促凋亡基因bax在胆管癌组 织中的表达及临床意义
作者：姜丰星 李哲夫 胡义利 王一 李洪 王训
单位：姜丰星(青岛市市立医院肝 胆外科 青岛 266011)；李哲夫(青岛市市立医院肝 胆外科 青岛 266011)；胡义利(青岛市市立医院肝 胆外科 青岛 266011)；王一(青岛市市立医院肝 胆外科 青岛 266011)；李洪(青岛市市立医院肝 胆外科 青岛 266011)；王训(青岛市市立医院肝 胆外科 青岛 266011)
关键词：胆管肿瘤；癌基因蛋白质类；基因表达
齐鲁医学杂志000104 [摘要] ①目的 探讨促凋亡基因bax在胆管癌 组织中的表达。②方法 应用抗bax多克隆抗体分别对20例胆管癌 和7例先天性胆总管囊肿组织的石蜡切片进行免疫组化染色。③结果 20例胆管癌组织有11例bax蛋白表达阳性(55.00%),而7例先天性胆总管囊肿仅1例表达阳 性(14.29%),两组间差异有显著性(χ2=6.73,P<0.01)。随肿瘤分化程度的增高,阳性 表达增强,但差异无显著性(χ2=5.09,P>0.05)。④结论 ba x蛋白参与了胆管癌的发生及发展过程。
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[中图分类号] R735.8 [文献标识码] A [文章编号] 1008-0341(2000)01-0009-02
EXPRESSION OF THE BAX ONCOPROTEIN IN CHOLANGIOCARCINOMA AND ITS CLINICAL SIGNIFICANCE
JIANG Fengxing, LI Z hefu, HU Yili, et al
Department of Hepatobiliary Surgery, Qingdao Munic ipal Hospital, Qingdao 266011
[ABSTRACT] Objective To study the role of bax (an apopto sis accelerating oncogene) in the development of cholangiocarcinoma. Methods We investigated bax expression by means of immunohistoc hemical technigue in 20 cases of cholangiocarcinoma and 7 cases of congenital choledochal cyst respectively. Results Bax oncogene expression was positive in 55.00% of cholan giocarcinoma, but only in 14.29% (1 out of 7) of congenital choledochal cyst, there was a significant difference between the two kinds of tissue(χ2=6. 73, P<0.01). Intensity and positivity of bax oncogene expression also increase d with increasing differentiation of cholangiocarcinoma. ConclusionThese results suggest that increased expression of bax oncogene in cholangiocarcinoma plays an important role in the development of cholangiocarcinoma.
, 百拇医药
[KEY WORDS] bile duct neoplasms; oncogene proteins; gene expressi on
近年来，胆管癌的发病率有逐渐升高的趋势[1],其发病机制尚不清楚。细胞凋亡及 凋亡相关因素在恶性肿瘤发生及进展中作用的研究越来越受到重视。bax是一种凋亡基因促 进基因,本文探讨其在胆管癌发生和发展中所起的作用。
1 材料和方法
1.1 对象及分组
实验组标本来自我院肝胆外科1994年2月～1998年3月手术的20例胆管癌组织,男14例,女6例; 年龄46～69岁,平均59岁。对照组标本来自1996年2月～1998年3月间手术的先天性胆总管囊 肿病人，共7例,男3例,女4例;年龄16～41岁,平均32岁。所有标本均经病理组织学证实。
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1.2 方法
标本用质量浓度为40g/L的甲醛固定,石蜡包埋,切片厚4μm.免疫组化染色采用SP法，所 有标本均在同一条件下进行染色。一抗为兔抗人bax多克隆抗体(NO20由Santa Cruz公司生产 ),稀释度1∶50,SP试剂盒为福州迈新公司产品,各步间均用PBS液洗涤,用PBS替代一抗作为阴 性对照。
1.3 结果判定及统计学方法
细胞浆内出现明确的棕黄色颗粒为染色阳性细胞,切片内阳性细胞率<20%为阴性显色,>20%为 阳性显色。阳性显色按细胞着色的强度和范围分为(+)和()两个级别。组间比较采用 χ2检验。
2 结 果
20例胆管癌组织中,促凋亡基因bax在11例胆管癌组织中得以表达,占55.00%,主要表现为免疫 标记的bax基因定位于细胞胞浆内和核膜上,呈棕黄色、弥漫性颗粒状,细胞核不着色。7例先 天性胆总管囊肿组织中,仅1例弱阳性,其余均为阴性,两组间差异有显著性(χ2=6.73,P <0.01)。随肿瘤分化程度增高,bax蛋白阳性表达增强,但各组间差异无显著性(χ2=5. 09,P>0.05)。见表1,2.
, 百拇医药
3 讨 论
近年来的实验研究认为,在肿瘤形成过程中,不仅由于细胞的增殖增加,更重要的是 细胞的死亡减少,即细胞增殖与死亡平衡失调导致肿瘤形成。细胞死亡有两种类型,即细胞坏死和细 胞凋亡,后者指单个细胞程序性“自杀”现象，是机体维持自身细胞稳定的机制。凋亡的发 生机制非常复杂，受多种促进和抑制因素的影响。bax是1993年克隆成功的基因，是编码相 对分子质量为21 000的蛋白产物，bax蛋白的氨基酸序列有21%与bcl-2同源，其过量表达 可抑制bcl-2功能而促进细胞凋亡[2]。本组胆管癌组织中，促凋亡基因bax有明显 表达，随肿瘤分化程度增高，bax表达呈增强趋势，这与临床所得结论相符，可以推测bax蛋 白高度表达的胆管癌，其肿瘤生物学特性良好，预后好。bax蛋白表达与胆管癌的分化程度 间无明显差异，可能与该组病例较少有关。
表1 两组bax基因的表达结果及比较 组别
, 百拇医药
n
阳性例数(%)
表达强度
-
+
对照组
7
1(14.29)
6
1
0
实验组
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20
11(55.00)*
9
4
7
与对照组比较,*χ2=6.73,P<0.01 表2 bax表达与胆管癌分化程度的关系 病理分化程度
n
阳性例数( %)
表达强度
-
+
, http://www.100md.com
未分化癌
4
1(25.00)
3
1
0
低分化腺癌
5
2(40.00)
3
1
1
高分化腺癌
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11
8(72.73)
3
2
6
本文结果显示,先天性胆总管囊肿病人bax蛋白表达极低，这与该病的生物学特性相悖 ，可能与该组病人年龄偏轻有关，也可能与本组病例较少有关。目前尚未见bax蛋白在该病 中表达的文献报道，其确切的结论尚待进一步研究。由于很难找到正常胆管组织标本，因 此无法进行bax蛋白在正常胆管组织中表达的研究，从而不能比较胆管癌和正常胆管组织ba x蛋白表达差异。有文献报道，bax蛋白在正常膀胱黏膜组织中表达阳性率高，为88.88%(8/9 ) [3].若正常胆管组织中bax蛋白表达存在相似的结果，便进一步验证本组实验得出 的结论。
作者简介 姜丰星，男，1965 年1月生，主治医师
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参考文献
1，韩本立.加强胆道恶性肿瘤的基础研究提高临床诊治水平[J].中华实验 外科杂志,1997,14:65
2，Oltvai ZN, Milliman CL, Korsmeyer SJ. Bcl-2 heterodimerized in vivo with a conserved hemology, bax, that accelerates programmed cell death[J]. Cell,1993,74:609
3，杨宝龙,顾方六,王行环.等.凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白在膀胱癌组织中的表 达及临床意义[J].中华外科杂志,1997,35:602
(1999-03-10收稿 1999-11-16修回), http://www.100md.com
单位：姜丰星(青岛市市立医院肝 胆外科 青岛 266011)；李哲夫(青岛市市立医院肝 胆外科 青岛 266011)；胡义利(青岛市市立医院肝 胆外科 青岛 266011)；王一(青岛市市立医院肝 胆外科 青岛 266011)；李洪(青岛市市立医院肝 胆外科 青岛 266011)；王训(青岛市市立医院肝 胆外科 青岛 266011)
关键词：胆管肿瘤；癌基因蛋白质类；基因表达
齐鲁医学杂志000104 [摘要] ①目的 探讨促凋亡基因bax在胆管癌 组织中的表达。②方法 应用抗bax多克隆抗体分别对20例胆管癌 和7例先天性胆总管囊肿组织的石蜡切片进行免疫组化染色。③结果 20例胆管癌组织有11例bax蛋白表达阳性(55.00%),而7例先天性胆总管囊肿仅1例表达阳 性(14.29%),两组间差异有显著性(χ2=6.73,P<0.01)。随肿瘤分化程度的增高,阳性 表达增强,但差异无显著性(χ2=5.09,P>0.05)。④结论 ba x蛋白参与了胆管癌的发生及发展过程。
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[中图分类号] R735.8 [文献标识码] A [文章编号] 1008-0341(2000)01-0009-02
EXPRESSION OF THE BAX ONCOPROTEIN IN CHOLANGIOCARCINOMA AND ITS CLINICAL SIGNIFICANCE
JIANG Fengxing, LI Z hefu, HU Yili, et al
Department of Hepatobiliary Surgery, Qingdao Munic ipal Hospital, Qingdao 266011
[ABSTRACT] Objective To study the role of bax (an apopto sis accelerating oncogene) in the development of cholangiocarcinoma. Methods We investigated bax expression by means of immunohistoc hemical technigue in 20 cases of cholangiocarcinoma and 7 cases of congenital choledochal cyst respectively. Results Bax oncogene expression was positive in 55.00% of cholan giocarcinoma, but only in 14.29% (1 out of 7) of congenital choledochal cyst, there was a significant difference between the two kinds of tissue(χ2=6. 73, P<0.01). Intensity and positivity of bax oncogene expression also increase d with increasing differentiation of cholangiocarcinoma. ConclusionThese results suggest that increased expression of bax oncogene in cholangiocarcinoma plays an important role in the development of cholangiocarcinoma.
, 百拇医药
[KEY WORDS] bile duct neoplasms; oncogene proteins; gene expressi on
近年来，胆管癌的发病率有逐渐升高的趋势[1],其发病机制尚不清楚。细胞凋亡及 凋亡相关因素在恶性肿瘤发生及进展中作用的研究越来越受到重视。bax是一种凋亡基因促 进基因,本文探讨其在胆管癌发生和发展中所起的作用。
1 材料和方法
1.1 对象及分组
实验组标本来自我院肝胆外科1994年2月～1998年3月手术的20例胆管癌组织,男14例,女6例; 年龄46～69岁,平均59岁。对照组标本来自1996年2月～1998年3月间手术的先天性胆总管囊 肿病人，共7例,男3例,女4例;年龄16～41岁,平均32岁。所有标本均经病理组织学证实。
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1.2 方法
标本用质量浓度为40g/L的甲醛固定,石蜡包埋,切片厚4μm.免疫组化染色采用SP法，所 有标本均在同一条件下进行染色。一抗为兔抗人bax多克隆抗体(NO20由Santa Cruz公司生产 ),稀释度1∶50,SP试剂盒为福州迈新公司产品,各步间均用PBS液洗涤,用PBS替代一抗作为阴 性对照。
1.3 结果判定及统计学方法
细胞浆内出现明确的棕黄色颗粒为染色阳性细胞,切片内阳性细胞率<20%为阴性显色,>20%为 阳性显色。阳性显色按细胞着色的强度和范围分为(+)和()两个级别。组间比较采用 χ2检验。
2 结 果
20例胆管癌组织中,促凋亡基因bax在11例胆管癌组织中得以表达,占55.00%,主要表现为免疫 标记的bax基因定位于细胞胞浆内和核膜上,呈棕黄色、弥漫性颗粒状,细胞核不着色。7例先 天性胆总管囊肿组织中,仅1例弱阳性,其余均为阴性,两组间差异有显著性(χ2=6.73,P <0.01)。随肿瘤分化程度增高,bax蛋白阳性表达增强,但各组间差异无显著性(χ2=5. 09,P>0.05)。见表1,2.
, 百拇医药
3 讨 论
近年来的实验研究认为,在肿瘤形成过程中,不仅由于细胞的增殖增加,更重要的是 细胞的死亡减少,即细胞增殖与死亡平衡失调导致肿瘤形成。细胞死亡有两种类型,即细胞坏死和细 胞凋亡,后者指单个细胞程序性“自杀”现象，是机体维持自身细胞稳定的机制。凋亡的发 生机制非常复杂，受多种促进和抑制因素的影响。bax是1993年克隆成功的基因，是编码相 对分子质量为21 000的蛋白产物，bax蛋白的氨基酸序列有21%与bcl-2同源，其过量表达 可抑制bcl-2功能而促进细胞凋亡[2]。本组胆管癌组织中，促凋亡基因bax有明显 表达，随肿瘤分化程度增高，bax表达呈增强趋势，这与临床所得结论相符，可以推测bax蛋 白高度表达的胆管癌，其肿瘤生物学特性良好，预后好。bax蛋白表达与胆管癌的分化程度 间无明显差异，可能与该组病例较少有关。
表1 两组bax基因的表达结果及比较 组别
, 百拇医药
n
阳性例数(%)
表达强度
-
+
对照组
7
1(14.29)
6
1
0
实验组
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20
11(55.00)*
9
4
7
与对照组比较,*χ2=6.73,P<0.01 表2 bax表达与胆管癌分化程度的关系 病理分化程度
n
阳性例数( %)
表达强度
-
+
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未分化癌
4
1(25.00)
3
1
0
低分化腺癌
5
2(40.00)
3
1
1
高分化腺癌
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11
8(72.73)
3
2
6
本文结果显示,先天性胆总管囊肿病人bax蛋白表达极低，这与该病的生物学特性相悖 ，可能与该组病人年龄偏轻有关，也可能与本组病例较少有关。目前尚未见bax蛋白在该病 中表达的文献报道，其确切的结论尚待进一步研究。由于很难找到正常胆管组织标本，因 此无法进行bax蛋白在正常胆管组织中表达的研究，从而不能比较胆管癌和正常胆管组织ba x蛋白表达差异。有文献报道，bax蛋白在正常膀胱黏膜组织中表达阳性率高，为88.88%(8/9 ) [3].若正常胆管组织中bax蛋白表达存在相似的结果，便进一步验证本组实验得出 的结论。
作者简介 姜丰星，男，1965 年1月生，主治医师
, http://www.100md.com
参考文献
1，韩本立.加强胆道恶性肿瘤的基础研究提高临床诊治水平[J].中华实验 外科杂志,1997,14:65
2，Oltvai ZN, Milliman CL, Korsmeyer SJ. Bcl-2 heterodimerized in vivo with a conserved hemology, bax, that accelerates programmed cell death[J]. Cell,1993,74:609
3，杨宝龙,顾方六,王行环.等.凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白在膀胱癌组织中的表 达及临床意义[J].中华外科杂志,1997,35:602
(1999-03-10收稿 1999-11-16修回), http://www.100md.com