黄芩苷的物化常数测定
作者：王弘 陈济民 张清民
单位：沈阳药科大学药学系,沈阳 110015
关键词：黄芩苷；溶解度；油/水分配系数；pKa值
沈阳药科大学学报000209 摘 要：采用紫外分光光度法测定了黄芩苷在不同溶媒中的溶解度、油/水分配系数、pKa值.结果表明：黄芩苷在甲醇、乙醇中溶解度分别为1569μg/mL和1458μg/mL，较其它溶媒高；在酸性条件下的油/水分配系数较大,pKa值为5.047.
分类号：R913
Determination of the Physical Chemistry Constants of Baicalin
Wang Hong Chen Jimin Zhang Qingmin
, 百拇医药
(Department of Pharmacy,Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110015)
Abstract：The solubility in different solvents, the oil/water detached coefficient and pKa value of baicalin were determined by UV spectrophotometry for the study of its absorption in vivo. The results showed that the higher solubility values of baicalin were 1 569 μg/mL and 1 458 μg/mL in methanol and ethanol, while the oil/water detached coefficient was higher in acid solvent,the pKa value of baicalin was 5.047.
, 百拇医药
Key words：baicalin;solubility;oil/water detached coefficient;pKa value▲
1 在不同溶媒中溶解度的测定
黄芩苷在甲醇、乙醇中微溶、不溶于水.作者测定了黄芩苷在甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚、水、氯仿中的溶解度,从而为分析测定黄芩苷提供依据,有关在上述溶剂中黄芩苷的溶解度尚未见报道(此测定对其它黄酮类物化实验有参考意义).
1.1 材料与仪器
黄芩苷:深圳南方药厂提供;甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯、氯仿、正辛醇均为分析纯;721紫外可见分光光度计.
1.2 黄芩苷标准曲线制备〔1，2〕
, http://www.100md.com 精密称取黄芩苷10.0 mg,加少量甲醇溶解后,定量转移至100 mL容量瓶中,加甲醇摇匀后至刻度,即得100 μg/mL黄芩苷标准溶液.取黄芩苷标准液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0 mL，分别置于10 mL容量瓶中,加甲醇至刻度.配制每毫升含4、6、8、10、12、14、16、18、20 μg的样品9份.在UV分光光度计276 nm处,测定吸收度，见表1.实验数据经FX-200计算器回归处理后,直线方程为：
A=0.034C+0.060 3 (r=0.998 8).
A为吸收度(n=3);C为黄芩苷浓度(μg/mL).
Tab.1 Absorption at different concentrations C/μg.mL-1
, 百拇医药
4
6
8
10
12
14
16
18
20
A
0.188
0.302
0.331
0.366
, 百拇医药
0.440
0.584
0.621
0.653
0.768
0.187
0.301
0.331
0.366
0.440
0.583
0.621
0.653
, http://www.100md.com
0.768
0.188
0.302
0.332
0.366
0.441
0.583
0.621
0.653
0.768
1. 3 测定方法
称取黄芩苷精制品0.5 g 7份，分别置于50 mL磨口三角瓶中,再分别加入甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、水,盖好后,放入20 ℃恒温摇床中振荡8 h,饱和液静置1 h后,各吸收1.0 mL上清饱和液,置于10 mL容量瓶中,加甲醇稀释后,用分光光度计测定吸收度,由标准曲线计算黄芩苷在不同溶剂中溶解度.在甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、水中溶解度分别为1 569、1 458、79 341、166、122、160 μg/mL.
, http://www.100md.com
2 黄芩苷的油/水分配系数测定
作者通过测定不同pH值下黄芩苷的油/水分配系数(R),为进一步研究大鼠的胃、小肠吸收规律提供了依据.
取本品2.5 g 3份,分别置于50 mL容量瓶中,分别加入0.1 mol/L HC1、0.15 mol/L NaC1、 0.15 mol/L NaHCO3溶液20 mL,20℃下分别加入正辛醇20 mL;密塞,剧烈振摇30 min,静置分层,1 h后分别吸取上层(正辛醇)和下层水溶液,测定吸收度方法同上.
与吸收值对应的黄芩苷浓度在正辛醇相中分别为283.5、91.1、1 470.5 μg/mL;在水相中分别为164.4、1 088.2、79 125 μg/mL.同时计算出上述不同pH条件下黄芩苷的油/水分配系数分别为1.750、0.084、0.018.
, http://www.100md.com 3 黄芩苷pKa值的测定
酸类或碱类药物在溶液中部分解离,非解离部分脂溶性高易透过生物膜,而非解离部分的多少决定于该药物解离常数和溶媒的pH值.因此根据药物在生物膜两侧已知pH值溶媒中的浓度,可由公式计算pKa〔3〕.
R=[1+10(pH1-pKa)]/[1+10(pH2-pKa)].
3.1 材料与试剂
管状半透膜;黄芩苷溶液600 μg/mL;pH=6.8磷酸盐缓冲液;pH=5.8磷酸盐缓冲液.
3.2 测定方法
在一端扎紧的半透膜内,用移液管准确加入pH=5.8的磷酸盐缓冲液3 mL,然后把口扎紧,袋内保留少量空气,将两端结扎的半透膜袋置于10 mL pH=6.8磷酸盐缓冲液的广口瓶中.用袋两端线段调节袋内外液面,使保持同一水平,加黄芩苷(600 μg/mL)0.5 mL于袋外缓冲液中,放置于室温平衡60 h.测定袋内及袋外溶液中的药物浓度，见表2.
, 百拇医药
Tab.2 Concentration of baicalin inside and outside of the bag Buffer
Outside of the bag
(pH=6.8)
Inside of the bag
(pH=5.8)
6.486
9.366
6.933
6.870
Concentration
, 百拇医药
7.605
9.198
value
7.182
7.997
8.937
8.043
5.883
8.300
Mean
7.171
8.291
计算膜两侧溶媒中黄芩苷浓度之比为R=0.864 9,由公式得出黄芩苷pKa值为5.047.
, 百拇医药
4 结果与讨论
溶解度实验结果表明:黄芩苷在甲醇、乙醇中溶解度分别为1 569 μg/mL 和1 458 μg/mL，较其它溶媒高.
油/水分配系数实验表明:(1)随溶液pH值的增大,油/水分配系数降低.(2)从黄芩苷分子结构看,具有COOH基团,在酸性条件下呈分子状态;相对分子质量为446.37的黄芩苷在油相中分布较多,油/水分配系数较大.
黄芩苷pKa值的测定表明: 黄芩苷pKa值为5.047，显示黄芩苷为弱酸性药物.■
参考文献：
[1]江苏新医学院.中药大辞典.上海:上海人民出版社,1977.4145～4147
[2]毛凤斐,屠锡德,朱家璧，等.黄芩苷在人体内吸收的研究.南京药学院学报,1983,21(1):61～66
[3]徐叔云,卞如濂,陈修主编.药理学实验方法.北京:人民卫生出版社,1982.448～449
收稿日期：1999-07-09, 百拇医药
单位：沈阳药科大学药学系,沈阳 110015
关键词：黄芩苷；溶解度；油/水分配系数；pKa值
沈阳药科大学学报000209 摘 要：采用紫外分光光度法测定了黄芩苷在不同溶媒中的溶解度、油/水分配系数、pKa值.结果表明：黄芩苷在甲醇、乙醇中溶解度分别为1569μg/mL和1458μg/mL，较其它溶媒高；在酸性条件下的油/水分配系数较大,pKa值为5.047.
分类号：R913
Determination of the Physical Chemistry Constants of Baicalin
Wang Hong Chen Jimin Zhang Qingmin
, 百拇医药
(Department of Pharmacy,Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110015)
Abstract：The solubility in different solvents, the oil/water detached coefficient and pKa value of baicalin were determined by UV spectrophotometry for the study of its absorption in vivo. The results showed that the higher solubility values of baicalin were 1 569 μg/mL and 1 458 μg/mL in methanol and ethanol, while the oil/water detached coefficient was higher in acid solvent,the pKa value of baicalin was 5.047.
, 百拇医药
Key words：baicalin;solubility;oil/water detached coefficient;pKa value▲
1 在不同溶媒中溶解度的测定
黄芩苷在甲醇、乙醇中微溶、不溶于水.作者测定了黄芩苷在甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚、水、氯仿中的溶解度,从而为分析测定黄芩苷提供依据,有关在上述溶剂中黄芩苷的溶解度尚未见报道(此测定对其它黄酮类物化实验有参考意义).
1.1 材料与仪器
黄芩苷:深圳南方药厂提供;甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯、氯仿、正辛醇均为分析纯;721紫外可见分光光度计.
1.2 黄芩苷标准曲线制备〔1，2〕
, http://www.100md.com 精密称取黄芩苷10.0 mg,加少量甲醇溶解后,定量转移至100 mL容量瓶中,加甲醇摇匀后至刻度,即得100 μg/mL黄芩苷标准溶液.取黄芩苷标准液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0 mL，分别置于10 mL容量瓶中,加甲醇至刻度.配制每毫升含4、6、8、10、12、14、16、18、20 μg的样品9份.在UV分光光度计276 nm处,测定吸收度，见表1.实验数据经FX-200计算器回归处理后,直线方程为：
A=0.034C+0.060 3 (r=0.998 8).
A为吸收度(n=3);C为黄芩苷浓度(μg/mL).
Tab.1 Absorption at different concentrations C/μg.mL-1
, 百拇医药
4
6
8
10
12
14
16
18
20
A
0.188
0.302
0.331
0.366
, 百拇医药
0.440
0.584
0.621
0.653
0.768
0.187
0.301
0.331
0.366
0.440
0.583
0.621
0.653
, http://www.100md.com
0.768
0.188
0.302
0.332
0.366
0.441
0.583
0.621
0.653
0.768
1. 3 测定方法
称取黄芩苷精制品0.5 g 7份，分别置于50 mL磨口三角瓶中,再分别加入甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、水,盖好后,放入20 ℃恒温摇床中振荡8 h,饱和液静置1 h后,各吸收1.0 mL上清饱和液,置于10 mL容量瓶中,加甲醇稀释后,用分光光度计测定吸收度,由标准曲线计算黄芩苷在不同溶剂中溶解度.在甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、水中溶解度分别为1 569、1 458、79 341、166、122、160 μg/mL.
, http://www.100md.com
2 黄芩苷的油/水分配系数测定
作者通过测定不同pH值下黄芩苷的油/水分配系数(R),为进一步研究大鼠的胃、小肠吸收规律提供了依据.
取本品2.5 g 3份,分别置于50 mL容量瓶中,分别加入0.1 mol/L HC1、0.15 mol/L NaC1、 0.15 mol/L NaHCO3溶液20 mL,20℃下分别加入正辛醇20 mL;密塞,剧烈振摇30 min,静置分层,1 h后分别吸取上层(正辛醇)和下层水溶液,测定吸收度方法同上.
与吸收值对应的黄芩苷浓度在正辛醇相中分别为283.5、91.1、1 470.5 μg/mL;在水相中分别为164.4、1 088.2、79 125 μg/mL.同时计算出上述不同pH条件下黄芩苷的油/水分配系数分别为1.750、0.084、0.018.
, http://www.100md.com 3 黄芩苷pKa值的测定
酸类或碱类药物在溶液中部分解离,非解离部分脂溶性高易透过生物膜,而非解离部分的多少决定于该药物解离常数和溶媒的pH值.因此根据药物在生物膜两侧已知pH值溶媒中的浓度,可由公式计算pKa〔3〕.
R=[1+10(pH1-pKa)]/[1+10(pH2-pKa)].
3.1 材料与试剂
管状半透膜;黄芩苷溶液600 μg/mL;pH=6.8磷酸盐缓冲液;pH=5.8磷酸盐缓冲液.
3.2 测定方法
在一端扎紧的半透膜内,用移液管准确加入pH=5.8的磷酸盐缓冲液3 mL,然后把口扎紧,袋内保留少量空气,将两端结扎的半透膜袋置于10 mL pH=6.8磷酸盐缓冲液的广口瓶中.用袋两端线段调节袋内外液面,使保持同一水平,加黄芩苷(600 μg/mL)0.5 mL于袋外缓冲液中,放置于室温平衡60 h.测定袋内及袋外溶液中的药物浓度，见表2.
, 百拇医药
Tab.2 Concentration of baicalin inside and outside of the bag Buffer
Outside of the bag
(pH=6.8)
Inside of the bag
(pH=5.8)
6.486
9.366
6.933
6.870
Concentration
, 百拇医药
7.605
9.198
value
7.182
7.997
8.937
8.043
5.883
8.300
Mean
7.171
8.291
计算膜两侧溶媒中黄芩苷浓度之比为R=0.864 9,由公式得出黄芩苷pKa值为5.047.
, 百拇医药
4 结果与讨论
溶解度实验结果表明:黄芩苷在甲醇、乙醇中溶解度分别为1 569 μg/mL 和1 458 μg/mL，较其它溶媒高.
油/水分配系数实验表明:(1)随溶液pH值的增大,油/水分配系数降低.(2)从黄芩苷分子结构看,具有COOH基团,在酸性条件下呈分子状态;相对分子质量为446.37的黄芩苷在油相中分布较多,油/水分配系数较大.
黄芩苷pKa值的测定表明: 黄芩苷pKa值为5.047，显示黄芩苷为弱酸性药物.■
参考文献：
[1]江苏新医学院.中药大辞典.上海:上海人民出版社,1977.4145～4147
[2]毛凤斐,屠锡德,朱家璧，等.黄芩苷在人体内吸收的研究.南京药学院学报,1983,21(1):61～66
[3]徐叔云,卞如濂,陈修主编.药理学实验方法.北京:人民卫生出版社,1982.448～449
收稿日期：1999-07-09, 百拇医药
参见：首页 > 中医药 > 中药专业 > 中草药汇编 > 中药大典 > 根类 > 黄芩