舒胸胶囊质量标准的研究
作者：胡棠洪 吴朝阳
单位：胡棠洪(江西省药品检验所 江西 330006)；吴朝阳(江西省余江制药厂 江西 330046)
关键词：舒胸胶囊；人参皂甙Rg1；薄层扫描法
北京中医药大学学报000115 分类号：R284.1▲
舒胸胶囊是根据《中华人民共和国药典》(1995年版)舒胸片改变剂型研制而成的胶囊剂。处方由三七、红花、川芎组成，与原剂型比较，其质量标准除相应剂型的检查项外，增加了三七、红花的薄层色谱鉴别及三七的含量测定，制剂质量标准有了明显提高。
1 制备工艺
红花、川芎加水提取，滤液浓缩、干燥成干膏碾成红粉，加入三七细粉，混匀，制颗粒，装入胶囊即得。
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2 定性鉴别
原片剂收载了川芎的色谱鉴别及皂甙类成分试管颜色反应。而胶囊则增加了三七、红花的薄层色谱鉴别，处方中3味药均有专属性较强的薄层色谱定性鉴别。
(1)取本品10粒，倾出内容物，加乙醚20 mL,加热回流，过滤，滤液挥干，残渣加乙醚2 mL使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.3 g，加乙醚10 mL，浸泡，过滤，滤液挥干，残渣加乙醚2 mL使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典1995版一部附录ⅥB)试验， 吸取上述两种溶液2～5 μL， 分别点于同一硅胶G薄层板上， 以石油醚(30～60 ℃)—氯仿(1∶9)为展开剂，展开，取出，晾干，紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(2)取本品10粒，倾出内容物，加石油醚(60～90 ℃)20 mL浸渍，振摇，滤过，残留物挥去石油醚，加丙酮30 mL超声提取，滤液浓缩至 1 mL，作为供试品。另取红花对照药材1 g，加水 60 mL，煮沸，滤过，滤液加石油醚(60～90 ℃)30 mL提取，水液置水浴蒸干，残渣加丙酮适置溶解，溶液浓缩至1 mL，作为对照药材溶液，照薄层色谱法(中国药典1995版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各10 μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，以氯仿—醋酸乙酯—冰醋酸(5∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
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(3)取三七对照药材0.5 g，加水饱和的正丁醇20 mL，超声波处理，滤过，滤液用正丁醇饱和的水洗涤2次，弃去水层，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇 1 mL溶解，作为供试品溶液。再取人参皂甙 Rb1、 Rg1及三七皂甙R1对照品，加甲醇制成 1 mL各含 1 mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典1995版一部附录ⅥB)试验，吸取 [含量测定]项下供试品溶液5～10 μL，对照药材及对照品溶液2～4 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿—醋酸乙酯—甲醇—水(15∶40∶22∶10)5～10 ℃放置12 h的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。喷1%硫酸乙醇溶液， 110 ℃烘 5～10 min，分别置日光及紫外光灯 (365 nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点及荧光斑点。
3 含量测定
片剂未收载含量测定，胶囊剂增加了君药三七含量测定项目。根据文献报道，三七主要含皂甙类成分，并以人参皂甙Rg1含量最高，故选用人参皂甙Rg1为对照品测定三七的含量。
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3.1 仪器与试剂
仪器：CS-910薄层扫描仪(日本岛津)， 薄层自动喷雾显色仪(日本岛津)，PBQ-/薄层自动铺板仪(重庆)，微量毛细管(美国Drum-mond公司)。对照品：人参皂甙Rg1(中国药品生物制品检定所)。薄层板：取硅胶G(青岛海洋化工厂)适量，制板备用。展开剂：氯仿—醋酸乙酯—甲醇—水(15∶40∶20∶10)。显色剂：10%硫酸乙醇溶液。
3.2 测定方法
取本品20粒，倾出内容物，碾细，精密称取0.5 g，置索氏提取器中，加乙醚适量，水浴上回流2h，弃去乙醚液，取出滤纸筒，晾干，待乙醚挥尽，将滤纸筒再置索氏提取器中，加甲醇适量，放置过夜。置水浴上回流提取至甲醇无色止，回收甲醇至干，残渣加水30 mL使溶解，定量转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇萃取5次(25、20、20、10、10 mL)，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次25 mL，弃去水层，减压回收正丁醇，残渣加甲醇使溶解，定量转移至25 mL量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另精密称取人参皂式Rg1对照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录ⅣB)试验，吸取对照品溶液2 μL和3 μL，供试品溶液5 μL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿—醋酸乙酯—甲醇—水(15∶40∶22∶10)5～10 ℃放置12 h的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃烘数分钟，至呈现清晰的斑点，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定。照薄层扫描法(中国药典1995年版一部附录Ⅳ B)进行扫描，波长λS=525 nm,λR=700 nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，外标二点法计算，即得。见图1
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图1 薄层扫描色谱图
1 人参皂甙Rg1对照品 2 供试品 3 阴性
本品每粒含人参皂甙Rg1(C42H72O14)不得低于2.5 mg。
3.3 方法学研究3.3.1 测定波长的选择：用CS-910薄层扫描仪分别对人参皂甙Rg1及供试品色谱相应位置上的斑点进行光谱扫描，结果供试品与对照品光谱相同，并在525 nm处有最大吸收，在660～700 nm波长处几乎无吸收。阴性供试品色谱中，在人参皂甙Rg1位置处无斑点，在525nm波长处亦无吸收，故确定λS=525 nm，λR=700 nm，SX=3。
3.3.2 线性关系考察：精密称取人参皂甙 Rg1对照品，加甲醇制成每 1 mL含0.5 mg的溶液，分别吸取1、3、5、7、9 μL点于同一硅胶 G板上，展开、显色、扫描测定。回归方程Y=301.1X+81.35 , r=0.998。线性范围0.499～4.491 μg。
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3.3.3 精密度试验：精密吸取同一对照品溶液6个点于同一薄层板上，各点均为2 μL(照含量测定项下展开，晾干，显色，扫描测得斑点面积积分值，RSD=2.56%)。再精密吸取同一对照品溶液，分别点于5块薄层板上，各点均为2 μL，照含量测定项下展开，晾干，显色，扫描测得斑点面积积分值，前者RSD=2.56%，后者RSD=2.42%。本品扫描测定精密度较好。
3.3.4 重现性试验：取同一批号样品照含量测定方法测定含量，平行试验，RSD=2.03%。
3.3.5 稳定性试验：取对照溶液2、5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，照含量测定项下展开，晾干，显色，扫描，每隔30 min扫描1次，药品在2 h内基本稳定。结果RSD均在1.6%以下。
3.3.6 回收率试验：取已知含量的样品细粉0.5 g，精密称定，加入一定量的人参皂甙Rg1对照品溶液，按含量测定法测定，平均回收率为96.12%，RSD=1.19%(n=8)。
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3.3.7 含量测定：照本品含量测定方法进行测定，根据10批样品检测结果见表1。
表1 10批样品含量测定结果 (mg/粒；n=3) 样品批号
人参皂甙Rg1
含量RSD/%
950521
2.90
3.01
950524
2.84
2.48
950527
, 百拇医药
2.62
1.52
950610
2.76
3.21
950616
2.88
2.95
950620
2.96
1.34
960107
3.03
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1.45
960108
3.12
2.66
960109
2.95
2.37
960110
3.10
2.86
根据样品的检测结果，将本品的含量限度定为每粒含人参皂甙Rg1(C42H72O14)，不得低于2.5 mg。4 结论
以上实验证明，舒胸胶囊质量标准对处方内各药均制定了监测项目，特别是对君药三七建立含量测定方法，能有效地监控本品内在质量，有利于发挥处方应有的疗效，保证人民用药安全有效。■
作者简介：胡棠洪，女，46岁，副教授
(收稿日期：1999-09-01), 百拇医药
单位：胡棠洪(江西省药品检验所 江西 330006)；吴朝阳(江西省余江制药厂 江西 330046)
关键词：舒胸胶囊；人参皂甙Rg1；薄层扫描法
北京中医药大学学报000115 分类号：R284.1▲
舒胸胶囊是根据《中华人民共和国药典》(1995年版)舒胸片改变剂型研制而成的胶囊剂。处方由三七、红花、川芎组成，与原剂型比较，其质量标准除相应剂型的检查项外，增加了三七、红花的薄层色谱鉴别及三七的含量测定，制剂质量标准有了明显提高。
1 制备工艺
红花、川芎加水提取，滤液浓缩、干燥成干膏碾成红粉，加入三七细粉，混匀，制颗粒，装入胶囊即得。
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2 定性鉴别
原片剂收载了川芎的色谱鉴别及皂甙类成分试管颜色反应。而胶囊则增加了三七、红花的薄层色谱鉴别，处方中3味药均有专属性较强的薄层色谱定性鉴别。
(1)取本品10粒，倾出内容物，加乙醚20 mL,加热回流，过滤，滤液挥干，残渣加乙醚2 mL使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.3 g，加乙醚10 mL，浸泡，过滤，滤液挥干，残渣加乙醚2 mL使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典1995版一部附录ⅥB)试验， 吸取上述两种溶液2～5 μL， 分别点于同一硅胶G薄层板上， 以石油醚(30～60 ℃)—氯仿(1∶9)为展开剂，展开，取出，晾干，紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(2)取本品10粒，倾出内容物，加石油醚(60～90 ℃)20 mL浸渍，振摇，滤过，残留物挥去石油醚，加丙酮30 mL超声提取，滤液浓缩至 1 mL，作为供试品。另取红花对照药材1 g，加水 60 mL，煮沸，滤过，滤液加石油醚(60～90 ℃)30 mL提取，水液置水浴蒸干，残渣加丙酮适置溶解，溶液浓缩至1 mL，作为对照药材溶液，照薄层色谱法(中国药典1995版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各10 μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，以氯仿—醋酸乙酯—冰醋酸(5∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
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(3)取三七对照药材0.5 g，加水饱和的正丁醇20 mL，超声波处理，滤过，滤液用正丁醇饱和的水洗涤2次，弃去水层，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇 1 mL溶解，作为供试品溶液。再取人参皂甙 Rb1、 Rg1及三七皂甙R1对照品，加甲醇制成 1 mL各含 1 mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典1995版一部附录ⅥB)试验，吸取 [含量测定]项下供试品溶液5～10 μL，对照药材及对照品溶液2～4 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿—醋酸乙酯—甲醇—水(15∶40∶22∶10)5～10 ℃放置12 h的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。喷1%硫酸乙醇溶液， 110 ℃烘 5～10 min，分别置日光及紫外光灯 (365 nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点及荧光斑点。
3 含量测定
片剂未收载含量测定，胶囊剂增加了君药三七含量测定项目。根据文献报道，三七主要含皂甙类成分，并以人参皂甙Rg1含量最高，故选用人参皂甙Rg1为对照品测定三七的含量。
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3.1 仪器与试剂
仪器：CS-910薄层扫描仪(日本岛津)， 薄层自动喷雾显色仪(日本岛津)，PBQ-/薄层自动铺板仪(重庆)，微量毛细管(美国Drum-mond公司)。对照品：人参皂甙Rg1(中国药品生物制品检定所)。薄层板：取硅胶G(青岛海洋化工厂)适量，制板备用。展开剂：氯仿—醋酸乙酯—甲醇—水(15∶40∶20∶10)。显色剂：10%硫酸乙醇溶液。
3.2 测定方法
取本品20粒，倾出内容物，碾细，精密称取0.5 g，置索氏提取器中，加乙醚适量，水浴上回流2h，弃去乙醚液，取出滤纸筒，晾干，待乙醚挥尽，将滤纸筒再置索氏提取器中，加甲醇适量，放置过夜。置水浴上回流提取至甲醇无色止，回收甲醇至干，残渣加水30 mL使溶解，定量转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇萃取5次(25、20、20、10、10 mL)，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次25 mL，弃去水层，减压回收正丁醇，残渣加甲醇使溶解，定量转移至25 mL量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另精密称取人参皂式Rg1对照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录ⅣB)试验，吸取对照品溶液2 μL和3 μL，供试品溶液5 μL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿—醋酸乙酯—甲醇—水(15∶40∶22∶10)5～10 ℃放置12 h的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃烘数分钟，至呈现清晰的斑点，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定。照薄层扫描法(中国药典1995年版一部附录Ⅳ B)进行扫描，波长λS=525 nm,λR=700 nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，外标二点法计算，即得。见图1
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图1 薄层扫描色谱图
1 人参皂甙Rg1对照品 2 供试品 3 阴性
本品每粒含人参皂甙Rg1(C42H72O14)不得低于2.5 mg。
3.3 方法学研究3.3.1 测定波长的选择：用CS-910薄层扫描仪分别对人参皂甙Rg1及供试品色谱相应位置上的斑点进行光谱扫描，结果供试品与对照品光谱相同，并在525 nm处有最大吸收，在660～700 nm波长处几乎无吸收。阴性供试品色谱中，在人参皂甙Rg1位置处无斑点，在525nm波长处亦无吸收，故确定λS=525 nm，λR=700 nm，SX=3。
3.3.2 线性关系考察：精密称取人参皂甙 Rg1对照品，加甲醇制成每 1 mL含0.5 mg的溶液，分别吸取1、3、5、7、9 μL点于同一硅胶 G板上，展开、显色、扫描测定。回归方程Y=301.1X+81.35 , r=0.998。线性范围0.499～4.491 μg。
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3.3.3 精密度试验：精密吸取同一对照品溶液6个点于同一薄层板上，各点均为2 μL(照含量测定项下展开，晾干，显色，扫描测得斑点面积积分值，RSD=2.56%)。再精密吸取同一对照品溶液，分别点于5块薄层板上，各点均为2 μL，照含量测定项下展开，晾干，显色，扫描测得斑点面积积分值，前者RSD=2.56%，后者RSD=2.42%。本品扫描测定精密度较好。
3.3.4 重现性试验：取同一批号样品照含量测定方法测定含量，平行试验，RSD=2.03%。
3.3.5 稳定性试验：取对照溶液2、5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，照含量测定项下展开，晾干，显色，扫描，每隔30 min扫描1次，药品在2 h内基本稳定。结果RSD均在1.6%以下。
3.3.6 回收率试验：取已知含量的样品细粉0.5 g，精密称定，加入一定量的人参皂甙Rg1对照品溶液，按含量测定法测定，平均回收率为96.12%，RSD=1.19%(n=8)。
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3.3.7 含量测定：照本品含量测定方法进行测定，根据10批样品检测结果见表1。
表1 10批样品含量测定结果 (mg/粒；n=3) 样品批号
人参皂甙Rg1
含量RSD/%
950521
2.90
3.01
950524
2.84
2.48
950527
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2.62
1.52
950610
2.76
3.21
950616
2.88
2.95
950620
2.96
1.34
960107
3.03
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1.45
960108
3.12
2.66
960109
2.95
2.37
960110
3.10
2.86
根据样品的检测结果，将本品的含量限度定为每粒含人参皂甙Rg1(C42H72O14)，不得低于2.5 mg。4 结论
以上实验证明，舒胸胶囊质量标准对处方内各药均制定了监测项目，特别是对君药三七建立含量测定方法，能有效地监控本品内在质量，有利于发挥处方应有的疗效，保证人民用药安全有效。■
作者简介：胡棠洪，女，46岁，副教授
(收稿日期：1999-09-01), 百拇医药