定
采用硫代巴比妥酸荧光法测定丙二醛含量。
1.5 超氧化物歧化酶活性测定
采用化学比色法。
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2 结果
2.1 实验组与对照组血浆粘度、纤维蛋白原含量、荧光偏振度变化见表1。
表1 血浆粘度、纤维蛋白原含量及荧光偏振度变化(
±s) 组别
例数
ηp(mpass)
Fg(mg。L-1)
P
对照组
28
1.633±0.047
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2.16±0.27
0.3075±0.0136
ACI组
30
1.843±0.012*
4.07±0.31*
0.3267±0.0154*
*P<0.01 由表1可知，与对照组比较ACI组血浆粘度、纤维蛋白原含量、荧光偏振度均显著升高(P<0.01)。
2.2 实验组与对照组脂质过氧化物含量、超氧化物歧化酶活性见表2。
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表2 过氧化脂质含量、超氧化物歧化酶活性变化(±s)
组别
例数
LPO(mmo。ml-1)
SOD(NU。ml-1)
对照组
28
6.48±0.43
104.21±9.51
ACI组
, 百拇医药
30
8.16±1.27*
75.42±7.45*
*P<0.01 与对照组比较，ACI组过氧化脂质含量显著升高(P<0.01)，而超氧化物歧化酶活性显著降低(P<0.01)。
3 讨论
近年来，脑梗塞发病率呈上升年轻化趋势。纤维蛋白原是血栓的主要基质，因其分子量较大且呈链状并附于细胞表面，促使纤维蛋白原分子之间及其与其他蛋白分子之间的相互拉引，增强了细胞的凝聚性。因而，纤维蛋白原增高是血浆粘度增高的主要原因之一。高纤维蛋白原还可促进纤维蛋白形成，缩短血液凝固时间，增加血小板粘度和血粘度，使之具有潜在血栓源性[2]。纤维蛋白原增高是缺血性脑血管病的重要危险因素之一，临床观察发现，大部分脑血栓形成及脑梗塞患者同时伴有高纤血症。采取有效的降纤措施溶解血栓可减少中风发生。生物膜脂的流动性是生物膜的重要特性之一，是维持膜功能，如细胞膜物质转运、通透性、酶活性、变形性等。红细胞膜脂流动性降低，引起红细胞变形性降低，表现血液粘度增加，红细胞聚集性增加，血流阻力增大[3]，同时红细胞膜流动性降低，红细胞贴合变形能力下降，导致血液层流中的内摩擦力增加，血管内皮易因血流高速度梯度而受损，内皮下胶原暴露，使带正电的胶原与带负电的血小板相互吸引，形成血小板团阻塞血流，使红细胞聚集成团形成血栓。本实验证实急性脑梗塞患者红细胞膜的荧光偏振度P增高，而P值恰好反映了膜脂的流动性。P值越大，膜脂流动性越小。由此可见，急性脑梗塞患者红细胞膜流动性显著降低。
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LPO是脂质过氧化链式支链反应最终变性产物，它在血浆中的浓度直接反映了脂质过氧化速率[4]。本实验中ACI患者LPO水平明显高于正常人，说明ACI时脂质过氧化速率是增加的，即在ACI发生与发展中脂质过氧化物参与了其中某个环节。血浆LPO含量的增加可能是由于组织细胞自由基生成增加以及失控引起的。自由基医学认为，体内氧自由基反应及脂质过氧化反应的病理性加剧是脑血管病的病理基础之一。因此减缓机体内脂质过氧化物水平对保护机体有重要作用。中枢神经系统细胞富含多不饱和脂肪酸及易与超氧自由基、羟自由基等作用而引起膜脂质的氧化反应和过氧化反应加剧。脑梗塞时激发并催化氧自由基反应和脂质过氧化反应加剧所引起的氧化和过氧化损伤，即导致中枢神经系统细胞内环境系乱和细胞功能丧失，促进攻击膜脂导致不饱和脂肪酸的氧化，表现为细胞膜流动性下降[5]。本实验结果显示，ACI患者存在明显流动性障碍，也许是本病发病的原因。采用溶栓治疗可有效地改善血液流变性，提高红细胞膜流动性，从而使病情得以缓解。动态的观察生化指标也是判定疗效预后的重要参数之一。■
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作者简介：许艳(1965-)，女，讲师
参考文献：
[1]许艳，付晨微，等.脑血栓患者血液流变学及红细胞膜流动性改变的研究[J].中国血液流变学杂志，1997，7(3)：15-18.
[2]戴宝珠，朱秉武.腔隙性脑梗塞患者血液流变学与血脂变化的观察[J].实用老年医学，1995，7(6)：272.
[3]Tozzi CMG.Erythrocyte membrane fluidity in subjects addected with reversible attacks[J].Riv Eur Sci Med Farmacal,1991,13(1-2):43-49.
[4]邬梦麒，周玫，等.原发性肺癌患者血浆LPO含量和血浆红细胞ScGSHPx活性测定[J].实用肿瘤杂志，1992，2(4)：206.
[5]陈建文，张兰萍，宋剑陶，等.脂质过氧化物对人红细胞膜流动性的影响[J].生物物理学报，1992，8(3)：502.
收稿日期：1999-06-28, 百拇医药
单位：许艳(哈尔滨医科大学 生物物理教研室)； 高佩琦(哈尔滨医科大学 生物物理教研室)； 马波(哈尔滨医科大学 生物物理教研室) ； 梁庆成(哈尔滨医科大学附属第二医院，黑龙江 哈尔滨 150086)； 赵永波(哈尔滨医科大学附属第二医院，黑龙江 哈尔滨 150086)
关键词：脑梗塞；荧光偏振度；过氧化脂质；超氧化物歧化酶
哈尔滨医科大学学报000110 摘 要：目的 探讨急性脑梗塞(ACI)的发病机制及治疗措施。方法 采用测定ACI患者血浆粘度(ηp)、纤维蛋白原含量(Fg)、红细胞膜荧光偏振度P、过氧化脂质(LPO)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性等指标进行对比研究。结果 与同龄健康组比较，ACI患者ηp、Fg、LPO水平均显著升高(P<0.05)，SOD活性显著降低(P<0.01)。红细胞膜流动性下降。结论 本研究对深入探讨ACI发病机制有一定意义。
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分类号：R743.33 文献标识码：A
文章编号：1000-1905(2000)01-0024-02
Changes of membrane fluidity of erythrocytes and some biochemical
indexes in patients with acute cerebral infarction
XU Yan GAO Pei-qi MA Bo
(Department of Biophysics,Harbin Medical University,Harbin 150086,China)
Abstract：Objective To explore the mechanism and the cure manner in acute cerebral infarction (ACI).Methods The indexes of plasma viscosity(ηp),plasminogen(Fg),the fluorescance polarization of membrane (P),lipide peroxidation (LPO) level,and superoxide dismutase (SOD) activity were studied in patients with ACI as well as the control group.Results The ηp,Fg,LPO level significantly increased (P<0.01) in the patients while the activity of SOD and the membrane fluidity significantly decreased (P<0.01).Conclusion The experiments may play an important role in the mechanism of ACI.
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Key words：cerebral infarction;fluorescance polarization;LPO;SOD▲
近年来急性脑梗塞(ACI)的发病率呈上升趋势，由于宏观血液流变学特异性不强[1]，本文从亚细胞水平研究ACI红细胞膜流动性及过氧化脂质(LPO)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性的改变，为ACI防治提供基础资料。
1 临床资料
1.1 研究对象
经头颅CT确诊为ACI的患者30例(男21例，女9例)，年龄40～70岁，均为我校二院神经科住院患者。健康对照组28例(男16例，女12例)，年龄38～69岁。
1.2 血浆粘度及纤维蛋白含量测定
, http://www.100md.com
脑梗塞患者晨起空腹采血4ml，肝素抗凝，用0.38mm管径垂直式毛细管式粘度计(本教研室自行研制生产，获黑龙江省科技进步三等奖)测定血浆粘度，血浆放在温式(wintrobe)血沉管中60℃温育30min。离心测纤维蛋白含量。
1.3 红细胞膜流动性检测
用一步低渗溶血法提取红细胞膜，然后用LOWRY法测蛋白浓度(50μg/ml)，DPH(美国sigma公司出品)荧光标记，于Ex=362nm,Em=432nm时测量荧光偏振度P。
1.4 过氧化脂质测定
采用硫代巴比妥酸荧光法测定丙二醛含量。
1.5 超氧化物歧化酶活性测定
采用化学比色法。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 实验组与对照组血浆粘度、纤维蛋白原含量、荧光偏振度变化见表1。
表1 血浆粘度、纤维蛋白原含量及荧光偏振度变化(
±s) 组别例数
ηp(mpass)
Fg(mg。L-1)
P
对照组
28
1.633±0.047
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2.16±0.27
0.3075±0.0136
ACI组
30
1.843±0.012*
4.07±0.31*
0.3267±0.0154*
*P<0.01 由表1可知，与对照组比较ACI组血浆粘度、纤维蛋白原含量、荧光偏振度均显著升高(P<0.01)。
2.2 实验组与对照组脂质过氧化物含量、超氧化物歧化酶活性见表2。
, 百拇医药
表2 过氧化脂质含量、超氧化物歧化酶活性变化(
±s)组别
例数
LPO(mmo。ml-1)
SOD(NU。ml-1)
对照组
28
6.48±0.43
104.21±9.51
ACI组
, 百拇医药
30
8.16±1.27*
75.42±7.45*
*P<0.01 与对照组比较，ACI组过氧化脂质含量显著升高(P<0.01)，而超氧化物歧化酶活性显著降低(P<0.01)。
3 讨论
近年来，脑梗塞发病率呈上升年轻化趋势。纤维蛋白原是血栓的主要基质，因其分子量较大且呈链状并附于细胞表面，促使纤维蛋白原分子之间及其与其他蛋白分子之间的相互拉引，增强了细胞的凝聚性。因而，纤维蛋白原增高是血浆粘度增高的主要原因之一。高纤维蛋白原还可促进纤维蛋白形成，缩短血液凝固时间，增加血小板粘度和血粘度，使之具有潜在血栓源性[2]。纤维蛋白原增高是缺血性脑血管病的重要危险因素之一，临床观察发现，大部分脑血栓形成及脑梗塞患者同时伴有高纤血症。采取有效的降纤措施溶解血栓可减少中风发生。生物膜脂的流动性是生物膜的重要特性之一，是维持膜功能，如细胞膜物质转运、通透性、酶活性、变形性等。红细胞膜脂流动性降低，引起红细胞变形性降低，表现血液粘度增加，红细胞聚集性增加，血流阻力增大[3]，同时红细胞膜流动性降低，红细胞贴合变形能力下降，导致血液层流中的内摩擦力增加，血管内皮易因血流高速度梯度而受损，内皮下胶原暴露，使带正电的胶原与带负电的血小板相互吸引，形成血小板团阻塞血流，使红细胞聚集成团形成血栓。本实验证实急性脑梗塞患者红细胞膜的荧光偏振度P增高，而P值恰好反映了膜脂的流动性。P值越大，膜脂流动性越小。由此可见，急性脑梗塞患者红细胞膜流动性显著降低。
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LPO是脂质过氧化链式支链反应最终变性产物，它在血浆中的浓度直接反映了脂质过氧化速率[4]。本实验中ACI患者LPO水平明显高于正常人，说明ACI时脂质过氧化速率是增加的，即在ACI发生与发展中脂质过氧化物参与了其中某个环节。血浆LPO含量的增加可能是由于组织细胞自由基生成增加以及失控引起的。自由基医学认为，体内氧自由基反应及脂质过氧化反应的病理性加剧是脑血管病的病理基础之一。因此减缓机体内脂质过氧化物水平对保护机体有重要作用。中枢神经系统细胞富含多不饱和脂肪酸及易与超氧自由基、羟自由基等作用而引起膜脂质的氧化反应和过氧化反应加剧。脑梗塞时激发并催化氧自由基反应和脂质过氧化反应加剧所引起的氧化和过氧化损伤，即导致中枢神经系统细胞内环境系乱和细胞功能丧失，促进攻击膜脂导致不饱和脂肪酸的氧化，表现为细胞膜流动性下降[5]。本实验结果显示，ACI患者存在明显流动性障碍，也许是本病发病的原因。采用溶栓治疗可有效地改善血液流变性，提高红细胞膜流动性，从而使病情得以缓解。动态的观察生化指标也是判定疗效预后的重要参数之一。■
, http://www.100md.com
作者简介：许艳(1965-)，女，讲师
参考文献：
[1]许艳，付晨微，等.脑血栓患者血液流变学及红细胞膜流动性改变的研究[J].中国血液流变学杂志，1997，7(3)：15-18.
[2]戴宝珠，朱秉武.腔隙性脑梗塞患者血液流变学与血脂变化的观察[J].实用老年医学，1995，7(6)：272.
[3]Tozzi CMG.Erythrocyte membrane fluidity in subjects addected with reversible attacks[J].Riv Eur Sci Med Farmacal,1991,13(1-2):43-49.
[4]邬梦麒，周玫，等.原发性肺癌患者血浆LPO含量和血浆红细胞ScGSHPx活性测定[J].实用肿瘤杂志，1992，2(4)：206.
[5]陈建文，张兰萍，宋剑陶，等.脂质过氧化物对人红细胞膜流动性的影响[J].生物物理学报，1992，8(3)：502.
收稿日期：1999-06-28, 百拇医药