孕期人乳头状瘤病毒亚临床感染与母婴垂直
作者：彭 萍 翁霞云 谷志远 李 琦
单位：解放军总医院，北京 100853
关键词：人乳头状瘤病毒；妊娠；传播；PCR
军医进修学院学报000111摘 要：目的：探讨不同孕期人乳头状瘤病毒(HPV)亚临床感染及母婴垂直传播情况。方法：采用PCR技术检测30例孕早期、42例孕中期、32例孕晚期妇女的宫颈分泌物、母血、绒毛或胎盘、羊水、脐血及新生儿咽部抽吸物标本HPV-6、11、16、18型DNA。结果：早孕期：5例宫颈分泌物HPV阳性 (5/30)，7例母血HPV阳性 (7/30)，3例绒毛HPV阳性 (3/30)；中孕期：12例宫颈分泌物HPV阳性 (12/42)，11例母血HPV阳性 (11/42)，9例胎盘HPV阳性 (9/42)；另22例羊水标本中，仅1例HPV阳性 (1/22)；晚孕期：23例宫颈分泌物HPV阳性 (23/32)、18例母血HPV阳性 (18/32)，12例胎盘HPV阳性 (12/32)；另31例羊水标本中，4例HPV阳性 (4/31)，31例脐血标本中，12例HPV阳性 (12/31)。分析羊水、脐血与母血HPV感染的相对危险度高于宫颈分泌物，而产时新生儿咽部抽吸物与宫颈分泌物HPV感染的相对危险度高于母血。结论：在整个孕期中，孕晚期的HPV亚临床感染明显。孕期HPV亚临床感染的母婴传播不但可经产道直接接触传播，还可经羊水、胎盘发生宫内传播，其宫内传播率的高低主要与母血HPV感染相关。新生儿脐血的HPV感染主要与母血感染相关，而产时新生儿咽部的HPV感染主要与宫颈分泌物感染相关。
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中图号：R373.9 文献标识码：A
文章编号：1005-1139(2000)01-0032-35
Vertical transimission of human papillomavirus asymptomatic infection during different gestational periods
PENG Ping,(Department of Gynecology Obstetircs,General Hospital of Guangzhou Military District, Guangzhou 510010, China)
WENG Xia-yun,GU Zhi-yuan, LI Qi
Abstract：Objective：To investigate the vertical transmission of Human Papillomavirus (HPV) asymptomatic infection of different gestational periods. Methods：Polymerase chain reaction (PCR) assay was employed to detect HPV-DNA 6, 11, 16,and 18 in 30 pregnant women in the first trimester, 42 in the second and 32 in the third. Samples from cervicalvaginal exfoliated cells, maternal peripheral blood, chorionic villi or placenta, amniotic fluid,cord blood and nasopharyngeal secretion of the newborns were examined respectively.Results：In the first trimester,HPV-DNA was detected in the cervicalvaginal exfoliated cells of 5 cases (5/30), in maternal peripheral blood of 7 cases (7/30) and in chorionic villi of 3 cases (3/30). In the second trimester, HPV-DNA was detected in the cervicalvaginal exfoliated cells of 12 cases (12/42), in maternal peripheral blood of 11 cases (11/42), in placenta of 9 cases (9/42). Only one of 22 amniotic fluid samples was found infected (1/22). In the third trimester, HPV-DNA was detected in the cervicalvaginal exfoliated cells of 23 cases (23/32),in maternal peripheral blood of 18 cases (18/32), in placenta of 12 cases (12/32).4 samples of amniotic fluid out of the 31 cases (4/31) and 12 cord blood samples (12/31) were found infected. The risk of HPV infection in the amniotic fluid as well as the neonatal cord blood was related to the status of HPV infection in the maternal peripheral blood, being significantly higher than the relation to the maternal cervicalvaginal cells samples.The risk of HPV infection in the neonatal nasopharyngeal aspirates at birth was more highly related to the infective status of HPV in the maternal cervicalvaginal cells samples than to that of the maternal peripheral blood.Conclusion：Asymptomatic in-fective rate of HPV is highly siginificant in the third trimester.In pregnant women,HPV is transmitted not only through the birth canal at birth but also through the amniotic fluid and placenta during intrauterine life, and the HPV intrauterine transimission rate is related mainly to the state of HPV infection in the maternal peripheral blood.HPV infection in the neonatal cord blood is closely related to the status of HPV infection in the maternal peripheral blood,while HPV positive in the neonatal nasopharyngeal aspirates at birth correlates closely with the HPV infective state in the maternal cervicalvaginal cells.
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Key words：human papillomavirus (HPV); pregnancy; transimission; polymerase chain reaction (PCR)▲
近年来，女性生殖道人乳头状瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染率逐年上升，而其引起的尖锐湿疣已成为最常见的性传播疾病之一。孕期妇女HPV感染可通过母婴传播引起婴幼儿肛生殖部位的先天性尖锐湿疣、青少年喉乳头状瘤等相关性疾病，因而倍受关注，相继有学者对HPV的母婴传播作了初步探讨；但多限于孕晚期的研究，且取样单一，欠全面。我们选取平均年龄相近的孕早、中、晚期妇女共104例，采用PCR技术，对其宫颈分泌物、母血、绒毛或胎盘组织、羊水、脐血、新生儿咽部抽吸物标本进行HPV-6、11、16、18型DNA检测，力求对HPV的母婴垂直传播进行系统观察，现将结果报告如下。
1 对象和方法
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1.1 实验对象 1997年5月～1997年11月期间，按来院就诊日期随机选取孕早期30例(6～11周)、孕中期42例(12～27周)、孕晚期32例(28～41周)，排除有内外科疾病、外阴瘙痒及白带常规检查异常者。
1.2 临床标本的采集 包括：①冲洗宫颈外口(孕晚期者于破膜前)，留取冲洗液；产时吸取咽部分泌物；取羊水(孕中期志愿做雷凡诺尔引产者经腹行羊膜腔穿刺，孕晚期经阴道分娩者于人工破膜前穿刺前羊水囊、剖宫产者于术中取)，三种标本4℃下低速离心收取细胞沉淀，混悬于1.0mlPBS液中；②取孕早期绒毛，孕中、晚期胎盘，用生理盐水反复漂洗，直至确认无母血污染；③孕晚期娩出儿，确认无母血污染，抽取脐血，肝素抗凝；④抽取孕妇外周血，肝素抗凝。上述标本均置-20℃冰箱保存。
1.3 DNA提取
1.3.1 宫颈冲洗液、新生儿咽部抽吸物及羊水标本 用50～100μl裂解液(蛋白酶K终浓度为100μg/ml)混悬细胞沉淀，于55℃水浴消化1h；95℃处理10min，4℃下11000r/min离心5min，取上清液做为PCR扩增的模板。
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1.3.2 全血标本 先反复用TE液除去红细胞成分，余同1.3.1步骤。
1.3.3 绒毛及胎盘组织 组织块经1mlDNA提取液(10mmol/LTris-HCl，0.1mol/LEDTA,0.5%SDS，100μg/ml蛋白酶K)匀浆处理后，55℃水浴4h，苯酚∶氯仿∶异戊醇(25∶25∶1)抽提2次，加入1/10体积3molNaAc(pH5.2)和2倍体积的无水乙醇沉淀DNA。
1.4 PCR扩增 引物设计、扩增程序、扩增产物见参考文献[1]。每次扩增均同时设阳性和阴性对照，阳性对照为解放军总医院分子生物实验室提取的HPV-6、HPV-11、HPV-16、HPV-18型质粒DNA，阴性对照为蒸馏水。经2%琼脂糖凝胶电泳判定结果。
1.5 资料的统计学处理 应用SAS软件，计数资料比较采用χ2检验，如频数有特别小值时，两组采用Fisher精确检验，多组采用似然比χ2检验。单因数的相关分析采用队列研究分析，多因数的相关分析采用Logistic多元回归分析。以P<0.05为显著性界值。
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2 结 果
2.1 孕期妇女HPV亚临床感染 孕早、中、晚期妇女宫颈分泌物及母血的HPV感染率分别为16.67%(5/30)、23.33(7/30)；28.57%(12/42)、26.19%(11/42)；71.86%(23/32)、56.25%(18/32)；经总χ2检验，差异均有极显著意义(χ2宫颈＝22.844，χ2母血＝9.623，P均<0.01)；以孕晚期组的HPV感染率最高，其与孕早期、孕中期分别相比较，差异均有极显著意义(P<0.01)；而孕早、中期相比较，差异无显著性意义(P>0.05)。
2.2 胎盘的HPV感染率 孕早、中、晚期的感染率分别为10.00%(3/30)、21.43%(9/42)、37.50%(12/32)，经总χ2检验，其差异有显著意义(χ2＝6.704，P<0.05)；其中孕早、晚期相比较，差异显著(P<0.05)，而孕早、中期及孕中、晚期分别相比较，差异不显著(P>0.05)。分析胎盘的感染与宫颈分泌物及母血感染的相关性，见表1。
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表1 不同孕期绒毛/胎盘HPV感染状况与孕母HPV感染状况的关系
绒毛/胎盘HPV-DNA
相对危险度*
(RR)
P
+
-
宫颈分泌物HPV-DNA
+
16
24
1.82
, 百拇医药
>0.05
-
8
56
母 血HPV-DNA
+
22
14
42.84(8.17～210.59)
<0.01
-
2
66
, 百拇医药
*括号内为95%的可信区间
2.3 羊水的HPV感染率 孕中、晚期感染率分别为4.54%(1/22)、12.90%(4/31)，经检验，差异无显著性意义(Fisher精确检验：P(双侧)＝0.389)；不过，孕中期羊水均系经腹行羊膜腔穿刺取得，有1例HPV阳性，而孕晚期羊水的HPV阳性病例中亦有1例系从未破膜的剖宫产术中取得。羊水HPV感染与宫颈分泌物及母血HPV感染的相关性统计学分析显示前者相对危险度低于后者，但两者未见显著性差异。研究观察到，在孕中晚期各有1例经腹取得的羊水中检出了HPV-DNA。
2.4 脐血的HPV感染率 为38.71%(12/31)；脐血HPV感染与孕母宫颈分泌物及母血HPV感染的相关性，见表2。
表2 孕晚期脐血HPV感染状况与孕母HPV感染状况的关系
, 百拇医药
脐血HPV-DNA
相对危险度*
(RR)
P
+
-
宫颈分泌物HPV-DNA
+
10
12
1.85
>0.05
-
, 百拇医药
2
7
母 血HPV-DNA
+
10
7
7.60(1.24～46.61)
<0.05
-
2
12
*括号内为95%的可信区间
2.5 产时新生儿咽部抽吸物的HPV感染率 为41.94%(13/31)，其HPV感染与孕母宫颈分泌物及母血HPV感染的相关性，见表3。
, 百拇医药
表3 产时新生儿咽部抽吸物HPV感染状况与孕母HPV感染状况的关系
咽部HPV-DNA
相对危险度*
(RR)
P
+
-
宫颈分泌物HPV-DNA
+
12
10
9.60(1.02～90.35)
, 百拇医药
<0.05
-
2
7
母 血HPV-DNA
+
10
7
4.12
>0.05
-
2
12
, 百拇医药 *括号内为95%的可信区间
2.6 宫颈分泌物HPV阳性的孕妇经阴道分娩的传播率为55.56%(10/18)，经剖宫产的传播率为50.00%(2/4)，经检验其差异无显著性意义(Fisher精确检验：P(双侧)＝1.000)；但其中1例系未破膜的剖宫产儿，其咽部抽吸物的HPV-DNA阳性，其母血、脐血及胎盘均为HPV-DNA阳性，而孕母宫颈分泌物为HPV-DNA阴性。
3 讨 论
3.1 孕期HPV亚临床感染 妊娠妇女HPV亚临床感染率多数研究表明以孕晚期明显[2～3]，少数研究提示不同孕期妊娠妇女并无差别，认为感染率高低与妊娠妇女年龄相关，<30岁组感染率高于>30岁组[4]。
本文选取年龄(26.42±5.38)相近(P>0.05)的孕早、中、晚期妇女，研究结果表明：随着孕期的增长，宫颈分泌物和母血的HPV感染率均呈升高趋势，孕晚期明显高于孕早期、孕中期；而孕早期、孕中期的HPV感染率相近。其升高机制，认为与孕期细胞免疫功能受抑制、激素水平升高相关；据Sridama等[5]报道，孕晚期Th/Ts之比下降明显；孕晚期激素水平持续升高，而性激素及糖皮质激素能增强HPV基因非编码区的转录活性[6～7]。
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3.2 HPV感染的产道传播 本文结果显示产时新生儿咽部抽吸物中HPV阳性率达41.94%(13/31)，母婴传播率达59.09%(13/22)，与多数文献报道相一致[8]。分析新生儿咽部抽吸物HPV感染主要与宫颈感染相关，其阳性相对危险度是阴性的9.6倍，表明新生儿HPV可经感染产道直接接触而传播。不过，本文资料因剖宫产例数少，分娩方式的影响无显著性差别。但有1例未破膜的剖宫产儿，咽部抽吸物HPV检出阳性，其孕母宫颈分泌物HPV阴性，而母血、脐血和胎盘HPV阳性，提示存在宫内感染。因此，我们认为剖宫产不能完全阻断母婴间的传播[9]。
3.3 孕期HPV感染的母婴宫内垂直传播 通过PCR检测HPV-DNA证实，从脐血、胎盘、羊水均可检出HPV感染，且孕晚期感染率明显增高。其感染与母血及宫颈分泌物感染相关性分析(表1～3)表明，母血感染是脐血、胎盘感染的主要来源。本文还在孕中、晚期各有1例经腹取得羊水中检出HPV-DNA。这些结果揭示孕期HPV亚临床感染可经羊水、胎盘发生宫内垂直传播，证实新生儿HPV感染途径除经产道传播外，还存在宫内传播，其传播率主要与母血感染有关。■
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作者简介：彭萍，女，1967-10-17生，湖南省常德市人，汉族，1998年军医进修学院硕士毕业，广州军区总医院妇产科主治医师；发表论文3篇。电话：(020)86662205-53785
参考文献：
[1]郑鹏生，崔满生，李守柔.应用多重聚合酶链反应技术检测人类乳头瘤病毒DNA[J].中华妇产科杂志，1993，16(5)：266-268.
[2]Rando RF, Lindhein S, Hasty L et al. Increased frequency of detection of human papillomavirus deoxyribonucleic acid in exfoliated cervical cells during pregnancy [J]. Am J Obstet Gynecol, 1989,161(1):50-54.
, 百拇医药
[3]Czegledy J, Gergely L, Endrodi I. Detection of human papillomavirus deoxyribonucleic acid by filter in situ hybrdization during pregnancy [J]. J Med Virol, 1989,28:250-253.
[4]Kemp EA, Hakenwerth AM, Laurent SI et al. Human papillomavirus prevalence in pregnancy [J]. Obstet Gynecol, 1992,79(5):649-652.
[5]Sridama V, Pacini F, Yang S-L et al. Decreased levels of helper T cell: a possible cause of immunodeficiency in pregnancy [J].N Engl J Med, 1982,307:352-355.
, 百拇医药
[6]Mittal R, Tsutsumi K, Pater A et al. Human papillomavirus type 16 expression in cervical keratinocytes: role of progesterone and glucocorticoid hormones [J]. Obset Gynecol, 1993, 81:5-8.
[7]Michelin D, Gissmann L, Street D et al. Regulation of human papillomavirus type 18 in vivo: effects of estrogen and progesterone in transgenic mice [J].Gynecol Oncol, 1997,66(2):202-205.
[8]Tseng CJ, Liang CC, Soong YK et al. Perinatal transmission of human papillomavirus in infants: relationship between infection rate and model of deliver [J]. Obstet Gynecol, 1998,91(1):92-95.
[9]Kosko JR, Derkay CS. Role of cesearean section in prevention of recurrent respiratory papillomatosis-is there one [J]? Int J Pediatr Otorhinolaryngol, 1996,35(1):31-35.
收稿日期：1999-07-24
改回日期：1999-08-29, 百拇医药
单位：解放军总医院，北京 100853
关键词：人乳头状瘤病毒；妊娠；传播；PCR
军医进修学院学报000111摘 要：目的：探讨不同孕期人乳头状瘤病毒(HPV)亚临床感染及母婴垂直传播情况。方法：采用PCR技术检测30例孕早期、42例孕中期、32例孕晚期妇女的宫颈分泌物、母血、绒毛或胎盘、羊水、脐血及新生儿咽部抽吸物标本HPV-6、11、16、18型DNA。结果：早孕期：5例宫颈分泌物HPV阳性 (5/30)，7例母血HPV阳性 (7/30)，3例绒毛HPV阳性 (3/30)；中孕期：12例宫颈分泌物HPV阳性 (12/42)，11例母血HPV阳性 (11/42)，9例胎盘HPV阳性 (9/42)；另22例羊水标本中，仅1例HPV阳性 (1/22)；晚孕期：23例宫颈分泌物HPV阳性 (23/32)、18例母血HPV阳性 (18/32)，12例胎盘HPV阳性 (12/32)；另31例羊水标本中，4例HPV阳性 (4/31)，31例脐血标本中，12例HPV阳性 (12/31)。分析羊水、脐血与母血HPV感染的相对危险度高于宫颈分泌物，而产时新生儿咽部抽吸物与宫颈分泌物HPV感染的相对危险度高于母血。结论：在整个孕期中，孕晚期的HPV亚临床感染明显。孕期HPV亚临床感染的母婴传播不但可经产道直接接触传播，还可经羊水、胎盘发生宫内传播，其宫内传播率的高低主要与母血HPV感染相关。新生儿脐血的HPV感染主要与母血感染相关，而产时新生儿咽部的HPV感染主要与宫颈分泌物感染相关。
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中图号：R373.9 文献标识码：A
文章编号：1005-1139(2000)01-0032-35
Vertical transimission of human papillomavirus asymptomatic infection during different gestational periods
PENG Ping,(Department of Gynecology Obstetircs,General Hospital of Guangzhou Military District, Guangzhou 510010, China)
WENG Xia-yun,GU Zhi-yuan, LI Qi
Abstract：Objective：To investigate the vertical transmission of Human Papillomavirus (HPV) asymptomatic infection of different gestational periods. Methods：Polymerase chain reaction (PCR) assay was employed to detect HPV-DNA 6, 11, 16,and 18 in 30 pregnant women in the first trimester, 42 in the second and 32 in the third. Samples from cervicalvaginal exfoliated cells, maternal peripheral blood, chorionic villi or placenta, amniotic fluid,cord blood and nasopharyngeal secretion of the newborns were examined respectively.Results：In the first trimester,HPV-DNA was detected in the cervicalvaginal exfoliated cells of 5 cases (5/30), in maternal peripheral blood of 7 cases (7/30) and in chorionic villi of 3 cases (3/30). In the second trimester, HPV-DNA was detected in the cervicalvaginal exfoliated cells of 12 cases (12/42), in maternal peripheral blood of 11 cases (11/42), in placenta of 9 cases (9/42). Only one of 22 amniotic fluid samples was found infected (1/22). In the third trimester, HPV-DNA was detected in the cervicalvaginal exfoliated cells of 23 cases (23/32),in maternal peripheral blood of 18 cases (18/32), in placenta of 12 cases (12/32).4 samples of amniotic fluid out of the 31 cases (4/31) and 12 cord blood samples (12/31) were found infected. The risk of HPV infection in the amniotic fluid as well as the neonatal cord blood was related to the status of HPV infection in the maternal peripheral blood, being significantly higher than the relation to the maternal cervicalvaginal cells samples.The risk of HPV infection in the neonatal nasopharyngeal aspirates at birth was more highly related to the infective status of HPV in the maternal cervicalvaginal cells samples than to that of the maternal peripheral blood.Conclusion：Asymptomatic in-fective rate of HPV is highly siginificant in the third trimester.In pregnant women,HPV is transmitted not only through the birth canal at birth but also through the amniotic fluid and placenta during intrauterine life, and the HPV intrauterine transimission rate is related mainly to the state of HPV infection in the maternal peripheral blood.HPV infection in the neonatal cord blood is closely related to the status of HPV infection in the maternal peripheral blood,while HPV positive in the neonatal nasopharyngeal aspirates at birth correlates closely with the HPV infective state in the maternal cervicalvaginal cells.
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Key words：human papillomavirus (HPV); pregnancy; transimission; polymerase chain reaction (PCR)▲
近年来，女性生殖道人乳头状瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染率逐年上升，而其引起的尖锐湿疣已成为最常见的性传播疾病之一。孕期妇女HPV感染可通过母婴传播引起婴幼儿肛生殖部位的先天性尖锐湿疣、青少年喉乳头状瘤等相关性疾病，因而倍受关注，相继有学者对HPV的母婴传播作了初步探讨；但多限于孕晚期的研究，且取样单一，欠全面。我们选取平均年龄相近的孕早、中、晚期妇女共104例，采用PCR技术，对其宫颈分泌物、母血、绒毛或胎盘组织、羊水、脐血、新生儿咽部抽吸物标本进行HPV-6、11、16、18型DNA检测，力求对HPV的母婴垂直传播进行系统观察，现将结果报告如下。
1 对象和方法
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1.1 实验对象 1997年5月～1997年11月期间，按来院就诊日期随机选取孕早期30例(6～11周)、孕中期42例(12～27周)、孕晚期32例(28～41周)，排除有内外科疾病、外阴瘙痒及白带常规检查异常者。
1.2 临床标本的采集 包括：①冲洗宫颈外口(孕晚期者于破膜前)，留取冲洗液；产时吸取咽部分泌物；取羊水(孕中期志愿做雷凡诺尔引产者经腹行羊膜腔穿刺，孕晚期经阴道分娩者于人工破膜前穿刺前羊水囊、剖宫产者于术中取)，三种标本4℃下低速离心收取细胞沉淀，混悬于1.0mlPBS液中；②取孕早期绒毛，孕中、晚期胎盘，用生理盐水反复漂洗，直至确认无母血污染；③孕晚期娩出儿，确认无母血污染，抽取脐血，肝素抗凝；④抽取孕妇外周血，肝素抗凝。上述标本均置-20℃冰箱保存。
1.3 DNA提取
1.3.1 宫颈冲洗液、新生儿咽部抽吸物及羊水标本 用50～100μl裂解液(蛋白酶K终浓度为100μg/ml)混悬细胞沉淀，于55℃水浴消化1h；95℃处理10min，4℃下11000r/min离心5min，取上清液做为PCR扩增的模板。
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1.3.2 全血标本 先反复用TE液除去红细胞成分，余同1.3.1步骤。
1.3.3 绒毛及胎盘组织 组织块经1mlDNA提取液(10mmol/LTris-HCl，0.1mol/LEDTA,0.5%SDS，100μg/ml蛋白酶K)匀浆处理后，55℃水浴4h，苯酚∶氯仿∶异戊醇(25∶25∶1)抽提2次，加入1/10体积3molNaAc(pH5.2)和2倍体积的无水乙醇沉淀DNA。
1.4 PCR扩增 引物设计、扩增程序、扩增产物见参考文献[1]。每次扩增均同时设阳性和阴性对照，阳性对照为解放军总医院分子生物实验室提取的HPV-6、HPV-11、HPV-16、HPV-18型质粒DNA，阴性对照为蒸馏水。经2%琼脂糖凝胶电泳判定结果。
1.5 资料的统计学处理 应用SAS软件，计数资料比较采用χ2检验，如频数有特别小值时，两组采用Fisher精确检验，多组采用似然比χ2检验。单因数的相关分析采用队列研究分析，多因数的相关分析采用Logistic多元回归分析。以P<0.05为显著性界值。
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2 结 果
2.1 孕期妇女HPV亚临床感染 孕早、中、晚期妇女宫颈分泌物及母血的HPV感染率分别为16.67%(5/30)、23.33(7/30)；28.57%(12/42)、26.19%(11/42)；71.86%(23/32)、56.25%(18/32)；经总χ2检验，差异均有极显著意义(χ2宫颈＝22.844，χ2母血＝9.623，P均<0.01)；以孕晚期组的HPV感染率最高，其与孕早期、孕中期分别相比较，差异均有极显著意义(P<0.01)；而孕早、中期相比较，差异无显著性意义(P>0.05)。
2.2 胎盘的HPV感染率 孕早、中、晚期的感染率分别为10.00%(3/30)、21.43%(9/42)、37.50%(12/32)，经总χ2检验，其差异有显著意义(χ2＝6.704，P<0.05)；其中孕早、晚期相比较，差异显著(P<0.05)，而孕早、中期及孕中、晚期分别相比较，差异不显著(P>0.05)。分析胎盘的感染与宫颈分泌物及母血感染的相关性，见表1。
, 百拇医药
表1 不同孕期绒毛/胎盘HPV感染状况与孕母HPV感染状况的关系
绒毛/胎盘HPV-DNA
相对危险度*
(RR)
P
+
-
宫颈分泌物HPV-DNA
+
16
24
1.82
, 百拇医药
>0.05
-
8
56
母 血HPV-DNA
+
22
14
42.84(8.17～210.59)
<0.01
-
2
66
, 百拇医药
*括号内为95%的可信区间
2.3 羊水的HPV感染率 孕中、晚期感染率分别为4.54%(1/22)、12.90%(4/31)，经检验，差异无显著性意义(Fisher精确检验：P(双侧)＝0.389)；不过，孕中期羊水均系经腹行羊膜腔穿刺取得，有1例HPV阳性，而孕晚期羊水的HPV阳性病例中亦有1例系从未破膜的剖宫产术中取得。羊水HPV感染与宫颈分泌物及母血HPV感染的相关性统计学分析显示前者相对危险度低于后者，但两者未见显著性差异。研究观察到，在孕中晚期各有1例经腹取得的羊水中检出了HPV-DNA。
2.4 脐血的HPV感染率 为38.71%(12/31)；脐血HPV感染与孕母宫颈分泌物及母血HPV感染的相关性，见表2。
表2 孕晚期脐血HPV感染状况与孕母HPV感染状况的关系
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脐血HPV-DNA
相对危险度*
(RR)
P
+
-
宫颈分泌物HPV-DNA
+
10
12
1.85
>0.05
-
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2
7
母 血HPV-DNA
+
10
7
7.60(1.24～46.61)
<0.05
-
2
12
*括号内为95%的可信区间
2.5 产时新生儿咽部抽吸物的HPV感染率 为41.94%(13/31)，其HPV感染与孕母宫颈分泌物及母血HPV感染的相关性，见表3。
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表3 产时新生儿咽部抽吸物HPV感染状况与孕母HPV感染状况的关系
咽部HPV-DNA
相对危险度*
(RR)
P
+
-
宫颈分泌物HPV-DNA
+
12
10
9.60(1.02～90.35)
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<0.05
-
2
7
母 血HPV-DNA
+
10
7
4.12
>0.05
-
2
12
, 百拇医药 *括号内为95%的可信区间
2.6 宫颈分泌物HPV阳性的孕妇经阴道分娩的传播率为55.56%(10/18)，经剖宫产的传播率为50.00%(2/4)，经检验其差异无显著性意义(Fisher精确检验：P(双侧)＝1.000)；但其中1例系未破膜的剖宫产儿，其咽部抽吸物的HPV-DNA阳性，其母血、脐血及胎盘均为HPV-DNA阳性，而孕母宫颈分泌物为HPV-DNA阴性。
3 讨 论
3.1 孕期HPV亚临床感染 妊娠妇女HPV亚临床感染率多数研究表明以孕晚期明显[2～3]，少数研究提示不同孕期妊娠妇女并无差别，认为感染率高低与妊娠妇女年龄相关，<30岁组感染率高于>30岁组[4]。
本文选取年龄(26.42±5.38)相近(P>0.05)的孕早、中、晚期妇女，研究结果表明：随着孕期的增长，宫颈分泌物和母血的HPV感染率均呈升高趋势，孕晚期明显高于孕早期、孕中期；而孕早期、孕中期的HPV感染率相近。其升高机制，认为与孕期细胞免疫功能受抑制、激素水平升高相关；据Sridama等[5]报道，孕晚期Th/Ts之比下降明显；孕晚期激素水平持续升高，而性激素及糖皮质激素能增强HPV基因非编码区的转录活性[6～7]。
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3.2 HPV感染的产道传播 本文结果显示产时新生儿咽部抽吸物中HPV阳性率达41.94%(13/31)，母婴传播率达59.09%(13/22)，与多数文献报道相一致[8]。分析新生儿咽部抽吸物HPV感染主要与宫颈感染相关，其阳性相对危险度是阴性的9.6倍，表明新生儿HPV可经感染产道直接接触而传播。不过，本文资料因剖宫产例数少，分娩方式的影响无显著性差别。但有1例未破膜的剖宫产儿，咽部抽吸物HPV检出阳性，其孕母宫颈分泌物HPV阴性，而母血、脐血和胎盘HPV阳性，提示存在宫内感染。因此，我们认为剖宫产不能完全阻断母婴间的传播[9]。
3.3 孕期HPV感染的母婴宫内垂直传播 通过PCR检测HPV-DNA证实，从脐血、胎盘、羊水均可检出HPV感染，且孕晚期感染率明显增高。其感染与母血及宫颈分泌物感染相关性分析(表1～3)表明，母血感染是脐血、胎盘感染的主要来源。本文还在孕中、晚期各有1例经腹取得羊水中检出HPV-DNA。这些结果揭示孕期HPV亚临床感染可经羊水、胎盘发生宫内垂直传播，证实新生儿HPV感染途径除经产道传播外，还存在宫内传播，其传播率主要与母血感染有关。■
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作者简介：彭萍，女，1967-10-17生，湖南省常德市人，汉族，1998年军医进修学院硕士毕业，广州军区总医院妇产科主治医师；发表论文3篇。电话：(020)86662205-53785
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收稿日期：1999-07-24
改回日期：1999-08-29, 百拇医药