咳息定胶囊质量标准研究
作者：刘爱芳 傅强 王萍娅 郑晓辉 常春 陈国清
单位：刘爱芳 傅强 王萍娅 郑晓辉 常春 陈国清(西安医科大学药学院 西安 710061)
关键词：咳息定胶囊；鉴别；黄芩苷；HPLC
西北药学杂志000205
摘要 建立了TLC法对咳息定胶囊中黄芩、牛蒡子、甘草进行鉴别；采用 反相HPLC法测定其君药主要有效成分黄芩苷的含量；甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.2)为流动 相，检测波长280nm，黄芩苷保留时间18min，平均回收率为95.2%(RSD＝2.82%)。
咳息定胶囊是在传统方剂的基础上由黄芩、牛蒡子、甘草、桔梗制成 ，具有疏风清热、止咳化痰作用。笔者对其质量标准进行了研究。
, http://www.100md.com 1 仪器与试药
1.1 仪器 SPD-M10Avp型液相色谱仪，SPD-M10Avp型 检测器，CLASS-VP工作站，LC-10ATvp溶剂输送泵(日本岛津)。
1.2 试药 黄芩苷，牛蒡子苷，甘草次酸对照品，牛蒡 子对照药材(中国药品生物制品检定所)；咳息定胶囊(0.3g，相当于生药2.4g。西安康得 制药公司)；甲醇(色谱纯，美国Fisher公司)。
2 方法与结果
2.1 定性鉴别
2.1.1 黄芩苷〔1〕 取试品10粒，倾出内容物，加70%乙醇30m l，置水浴中加热回流3h，滤至50ml量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤残渣，滤入同一量瓶中 ，加70%乙醇稀释至刻度。量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液。 另取黄芩苷对照品加甲醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。吸取二溶液各10μl，点于 同一硅胶G板上，以醋酸乙酯-丁酮-醋酸-水(10∶7∶5∶3)上层溶液展开，晾干，喷以2% 三氯化铁乙醇溶液，105℃烘10min。黄芩苷Rf值为0.48。随行不加黄芩的试样，无 此斑点。
, 百拇医药
2.1.2 牛蒡子〔2〕 取试品10粒，倾出内容物，加乙醇20ml， 加热回流1h，滤过；滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，过滤，滤液作为供试品溶液。另取 牛蒡子对照药材1g，同法制成对照溶液。再取牛蒡子苷对照品加乙醇制成1mg/ml溶液作对照 品溶液。吸取3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G板上，以氯仿-甲酸-水(40∶10∶1)展 开，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点清晰。Rf值为0.52。随行不加牛蒡子的试样，无此斑点。
2.1.3 甘草〔3〕 取试品10粒，倾出内容物，加浓盐酸1ml与 氯仿30ml，回流1h；滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作供试品溶液。另取甘草次 酸加无水乙醇制成1mg/ml溶液作对照品溶液。吸取二溶液各5μl，分别点于同一硅胶G板上 ，以石油醚(30℃～60℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(10∶20∶7∶0.5)展开，晾干，喷以10% 磷钼酸乙醇溶液，105℃烘至斑点清晰。试品在甘草次酸相应位置上出现斑点，Rf值为0. 42。随行不加甘草的试样，无此斑点。
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2.2 黄芩苷含量测定〔4〕
2.2.1 色谱条件下系统适用性实验 十八烷基硅烷键合硅胶(Hypersil, 5μm，150mm×4.6mm)；甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.2)为流动相；检测波长280nm，AUFS 0.05；纸速4mm/min；理论塔板数按黄芩苷峰计算不低于2500。试品中黄芩苷分离良好， 保留时间18min，空白样品无干扰，见图1、图2。
图1 黄芩苷对照品HP LC三维图谱 图2 咳息定样 品HPLC三维图谱
2.2.2 线性关系 分别吸取对照品溶液，1，2，3，5，7，10，12μl， 进样，以进样量对峰面积回归得方程为：Y×10-3＝2.230X+0.029，r＝0.999 4。连续进样5次，峰面积的RSD＝2.17%。回收率试验结果为95.21%，RSD＝2. 82%。
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2.2.3 样品含量测定 吸取2.1.1项下供试品溶液、对照品溶液各10 μl进样，在上述色谱条件下测定。用外标峰面积法计算。结果3批咳息定胶囊分别含黄芩苷 1.71%，1.65%，1.72%。
3 讨论
黄芩苷含量测定与文献方法相比，降低流动相中甲醇比例，保留时间延长，可排除共存组分 的干扰。三维图谱显示HPLC峰为黄芩苷单一组分。流动相中加入磷酸，与文献中加入醋酸的结果〔 4〕一致。
参考文献
〔1〕中国药典1995版.一部.1995：270
〔2〕康廷国.中成药薄层色谱鉴别.北京：人民卫生出 版社，1995：77
〔3〕中国药典1995版.一部.1995：71
〔4〕王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.北京： 中国医药科技出版社，1994：337
(收稿：1999-08-26), http://www.100md.com
单位：刘爱芳 傅强 王萍娅 郑晓辉 常春 陈国清(西安医科大学药学院 西安 710061)
关键词：咳息定胶囊；鉴别；黄芩苷；HPLC
西北药学杂志000205
摘要 建立了TLC法对咳息定胶囊中黄芩、牛蒡子、甘草进行鉴别；采用 反相HPLC法测定其君药主要有效成分黄芩苷的含量；甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.2)为流动 相，检测波长280nm，黄芩苷保留时间18min，平均回收率为95.2%(RSD＝2.82%)。
咳息定胶囊是在传统方剂的基础上由黄芩、牛蒡子、甘草、桔梗制成 ，具有疏风清热、止咳化痰作用。笔者对其质量标准进行了研究。
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1.1 仪器 SPD-M10Avp型液相色谱仪，SPD-M10Avp型 检测器，CLASS-VP工作站，LC-10ATvp溶剂输送泵(日本岛津)。
1.2 试药 黄芩苷，牛蒡子苷，甘草次酸对照品，牛蒡 子对照药材(中国药品生物制品检定所)；咳息定胶囊(0.3g，相当于生药2.4g。西安康得 制药公司)；甲醇(色谱纯，美国Fisher公司)。
2 方法与结果
2.1 定性鉴别
2.1.1 黄芩苷〔1〕 取试品10粒，倾出内容物，加70%乙醇30m l，置水浴中加热回流3h，滤至50ml量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤残渣，滤入同一量瓶中 ，加70%乙醇稀释至刻度。量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液。 另取黄芩苷对照品加甲醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。吸取二溶液各10μl，点于 同一硅胶G板上，以醋酸乙酯-丁酮-醋酸-水(10∶7∶5∶3)上层溶液展开，晾干，喷以2% 三氯化铁乙醇溶液，105℃烘10min。黄芩苷Rf值为0.48。随行不加黄芩的试样，无 此斑点。
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2.1.2 牛蒡子〔2〕 取试品10粒，倾出内容物，加乙醇20ml， 加热回流1h，滤过；滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，过滤，滤液作为供试品溶液。另取 牛蒡子对照药材1g，同法制成对照溶液。再取牛蒡子苷对照品加乙醇制成1mg/ml溶液作对照 品溶液。吸取3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G板上，以氯仿-甲酸-水(40∶10∶1)展 开，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点清晰。Rf值为0.52。随行不加牛蒡子的试样，无此斑点。
2.1.3 甘草〔3〕 取试品10粒，倾出内容物，加浓盐酸1ml与 氯仿30ml，回流1h；滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作供试品溶液。另取甘草次 酸加无水乙醇制成1mg/ml溶液作对照品溶液。吸取二溶液各5μl，分别点于同一硅胶G板上 ，以石油醚(30℃～60℃)-苯-醋酸乙酯-冰醋酸(10∶20∶7∶0.5)展开，晾干，喷以10% 磷钼酸乙醇溶液，105℃烘至斑点清晰。试品在甘草次酸相应位置上出现斑点，Rf值为0. 42。随行不加甘草的试样，无此斑点。
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2.2 黄芩苷含量测定〔4〕
2.2.1 色谱条件下系统适用性实验 十八烷基硅烷键合硅胶(Hypersil, 5μm，150mm×4.6mm)；甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.2)为流动相；检测波长280nm，AUFS 0.05；纸速4mm/min；理论塔板数按黄芩苷峰计算不低于2500。试品中黄芩苷分离良好， 保留时间18min，空白样品无干扰，见图1、图2。
图1 黄芩苷对照品HP LC三维图谱 图2 咳息定样 品HPLC三维图谱
2.2.2 线性关系 分别吸取对照品溶液，1，2，3，5，7，10，12μl， 进样，以进样量对峰面积回归得方程为：Y×10-3＝2.230X+0.029，r＝0.999 4。连续进样5次，峰面积的RSD＝2.17%。回收率试验结果为95.21%，RSD＝2. 82%。
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2.2.3 样品含量测定 吸取2.1.1项下供试品溶液、对照品溶液各10 μl进样，在上述色谱条件下测定。用外标峰面积法计算。结果3批咳息定胶囊分别含黄芩苷 1.71%，1.65%，1.72%。
3 讨论
黄芩苷含量测定与文献方法相比，降低流动相中甲醇比例，保留时间延长，可排除共存组分 的干扰。三维图谱显示HPLC峰为黄芩苷单一组分。流动相中加入磷酸，与文献中加入醋酸的结果〔 4〕一致。
参考文献
〔1〕中国药典1995版.一部.1995：270
〔2〕康廷国.中成药薄层色谱鉴别.北京：人民卫生出 版社，1995：77
〔3〕中国药典1995版.一部.1995：71
〔4〕王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.北京： 中国医药科技出版社，1994：337
(收稿：1999-08-26), http://www.100md.com