协同刺激分子CD28/CTLA-4，B7在实验性变态反应性神经炎发病中的动态变化
作者：欧阳俊 张智博 王爱民 肖波 谢光洁 杨欢 李静
单位：欧阳俊(湖南省长沙市神经病学研究所 长沙 410005)；张智博(湖南省长沙市神经病学研究所 长沙 410005)；王爱民(湖南省长沙市神经病学研究所 长沙 410005)；肖波(湖南医科大学附属湘雅医院 长沙 410008)；谢光洁(湖南医科大学附属湘雅医院 长沙 410008)；杨欢(湖南医科大学附属湘雅医院 长沙 410008)；李静(湖南医科大学附属湘雅医院 长沙 410008)
关键词：神经炎，实验性变应性；次要淋巴细胞刺激抗原；PCR；疾病模型，动物；小鼠
湖南医学000203【摘 要】目的探讨CD28/CTLA-4,B7在小鼠实验性变态反应言神经炎(EAN)中的变化规律及对发病的影响。方法于小鼠双后肢足垫皮下注射兔坐骨神经匀浆，建立EAN模型，用免疫组化观察外周淋巴细胞CD28，CTLA-4，B7-1和B7-2蛋白的表达；用RT-PCR检测外周淋巴细胞B7-1和B7-2 mRNA的表达。结果B7-1蛋白和mRNA及CTLA-4蛋白从潜伏期至发病高峰呈递增趋势，而B7-2蛋白和mRNA及CD28蛋白从潜伏期至发病初期明显增高，至发病高峰又下降。结论CD28/CTLA-4,B7与EAN的发病密切相关。B7-2可能与EAN的始发有关，而B7-1与EAN的进展及维持关系更密切。
, 百拇医药
【中图分类号】 R745.4+9 【文献标识码】 A 【文章编号】 1001-9421(2000)02-0086-03
Dynamic Changes of Costimulatory Molecules CD28/CTLA-4,B7
in Experimental Allergic Neuritis
OU Yangjun ZHANG Zhibo WANG Aimin
(Changsha Research Institute of Neurology,Hunan Province,Changsha,410005,China)
XIAO Bo XIE Guangjie Yang Huan
, 百拇医药
(Department of Neurology,Xiangya Hospital,Hunan Medical University,Changsha,410008)
【Abstract】ObjectiveTo investigate the changing rules of CD28,CTLA-4,B7-1 and B7-2 as well as their effects on the onset of disease in experimental allergic neuritis(EAN).MethodsEAN models were established on mice by subcutaneous injection of homogenate prepared from rabbit sciatic nerves.The expression of CD28,CTLA-4,B7-1 and B7-2 proteins in lymphocytes of peripheral blood was examined with immunohistochemistry,and that of B7-1 and B7-2 mRNA with RT-PCR dynamically on day 14(incubation period),day 18(primary period)and day 22(peak of disease)after mice immunization.ResultsExpression of B7-1 protein/mRNA and CTLA-4 protein increased progressively from incubation period to the peak of disease,whereas that of B7-2 protein/mRNA and CD28 protein increased markedly from incubation period to the early stage of disease,then decreased during the peak of EAN.ConclusionsThe increased expression of CD28/CTLA-4,B7 is closely related with the occurrence of EAN,while B7-2 is considered to be involved in the initiation of the disease and B7-1 in its progress and persistence.
, 百拇医药
【Key words】 neuritis,experimental allergic; minor lymphocyte stimulatory antigens; polymerase chain reaction; disease models,animals; mice
协同刺激分子是表达于T细胞表面的免疫活性分子，与抗原提呈细胞表面的配体结合后刺激T细胞增殖、分化为效应细胞[1，2]，有关其在格林巴利综合征(GBS)或实验性变态反应性神经炎(EAN)发病中的作用，迄今在国内外尚未见报道。本实验动态观察了协同刺激分子CD28/CTLA-4，B7在EAN从潜伏期至发病高峰的变化，探讨其与GBS发病的关系。
1 材料与方法
1.1 EAN动物模型诱导 32只健康雄性昆明小鼠(6～8周，25～30 g)随机分为对照组、潜伏期组、发病初期组和发病高峰组，每组8只。后三组分别于动物免疫后第14天(潜伏期)、第18天(发病初期)及第22天(发病高峰期)处死。取0.05 ml兔周围神经匀浆加等量福氏完全佐剂(CFA)混合制成乳剂，免疫于兔双侧后肢足垫下。对照组用生理盐水代替兔神经匀浆。
, 百拇医药
1.2 外周血淋巴细胞B7-1，B7-2，CD28和CTLA-4蛋白的检测 用3%异戊巴妥钠腹腔麻醉，心脏抽血后肝素抗凝。常规分离淋巴细胞。涂片，丙酮固定。用间接免疫荧光法检测四种协同刺激分子，显微镜下计数10个高倍视野下的阳性细胞数，取其平均值。
1.3 淋巴细胞B7-1，B7-2 mRNA表达水平检测
1.3.1 cDNA合成和PCR扩增 取抗凝血1 ml，按上述方法分离出淋巴细胞后，加TRIzol试剂1 ml，按试剂操作说明提取RNA。取样品RNA 0.2 μg，按试剂盒操作说明进行逆转录反应合成cDNA。
取cDNA反应液10 μl，分别加入2.5 mM dNTP 4 μL,Taq酶1 U，10×PCR缓冲液5 μl,β-actin上、下游引物各1 μl(10 pmol/μl)，B7-1或B7-2上、下游引物各2 μl(10 pmol/μl)，加去离子双蒸水至终体积50 μl，石蜡油覆盖，95 ℃变性5 min。反应条件为：95 ℃变性1 min，55 ℃退火1 min，72 ℃延伸1 min。循环30次后72 ℃延伸5 min。
, 百拇医药
1.3.2 PCR产物的分析 2%琼脂糖凝胶电泳后在Eagle Eye Ⅱ型图像处理系统上计算出B7-1，B7-2，β-actin密度，用β-actin密度作为参照，求出B7-1，B7-2基因表达的相对值。
1.4 统计学处理 本研究测定数值用平均数±标准差(x±s)表示。进行q检验、t检验及相关分析。
2 结果
2.1 外周血淋巴细胞B7-1，B7-2，CD28，CTLA-4蛋白表达水平 B7-1，B7-2和CD28在对照组仅见极少量表达，CTLA-4未检测出表达，见附表。实验组B7-1和CD28从潜伏期到发病初期，两者表达均逐步增加，至发病高峰达最高，较对照组明显增高(P<0.01)；B7-2和CTLA-4从潜伏期开始增加，在发病初期达最高，至发病高峰又下降，较对照组亦明显增高(P<0.01)。
附表 小鼠外周血淋巴细胞协同刺激分子及B7 mRNA的表达(
±s) 组别
, 百拇医药
B7-1
B7-2
CD28
CTLA-4
B7-1 mRNA
B7-2 mRNA
对照组
0.44±0.43
2.19±1.65
1.83±0.51
0
1.48±0.13
, 百拇医药
1.43±0.07
潜伏期
7.01±1.801)2)
19.09±6.061)
14.31±2.411)2)
0.53±0.23
2.42±0.261)
2.95±0.431)
病初期
13.91±4.801)
, 百拇医药
25.55±10.311)
16.91±2.671)
1.01±0.22
2.90±0.571)
7.44±2.931)
高峰期
19.30±5.991)3)
15.79±4.181)3)
12.48±2.091)3)
, 百拇医药 1.43±0.21
4.96±1.361)
3.94±0.691)
与对照组比较：1)P<0.01；与发病初期比较：2)P<0.05，3)P<0.012.2 外周血淋巴细胞B7-1 mRNA,B7-2 mRNA表达 见附表，B7-1 mRNA的表达从潜伏期至发病高峰逐步增加；与对照组相比，明显增加，差异有高度显著性(P<0.01)。B7-2 mRNA从潜伏期至发病初期迅速增加，至发病高峰又下降；与对照组相应时间比较，明显增加，差异具有高度显著性(P<0.01)。
直线相关分析显示：B7-1 mRNA,B7-2 mRNA表达强度均与其蛋白表达强度相平行，与其各自的潜伏期、发病初期、发病高峰期的相关系数值分别为0.766，0.773，0.724和0.737，0.782，0.840，差异均有显著性(P<0.05)。
, 百拇医药
3 讨论
近来研究表明，T细胞的活化除了需要抗原刺激外，还须第二信号的参与，第二信号的传递主要由协同刺激分子完成。目前研究较多的协同刺激分子及其配体包括CD28/CTLA-4；B7-1/B7-2，CD40 L：CD40，HSA：HSA，CD5：CD72。其中又以CD28/CTLA-4，B7-1/B7-2最为关键，在T细胞活化过程中起主导作用[3，4]。本结果表明CD28/CTLA-4：B7与EAN的发病密切相关，在EAN的潜伏期，B7-1和CD28的表达逐步增加，至发病高峰达最高；而B7-2和CTLA-4的表达从潜伏期开始增加，发病初期达顶峰，至发病高峰又下降。增加的CD28与B7结合后，可诱导IL-2的产生及T细胞的增殖，上调免疫反应，而CTLA-4与B7结合后，抑制T细胞的增生或直接诱导已被激活的T细胞的凋亡，下调免疫反应[5]。B7-1和B7-2 mRNA和蛋白表达呈同步增加，提示B7-1和B7-2的表达增加主要是发生在转录水平。已有不少作者观察到B7-1和B7-2在不同的自身免疫性疾病中所起的作用不尽相同。在多发性硬化的发病中，B7-1比B7-2更重要[6，7]。本研究观察到在EAN发病过程中，B7-1和B7-2均呈明显增加，只是B7-2在发病初期达到最高峰，故认为与EAN的始发关系更为密切，而B7-1从潜伏期至发病高峰呈逐步增加的倾向，推测参与了EAN的进展及维持。
, http://www.100md.com
关于B7-1和B7-2在不同免疫性疾病中所起的各种作用，目前仍不是十分清楚。已有证据表明B7-1和B7-2在CD+4 T细胞(Th0细胞)分化为效应细胞的过程中起着不同的作用[8]。一般情况下，CD+4 T细胞被激活后，或者转变为Th1细胞，或者转变为Th2细胞，两者通过产生不同的细胞因子调节免疫反应。Th1细胞主要分泌IL-2，INF-γ，TNF-β，而Th2细胞主要分泌IL-4，IL-5，IL-10。前者介导细胞免疫，后者与体液免疫有关。有人发现应用抗B7-1抗体能够预防实验性变态性脑炎(EAE)的发生或减轻发病的程度，小鼠体内Th0细胞主要向Th2细胞的转化[9]。反之，用抗B7-2抗体处理后，出现Th1细胞增多，导致疾病的加剧，因而认为B7-1主要促使Th0细胞向Th2细胞转化。多发性硬化或EAE主要由细胞免疫异常所致，应用抗B7-1抗体，阻断了Th0细胞向Th1细胞转化，使执行细胞免疫的Th1细胞减少，从而达到治疗EAE的目的。本研究观察到在EAN中B7-2和B7-1均呈明显增加，提示体液免疫和细胞免疫均参加了EAN的发生，与既往的临床及实验观察相吻合[10]。
, http://www.100md.com
总之，CD28/CTLA-4，B7在EAN的发生和进展中起着非常重要的作用，干扰或阻断第二信号的传递有可能达到预防或治疗EAN或GBS的目的。【作者简介】 欧阳俊(1963～)，男，湖南长沙人，长沙市神经病学研究的主治医师，湖南医科大学兼职讲师，主要从事神经内分泌学，周围神经疾病的研究。
【参 考 文 献】
[1] Khalili-Shirazi A,Hughes RA,Brostoff SW,et al.T cell responses to myelinprotein in Guillain-Barre Syndrome[J].J Neurol Sci,1992,111(2):200
[2] Taylor WA,Brostoff SW,Hughs RA.P2 specific lymophocyte transformation in Guillain-Barre Syndrome and chronic idiopathic demyelinating polyradiculoneuropathy[J].J Neuro Sci,1991,104(1):52
, 百拇医药
[3] Hathcock KSG,Laszlo HB,Dickler J,et al.Identification of an alternative CTLA-4 ligand costimulatory for T cell activation[J].Science,1993,262(4):905
[4] Stout RD,Suttles J,Xu JC,et al.Impaired T cell-mediated macrophage activation in CD40 ligand-deficient mice[J].J Immunol,1996,156(7):8
[5] Gribben JGGJ.CTLA-4 mediates antigen-specific apoptosis of human T cells[J]. Proc Natl Acad Sci USA,1995,92(3):811
, http://www.100md.com
[6] Svenningsson A,Dotevall L,Stemme S,et al.Increased expression of B7-1 costimulatory molecule on cerebrospinal fluid cell of patients with multiple sclerosis and infectious central nervous system disease[J].J Neuroimmuno,1997,75(1):59
[7] Gen K,Dona DL,Reder AT.Increased CD80(+) B cell in active multiple sclerosis and reversal by interferon beta-1b therapy[J].J Clin Invest,1997,99(11):2664
[8] Thompson CB.Distict roles for the costimulatory ligand B7-1 and B7-2 in T helper cell differentiation?[J]Cell,1995,81(3):979
[9] Cross AHTJ.Long-term inhibition of murine experimental autoimmune encephalomyelitis:using CTLA-4 Fc supports a key role for CD28 costimulation[J].J Clin Invest,1995,95(6):2783
[10] 王学萍，赵雅珍，陈长春，等.格林-巴利综合征患儿细胞免疫和体液免疫的初步研究[J].中国实验临床免疫学杂志，1991，3(1)：25
【收稿日期】 1999-12-10, 百拇医药
单位：欧阳俊(湖南省长沙市神经病学研究所 长沙 410005)；张智博(湖南省长沙市神经病学研究所 长沙 410005)；王爱民(湖南省长沙市神经病学研究所 长沙 410005)；肖波(湖南医科大学附属湘雅医院 长沙 410008)；谢光洁(湖南医科大学附属湘雅医院 长沙 410008)；杨欢(湖南医科大学附属湘雅医院 长沙 410008)；李静(湖南医科大学附属湘雅医院 长沙 410008)
关键词：神经炎，实验性变应性；次要淋巴细胞刺激抗原；PCR；疾病模型，动物；小鼠
湖南医学000203【摘 要】目的探讨CD28/CTLA-4,B7在小鼠实验性变态反应言神经炎(EAN)中的变化规律及对发病的影响。方法于小鼠双后肢足垫皮下注射兔坐骨神经匀浆，建立EAN模型，用免疫组化观察外周淋巴细胞CD28，CTLA-4，B7-1和B7-2蛋白的表达；用RT-PCR检测外周淋巴细胞B7-1和B7-2 mRNA的表达。结果B7-1蛋白和mRNA及CTLA-4蛋白从潜伏期至发病高峰呈递增趋势，而B7-2蛋白和mRNA及CD28蛋白从潜伏期至发病初期明显增高，至发病高峰又下降。结论CD28/CTLA-4,B7与EAN的发病密切相关。B7-2可能与EAN的始发有关，而B7-1与EAN的进展及维持关系更密切。
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【中图分类号】 R745.4+9 【文献标识码】 A 【文章编号】 1001-9421(2000)02-0086-03
Dynamic Changes of Costimulatory Molecules CD28/CTLA-4,B7
in Experimental Allergic Neuritis
OU Yangjun ZHANG Zhibo WANG Aimin
(Changsha Research Institute of Neurology,Hunan Province,Changsha,410005,China)
XIAO Bo XIE Guangjie Yang Huan
, 百拇医药
(Department of Neurology,Xiangya Hospital,Hunan Medical University,Changsha,410008)
【Abstract】ObjectiveTo investigate the changing rules of CD28,CTLA-4,B7-1 and B7-2 as well as their effects on the onset of disease in experimental allergic neuritis(EAN).MethodsEAN models were established on mice by subcutaneous injection of homogenate prepared from rabbit sciatic nerves.The expression of CD28,CTLA-4,B7-1 and B7-2 proteins in lymphocytes of peripheral blood was examined with immunohistochemistry,and that of B7-1 and B7-2 mRNA with RT-PCR dynamically on day 14(incubation period),day 18(primary period)and day 22(peak of disease)after mice immunization.ResultsExpression of B7-1 protein/mRNA and CTLA-4 protein increased progressively from incubation period to the peak of disease,whereas that of B7-2 protein/mRNA and CD28 protein increased markedly from incubation period to the early stage of disease,then decreased during the peak of EAN.ConclusionsThe increased expression of CD28/CTLA-4,B7 is closely related with the occurrence of EAN,while B7-2 is considered to be involved in the initiation of the disease and B7-1 in its progress and persistence.
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【Key words】 neuritis,experimental allergic; minor lymphocyte stimulatory antigens; polymerase chain reaction; disease models,animals; mice
协同刺激分子是表达于T细胞表面的免疫活性分子，与抗原提呈细胞表面的配体结合后刺激T细胞增殖、分化为效应细胞[1，2]，有关其在格林巴利综合征(GBS)或实验性变态反应性神经炎(EAN)发病中的作用，迄今在国内外尚未见报道。本实验动态观察了协同刺激分子CD28/CTLA-4，B7在EAN从潜伏期至发病高峰的变化，探讨其与GBS发病的关系。
1 材料与方法
1.1 EAN动物模型诱导 32只健康雄性昆明小鼠(6～8周，25～30 g)随机分为对照组、潜伏期组、发病初期组和发病高峰组，每组8只。后三组分别于动物免疫后第14天(潜伏期)、第18天(发病初期)及第22天(发病高峰期)处死。取0.05 ml兔周围神经匀浆加等量福氏完全佐剂(CFA)混合制成乳剂，免疫于兔双侧后肢足垫下。对照组用生理盐水代替兔神经匀浆。
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1.2 外周血淋巴细胞B7-1，B7-2，CD28和CTLA-4蛋白的检测 用3%异戊巴妥钠腹腔麻醉，心脏抽血后肝素抗凝。常规分离淋巴细胞。涂片，丙酮固定。用间接免疫荧光法检测四种协同刺激分子，显微镜下计数10个高倍视野下的阳性细胞数，取其平均值。
1.3 淋巴细胞B7-1，B7-2 mRNA表达水平检测
1.3.1 cDNA合成和PCR扩增 取抗凝血1 ml，按上述方法分离出淋巴细胞后，加TRIzol试剂1 ml，按试剂操作说明提取RNA。取样品RNA 0.2 μg，按试剂盒操作说明进行逆转录反应合成cDNA。
取cDNA反应液10 μl，分别加入2.5 mM dNTP 4 μL,Taq酶1 U，10×PCR缓冲液5 μl,β-actin上、下游引物各1 μl(10 pmol/μl)，B7-1或B7-2上、下游引物各2 μl(10 pmol/μl)，加去离子双蒸水至终体积50 μl，石蜡油覆盖，95 ℃变性5 min。反应条件为：95 ℃变性1 min，55 ℃退火1 min，72 ℃延伸1 min。循环30次后72 ℃延伸5 min。
, 百拇医药
1.3.2 PCR产物的分析 2%琼脂糖凝胶电泳后在Eagle Eye Ⅱ型图像处理系统上计算出B7-1，B7-2，β-actin密度，用β-actin密度作为参照，求出B7-1，B7-2基因表达的相对值。
1.4 统计学处理 本研究测定数值用平均数±标准差(x±s)表示。进行q检验、t检验及相关分析。
2 结果
2.1 外周血淋巴细胞B7-1，B7-2，CD28，CTLA-4蛋白表达水平 B7-1，B7-2和CD28在对照组仅见极少量表达，CTLA-4未检测出表达，见附表。实验组B7-1和CD28从潜伏期到发病初期，两者表达均逐步增加，至发病高峰达最高，较对照组明显增高(P<0.01)；B7-2和CTLA-4从潜伏期开始增加，在发病初期达最高，至发病高峰又下降，较对照组亦明显增高(P<0.01)。
附表 小鼠外周血淋巴细胞协同刺激分子及B7 mRNA的表达(
±s) 组别, 百拇医药
B7-1
B7-2
CD28
CTLA-4
B7-1 mRNA
B7-2 mRNA
对照组
0.44±0.43
2.19±1.65
1.83±0.51
0
1.48±0.13
, 百拇医药
1.43±0.07
潜伏期
7.01±1.801)2)
19.09±6.061)
14.31±2.411)2)
0.53±0.23
2.42±0.261)
2.95±0.431)
病初期
13.91±4.801)
, 百拇医药
25.55±10.311)
16.91±2.671)
1.01±0.22
2.90±0.571)
7.44±2.931)
高峰期
19.30±5.991)3)
15.79±4.181)3)
12.48±2.091)3)
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4.96±1.361)
3.94±0.691)
与对照组比较：1)P<0.01；与发病初期比较：2)P<0.05，3)P<0.012.2 外周血淋巴细胞B7-1 mRNA,B7-2 mRNA表达 见附表，B7-1 mRNA的表达从潜伏期至发病高峰逐步增加；与对照组相比，明显增加，差异有高度显著性(P<0.01)。B7-2 mRNA从潜伏期至发病初期迅速增加，至发病高峰又下降；与对照组相应时间比较，明显增加，差异具有高度显著性(P<0.01)。
直线相关分析显示：B7-1 mRNA,B7-2 mRNA表达强度均与其蛋白表达强度相平行，与其各自的潜伏期、发病初期、发病高峰期的相关系数值分别为0.766，0.773，0.724和0.737，0.782，0.840，差异均有显著性(P<0.05)。
, 百拇医药
3 讨论
近来研究表明，T细胞的活化除了需要抗原刺激外，还须第二信号的参与，第二信号的传递主要由协同刺激分子完成。目前研究较多的协同刺激分子及其配体包括CD28/CTLA-4；B7-1/B7-2，CD40 L：CD40，HSA：HSA，CD5：CD72。其中又以CD28/CTLA-4，B7-1/B7-2最为关键，在T细胞活化过程中起主导作用[3，4]。本结果表明CD28/CTLA-4：B7与EAN的发病密切相关，在EAN的潜伏期，B7-1和CD28的表达逐步增加，至发病高峰达最高；而B7-2和CTLA-4的表达从潜伏期开始增加，发病初期达顶峰，至发病高峰又下降。增加的CD28与B7结合后，可诱导IL-2的产生及T细胞的增殖，上调免疫反应，而CTLA-4与B7结合后，抑制T细胞的增生或直接诱导已被激活的T细胞的凋亡，下调免疫反应[5]。B7-1和B7-2 mRNA和蛋白表达呈同步增加，提示B7-1和B7-2的表达增加主要是发生在转录水平。已有不少作者观察到B7-1和B7-2在不同的自身免疫性疾病中所起的作用不尽相同。在多发性硬化的发病中，B7-1比B7-2更重要[6，7]。本研究观察到在EAN发病过程中，B7-1和B7-2均呈明显增加，只是B7-2在发病初期达到最高峰，故认为与EAN的始发关系更为密切，而B7-1从潜伏期至发病高峰呈逐步增加的倾向，推测参与了EAN的进展及维持。
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关于B7-1和B7-2在不同免疫性疾病中所起的各种作用，目前仍不是十分清楚。已有证据表明B7-1和B7-2在CD+4 T细胞(Th0细胞)分化为效应细胞的过程中起着不同的作用[8]。一般情况下，CD+4 T细胞被激活后，或者转变为Th1细胞，或者转变为Th2细胞，两者通过产生不同的细胞因子调节免疫反应。Th1细胞主要分泌IL-2，INF-γ，TNF-β，而Th2细胞主要分泌IL-4，IL-5，IL-10。前者介导细胞免疫，后者与体液免疫有关。有人发现应用抗B7-1抗体能够预防实验性变态性脑炎(EAE)的发生或减轻发病的程度，小鼠体内Th0细胞主要向Th2细胞的转化[9]。反之，用抗B7-2抗体处理后，出现Th1细胞增多，导致疾病的加剧，因而认为B7-1主要促使Th0细胞向Th2细胞转化。多发性硬化或EAE主要由细胞免疫异常所致，应用抗B7-1抗体，阻断了Th0细胞向Th1细胞转化，使执行细胞免疫的Th1细胞减少，从而达到治疗EAE的目的。本研究观察到在EAN中B7-2和B7-1均呈明显增加，提示体液免疫和细胞免疫均参加了EAN的发生，与既往的临床及实验观察相吻合[10]。
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总之，CD28/CTLA-4，B7在EAN的发生和进展中起着非常重要的作用，干扰或阻断第二信号的传递有可能达到预防或治疗EAN或GBS的目的。【作者简介】 欧阳俊(1963～)，男，湖南长沙人，长沙市神经病学研究的主治医师，湖南医科大学兼职讲师，主要从事神经内分泌学，周围神经疾病的研究。
【参 考 文 献】
[1] Khalili-Shirazi A,Hughes RA,Brostoff SW,et al.T cell responses to myelinprotein in Guillain-Barre Syndrome[J].J Neurol Sci,1992,111(2):200
[2] Taylor WA,Brostoff SW,Hughs RA.P2 specific lymophocyte transformation in Guillain-Barre Syndrome and chronic idiopathic demyelinating polyradiculoneuropathy[J].J Neuro Sci,1991,104(1):52
, 百拇医药
[3] Hathcock KSG,Laszlo HB,Dickler J,et al.Identification of an alternative CTLA-4 ligand costimulatory for T cell activation[J].Science,1993,262(4):905
[4] Stout RD,Suttles J,Xu JC,et al.Impaired T cell-mediated macrophage activation in CD40 ligand-deficient mice[J].J Immunol,1996,156(7):8
[5] Gribben JGGJ.CTLA-4 mediates antigen-specific apoptosis of human T cells[J]. Proc Natl Acad Sci USA,1995,92(3):811
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[6] Svenningsson A,Dotevall L,Stemme S,et al.Increased expression of B7-1 costimulatory molecule on cerebrospinal fluid cell of patients with multiple sclerosis and infectious central nervous system disease[J].J Neuroimmuno,1997,75(1):59
[7] Gen K,Dona DL,Reder AT.Increased CD80(+) B cell in active multiple sclerosis and reversal by interferon beta-1b therapy[J].J Clin Invest,1997,99(11):2664
[8] Thompson CB.Distict roles for the costimulatory ligand B7-1 and B7-2 in T helper cell differentiation?[J]Cell,1995,81(3):979
[9] Cross AHTJ.Long-term inhibition of murine experimental autoimmune encephalomyelitis:using CTLA-4 Fc supports a key role for CD28 costimulation[J].J Clin Invest,1995,95(6):2783
[10] 王学萍，赵雅珍，陈长春，等.格林-巴利综合征患儿细胞免疫和体液免疫的初步研究[J].中国实验临床免疫学杂志，1991，3(1)：25
【收稿日期】 1999-12-10, 百拇医药