冠瘤海鞘Styela canopus的化学成份研究
作者：王超杰 苏镜娱 曾陇梅
单位：(中山大学化学系，广州 510275)
关键词：冠瘤海鞘；天然产物；结构鉴定
中国海洋药物000101
摘 要：从中国惠州大亚湾海域采集的冠瘤海鞘Styela canopus中分离出4种化合物，它们分别是鲛肝醇，鲨肝醇，胞嘧啶，胸腺嘧啶脱氧核糖，其结构通过波谱鉴定。这是有关冠瘤海鞘化学成份研究的首次报道。
STUDIES ON THE CHEMICAL CONSTITUENTS OF THE TUNICATE STYELACANOPUS FROM THE DAYAWAN BAY
Wang Chaojie Su Jingyu Zeng Longmei
, http://www.100md.com
(Department of Chemistry,Zhongshan University,Guangzhou 510275)
ABSTRACT：Four compounds were isolated from the tunicate Styela canopus savigny collected
from the Dayawan Bay of Huizhou,Guang Dong Province.They were α-palmityl glycerin ether,batyl alcohol,cytosine and thymidine respectively. These compounds were identified by means of various
spectra data of IR,FABMS,1HNMR，13CNMR.This is the first report about Styela canopus.
, 百拇医药
KEY WORDS；Tunicate;natural products;structure identification▲
海鞘(ascidians)是海洋化学家研究对象中进化程度较高的动物之一。八十年代以来的研究表明：海鞘中含有很多种生理活性良好的化合物，如抗肿瘤活性物质、抗菌及抗病毒活性物质、抑制钙调蛋白活性物质、诱导肌浆网释钙物质等[1]。因此，有关海鞘生理活性成份的研究正受到越来越多的研究者的关注。我国南海有丰富的海鞘资源，但国内对海鞘化学成份的研究还很少[2]。本文将报道采自广东惠州大亚湾冠瘤海鞘Styela canopus Savigny化学成份的初步研究结果，这也是有关冠瘤海鞘化学成份的首次报道。
1 实验
1.1 仪器与试剂
国产5X显微熔点测定仪，温度计未经校正。Nicolet 5DX FT红外光谱仪，JEOL 90Q FT核磁共振仪，AMX600核磁共振仪，VG-ZAB-HS质谱仪，LABCONCO型冻干机，分离用硅胶H(10-40μ)系青岛海洋化工厂生产，各种溶剂为化学纯试剂，重蒸后使用。
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1.2 提取与分离
冠瘤海鞘Styela canopus Savigny于1996年4月采自广东惠州大亚湾，由中科院南海海洋研究所杨国峰教授鉴定。标本存放于中山大学化学系天然产物研究室。
海鞘出水后立即冰冻保存，提取时先用冻干机冻干，得约45g样品，剪碎后用2∶1的氯仿：甲醇浸泡，3次提取的滤液合并，蒸干溶剂后的浸膏用乙酸乙酯-水分配，有机相干燥后减压浓缩得2.5g褐色浸膏，然后用硅胶H减压柱层析，丙酮-石油醚梯度洗脱得粗产物A、B、C。A再经加压硅胶H柱层析(乙酸乙酯：石油醚＝25∶75)，所得固体再经制备薄层(PTLC)分离，丙酮重结晶分别得化合物Ⅰ(5mg)和化合物Ⅱ(3mg)。B经加压硅胶H柱层析(丙酮：石油醚＝40∶60)，所得固体经PTLC纯化，丙酮-甲醇重结晶得化合物Ⅲ(3mg)。C经加压硅胶H柱层析(丙酮：石油醚＝45∶65)，所得固体经PTLC纯化，丙酮-甲醇重结晶，得化合物Ⅳ(3mg)。
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1.3 波谱数据
化合物I(鲛肝醇)为白色粉末状固体，mp 59～61℃，FABMS(m/z)317(M+1)+，IR(υmax cm-1)3400，3390，2952，1465，1140，1025，746.1HNMR(TMS，CDCl3)
3.9(1H，m)，3.4～3.8(6H，m)，1.8(br,可氘代)，1.56(2H，br)，1.26
(28H，brs)，0.87(3H，t)。13CNMR(TMS，CDCl3)72.59(t,C1｀70.66(d,C2｀)，64.40(t,C3｀)，71.95(t,C1)，29.40(t)，26.0(t)，29.7(t,C3～13)，31.8(t)，22.42(t),13.90(q).
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化合物Ⅱ(鲨肝醇)为白色粉末状固体，mp 68～70℃，FABMS(m/z) 345(M+1)+，IR(υmax cm-1)3410，3390，2952，1462，1140，1025，760.1HNMR(TMS，CDCl3)3.95(1H，m)，3.4～3.8(6H，m)，1.8(brs,可氘代)，1.56(2H，brs)，1.26(32H，brs),0.87(3H，t).
化合物Ⅲ(胞嘧啶)白色粉末状固体，mp >250℃，FABMS(m/z)112(M+1)+，IR(υmax cm-1)3390，3180，2750，1660，1460，1520，1460，1280，1HNMR(TMS，CDCl3)11.0(1H，brs)，10.8(2H,brs),7.38(1H,d,J=7.2Hz),5.44(1H,d,J=7.2Hz)
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化合物Ⅳ(胸腺嘧啶脱氧核糖)，无色针状晶体，mp 187～189℃，ESMS(m/z)
243(M+1)+，IR(υmax cm-1)3318，3029，2846，1700，1665，1475，1433，1321，1271，1068，1004，969，906，878.1HNMR(TMS，CDCl3)7.80(1H,d,J=1.2Hz),6.27(1H,m),4.40(1H,m),3.88(1H,dd,J=6.7,3.4Hz),3.73(2H,dd,J=12.1,3.2Hz),2.23(2H,m).13CNMR(TMS,CDCl3)166.4(s),152.4(s),138.2(d),111.5(s),88.8(d),86.3(d),72.2(d),62.9(t),41.2(t)12.4(q)
表1 化合物Ⅳ的核磁双共振结果 照射的信号δH
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变化的信号
3.90
4.38
6.27
7.80
3.74(2H,dddd)→3.74(2H,dd);4.38(1H,m)→s
2.2(2H,m)→s；3.90(1H,m)→s
2.2(2H,m)→s
1.87(3H,d)→s
2 结果与讨论
2.1 化合物(Ⅰ)(鲛肝醇) (Ⅰ)的IR中3400cm-1处有一强宽峰，1HNMR中δ1.85处有一宽峰，重水交换后消失，说明分子中有羟基；1HNMR同时显示出长直链化合物的特征：一个CH3(δ0.87)信号，一个由多个CH2(δ1.26)组成的信号。13CNMR(DEPT)谱表明(Ⅰ)在被氧去屏蔽的低场区(δc72.59，71.95，70.66，64.40)有三个CH2O、一个CH-O信号；同时只有一个CH3(δc13.90)信号。FABMS显示(Ⅰ)的分子量为316.(Ⅰ)的波谱数据与1-十六碳烷甘油醚(鲛肝醇)相吻合[3]，说明(Ⅰ)为鲛肝醇。其结构式为：
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2.2 化合物(Ⅱ)(鲨肝醇) (Ⅱ)的IR、1HNMR谱图特征与鲛肝醇的谱图特征基本相同，说明它也是甘油醚类化合物，但FABMS显示(Ⅱ)的分子量为344。表明(Ⅱ)是1-十八碳烷甘油醚(鲨肝醇)，其熔点及波谱数据与文献值相符[4]。其结构式为：
2.3 化合物(Ⅲ)(胞嘧啶) (Ⅲ)的分子量不大(FABMS112(M+1)+)但熔点很高(m.p>250℃)，其IR、1HNMR与胞嘧啶的文献值[5]相符，说明(Ⅲ)为胞嘧啶。其结构式为：
2.4 化合物(Ⅳ)(胸腺嘧啶脱氧核糖) (Ⅳ)的ESMS表明其分子量为242，结合13CNMR判断其分子式为C10H14N2O5，不饱和度为5。
, 百拇医药
(Ⅳ)的IR(vmax,cm-1)中3318处的强尖峰，表明分子中可能含有羟基或N-H；1700，1665处的强峰则表明有两个羰基，结合13CNMR中较低的羰基化学位移(δ166.4，152.4)可以推断这两个羰基为共轭型的酯羰基或酰氨羰基。(Ⅳ)中的1HNMR中(δ3.74(2H)、3.90(1H)、4.28(1H)处多组氢信号提示分子中可能含有糖的片断；13CNMR中δ60-90间有4个连氧碳[88.8(d),86.3(d),72.2(d),62.9(t)]则证实了这一点。而利用核磁双共振实验可以确定该糖为脱氧核糖：δ6.27(1H，C1')信号，只使δ2.20(2H，C2')信号变尖，说明二者直接相联；而照射δ4.38(1H，C3')信号不仅使δ2.20(2H，C2')信号变尖，还使δ3.90(1H，C4')信号变尖；照照射射390(1H，C4')信号则不仅使δ4.38(1H，C3')信号变尖，还使3.74(2H，C5')变尖，至此说明这是1位成苷的脱氧核糖。综合以上讨论及4的1HNMR和13CNMR数据可以确定Ⅳ为胸腺嘧啶脱氧核糖，其波谱数据与文献[6]一致。其结构式为：
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基金项目：国家自然科学基金资助项目(编号29572088)
参考文献：
[1]Rinehart KL,Kishore V,Nagarajan S,et al. Structures of the Didemins,Antiviral and Cytotoxic Depsipeptides from a Caribbean Tunicate.J Am Chem Soc.,1981,103:1857
[2]程杰飞，李榕，林国强.大亚湾产红贺复海鞘Herdmania momus化学成分的研究.有机化学.1995，15：455
[3]Bayer E，icher HOL. Acetone Glyceraldehyde and Optically Active Glycerides. J Bio chem,1941,140:397
, http://www.100md.com
[4]王贵阳生，刘青，曾陇梅.中国南海软珊瑚Cladiella densa的化学成分研究.中山大学学报(自然科学版)，1995，34(1)：110
[5]Jeanettle G,Grassolli,William M,Rictchey. Atlas of Spectral Data and Physical Constants for Organic Compounds.2nd Edition,VIII,480
[6]a. Aldrich 1994～1995,1350
b. Standard Spectra 1HNMR 35674M
收稿日期：99-04-06, 百拇医药
单位：(中山大学化学系，广州 510275)
关键词：冠瘤海鞘；天然产物；结构鉴定
中国海洋药物000101
摘 要：从中国惠州大亚湾海域采集的冠瘤海鞘Styela canopus中分离出4种化合物，它们分别是鲛肝醇，鲨肝醇，胞嘧啶，胸腺嘧啶脱氧核糖，其结构通过波谱鉴定。这是有关冠瘤海鞘化学成份研究的首次报道。
STUDIES ON THE CHEMICAL CONSTITUENTS OF THE TUNICATE STYELACANOPUS FROM THE DAYAWAN BAY
Wang Chaojie Su Jingyu Zeng Longmei
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(Department of Chemistry,Zhongshan University,Guangzhou 510275)
ABSTRACT：Four compounds were isolated from the tunicate Styela canopus savigny collected
from the Dayawan Bay of Huizhou,Guang Dong Province.They were α-palmityl glycerin ether,batyl alcohol,cytosine and thymidine respectively. These compounds were identified by means of various
spectra data of IR,FABMS,1HNMR，13CNMR.This is the first report about Styela canopus.
, 百拇医药
KEY WORDS；Tunicate;natural products;structure identification▲
海鞘(ascidians)是海洋化学家研究对象中进化程度较高的动物之一。八十年代以来的研究表明：海鞘中含有很多种生理活性良好的化合物，如抗肿瘤活性物质、抗菌及抗病毒活性物质、抑制钙调蛋白活性物质、诱导肌浆网释钙物质等[1]。因此，有关海鞘生理活性成份的研究正受到越来越多的研究者的关注。我国南海有丰富的海鞘资源，但国内对海鞘化学成份的研究还很少[2]。本文将报道采自广东惠州大亚湾冠瘤海鞘Styela canopus Savigny化学成份的初步研究结果，这也是有关冠瘤海鞘化学成份的首次报道。
1 实验
1.1 仪器与试剂
国产5X显微熔点测定仪，温度计未经校正。Nicolet 5DX FT红外光谱仪，JEOL 90Q FT核磁共振仪，AMX600核磁共振仪，VG-ZAB-HS质谱仪，LABCONCO型冻干机，分离用硅胶H(10-40μ)系青岛海洋化工厂生产，各种溶剂为化学纯试剂，重蒸后使用。
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1.2 提取与分离
冠瘤海鞘Styela canopus Savigny于1996年4月采自广东惠州大亚湾，由中科院南海海洋研究所杨国峰教授鉴定。标本存放于中山大学化学系天然产物研究室。
海鞘出水后立即冰冻保存，提取时先用冻干机冻干，得约45g样品，剪碎后用2∶1的氯仿：甲醇浸泡，3次提取的滤液合并，蒸干溶剂后的浸膏用乙酸乙酯-水分配，有机相干燥后减压浓缩得2.5g褐色浸膏，然后用硅胶H减压柱层析，丙酮-石油醚梯度洗脱得粗产物A、B、C。A再经加压硅胶H柱层析(乙酸乙酯：石油醚＝25∶75)，所得固体再经制备薄层(PTLC)分离，丙酮重结晶分别得化合物Ⅰ(5mg)和化合物Ⅱ(3mg)。B经加压硅胶H柱层析(丙酮：石油醚＝40∶60)，所得固体经PTLC纯化，丙酮-甲醇重结晶得化合物Ⅲ(3mg)。C经加压硅胶H柱层析(丙酮：石油醚＝45∶65)，所得固体经PTLC纯化，丙酮-甲醇重结晶，得化合物Ⅳ(3mg)。
, 百拇医药
1.3 波谱数据
化合物I(鲛肝醇)为白色粉末状固体，mp 59～61℃，FABMS(m/z)317(M+1)+，IR(υmax cm-1)3400，3390，2952，1465，1140，1025，746.1HNMR(TMS，CDCl3)
3.9(1H，m)，3.4～3.8(6H，m)，1.8(br,可氘代)，1.56(2H，br)，1.26
(28H，brs)，0.87(3H，t)。13CNMR(TMS，CDCl3)72.59(t,C1｀70.66(d,C2｀)，64.40(t,C3｀)，71.95(t,C1)，29.40(t)，26.0(t)，29.7(t,C3～13)，31.8(t)，22.42(t),13.90(q).
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化合物Ⅱ(鲨肝醇)为白色粉末状固体，mp 68～70℃，FABMS(m/z) 345(M+1)+，IR(υmax cm-1)3410，3390，2952，1462，1140，1025，760.1HNMR(TMS，CDCl3)3.95(1H，m)，3.4～3.8(6H，m)，1.8(brs,可氘代)，1.56(2H，brs)，1.26(32H，brs),0.87(3H，t).
化合物Ⅲ(胞嘧啶)白色粉末状固体，mp >250℃，FABMS(m/z)112(M+1)+，IR(υmax cm-1)3390，3180，2750，1660，1460，1520，1460，1280，1HNMR(TMS，CDCl3)11.0(1H，brs)，10.8(2H,brs),7.38(1H,d,J=7.2Hz),5.44(1H,d,J=7.2Hz)
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化合物Ⅳ(胸腺嘧啶脱氧核糖)，无色针状晶体，mp 187～189℃，ESMS(m/z)
243(M+1)+，IR(υmax cm-1)3318，3029，2846，1700，1665，1475，1433，1321，1271，1068，1004，969，906，878.1HNMR(TMS，CDCl3)7.80(1H,d,J=1.2Hz),6.27(1H,m),4.40(1H,m),3.88(1H,dd,J=6.7,3.4Hz),3.73(2H,dd,J=12.1,3.2Hz),2.23(2H,m).13CNMR(TMS,CDCl3)166.4(s),152.4(s),138.2(d),111.5(s),88.8(d),86.3(d),72.2(d),62.9(t),41.2(t)12.4(q)
表1 化合物Ⅳ的核磁双共振结果 照射的信号δH
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变化的信号
3.90
4.38
6.27
7.80
3.74(2H,dddd)→3.74(2H,dd);4.38(1H,m)→s
2.2(2H,m)→s；3.90(1H,m)→s
2.2(2H,m)→s
1.87(3H,d)→s
2 结果与讨论
2.1 化合物(Ⅰ)(鲛肝醇) (Ⅰ)的IR中3400cm-1处有一强宽峰，1HNMR中δ1.85处有一宽峰，重水交换后消失，说明分子中有羟基；1HNMR同时显示出长直链化合物的特征：一个CH3(δ0.87)信号，一个由多个CH2(δ1.26)组成的信号。13CNMR(DEPT)谱表明(Ⅰ)在被氧去屏蔽的低场区(δc72.59，71.95，70.66，64.40)有三个CH2O、一个CH-O信号；同时只有一个CH3(δc13.90)信号。FABMS显示(Ⅰ)的分子量为316.(Ⅰ)的波谱数据与1-十六碳烷甘油醚(鲛肝醇)相吻合[3]，说明(Ⅰ)为鲛肝醇。其结构式为：
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2.2 化合物(Ⅱ)(鲨肝醇) (Ⅱ)的IR、1HNMR谱图特征与鲛肝醇的谱图特征基本相同，说明它也是甘油醚类化合物，但FABMS显示(Ⅱ)的分子量为344。表明(Ⅱ)是1-十八碳烷甘油醚(鲨肝醇)，其熔点及波谱数据与文献值相符[4]。其结构式为：
2.3 化合物(Ⅲ)(胞嘧啶) (Ⅲ)的分子量不大(FABMS112(M+1)+)但熔点很高(m.p>250℃)，其IR、1HNMR与胞嘧啶的文献值[5]相符，说明(Ⅲ)为胞嘧啶。其结构式为：
2.4 化合物(Ⅳ)(胸腺嘧啶脱氧核糖) (Ⅳ)的ESMS表明其分子量为242，结合13CNMR判断其分子式为C10H14N2O5，不饱和度为5。
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(Ⅳ)的IR(vmax,cm-1)中3318处的强尖峰，表明分子中可能含有羟基或N-H；1700，1665处的强峰则表明有两个羰基，结合13CNMR中较低的羰基化学位移(δ166.4，152.4)可以推断这两个羰基为共轭型的酯羰基或酰氨羰基。(Ⅳ)中的1HNMR中(δ3.74(2H)、3.90(1H)、4.28(1H)处多组氢信号提示分子中可能含有糖的片断；13CNMR中δ60-90间有4个连氧碳[88.8(d),86.3(d),72.2(d),62.9(t)]则证实了这一点。而利用核磁双共振实验可以确定该糖为脱氧核糖：δ6.27(1H，C1')信号，只使δ2.20(2H，C2')信号变尖，说明二者直接相联；而照射δ4.38(1H，C3')信号不仅使δ2.20(2H，C2')信号变尖，还使δ3.90(1H，C4')信号变尖；照照射射390(1H，C4')信号则不仅使δ4.38(1H，C3')信号变尖，还使3.74(2H，C5')变尖，至此说明这是1位成苷的脱氧核糖。综合以上讨论及4的1HNMR和13CNMR数据可以确定Ⅳ为胸腺嘧啶脱氧核糖，其波谱数据与文献[6]一致。其结构式为：
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基金项目：国家自然科学基金资助项目(编号29572088)
参考文献：
[1]Rinehart KL,Kishore V,Nagarajan S,et al. Structures of the Didemins,Antiviral and Cytotoxic Depsipeptides from a Caribbean Tunicate.J Am Chem Soc.,1981,103:1857
[2]程杰飞，李榕，林国强.大亚湾产红贺复海鞘Herdmania momus化学成分的研究.有机化学.1995，15：455
[3]Bayer E，icher HOL. Acetone Glyceraldehyde and Optically Active Glycerides. J Bio chem,1941,140:397
, http://www.100md.com
[4]王贵阳生，刘青，曾陇梅.中国南海软珊瑚Cladiella densa的化学成分研究.中山大学学报(自然科学版)，1995，34(1)：110
[5]Jeanettle G,Grassolli,William M,Rictchey. Atlas of Spectral Data and Physical Constants for Organic Compounds.2nd Edition,VIII,480
[6]a. Aldrich 1994～1995,1350
b. Standard Spectra 1HNMR 35674M
收稿日期：99-04-06, 百拇医药