原发性胆囊癌nm 23表达与细胞增殖活性的关系
作者：许元鸿 郭仁宣 王福臣
单位：许元鸿(中国医科大学第一临床学院普通外科，沈阳 110001)；郭仁宣(中国医科大学第一临床学院普通外科，沈阳 110001)；王福臣(东北电业中心医院)
关键词：胆囊肿瘤；基因表达；细胞增殖活性
中国医科大学学报000219 摘要 目的：探讨nm 23表达与胆囊肿瘤良恶性、分化程度、浸润能力、淋巴结转移、预后及细胞增殖活性的关系。方法：56例原发性胆囊癌石蜡包埋标本，免疫组化S-P法检测。结果：nm 23在原发性胆囊癌表达的阳性率，无论是高、中、低分化均显著高于胆囊良性病变(P<0.01)；与分化程度、浸润程度、淋巴结转移亦有明显关系。生存期分析表明：nm 23表达阳性者生存期长(P<0.05)。nm 23表达阴性组PCNA明显高于阳性组(P<0.01)。结论：nm 23是反映原发性胆囊癌生物学特性良好的标志物，与PCNA互补可做为判断胆囊良恶性、恶性程度、淋巴结转移及预后的客观指标。
, http://www.100md.com
The Relationship Between the Expression of nm 23 and Cell Proliferative Activity in
Primary Gallbladder Carcinoma
Xu Yuanhong, Guo Renxuan, Wang Fuchen
(Department of General Surgery, The First Clinical College, China Medical University, Shenyang, 110001)
ABSTRACT Objective: To determine the relationship of nm 23 expression with characteristics of benign or malignant degree, tumor-differentiation, invasion, lymph node metastasis, prognosis, and cell proliferative activity of primary gallbladder carcinoma (PGC). Methods: Specimen from 56 cases of PGC were studied, nm 23 and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) was detected by the immunohistochemical staining S-P method. Results: The expression of nm 23 was significant higher in malignant lesions than in benign diseases. The expression of nm 23 was closely correlated with characteristics of tumor-differentiation, invasion and lymph node metastasis (P<0.05 or P<0.01). The survival time was significantly longer in patients with nm 23 positive expression than in patients with nm 23 negative expression (P<0.05). The expression of PCNA in nm 23 negative cases was obviously higher than the in nm 23 positive cases (P<0.01). Conclusion: nm 23 is a valuable indicator for the biological characteristics of PGC, nm 23 expression and cell proliferative activity can coordinate in distinguishing malignant from benign tumor, judging the malignant degree, and predicting the prognosis of the patients with PGC.
, 百拇医药
KEY WORDS gallbladder neoplasma; gene expression; cell proliferative activity
应用免疫组化S-P法检测原发性胆囊癌患者中nm 23基因的表达，并结合临床病理生物学行为，预后指标及增殖细胞核抗原(PCNA)进行综合分析，探讨其在临床病理生物学行为及预后价值。
1 资料与方法
1.1 临床资料 我院1988～1996年手术根治切除56例原发性胆囊癌标本，诊断明确，随访完整。男性19例，女性37例，年龄(55.4±8.9)岁。26例胆囊良性病变(22例为胆囊腺瘤，4例为胆囊腺肌症)。病理学分级分为高、中、低分化(包括末分化癌)。浸润深度分为3级，1级：癌细胞浸润粘膜层；2级：癌细胞浸润肌层但≤2/3肌层；3级：癌细胞浸润>2/3肌层或浆膜层。淋巴结转移分为阴性、阳性两组。
, http://www.100md.com
1.2 试剂 抗人nm 23单克隆抗体，抗人PCNA单克隆抗体，生物素标记二抗(北京中山生物技术有限公司提供)，S-P试剂盒(ZYMED公司产品)。
1.3 染色方法 nm 23、PCNA免疫组化S-P法。
1.4 结果判定 nm 23染色判定标准：(A)按细胞显色记分，0分：细胞无显色；1分：细胞显色为浅黄色；2分：细胞显色为棕黄色；3分：细胞显色为棕褐色。(B)按显色细胞的比例记分，1分：1/3以下肿瘤细胞显色；2分：1/3～2/3肿瘤细胞显色；3分：2/3以上肿瘤细胞显色。肿瘤积分=A×B。按积分高低分为：阴性(-)，积分为0分；弱阳性(+)，积分1～4分；强阳性()，积分>4分。PCNA染色判定标准：以细胞核呈棕红色或细胞核、细胞浆同时为棕红色为阳性细胞。双盲法，选择PCNA标记良好的区域在400倍显微镜下任选5个高倍视野，记数500个细胞。PCNA标记指数(LI)=阳性细胞/500×100%。
, 百拇医药
1.5 统计学处理 本组数据采用χ2检验，t检验。患者生存率分析采用Long rank检验。
2 结果
2.1 nm 23表达与原发性胆囊癌病理生物学行为特征的关系
原发性胆囊癌nm 23表达阳性率高于胆囊良性病变，组间比较差异有极显著意义；且原发性胆囊癌无论是高、中、低分化其nm 23表达的阳性率均显著高于胆囊良性病变；其高分化组nm 23表达的阳性率与中、低分化组比较差异有极显著意义；此外nm 23阳性表达与肿瘤的浸润深度，淋巴结转移亦有明显关系，各组间比较差异有显著意义。见表1。
表1 nm 23表达与原发性胆囊癌病理生物学
行为特征的关系
Table 1 The relation between nm 23 expression and
, 百拇医药
biological behavior of PGC 病理生物学行为
n
nm 23
-
+
阳性率(%)
原发性胆囊癌
56
15
19
22
73.21
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高分化
27
4
10
13
85.19
中分化
14
5
3
6
64.29
低分化
15
, http://www.100md.com
6
6
3
60.00
胆囊良性病变
26
19
6
1
26.92**
浸润深度
1级
28
, http://www.100md.com
10
5
13
64.29
2级
19
4
8
7
78.95
3级
9
1
6
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2
88.89*
淋巴结转移
阴性
37
6
15
16
83.75
阳性
19
9
4
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6
52.63**
* P<0.05，** P<0.01
2.2 nm 23表达与原发性胆囊癌患者预后的关系
nm 23阴性组15例中位生存期6个月，而nm 23阳性31例中位生存率16.7个月，两组患者生存期差异有显著意义(P<0.05)。
2.3 nm 23表达与PCNA表达的关系(
±s)
nm 23阴性组的PCNA LI为(54.23±9.59)，阳性表达组PCNA LI为(21.43±5.89)，两组间差异有极显著差异(P<0.01)。
, 百拇医药
3 讨论
nm 23基因的改变与乳腺癌和肝癌等肿瘤转移有密切关系[1]。有关该基因在胆道恶性肿瘤的表达情况资料甚少，结论不一。Fujii[2]等认为，nm 23在胆道恶性肿瘤局部浸润中发挥一定的作用，但与淋巴结转移无关；Lee[3]认为，胆囊癌nm 23表达与患者预后生存时间有关。可见，nm 23在肿瘤发生、发展中似呈多效性作用。
本研究显示，原发性胆囊癌nm 23表达阳性率高于胆囊良性病变，组间比较差异有极显著意义；且原发性胆囊癌无论是高、中、低分化其nm 23表达阳性率均显著高于胆囊良性病变。说明该基因在肿瘤发展的一定阶段生物活性是增强的。有研究表明，在肿瘤形成发展过程中某些因素，如肿瘤细胞刺激因子可增强nm 23基因活性，促使nm 23基因转录蛋白呈过度表达，发挥抑癌作用[4]。原发性胆囊癌分化程度越低，浸润深度深，有区域淋巴结转移，则nm 23表达阳性率越低。随访资料发现，原发性胆囊癌患者术后生存期与原发灶中nm 23表达水平呈正相关。说明nm 23在原发性胆囊癌中的表达可做为良恶性病变鉴别诊断及判定恶性程度和预后的参考指标。有研究表明，PCNA表达与原发性胆囊癌的良恶性、恶性程度、转移及预后有一定相关性[5]。本研究结果显示：nm 23阴性组的原发性胆囊癌患者其PCNA表达明显高于阳性组。说明nm 23具有对细胞增殖的负性调控作用，但其机制有待于进一步研究。nm 23一旦发生缺失，将有可能导致细胞的恶性增殖，在机能代谢和分化程度上表现有量变到质变的发展。因此可以认为，nm 23阴性而PCNA高表达的原发性胆囊癌其恶性程度高、预后差。
, 百拇医药
参考文献
1，Hennessy C, Henry JA, May FEB, et al. Expression of the antimetastatic gene nm 23 in human breast cancer: an association with good prognosis. J Natl Cancer Inst, 1991,83:281—287
2，Fujii K, Yasui W, Shimamoto F, et al. Immunohistochemical analysis of nm 23 gene product in human gallbladder carcinoma. Virchows Arch, 1995,429:355—359
3，Lee CS, Pirdas ZA. nm 23-H1, protein immunohistochemical analysis of nm 23 gene product in human gallbladder, extrahepatic bile ducts and ampulla of vater. Pathology, 1994,26:448—455
4，Shi Y, Parhar RS, Zou M, et al. Differential nm 23 gene expression at the feta 1-maternal interface. Br J Cancer, 1994,70:440—448
5，许元鸿，郭仁宣，郭克建，等.增殖细胞核抗原在原发性胆囊癌中的表达及预后意义.中华消化杂志，1998，18(1)：10～12
(1999-02-26收稿), http://www.100md.com
单位：许元鸿(中国医科大学第一临床学院普通外科，沈阳 110001)；郭仁宣(中国医科大学第一临床学院普通外科，沈阳 110001)；王福臣(东北电业中心医院)
关键词：胆囊肿瘤；基因表达；细胞增殖活性
中国医科大学学报000219 摘要 目的：探讨nm 23表达与胆囊肿瘤良恶性、分化程度、浸润能力、淋巴结转移、预后及细胞增殖活性的关系。方法：56例原发性胆囊癌石蜡包埋标本，免疫组化S-P法检测。结果：nm 23在原发性胆囊癌表达的阳性率，无论是高、中、低分化均显著高于胆囊良性病变(P<0.01)；与分化程度、浸润程度、淋巴结转移亦有明显关系。生存期分析表明：nm 23表达阳性者生存期长(P<0.05)。nm 23表达阴性组PCNA明显高于阳性组(P<0.01)。结论：nm 23是反映原发性胆囊癌生物学特性良好的标志物，与PCNA互补可做为判断胆囊良恶性、恶性程度、淋巴结转移及预后的客观指标。
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The Relationship Between the Expression of nm 23 and Cell Proliferative Activity in
Primary Gallbladder Carcinoma
Xu Yuanhong, Guo Renxuan, Wang Fuchen
(Department of General Surgery, The First Clinical College, China Medical University, Shenyang, 110001)
ABSTRACT Objective: To determine the relationship of nm 23 expression with characteristics of benign or malignant degree, tumor-differentiation, invasion, lymph node metastasis, prognosis, and cell proliferative activity of primary gallbladder carcinoma (PGC). Methods: Specimen from 56 cases of PGC were studied, nm 23 and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) was detected by the immunohistochemical staining S-P method. Results: The expression of nm 23 was significant higher in malignant lesions than in benign diseases. The expression of nm 23 was closely correlated with characteristics of tumor-differentiation, invasion and lymph node metastasis (P<0.05 or P<0.01). The survival time was significantly longer in patients with nm 23 positive expression than in patients with nm 23 negative expression (P<0.05). The expression of PCNA in nm 23 negative cases was obviously higher than the in nm 23 positive cases (P<0.01). Conclusion: nm 23 is a valuable indicator for the biological characteristics of PGC, nm 23 expression and cell proliferative activity can coordinate in distinguishing malignant from benign tumor, judging the malignant degree, and predicting the prognosis of the patients with PGC.
, 百拇医药
KEY WORDS gallbladder neoplasma; gene expression; cell proliferative activity
应用免疫组化S-P法检测原发性胆囊癌患者中nm 23基因的表达，并结合临床病理生物学行为，预后指标及增殖细胞核抗原(PCNA)进行综合分析，探讨其在临床病理生物学行为及预后价值。
1 资料与方法
1.1 临床资料 我院1988～1996年手术根治切除56例原发性胆囊癌标本，诊断明确，随访完整。男性19例，女性37例，年龄(55.4±8.9)岁。26例胆囊良性病变(22例为胆囊腺瘤，4例为胆囊腺肌症)。病理学分级分为高、中、低分化(包括末分化癌)。浸润深度分为3级，1级：癌细胞浸润粘膜层；2级：癌细胞浸润肌层但≤2/3肌层；3级：癌细胞浸润>2/3肌层或浆膜层。淋巴结转移分为阴性、阳性两组。
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1.2 试剂 抗人nm 23单克隆抗体，抗人PCNA单克隆抗体，生物素标记二抗(北京中山生物技术有限公司提供)，S-P试剂盒(ZYMED公司产品)。
1.3 染色方法 nm 23、PCNA免疫组化S-P法。
1.4 结果判定 nm 23染色判定标准：(A)按细胞显色记分，0分：细胞无显色；1分：细胞显色为浅黄色；2分：细胞显色为棕黄色；3分：细胞显色为棕褐色。(B)按显色细胞的比例记分，1分：1/3以下肿瘤细胞显色；2分：1/3～2/3肿瘤细胞显色；3分：2/3以上肿瘤细胞显色。肿瘤积分=A×B。按积分高低分为：阴性(-)，积分为0分；弱阳性(+)，积分1～4分；强阳性()，积分>4分。PCNA染色判定标准：以细胞核呈棕红色或细胞核、细胞浆同时为棕红色为阳性细胞。双盲法，选择PCNA标记良好的区域在400倍显微镜下任选5个高倍视野，记数500个细胞。PCNA标记指数(LI)=阳性细胞/500×100%。
, 百拇医药
1.5 统计学处理 本组数据采用χ2检验，t检验。患者生存率分析采用Long rank检验。
2 结果
2.1 nm 23表达与原发性胆囊癌病理生物学行为特征的关系
原发性胆囊癌nm 23表达阳性率高于胆囊良性病变，组间比较差异有极显著意义；且原发性胆囊癌无论是高、中、低分化其nm 23表达的阳性率均显著高于胆囊良性病变；其高分化组nm 23表达的阳性率与中、低分化组比较差异有极显著意义；此外nm 23阳性表达与肿瘤的浸润深度，淋巴结转移亦有明显关系，各组间比较差异有显著意义。见表1。
表1 nm 23表达与原发性胆囊癌病理生物学
行为特征的关系
Table 1 The relation between nm 23 expression and
, 百拇医药
biological behavior of PGC 病理生物学行为
n
nm 23
-
+
阳性率(%)
原发性胆囊癌
56
15
19
22
73.21
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高分化
27
4
10
13
85.19
中分化
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3
6
64.29
低分化
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60.00
胆囊良性病变
26
19
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浸润深度
1级
28
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13
64.29
2级
19
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7
78.95
3级
9
1
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88.89*
淋巴结转移
阴性
37
6
15
16
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阳性
19
9
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52.63**
* P<0.05，** P<0.01
2.2 nm 23表达与原发性胆囊癌患者预后的关系
nm 23阴性组15例中位生存期6个月，而nm 23阳性31例中位生存率16.7个月，两组患者生存期差异有显著意义(P<0.05)。
2.3 nm 23表达与PCNA表达的关系(
±s)nm 23阴性组的PCNA LI为(54.23±9.59)，阳性表达组PCNA LI为(21.43±5.89)，两组间差异有极显著差异(P<0.01)。
, 百拇医药
3 讨论
nm 23基因的改变与乳腺癌和肝癌等肿瘤转移有密切关系[1]。有关该基因在胆道恶性肿瘤的表达情况资料甚少，结论不一。Fujii[2]等认为，nm 23在胆道恶性肿瘤局部浸润中发挥一定的作用，但与淋巴结转移无关；Lee[3]认为，胆囊癌nm 23表达与患者预后生存时间有关。可见，nm 23在肿瘤发生、发展中似呈多效性作用。
本研究显示，原发性胆囊癌nm 23表达阳性率高于胆囊良性病变，组间比较差异有极显著意义；且原发性胆囊癌无论是高、中、低分化其nm 23表达阳性率均显著高于胆囊良性病变。说明该基因在肿瘤发展的一定阶段生物活性是增强的。有研究表明，在肿瘤形成发展过程中某些因素，如肿瘤细胞刺激因子可增强nm 23基因活性，促使nm 23基因转录蛋白呈过度表达，发挥抑癌作用[4]。原发性胆囊癌分化程度越低，浸润深度深，有区域淋巴结转移，则nm 23表达阳性率越低。随访资料发现，原发性胆囊癌患者术后生存期与原发灶中nm 23表达水平呈正相关。说明nm 23在原发性胆囊癌中的表达可做为良恶性病变鉴别诊断及判定恶性程度和预后的参考指标。有研究表明，PCNA表达与原发性胆囊癌的良恶性、恶性程度、转移及预后有一定相关性[5]。本研究结果显示：nm 23阴性组的原发性胆囊癌患者其PCNA表达明显高于阳性组。说明nm 23具有对细胞增殖的负性调控作用，但其机制有待于进一步研究。nm 23一旦发生缺失，将有可能导致细胞的恶性增殖，在机能代谢和分化程度上表现有量变到质变的发展。因此可以认为，nm 23阴性而PCNA高表达的原发性胆囊癌其恶性程度高、预后差。
, 百拇医药
参考文献
1，Hennessy C, Henry JA, May FEB, et al. Expression of the antimetastatic gene nm 23 in human breast cancer: an association with good prognosis. J Natl Cancer Inst, 1991,83:281—287
2，Fujii K, Yasui W, Shimamoto F, et al. Immunohistochemical analysis of nm 23 gene product in human gallbladder carcinoma. Virchows Arch, 1995,429:355—359
3，Lee CS, Pirdas ZA. nm 23-H1, protein immunohistochemical analysis of nm 23 gene product in human gallbladder, extrahepatic bile ducts and ampulla of vater. Pathology, 1994,26:448—455
4，Shi Y, Parhar RS, Zou M, et al. Differential nm 23 gene expression at the feta 1-maternal interface. Br J Cancer, 1994,70:440—448
5，许元鸿，郭仁宣，郭克建，等.增殖细胞核抗原在原发性胆囊癌中的表达及预后意义.中华消化杂志，1998，18(1)：10～12
(1999-02-26收稿), http://www.100md.com