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编号:10237202
幽门螺杆菌感染与增殖细胞核抗原及p53和p21蛋白表达的关系
http://www.100md.com 《广东医学》 2000年第2期
     作者:凌红 甘爱华 黄庆祖 刘集鸿

    单位:(广东省惠州市中心人民医院消化内科516001)

    关键词:

    广东医学000217 【摘要】 目的 探讨胃粘膜病变中幽门螺杆菌(Hp)感染与增殖细胞核抗原(PCNA)及ras 癌基因表达产物p21蛋白和突变型p53蛋白表达的关系。方法 采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶(SP)免疫组织化学染色方法及粘膜尿素酶试验、粘膜涂片染色检测30例慢性浅表性胃炎(CSG)、25例胃粘膜不全结肠型肠化生(ICM)、29例异型增生、37例胃腺癌活检标本。结果 ICM组、异型增生组和胃腺癌组的Hp 感染率明显高于CSG组,PCNA指数在ICM、异型增生及胃癌明显高于CSG,差异均有显著性。ICM及异型增生与胃癌比较差异也有非常显著性。rasp21及p53蛋白阳性表达率在CSG为0,在ICM及异型增生组的表达率明显低于胃癌组。其中胃癌、异型增生及ICM组中Hp阳性组的PCNA指数、rasp21及p53蛋白阳性表达率明显高于Hp阴性组,差异均有显著性。经根除Hp治疗后,PCNA指数在ICM及异型增生组中根除Hp组较未根除组明显下降。rasp21及p53蛋白阳性表达阴转率在Hp根除组较未根除组高。结论 Hp感染可使胃粘膜处于高增殖状态,并可能通过rasp癌基因的激活和p53抑癌基因的突变而致癌。根除Hp治疗可能干预这一进程。
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    【关键词】 幽门螺杆菌 增殖细胞核抗原 癌基因 癌前病变 胃肿瘤

    许多流行病学资料显示Hp感染与胃癌的发生密切相关。本研究探讨增殖细胞核抗原(PCNA)及ras原癌基因产物p21(rasp21)及p53癌基因产物突变型p53蛋白(p53)在各种胃粘膜病变中的阳性表达情况及其与Hp感染的关系。

    1 资料与方法

    1.1 资料来源 收集我院1995年12月至1998年12月诊治的121例胃镜活检组织资料,其中经病理证实的慢性浅表性胃炎(CSG)30例、胃粘膜不全结肠型肠化生(ICM,经粘液组织化学染色证实)25例、胃粘膜异型增生29例、胃腺癌37例。各类型活检标本(6块)取自胃窦部小弯及胃窦体交界处。Hp检测标本在胃癌取自癌旁,其余除胃窦外,还在胃体取2块。

    1.2 检测方法 标本除作尿素酶试验及粘膜涂片革兰染色外,其余用体积分数为10%的甲醛固定、常规石蜡包埋,连续切片,厚5 μm。分别作苏木素-伊红(HE)染色、高铁二胺/奥新蓝粘液组化染色、链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶(SP)免疫组化染色。rasp21和p53蛋白检测试剂购自福州迈新生物技术开发公司。按说明书操作。阳性结果用磷酸盐缓冲液取代一抗作空白对照,并用己知阳性的大肠癌标本切片作阳性对照。rasp21阳性结果表现为细胞浆染呈棕黄色。p53阳性结果表现为细胞核染呈棕黄色。鼠抗 PCNA单克隆抗体(1∶100)由DAKO公司提供。计算方法:每例标本在高倍镜下计数1 000个细胞中PCNA阳性细胞数。即PCNA指数=PCNA阳性细胞数/1 000个细胞,换算成百分比。
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    惠州市科委立项课题

    1.3 治疗方法 对Hp阳性的ICM及异型增生患者进行抗Hp治疗。给予奥美拉唑20 mg,1次/d,共6周,阿莫西林0.5 g及甲哨唑0.4 g,4次/d,共2周。于治疗结束后3个月复查胃镜并取材复查Hp及PCNA、rasp21、突变型p53蛋白。Hp根除标准:治疗结束后停药1个月以上胃镜复查,尿素酶试验、粘膜涂片染色二项Hp均为阴性。

    1.4 统计学方法 t检验。P<0.05为差异有显著性。

    2 结果

    2.1 各种胃粘膜组织类型的Hp感染率 121例应用尿素酶试验、粘膜涂片革兰染色,其中1项阳性计为阳性。结果ICM组、异型增生组及胃癌组的Hp感染率分别为60%(15/25),62%(18/29),57%(21/37),均比CSG组的33%(10/30)高(P<0.05)。
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    2.2 各种胃粘膜组织类型中PCNA指数及rasp21,p53蛋白阳性表达情况 见表1。

    2.3 各种胃粘膜组织类型中Hp感染与PCNA指数、rasp21及p53蛋白阳性表达的关系 见表2。

    表1 各种胃粘膜组织类型中PCNA及rasp21,p53蛋白阳性表达情况 组织类型

    例数

    PCNA指数

    (±s)%

    rasp21(+)

    例(%)

    p53(+)
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    例(%)

    CSG

    30

    16.1±3.8*

    0

    0

    ICM

    25

    23.1±6.7*

    8(32)**

    8(32)*

    异型增生
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    29

    35.9±6.1*

    13(45)**

    11(38)*

    胃癌

    37

    56.6±5.7

    22(60)

    26(70)

    与胃癌比较* P<0.01,**P<0.05表2 各种胃粘膜组织类型中Hp感染与PCNA,rasp21及p53蛋白阳性表达的关系 组织类型
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    Hp

    例数

    PCNA指数

    (±s)%

    rasp21(+)

    例(%)

    p53(+)

    例(%)

    ICM

    (+)

    15

    28.2±3.7*
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    7(47)**

    7(47)**

    (-)

    10

    18.3±3.6

    1(10)

    1(10)

    异型增生

    (+)

    18

    38.8±4.7*

    11 (61)*
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    10(56)*

    (-)

    11

    31.3±5.3

    2(18)

    1(9)

    胃癌

    (+)

    21

    59.9±4.5*

    16(76)*

    19(90)*
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    (-)

    16

    52.5±4.0

    6(38)

    7(44)

    Hp阳性组与阴性组比较 * P<0.01,*P<0.05

    2.4 根除Hp对PCNA指数、rasp21及p53蛋白阳性表达的影响 ICM伴Hp感染者14例(14/15)、异型增生伴Hp感染12例(12/18)能完成上述治疗。Hp根除率为69%(18/26)。治疗后,根除Hp组在ICM及异型增生组中PCNA指数由治疗前的28.2±3.7,38.8±4.7降至17.1±2.6,25.3±3.7。Hp未根除组则为26.1±3.5,34.9±4.9,差异有显著性,P均<0.05。ICM组中10例Hp根除者5例原rasp21阳性者4例阴转,6例原 p53阳性者4例阴转。4例Hp未根除者原rasp21,p53阳性的2例均未阴转,Hp根除组与未根除组rasp21及p53蛋白阴转率比较差异有显著性,P均<0.01。异型增生组中Hp根除组8例原rasp21蛋白阳性的7例阴转,7例原 p53阳性的3例阴转。4例Hp未根除者中原4例rasp21蛋白阳性者1例阴转,原4例p53蛋白阳性者未见阴转。Hp根除组与未根除组rasp21及p53蛋白阴转率比较差异也有显著性,P均<0.05。
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    3 讨论

    世界卫生组织已将Hp列为第一类的致胃癌因子。Hp感染可使发生胃癌的危险性增加6 倍。但Hp的致癌机理仍未明了。目前普遍认为胃粘膜上皮异型增生是胃癌的一个重要癌前病变,癌变率约为8.7%~81%[1]。不全结肠型肠化生与肠型胃癌关系密切,也是一癌前病变[2,3]。本研究表明,胃癌及癌前病变组Hp感染率明显高于CSG组。提示Hp感染与胃癌及癌前病变有关。有关资料也显示Hp持续感染可使CSG转变为萎缩性胃炎、肠上皮化生及异型增生[4]

    PCNA是一种核蛋白。在细胞增殖周期中,G1晚期开始增加,S期达高峰。是反映细胞增殖活性的重要指标。Hp感染使PCNA指数明显升高,说明Hp感染可使胃粘膜处于高增殖状态。细胞过渡增殖增加DNA受损的机会。有丝分裂细胞较静止期细胞更易受致突致癌物的损伤而发生癌变[5]
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    原癌基因ras的点突变及p53基因的突变可见于人类肿瘤及癌前病变。本文结果显示在胃癌组、异型增生组和ICM组中,rasp21和p53蛋白表达阳性率以胃癌最高,而在CSG组则无表达。且胃癌组、异型增生组及ICM组中Hp阳性组的rasp21和p53蛋白表达阳性率明显高于Hp阴性组,提示Hp感染与rasp21和p53蛋白阳性表达有关。目前有资料[6]表明在胃癌的致病过程中ras和p53基因的改变具有协同作用。所以我们认为,Hp感染可使胃粘膜细胞过渡增殖,过渡增殖的细胞受致癌物质的损伤而通过ras基因的激活及p53基因的突变而致癌。

    通过对ICM及异型增生伴Hp感染的患者进行抗Hp治疗,3个月后复查Hp及PCNA,rasp21蛋白,p53蛋白,发现根除Hp后PCNA指数下降、rasp21及p53蛋白阳性表达阴转率较Hp未根除者高,说明根除Hp可使胃粘膜细胞高增殖状态逆转。因此,对Hp感染的胃粘膜癌前病变患者应重视抗Hp治疗。

    参考文献
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    1,王福生.胃癌前病变的研究进展.医学综述, 1999,5(7):298

    2,周英发,沈 琼,王 敏,等.胃粘膜肠化和异型增生作为胃癌前兆的意义.胃肠病学和肝病学杂志,1998,7(1):45

    3,汤礼军. 胃粘膜上皮化生的研究现状. 实用肿瘤学杂志,1996,10(4):77

    4,Cranen ME, Dekker W, Blok P, et al. Intestinal metaplasia and helicobacter pylori:an endoscopic bioptic study of the gastric antrum. Gut, 1992, 33(1):16

    5,Preston-Martin S. Increased cell division as a cause of human cancer. Cancer Res, 1990, 50:7415

    6,Wright PA, Willams GT. Molecular biology and gastric carcinoma. Gut, 1993,34(2):145

    (收稿日期:1999-03-08), 百拇医药