肺癌组织雌/孕激素受体、DNA含量的测定及其临床意义
作者：彭爱梅 朱晓莉 李基业
单位：彭爱梅(上海铁道大学附属铁路医院呼吸内科，上海 200072)；朱晓莉 李基业(南京铁道医学院附属医院呼吸内科，江苏南京 210009)
关键词：肺癌；受体，雌激素；受体，孕激素；脱氧核糖核酸含量
铁道医学000205 [摘要]目的 探讨雌/孕激素受体(ER/PR)在肺癌的临床病理意义,研究肺癌的激素受体表达、DNA含量及其与生物学特性的关系。方法 应用免疫组织化学SP法检测肺癌组织ER/PR，流式细胞仪检测DNA含量。结果 40例肺癌ER检测阳性23例(57.5%)，PR检测阳性16例(40.0%)，异倍体者31例(77.5%)；受体阳性率与组织学分级呈负相关，并与病理类型有关；ER阳性者DI值较低，以二倍体多见。结论 肺癌组织中存在雌/孕激素受体，能用以反映其生物学行为，联合检测激素受体和DNA含量可为肺癌内分泌治疗和预后评估提供更多的生物学依据。
, http://www.100md.com
[中图分类号]R734.2 [文献标识码]A [文章编号]1001-0912(2000)02-0081-03
Detection of estrogen/progesterone receptor and DNA content in lung cancer and its clinical significance
PENG Ai-mei，ZHU Xiao-li，LI Ji-ye.
(The Affiliated Railway Hospital, Shanghai Tiedao University,Shanghai 200072,China)
Abstract：Objective To study the expression of hormone receptor and the relationship between estrogen/progesterone receptor (ER/PR)and DNA content and the biological features in lung cancer.Methods ER/PR was detected in lung cancer fresh resected or biopsy specimens with immunohistochemistry method, DNA content was measured with flow cytometry. Results The positive rates of ER and PR were 57.5%(23/40)and 40.0%(16/40),the rate of heteroploid was 77.5%(31/40);The positive rate of receptor had negative correlation with histopathologic grade and was related to the pathologic classification of lung neoplasm cells.In ER positive group,the DI was lower and the incidence of diploid was higher.Conclusions There are ER and PR in tissues of lung cancer, and the levels of them can reflect biologic behaviors. Simultaneous detection of ER/PR and DNA content can provide base for clinical endocrine treatment and evaluation of prognosis in lung cancer.
, http://www.100md.com
Key words:lung neoplasms；carcinoma；receptor，estrogen；receptor，progesterone；DNA content
(Railway Medical Journal,2000,28:81～83)
支气管肺癌是危及人类健康的主要疾病之一，发病率逐渐上升，已占男性肿瘤患者死亡率的第一位，女性肿瘤患者死亡率的第二位。目前，随着肿瘤研究的深入，发现非性激素靶器官肿瘤包括肺癌中有激素受体的存在，因此，研究肺癌激素受体将会为临床开展肺癌综合治疗提供一条新途径。本研究通过免疫组织化学法测定雌/孕激素受体(ER/PR),并结合DNA含量分析，探讨激素受体阳性患者肺癌的生物学特征及其临床意义。
1 材料和方法
1.1 标本来源
, http://www.100md.com
收集1997年2月～1998年3月期间经病理证实的手术切除及纤维支气管镜活检肺癌标本40份及良性病变组织10份(炎症7份，结核3份)，其病理分类参照WHO肺癌组织学分类、分级标准(1982)，分期参照UICC1985年分期标准。
1.2 方法
1.2.1 免疫组织化学SP法 对50例患者的石蜡标本应用SP免疫组织化学法，测定用雌/孕激素受体及生物素标记的第二抗，链霉菌抗生物素蛋白—过氧化酶免疫组化染色试剂盒，均为福州迈新生物技术开发公司产品。结果判断标准：细胞核或细胞浆见黄色颗粒，明显高于背景者为阳性反应癌细胞，若阳性率大于20%者为(+)，不足20%者为(-)。
1.2.2 肺癌组织DNA含量检测 新鲜标本经消化 、过滤、离心、固定、冰箱过夜。采用碘化丙啶一步荧光插入法进行细胞核DNA染色，使用美国Becton-Dickinson公司生产的FACS Calibur流式细胞仪检测，测定前以正常人外周血单个核细胞为校正标准。判断标准：DI在0.90～1.10之间为二倍体，其余为异倍体。其中：
, http://www.100md.com
1.3 统计学处理
本组数据采用NDST统计程序进行多批组资料统计，Fisher直接概率法作统计学处理。
2 结 果
2.1 肺癌雌/孕激素受体的表达及DNA含量
40份肺癌标本，测定结果：23份ER阳性，占57.5%；16份PR阳性，占40.0%。肺良性病变组不存在雌/孕激素受体的表达。流式细胞术分析检出肺癌中异倍体31份，占77.5%，而良性病变组10份均为二倍体。
2.2 雌/孕激素受体的表达与肺癌病理特征的关系
结果显示，分化Ⅰ级的肺癌与分化Ⅲ级者比，ER/PR阳性率明显较高，差异有显著意义(0.01
表1 肺癌ER/PR与组织学分级关系 分级
n
ER
PR
阳性数
阳性率/%
阳性数
阳性率/%
Ⅰ
7
6*
85.71
5*
, 百拇医药
71.43
Ⅱ
18
13
72.22
8
44.44
Ⅲ
15
4
26.67
3
20.00
, 百拇医药 *Ⅰ级与Ⅲ级相比，0.01
n
ER
PR
阳性数
阳性率/%
阳性数
阳性率/%
鳞癌
16
10
62.50
, http://www.100md.com 6
37.50
腺癌
14
10
71.43
7
50.00
小细胞癌
9
2
22.22*
2
, 百拇医药
22.22
腺鳞癌
1
1
100.00
1
100.00
*与其它3类癌相比，0.01
2.3 雌激素受体的表达与DNA含量的关系
ER阳性者DI值低于ER阴性者，两组间差异有显著意义(P<0.01，见表3)。
表3 肺癌细胞ER与DI值关系 ER
, http://www.100md.com
n
DI值
+
23
1.37±0.34*
-
13
1.66±0.29
*两组相比，P<0.01
3 讨 论
雌激素受体作为一种反式激活因子，能调节与细胞分裂有关的基因如c-myc、c-jun、c-fos等表达，从而影响细胞的分裂与增殖，而三苯氧胺作为非类固醇类的抗雌激素药，可阻滞肿瘤基因c-myc转录[1，2]，这就使内分泌治疗应用于临床成为可能。
, http://www.100md.com
目前对雌/孕激素受体的研究侧重于受体与肿瘤生物学特征的关系研究，发现在靶器官肿瘤中ER阳性者其细胞分化好，预后佳[3]，同时检测PR可提高诊断敏感性，但非性激素靶器官肿瘤也有报道，结论不一。在肺癌组织中存在性激素受体的表达已得到公认。但关于受体与肺癌生物学特性的关系存在分歧，国内藏福旺等[4]发现，ER或PR阳性患者术后5年生存率高于ER或PR阴性者，且与分化程度成正比；而杨梅怀等[5]的结果相反。本研究结果提示：肺癌中存在ER、PR表达，非小细胞肺癌ER/PR阳性率明显高于小细胞肺癌，而腺、鳞癌之间无显著差异；不同组织学分级ER/PR表达不同，ER/PR阳性率随分级增高而减低，即高分化者ER/PR趋于阳性，低分化者ER/PR趋于阴性，ER/PR含量在一定程度上反映肺癌的分化程度。
肿瘤细胞DNA非整倍体是恶性肿瘤的特征性标志之一[6]，测量和分析细胞核DNA倍体水平对恶性肿瘤的病理诊断、恶性程度判定、疗效评价、预测预后具有重要作用，本研究采用流式细胞术测量和分析细胞学样品单个完整细胞的DNA倍体水平，发现只有肿瘤细胞中存在有异倍体(77.5%)，同时发现ER阳性者DI值较低，两者有差异性。
, 百拇医药
肺癌的治疗包括手术、化疗、放疗、免疫治疗等，但疗效均不理想，总的5年生存率为10%，因此有必要寻求新的治疗方法。近年来，人们根据ER/PR测定结果，应用激素治疗乳腺癌、肝癌、胃癌等已取得一定的效果，同时，Kahioneini研究发现DNA倍体水平对激素受体阳性患者的预后有关键的影响。因此我们认为对肺癌细胞作ER、PR及DNA含量化疗的双重估计，将有助于对内分泌治疗方案的选择及预后的评估，这仍在进一步研究之中。
[基金项目]铁道部卫生司基金资助项目(J97TW77)
[作者简介]彭爱梅(1969-)，女，安徽天长人，上海铁道大学附属铁路医院主治医师。
[参考文献]
[1] Weisz A.Rosales R. Identification of an estrogen element upstream of the human c-fos gene that binds the estrogen receptor and the AP-1 transcription factor[J].Nucleic Acids Res,1990,18:5097-106.
, http://www.100md.com
[2] Webb D K,Moulton B C,Khan S A,et al. Estrogen induced expression of the C-Fun proto-oncogene in the immature and mature rat uterus[J].Biochem Biophys Res Commun，1990，168(2):721-6.
[3] Allred D C.Should immunohistochemical examination replace biochemical hormone receptor assays in breast cancer?[J].Am J Clin Pathol，1993，99:1-2.
[4] 藏福旺，孙秀威，蓝毓滨，等.雌、孕激素受体检测对57例女性肺癌的临床病理研究[J].中华肿瘤杂志，1993,15(6):434-6.
[5] 杨梅怀,张岩峰,潘女 是华.女性肺癌患者雌激素受体检测的研究[J].中华结核和呼吸杂志，1992，15(3):138-9.
[6] Viren M M,Ojala A T,Katajn V V, et al.Flow cytometric analysis of tumor DNA profile related to response to treatment and survival in small-cell-lung cancer[J].Med Oncol，1997，14(1):35-9.
[收稿日期]1999.10.26, http://www.100md.com
单位：彭爱梅(上海铁道大学附属铁路医院呼吸内科，上海 200072)；朱晓莉 李基业(南京铁道医学院附属医院呼吸内科，江苏南京 210009)
关键词：肺癌；受体，雌激素；受体，孕激素；脱氧核糖核酸含量
铁道医学000205 [摘要]目的 探讨雌/孕激素受体(ER/PR)在肺癌的临床病理意义,研究肺癌的激素受体表达、DNA含量及其与生物学特性的关系。方法 应用免疫组织化学SP法检测肺癌组织ER/PR，流式细胞仪检测DNA含量。结果 40例肺癌ER检测阳性23例(57.5%)，PR检测阳性16例(40.0%)，异倍体者31例(77.5%)；受体阳性率与组织学分级呈负相关，并与病理类型有关；ER阳性者DI值较低，以二倍体多见。结论 肺癌组织中存在雌/孕激素受体，能用以反映其生物学行为，联合检测激素受体和DNA含量可为肺癌内分泌治疗和预后评估提供更多的生物学依据。
, http://www.100md.com
[中图分类号]R734.2 [文献标识码]A [文章编号]1001-0912(2000)02-0081-03
Detection of estrogen/progesterone receptor and DNA content in lung cancer and its clinical significance
PENG Ai-mei，ZHU Xiao-li，LI Ji-ye.
(The Affiliated Railway Hospital, Shanghai Tiedao University,Shanghai 200072,China)
Abstract：Objective To study the expression of hormone receptor and the relationship between estrogen/progesterone receptor (ER/PR)and DNA content and the biological features in lung cancer.Methods ER/PR was detected in lung cancer fresh resected or biopsy specimens with immunohistochemistry method, DNA content was measured with flow cytometry. Results The positive rates of ER and PR were 57.5%(23/40)and 40.0%(16/40),the rate of heteroploid was 77.5%(31/40);The positive rate of receptor had negative correlation with histopathologic grade and was related to the pathologic classification of lung neoplasm cells.In ER positive group,the DI was lower and the incidence of diploid was higher.Conclusions There are ER and PR in tissues of lung cancer, and the levels of them can reflect biologic behaviors. Simultaneous detection of ER/PR and DNA content can provide base for clinical endocrine treatment and evaluation of prognosis in lung cancer.
, http://www.100md.com
Key words:lung neoplasms；carcinoma；receptor，estrogen；receptor，progesterone；DNA content
(Railway Medical Journal,2000,28:81～83)
支气管肺癌是危及人类健康的主要疾病之一，发病率逐渐上升，已占男性肿瘤患者死亡率的第一位，女性肿瘤患者死亡率的第二位。目前，随着肿瘤研究的深入，发现非性激素靶器官肿瘤包括肺癌中有激素受体的存在，因此，研究肺癌激素受体将会为临床开展肺癌综合治疗提供一条新途径。本研究通过免疫组织化学法测定雌/孕激素受体(ER/PR),并结合DNA含量分析，探讨激素受体阳性患者肺癌的生物学特征及其临床意义。
1 材料和方法
1.1 标本来源
, http://www.100md.com
收集1997年2月～1998年3月期间经病理证实的手术切除及纤维支气管镜活检肺癌标本40份及良性病变组织10份(炎症7份，结核3份)，其病理分类参照WHO肺癌组织学分类、分级标准(1982)，分期参照UICC1985年分期标准。
1.2 方法
1.2.1 免疫组织化学SP法 对50例患者的石蜡标本应用SP免疫组织化学法，测定用雌/孕激素受体及生物素标记的第二抗，链霉菌抗生物素蛋白—过氧化酶免疫组化染色试剂盒，均为福州迈新生物技术开发公司产品。结果判断标准：细胞核或细胞浆见黄色颗粒，明显高于背景者为阳性反应癌细胞，若阳性率大于20%者为(+)，不足20%者为(-)。
1.2.2 肺癌组织DNA含量检测 新鲜标本经消化 、过滤、离心、固定、冰箱过夜。采用碘化丙啶一步荧光插入法进行细胞核DNA染色，使用美国Becton-Dickinson公司生产的FACS Calibur流式细胞仪检测，测定前以正常人外周血单个核细胞为校正标准。判断标准：DI在0.90～1.10之间为二倍体，其余为异倍体。其中：
, http://www.100md.com
1.3 统计学处理
本组数据采用NDST统计程序进行多批组资料统计，Fisher直接概率法作统计学处理。
2 结 果
2.1 肺癌雌/孕激素受体的表达及DNA含量
40份肺癌标本，测定结果：23份ER阳性，占57.5%；16份PR阳性，占40.0%。肺良性病变组不存在雌/孕激素受体的表达。流式细胞术分析检出肺癌中异倍体31份，占77.5%，而良性病变组10份均为二倍体。
2.2 雌/孕激素受体的表达与肺癌病理特征的关系
结果显示，分化Ⅰ级的肺癌与分化Ⅲ级者比，ER/PR阳性率明显较高，差异有显著意义(0.01
表1 肺癌ER/PR与组织学分级关系 分级
n
ER
PR
阳性数
阳性率/%
阳性数
阳性率/%
Ⅰ
7
6*
85.71
5*
, 百拇医药
71.43
Ⅱ
18
13
72.22
8
44.44
Ⅲ
15
4
26.67
3
20.00
, 百拇医药 *Ⅰ级与Ⅲ级相比，0.01
n
ER
PR
阳性数
阳性率/%
阳性数
阳性率/%
鳞癌
16
10
62.50
, http://www.100md.com 6
37.50
腺癌
14
10
71.43
7
50.00
小细胞癌
9
2
22.22*
2
, 百拇医药
22.22
腺鳞癌
1
1
100.00
1
100.00
*与其它3类癌相比，0.01
2.3 雌激素受体的表达与DNA含量的关系
ER阳性者DI值低于ER阴性者，两组间差异有显著意义(P<0.01，见表3)。
表3 肺癌细胞ER与DI值关系 ER
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n
DI值
+
23
1.37±0.34*
-
13
1.66±0.29
*两组相比，P<0.01
3 讨 论
雌激素受体作为一种反式激活因子，能调节与细胞分裂有关的基因如c-myc、c-jun、c-fos等表达，从而影响细胞的分裂与增殖，而三苯氧胺作为非类固醇类的抗雌激素药，可阻滞肿瘤基因c-myc转录[1，2]，这就使内分泌治疗应用于临床成为可能。
, http://www.100md.com
目前对雌/孕激素受体的研究侧重于受体与肿瘤生物学特征的关系研究，发现在靶器官肿瘤中ER阳性者其细胞分化好，预后佳[3]，同时检测PR可提高诊断敏感性，但非性激素靶器官肿瘤也有报道，结论不一。在肺癌组织中存在性激素受体的表达已得到公认。但关于受体与肺癌生物学特性的关系存在分歧，国内藏福旺等[4]发现，ER或PR阳性患者术后5年生存率高于ER或PR阴性者，且与分化程度成正比；而杨梅怀等[5]的结果相反。本研究结果提示：肺癌中存在ER、PR表达，非小细胞肺癌ER/PR阳性率明显高于小细胞肺癌，而腺、鳞癌之间无显著差异；不同组织学分级ER/PR表达不同，ER/PR阳性率随分级增高而减低，即高分化者ER/PR趋于阳性，低分化者ER/PR趋于阴性，ER/PR含量在一定程度上反映肺癌的分化程度。
肿瘤细胞DNA非整倍体是恶性肿瘤的特征性标志之一[6]，测量和分析细胞核DNA倍体水平对恶性肿瘤的病理诊断、恶性程度判定、疗效评价、预测预后具有重要作用，本研究采用流式细胞术测量和分析细胞学样品单个完整细胞的DNA倍体水平，发现只有肿瘤细胞中存在有异倍体(77.5%)，同时发现ER阳性者DI值较低，两者有差异性。
, 百拇医药
肺癌的治疗包括手术、化疗、放疗、免疫治疗等，但疗效均不理想，总的5年生存率为10%，因此有必要寻求新的治疗方法。近年来，人们根据ER/PR测定结果，应用激素治疗乳腺癌、肝癌、胃癌等已取得一定的效果，同时，Kahioneini研究发现DNA倍体水平对激素受体阳性患者的预后有关键的影响。因此我们认为对肺癌细胞作ER、PR及DNA含量化疗的双重估计，将有助于对内分泌治疗方案的选择及预后的评估，这仍在进一步研究之中。
[基金项目]铁道部卫生司基金资助项目(J97TW77)
[作者简介]彭爱梅(1969-)，女，安徽天长人，上海铁道大学附属铁路医院主治医师。
[参考文献]
[1] Weisz A.Rosales R. Identification of an estrogen element upstream of the human c-fos gene that binds the estrogen receptor and the AP-1 transcription factor[J].Nucleic Acids Res,1990,18:5097-106.
, http://www.100md.com
[2] Webb D K,Moulton B C,Khan S A,et al. Estrogen induced expression of the C-Fun proto-oncogene in the immature and mature rat uterus[J].Biochem Biophys Res Commun，1990，168(2):721-6.
[3] Allred D C.Should immunohistochemical examination replace biochemical hormone receptor assays in breast cancer?[J].Am J Clin Pathol，1993，99:1-2.
[4] 藏福旺，孙秀威，蓝毓滨，等.雌、孕激素受体检测对57例女性肺癌的临床病理研究[J].中华肿瘤杂志，1993,15(6):434-6.
[5] 杨梅怀,张岩峰,潘女 是华.女性肺癌患者雌激素受体检测的研究[J].中华结核和呼吸杂志，1992，15(3):138-9.
[6] Viren M M,Ojala A T,Katajn V V, et al.Flow cytometric analysis of tumor DNA profile related to response to treatment and survival in small-cell-lung cancer[J].Med Oncol，1997，14(1):35-9.
[收稿日期]1999.10.26, http://www.100md.com