纤维素酶在黄连提取工艺中的应用
作者:马桔云 赵晶岩 姜颖 于喜水
单位:马桔云 于喜水 赵晶岩(黑龙江省医药工业研究所,哈尔滨 150040);颖(黑龙江完达山制药厂)
关键词:纤维素酶;酶解;盐酸小檗碱
中草药000213 摘 要 用黄连提取小檗碱之前,经纤维素酶进行酶解,可以提高小檗碱的收率,从而考察是否可将纤维素酶用于其它中药材的提取中,达到提高有效成分收率的目的。
近年来,纤维素酶在国外各个领域得到广泛应用,例如:食品工业,饮料工业,制取各种糖类以及提取天然产物等。然而我国的工业化用酶目前仍不普遍。大部分的中药材的细胞壁是由纤维素构成的,植物的有效成分往往被包裹在细胞壁内;纤维素则是由β-D-葡萄糖以1,4-β葡萄糖苷键连接,用纤维素酶酶解可以破坏β-D-葡萄糖键,使植物细胞壁破坏,有利于对有效成分的提取。根据这个原理,我们选用黄连提取小檗碱,对其加酶组和未加酶组进行对有效成分小檗碱提取的影响。
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1 实验材料和药品
纤维素酶粗品(活力单位2 000 U/g)海林万力达集团公司提供;盐酸小檗碱对照品中国药品生物制品检定所提供;黄连为黑龙江省药材站购进,经黑龙江省医药工业研究所生药鉴定室王有志副主任药师鉴定为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.的根茎;日本岛津CS-930双波长薄层扫描仪。
2 实验方法与结果
2.1 黄连中小檗碱提取工艺[1]:黄连粗粉50 g(酶解)
置渗漉筒中
渗漉液
滤液
干燥粗品 
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图1 层析图
2.2 黄连中小檗碱的酶提取工艺:此工艺比原工艺多了一步酶解实验,即每克生药10 U的量(0.25 g)加入纤维素酶,充分搅拌,其它工艺同原工艺2.1。
2.3 薄层层析:将加酶粗提取物甲醇溶液(1),未加酶粗提物甲醇溶液(2),盐酸小檗碱甲醇溶液(3),于硅胶G薄层板上展开,取出,晾干,紫外灯下观察比较。
展开剂:正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2),展距10 cm。层析结果见图1。
2.4 收率与提取结果的比较:对不同工艺提取物进行含量测定[2],结果见表1。
表1 加酶与未加酶提取小檗碱含量(%)
加酶法
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未加酶法
P
Ⅰ
3.633
2.107
Ⅱ
3.663
2.079<
单位:马桔云 于喜水 赵晶岩(黑龙江省医药工业研究所,哈尔滨 150040);颖(黑龙江完达山制药厂)
关键词:纤维素酶;酶解;盐酸小檗碱
中草药000213 摘 要 用黄连提取小檗碱之前,经纤维素酶进行酶解,可以提高小檗碱的收率,从而考察是否可将纤维素酶用于其它中药材的提取中,达到提高有效成分收率的目的。
近年来,纤维素酶在国外各个领域得到广泛应用,例如:食品工业,饮料工业,制取各种糖类以及提取天然产物等。然而我国的工业化用酶目前仍不普遍。大部分的中药材的细胞壁是由纤维素构成的,植物的有效成分往往被包裹在细胞壁内;纤维素则是由β-D-葡萄糖以1,4-β葡萄糖苷键连接,用纤维素酶酶解可以破坏β-D-葡萄糖键,使植物细胞壁破坏,有利于对有效成分的提取。根据这个原理,我们选用黄连提取小檗碱,对其加酶组和未加酶组进行对有效成分小檗碱提取的影响。
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1 实验材料和药品
纤维素酶粗品(活力单位2 000 U/g)海林万力达集团公司提供;盐酸小檗碱对照品中国药品生物制品检定所提供;黄连为黑龙江省药材站购进,经黑龙江省医药工业研究所生药鉴定室王有志副主任药师鉴定为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.的根茎;日本岛津CS-930双波长薄层扫描仪。
2 实验方法与结果
2.1 黄连中小檗碱提取工艺[1]:黄连粗粉50 g(酶解)
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图1 层析图
2.2 黄连中小檗碱的酶提取工艺:此工艺比原工艺多了一步酶解实验,即每克生药10 U的量(0.25 g)加入纤维素酶,充分搅拌,其它工艺同原工艺2.1。
2.3 薄层层析:将加酶粗提取物甲醇溶液(1),未加酶粗提物甲醇溶液(2),盐酸小檗碱甲醇溶液(3),于硅胶G薄层板上展开,取出,晾干,紫外灯下观察比较。
展开剂:正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2),展距10 cm。层析结果见图1。
2.4 收率与提取结果的比较:对不同工艺提取物进行含量测定[2],结果见表1。
表1 加酶与未加酶提取小檗碱含量(%)
加酶法
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未加酶法
P
Ⅰ
3.633
2.107
Ⅱ
3.663
2.079<