肉桂油气相色谱与气质联用分析
作者：李玲玲 袁文杰
单位：李玲玲 袁文杰(厦门市药品检验所 厦门 361012)
关键词：肉桂油；桂皮醛；气相色谱法；气质联用
药物分析杂志000216 摘要 目的：建立肉桂油中桂皮醛的含量测定方法和鉴定挥发性化学成分。方法：气相色谱法，3 mm×4 m不锈钢柱，10%PEG-20 M为固定液，Chromosorb WAW 60～80目担体，FID检测器，柱温190 ℃；气质联用，以HP-5毛细管柱，柱温起始120 ℃保持5 min后5 ℃.min-1升温至150 ℃保持7 min，检测质荷比范围10～425。结果：桂皮醛在2～10 mg.mL-1范围内具良好线性关系，平均回收率为98.3%～101.6%，RSD≤1.3%，气质联用鉴定了39种化合物。结论：方法简便，快速，准确，可有效排除其它成分的干扰。
, 百拇医药
Cinnamon Oil Analysis by GC and GC/MS
Li Lingling and Yuan Wenjie
(Xiamen Institute for Drug Control,Xiamen 361012)
Abstract Objective：GC method was established for the determination of cinnamic aldehyde in the cinnamon oil and GC-MS method used to identify the volatile compositions in this article.Methods:The GC method using chromosorb WAW with 10% PEG-20M as the stationary phase,and the column temperature was 190 ℃.Hydrogen flame ionization detector was specified.GC/MS condition:using programmed temperature gas chromatography [initial temperature was 120 ℃ maintaining 5 min,and than raising the temperature(5 ℃*min-1)to 150 ℃ for 7 min],mass-to-electric charge ratio was 10 to 425. Results:The calibration curve was linear within the range of 2～10 mg.mL-1 of cinnamic aldehydl.The results show that the recoveries were 98.3%～101.6% and RSD≤1.3% respectively,and cinnamic aldehyde in cinnamon oil can be determinated accurately.Conclusion:The method is simple,accurate,sensitive and anti-interference and GC/MS identified 39 different compositions in cinnamon oil.
, 百拇医药
Key words cinnamon oil,cinnamic aldehyde,GC,GC/MS
肉桂油是樟科植物肉桂(Cinnamomum cassia Presl)的干燥枝、叶经水蒸气蒸馏得到的挥发油，主要成分为桂皮醛(Cinnamic aldehyde)。现行质量标准中国药典(1995年版)[1]采用加入过量的亚硫酸氢钠，桂皮醛与亚硫酸氢钠形成白色沉淀物，该沉淀物溶于水层而与油层分离，读取油层体积计算含量，方法简单，但周期长，误差大，且当样品中混有其它醛类时，使用该法测得的结果偏高。本文采用气相色谱法测定其含量，方法简单、快速，可排除其它杂质的干扰，本文还应用气质联用对肉桂油中挥发性成分进行鉴定。
1 仪器与试药
日本Shimadzu GC-17A气相色谱仪；C-R6A数据处理机；美国HP 5890气相色谱仪；HP-MS检测器；NBS75K.质谱数据库。无水乙醇(AR)；桂皮醛对照品(中国药品生物制品检定所提供)；肉桂油(市售，产地广西)。
, 百拇医药
2 溶液制备
2.1 对照品溶液的配制 精密称取桂皮醛对照品约0.1 g置25 mL容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度。
2.2 样品溶液的配制 精密称定样品约0.05 g置10 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
3 实验条件及其考察
3.1 色谱条件
3.1.1 填充柱气相色谱条件 4 mm×3 m不锈钢柱，10%PEG-20M固定液，Chromosorb WAW 60～80目担体，FID检测器，柱温190 ℃，检测器温度230 ℃，载气：氮气60 mL.min-1，氢气、空气压力：50 kPa。
3.1.2 气质联用系统条件 HP-5(5%苯取代甲基硅酮)毛细管柱(0.25 mm×30 m)，载气：氦气，分流比40∶1，流量1.0 mL.min-1，柱温：起始120 ℃保持5 min后以5 ℃.min-1升温至150 ℃保持7 min,检测质荷比范围10～425，离子源温度300 ℃，倍增电压1 500 eV。
, 百拇医药
3.2 线性关系考察 精密称取桂皮醛对照品0.5 g置25 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度作对照品储备液，分别精密量取1，2，3，4，5 mL于10 mL量瓶，加无水乙醇稀释至刻度，分别吸取3 μL，注入气相色谱仪中，记录色谱，以样品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，作回归曲线，回归方程(n=3)为：
Y=3.0×104X-5.3×102 r=0.999 9
桂皮醛在2～10 mg.mL-1范围内具良好的线性关系。
3.3 稳定性试验 精密吸取样品溶液在0，1，2，4，6，10 h进样，结果峰面积RSD为1.29%，表明样品在10 h内稳定。
3.4 重现性试验 取同一批样品，按样品测定法依法测定8次，结果平均含量为79.7%，RSD为0.88%。
, 百拇医药
3.5 加样回收率试验 分别精密称取已测定含量的同一批号肉桂油样品6份，每份约0.03 g，精密加入桂皮醛对照品各约0.03 g于10 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，分别吸取3 μL注入气相色谱仪中，记录测定色谱，每份样品测定3次，结果加样回收率为98.3%～101.6%，最大RSD为1.3%。
3.6 样品测定结果 分别吸取对照品溶液和供试品溶液3 μL注入气相色谱仪中，记录色谱结果，计算；另取同批样品10 mL，按中国药典1995年版方法测定，计算。结果见表1，色谱图见图1。
表1 样品测定结果 批号
气相色谱法(n=4)
药典法
含量/%
RSD/%
, http://www.100md.com
含量/%
940607
80.8
1.34
89.3
940621
80.3
1.06
89.1
950210
75.0
0.83
89.3
, 百拇医药
950315
79.6
1.27
89.1
951006
78.9
0.91
90.2
807842
77.0
1.56
84.2
807832
, 百拇医药
79.9
0.00
88.0
807846
53.4
1.98
78.6
980510
80.0
0.88
79.6
980520
80.9
, http://www.100md.com
1.22
90.0
图1 桂皮醛对照品(A)与肉桂油(B)气相色谱图
1.桂皮醛
3.7 气质联用分析 取精油0.2 μL，按气质联用条件直接进样，结果见表2，总离子流图见图2。在上述条件下，从肉桂油中分得41个成分，鉴定了39个成分，占全精油的95.1%。
表2 肉桂油挥发油化学成分 编号
保留时间/min
成 分
归一化含量/%
, 百拇医药
1
1.71
苯乙烯(Styrene)
0.07
2
1.98
苯甲醛(Benzaldehyde)
0.03
3
2.03
伞花烃(Cymene)
0.98
4
, http://www.100md.com
2.36
苯甲醇(Benzyl Alcohol)
0.02
5
2.46
2-羟基苯甲醛(Benzaldehyde,2-hydroxy)
1.01
6
2.47
苯乙醛(Benzeneacetaldehyde)
0.34
7
, 百拇医药
2.65
甲酸苯甲酯(Formic acid,phenylmethyl ester)
0.08
8
2.67
苯乙酮(Acetophenone)
0.06
9
3.09
苯乙醇(Phenylethyl alcohol)
0.14
, http://www.100md.com 10
3.62
苯丙醛(Benzenepropanal)
0.09
11
3.73
薄荷醇(Menthol)
0.10
12
3.82
甲酸苯乙酯(Acetic acid,2-phenylethyl ester)
0.15
, 百拇医药
13
3.85
萜品烯醇-4(Terpine-4-ol)
0.09
14
4.23
水杨酸甲酯(Methyl salicylate)
6.17
15
4.54
2-甲基苯并呋喃(Benzofuran,2-methyl)
0.13
, http://www.100md.com
16
4.59
2-苯丙醛(2-Phenylpropanal)
0.05
17
4.61
苯亚甲基苯甲醛(Benzylidenemalonaldehyde)
0.12
18
5.02
2-甲氧基苯甲醛(Benzaldehyde,2-methoxy)
, 百拇医药
0.93
19
5.22
乙酸苯乙酯(Acetic acid,2-phenylethyl ester)
0.09
20
6.28
肉桂醛(Cinnamaldehyde)
67.21
21
7.08
肉桂醇(Cinnamyl alcohol)
, http://www.100md.com
1.02
22
7.15
苯丙醛(Benzenepropanal)
0.09
23
8.05
丁香酚(Eugenol)
0.99
24
8.22
咕巴烯(Copaene)
, 百拇医药
0.23
25
8.32
α-荜澄茄烯(α-Cubebene)
0.11
26
9.04
香草醛(Vanillin)
0.30
27
9.37
石竹烯(Caryophyllene)
, 百拇医药
5.58
28
10.05
苯并呋喃(Benzofuran)
0.34
29
10.10
乙酸肉桂酯(2-Propen-1-ol,3-phenyl-,acetate)
3.47
30
10.55
肉桂酸乙酯(2-Propenoic acid,3-phenyl-,ethyl ester)
, 百拇医药
0.27
31
10.67
β-荜澄茄烯(β-Cubebene)
0.07
32
11.03
肉桂酸(2-Propenoic acid,3-phenyl-)
0.23
33
11.64
γ-杜松烯(γ-Cadinene)
, http://www.100md.com
0.07
34
11.87
δ-杜松烯(δ-Cadinene)
0.05
35
12.40
2-甲氧基肉桂醛[2-Propenal,3-(2-methoxyphenyl)-]
7.40
36
13.16
橙花叔醇[cis-(+)-Nerolidol]
, http://www.100md.com
0.25
37
13.91
氧化石竹烯(Caryophyllene oxide)
0.50
38
15.19
9氢-芴醇-9(9H-Fluoren-9-ol)
0.06
39
15.93
金刚烷(Adamantane)
, 百拇医药
0.22
图2 肉桂油GC/MS总离子流图
峰号同表1的编号
4 结果与讨论
由气质联用分析结果可知肉桂油中含有苯甲醛、香草醛、2-甲氧基肉桂醛等醛类，所有的醛类和甲基酮及环酮均与亚硫酸氢钠发生反应[2]，引起药典法含量测定结果偏高。
桂皮醛对照品较不稳定，含量测定用新开封的对照品，对照品溶液应新鲜配制。
参考文献
1，中国药典.1995.一部：112
2，沈阳药学院主编.有机化学.北京：人民卫生出版社，1981.158
(本文于1999年3月22日收到), http://www.100md.com
单位：李玲玲 袁文杰(厦门市药品检验所 厦门 361012)
关键词：肉桂油；桂皮醛；气相色谱法；气质联用
药物分析杂志000216 摘要 目的：建立肉桂油中桂皮醛的含量测定方法和鉴定挥发性化学成分。方法：气相色谱法，3 mm×4 m不锈钢柱，10%PEG-20 M为固定液，Chromosorb WAW 60～80目担体，FID检测器，柱温190 ℃；气质联用，以HP-5毛细管柱，柱温起始120 ℃保持5 min后5 ℃.min-1升温至150 ℃保持7 min，检测质荷比范围10～425。结果：桂皮醛在2～10 mg.mL-1范围内具良好线性关系，平均回收率为98.3%～101.6%，RSD≤1.3%，气质联用鉴定了39种化合物。结论：方法简便，快速，准确，可有效排除其它成分的干扰。
, 百拇医药
Cinnamon Oil Analysis by GC and GC/MS
Li Lingling and Yuan Wenjie
(Xiamen Institute for Drug Control,Xiamen 361012)
Abstract Objective：GC method was established for the determination of cinnamic aldehyde in the cinnamon oil and GC-MS method used to identify the volatile compositions in this article.Methods:The GC method using chromosorb WAW with 10% PEG-20M as the stationary phase,and the column temperature was 190 ℃.Hydrogen flame ionization detector was specified.GC/MS condition:using programmed temperature gas chromatography [initial temperature was 120 ℃ maintaining 5 min,and than raising the temperature(5 ℃*min-1)to 150 ℃ for 7 min],mass-to-electric charge ratio was 10 to 425. Results:The calibration curve was linear within the range of 2～10 mg.mL-1 of cinnamic aldehydl.The results show that the recoveries were 98.3%～101.6% and RSD≤1.3% respectively,and cinnamic aldehyde in cinnamon oil can be determinated accurately.Conclusion:The method is simple,accurate,sensitive and anti-interference and GC/MS identified 39 different compositions in cinnamon oil.
, 百拇医药
Key words cinnamon oil,cinnamic aldehyde,GC,GC/MS
肉桂油是樟科植物肉桂(Cinnamomum cassia Presl)的干燥枝、叶经水蒸气蒸馏得到的挥发油，主要成分为桂皮醛(Cinnamic aldehyde)。现行质量标准中国药典(1995年版)[1]采用加入过量的亚硫酸氢钠，桂皮醛与亚硫酸氢钠形成白色沉淀物，该沉淀物溶于水层而与油层分离，读取油层体积计算含量，方法简单，但周期长，误差大，且当样品中混有其它醛类时，使用该法测得的结果偏高。本文采用气相色谱法测定其含量，方法简单、快速，可排除其它杂质的干扰，本文还应用气质联用对肉桂油中挥发性成分进行鉴定。
1 仪器与试药
日本Shimadzu GC-17A气相色谱仪；C-R6A数据处理机；美国HP 5890气相色谱仪；HP-MS检测器；NBS75K.质谱数据库。无水乙醇(AR)；桂皮醛对照品(中国药品生物制品检定所提供)；肉桂油(市售，产地广西)。
, 百拇医药
2 溶液制备
2.1 对照品溶液的配制 精密称取桂皮醛对照品约0.1 g置25 mL容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度。
2.2 样品溶液的配制 精密称定样品约0.05 g置10 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
3 实验条件及其考察
3.1 色谱条件
3.1.1 填充柱气相色谱条件 4 mm×3 m不锈钢柱，10%PEG-20M固定液，Chromosorb WAW 60～80目担体，FID检测器，柱温190 ℃，检测器温度230 ℃，载气：氮气60 mL.min-1，氢气、空气压力：50 kPa。
3.1.2 气质联用系统条件 HP-5(5%苯取代甲基硅酮)毛细管柱(0.25 mm×30 m)，载气：氦气，分流比40∶1，流量1.0 mL.min-1，柱温：起始120 ℃保持5 min后以5 ℃.min-1升温至150 ℃保持7 min,检测质荷比范围10～425，离子源温度300 ℃，倍增电压1 500 eV。
, 百拇医药
3.2 线性关系考察 精密称取桂皮醛对照品0.5 g置25 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度作对照品储备液，分别精密量取1，2，3，4，5 mL于10 mL量瓶，加无水乙醇稀释至刻度，分别吸取3 μL，注入气相色谱仪中，记录色谱，以样品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，作回归曲线，回归方程(n=3)为：
Y=3.0×104X-5.3×102 r=0.999 9
桂皮醛在2～10 mg.mL-1范围内具良好的线性关系。
3.3 稳定性试验 精密吸取样品溶液在0，1，2，4，6，10 h进样，结果峰面积RSD为1.29%，表明样品在10 h内稳定。
3.4 重现性试验 取同一批样品，按样品测定法依法测定8次，结果平均含量为79.7%，RSD为0.88%。
, 百拇医药
3.5 加样回收率试验 分别精密称取已测定含量的同一批号肉桂油样品6份，每份约0.03 g，精密加入桂皮醛对照品各约0.03 g于10 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，分别吸取3 μL注入气相色谱仪中，记录测定色谱，每份样品测定3次，结果加样回收率为98.3%～101.6%，最大RSD为1.3%。
3.6 样品测定结果 分别吸取对照品溶液和供试品溶液3 μL注入气相色谱仪中，记录色谱结果，计算；另取同批样品10 mL，按中国药典1995年版方法测定，计算。结果见表1，色谱图见图1。
表1 样品测定结果 批号
气相色谱法(n=4)
药典法
含量/%
RSD/%
, http://www.100md.com
含量/%
940607
80.8
1.34
89.3
940621
80.3
1.06
89.1
950210
75.0
0.83
89.3
, 百拇医药
950315
79.6
1.27
89.1
951006
78.9
0.91
90.2
807842
77.0
1.56
84.2
807832
, 百拇医药
79.9
0.00
88.0
807846
53.4
1.98
78.6
980510
80.0
0.88
79.6
980520
80.9
, http://www.100md.com
1.22
90.0
图1 桂皮醛对照品(A)与肉桂油(B)气相色谱图
1.桂皮醛
3.7 气质联用分析 取精油0.2 μL，按气质联用条件直接进样，结果见表2，总离子流图见图2。在上述条件下，从肉桂油中分得41个成分，鉴定了39个成分，占全精油的95.1%。
表2 肉桂油挥发油化学成分 编号
保留时间/min
成 分
归一化含量/%
, 百拇医药
1
1.71
苯乙烯(Styrene)
0.07
2
1.98
苯甲醛(Benzaldehyde)
0.03
3
2.03
伞花烃(Cymene)
0.98
4
, http://www.100md.com
2.36
苯甲醇(Benzyl Alcohol)
0.02
5
2.46
2-羟基苯甲醛(Benzaldehyde,2-hydroxy)
1.01
6
2.47
苯乙醛(Benzeneacetaldehyde)
0.34
7
, 百拇医药
2.65
甲酸苯甲酯(Formic acid,phenylmethyl ester)
0.08
8
2.67
苯乙酮(Acetophenone)
0.06
9
3.09
苯乙醇(Phenylethyl alcohol)
0.14
, http://www.100md.com 10
3.62
苯丙醛(Benzenepropanal)
0.09
11
3.73
薄荷醇(Menthol)
0.10
12
3.82
甲酸苯乙酯(Acetic acid,2-phenylethyl ester)
0.15
, 百拇医药
13
3.85
萜品烯醇-4(Terpine-4-ol)
0.09
14
4.23
水杨酸甲酯(Methyl salicylate)
6.17
15
4.54
2-甲基苯并呋喃(Benzofuran,2-methyl)
0.13
, http://www.100md.com
16
4.59
2-苯丙醛(2-Phenylpropanal)
0.05
17
4.61
苯亚甲基苯甲醛(Benzylidenemalonaldehyde)
0.12
18
5.02
2-甲氧基苯甲醛(Benzaldehyde,2-methoxy)
, 百拇医药
0.93
19
5.22
乙酸苯乙酯(Acetic acid,2-phenylethyl ester)
0.09
20
6.28
肉桂醛(Cinnamaldehyde)
67.21
21
7.08
肉桂醇(Cinnamyl alcohol)
, http://www.100md.com
1.02
22
7.15
苯丙醛(Benzenepropanal)
0.09
23
8.05
丁香酚(Eugenol)
0.99
24
8.22
咕巴烯(Copaene)
, 百拇医药
0.23
25
8.32
α-荜澄茄烯(α-Cubebene)
0.11
26
9.04
香草醛(Vanillin)
0.30
27
9.37
石竹烯(Caryophyllene)
, 百拇医药
5.58
28
10.05
苯并呋喃(Benzofuran)
0.34
29
10.10
乙酸肉桂酯(2-Propen-1-ol,3-phenyl-,acetate)
3.47
30
10.55
肉桂酸乙酯(2-Propenoic acid,3-phenyl-,ethyl ester)
, 百拇医药
0.27
31
10.67
β-荜澄茄烯(β-Cubebene)
0.07
32
11.03
肉桂酸(2-Propenoic acid,3-phenyl-)
0.23
33
11.64
γ-杜松烯(γ-Cadinene)
, http://www.100md.com
0.07
34
11.87
δ-杜松烯(δ-Cadinene)
0.05
35
12.40
2-甲氧基肉桂醛[2-Propenal,3-(2-methoxyphenyl)-]
7.40
36
13.16
橙花叔醇[cis-(+)-Nerolidol]
, http://www.100md.com
0.25
37
13.91
氧化石竹烯(Caryophyllene oxide)
0.50
38
15.19
9氢-芴醇-9(9H-Fluoren-9-ol)
0.06
39
15.93
金刚烷(Adamantane)
, 百拇医药
0.22
图2 肉桂油GC/MS总离子流图
峰号同表1的编号
4 结果与讨论
由气质联用分析结果可知肉桂油中含有苯甲醛、香草醛、2-甲氧基肉桂醛等醛类，所有的醛类和甲基酮及环酮均与亚硫酸氢钠发生反应[2]，引起药典法含量测定结果偏高。
桂皮醛对照品较不稳定，含量测定用新开封的对照品，对照品溶液应新鲜配制。
参考文献
1，中国药典.1995.一部：112
2，沈阳药学院主编.有机化学.北京：人民卫生出版社，1981.158
(本文于1999年3月22日收到), http://www.100md.com
参见：首页 > 中医药 > 中药专业 > 中草药汇编 > 中药大典 > 皮类 > 肉桂