三妙胶囊治疗前列腺增生药理研究
作者：侯士良 崔瑛 马爱莲 赵晶 许伏新 袁秀荣 杨传标
单位：侯士良(河南中医学院，河南 郑州 450003)；崔瑛(河南中医学院，河南 郑州 450003)；马爱莲(河南中医学院，河南 郑州 450003)；赵晶(河南中医学院，河南 郑州 450003)；许伏新(安徽省卫生厅 药政局，安徽 合肥 230000)；袁秀荣(上海中医药大学方剂教研室，上海 200032)；杨传标(第一军医大学 中医系，广东 广州 510000)
关键词：三妙胶囊；前列腺增生；血清E2活性；血清AKP，Zn2+浓度
中国中药杂志000218 摘 要：目的：观察三妙胶囊对丙酸睾丸素致大、小鼠前列腺增生的影响。方法：皮下注射丙酸睾丸素 (雄性小鼠5 g.kg-1.d-1，21 d；雄性大鼠3 g.kg-1.d-1，14 d) 造成前列腺增生动物模型。给药组分别灌胃：三妙胶囊组小鼠 36.3，18.2 g.kg-1，大鼠 25.2, 12.6 g.kg-1；前列康组 1.9 g.kg-1。正常对照组和模型对照组灌胃等体积生理盐水。末次给药后24 h，测定雌二醇 (E2)、碱性磷酸酶 (AKP)和血清锌 (Zn2+)；处死动物，取前列腺称重，计算前列腺指数并进行病理学检查。结果：三妙胶囊可降低前列腺增生模型大、小鼠的前列腺湿重和前列腺指数(P<0.01)，提高血清E2活性(P<0.01)，抑制血清Zn2+浓度(P<0.01)。结论：三妙胶囊有治疗前列腺增生作用，其机理可能与提高血清E2活性、降低Zn2+浓度有关。
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Experimental Study on Effect of Sanmiao Mixture Capsules
on Prostate Hyperplasia in Mice and Rats
HOU Shi-liang CUI Ying MA Ai-lian ZHAO Jing
(Henan College of TCM,Henan Zhengzhou 450003,China)
XU Fu-xin
(Pharmaceutical Policy Office of Anhui Public Health Bureau,Anhui Hefei 230000,China)
, 百拇医药 YUAN Xiu-rong
(Prescription Laboratory, Shanghai University of TCM,Shanghai 200032,China)
YANG Chuan-biao
(Guangzhou First Military Medical College,Guangdong Guangzhou 510000,China)
Abstract：Objective:To observe the effect of Sanmiao Mixture Capsules(SMC)on prostate hyperplasia in mice and rats.Method:The model of prostate hyperplasia was made by injecting testosterone propionate in to male mice(5g.kg-1.d-1,21d)and rats(3g.kg-1.d-1,14d).The treated group was administered SMC(mice:36.3g.kg-1and 18.2g.kg-1;rats:25.2g.kg-1and12.6g.kg-1),the normal control group 1.9g.kg-1,and the model control group NS. hours after the last administration serum tests were carried out on E2, AKP and Zn2+.Then the animals were killed,prostates taken out and weighed,index of prostate was calculated and pathological examination performed .Result : In the SMC treated group,the prostate weight and index were lowered( P<0.01) the mean activation of E2 was raised,and the mean concentration of AKP and Zn2+was inhibited ( P<0.01).Conclusion:SMC are helpful in checking prostate hyperplasia in mice and rats,the mechanism being probably related to the raising of activation of E2 as well as to the inhibition of concentration of AKP and Zn2+.
, 百拇医药
Key words：Sanmiao Mixture Capsules;prostate hyperplasia;serum tests on E2;serum tests AKP and Zn2+▲
前列腺增生症(BPH)是中老年男性常见病，50岁以上男性发病率可达85%。随着我国人口结构日趋老龄化，前列腺增生将困扰着越来越多的中老年人。因此，研究治疗该病的有效药物，是医药界面临的迫切任务。我们通过长期临床实践，筛选出以古方三妙散为基础的有效制剂，临床疗效确切。现将该制剂药理研究报告如下。
1 实验材料
1.1 动物 昆明种小鼠、SD大鼠均由河南医科大学实验动物中心提供。
1.2 药物 三妙胶囊(苍术、黄柏、牛膝、肉桂、冬葵子、甘草)，由河南中医学院一附院制剂中心提供，批号950512；前列康，浙江康恩贝制药公司，批号940409；丙酸睾丸素注射液，上海第九制药厂，批号940601；阿司匹林(ASP)，南京第二制药厂，批号940413。临用时以蒸馏水配制成混悬液。
, 百拇医药
1.3 试剂 血清雌二醇放射免疫测定试剂盒，天津利科公司，批号950311；血清锌试剂盒，北京化工厂临床试剂分厂，批号950213
2 方法与结果
2.1 对小鼠前列腺增生的作用[1]取体重18～22 g的雄性小鼠65只，随机分出15只作正常对照，其余小鼠每天皮下注射丙酸睾丸素5 mg.kg-1体重，给药21 d后，处死10只小鼠，剖检前列腺，经形态和病理切片确认造模成功后，再将其余小鼠随机分成4组。分别灌胃等体积三妙胶囊混悬液(36.3，18.2 g.kg-1，以生药计)，前列康混悬液(1.9 g.kg-1，以片重计)及生理盐水，正常对照组给予等体积生理盐水，每日1次。连续用药30 d，末次给药24 h，眼眶取血，放射免疫法[2]测定雌二醇(E2)，磷酸苯二钠法测定酸性磷酸酶(ACP)的含量，剖取小鼠前列腺称重，并计算前列腺指数(前列腺湿重/体重)，同时进行病理学观察。结果表明，三妙胶囊大、小剂量组均能显著抑制实验小鼠前列腺增生，与模型组比较，前列腺湿重、前列腺指数均极显著降低(P<0.01)，且与前列康作用相当(P>0.05)，见表1。三妙胶囊大、小剂量组均能显著抑制前列腺增生小鼠血清中ACP的活性，与模型组比较有极显著性差异(P<0.01)。三妙胶囊能够增强小鼠血清E2的活性，小剂量与模型组比较有极显著性差异(P<0.01)，见表2。以上均采用q检验。
, 百拇医药
表1 三妙胶囊对小鼠前列腺湿重及指数的影响 组别
剂量/
g.kg-1
前列腺湿重/
mg
前列腺指数/
mg.g-1
正常对照组
28.7±4.22)
0.9±0.22)
, 百拇医药 模型组
56.1±69.1
1.5±0.2
三妙胶囊组
18.2
34.3±4.72)
1.0±0.22)
36.3
32.0±4.12)
0.9±0.12)
前列康组
, http://www.100md.com
1.9
34.1±4.32)
1.0±0.22)
注：①
±s ②n=10 ③与模型组比较 1)P<0.05 2)P<0.01 表2 三妙胶囊对小鼠血清E2，ACP的影响
组别
剂量/
g.kg-1
E2/
, http://www.100md.com
pg.ml-1
ACP/
U%
正常对照组
5.2±1.62)
2.4±0.32)
模型组
3.2±0.8
3.8±0.6
三妙胶囊组
18.2
, 百拇医药 4.7±1.12)
2.9±0.52)
36.3
4.9±2.31)
2.3±0.52)
前列康组
1.9
5.6±1.62)
2.9±0.52)
2.2 对大鼠前列腺增生的作用[3]取体重200～240 g的雄性大鼠65只，随机取15只作正常对照，其余大鼠每天皮下注射丙酸睾丸素3 mg.kg-1，连续2周，取8只剖检，确认造模成功后，将余下大鼠随机分为4组，分别灌胃等体积的三妙胶囊混悬液(25.2，12.6 g.kg-1)、前列康混悬液(1.88g.kg-1)和生理盐水。正常对照组给予等体积生理盐水。每日1次，连续20 d。最后一次给药24h后，腹主动脉取血进行血清Zn2+及ACP的测定，剖取前列腺，称湿重，计算前列腺指数，并进行病理学观察。结果表明，三妙胶囊大、小剂量组均能明显抑制大鼠前列腺增生，与模型组比较，前列腺湿重、前列腺指数均有极显著性降低(P<0.01)。其中，大剂量组作用优于前列康组(P<0.05)，见表3。三妙胶囊可明显抑制血清ACP活性及血清Zn2+含量(P<0.01，P<0.05)，见表4。以上均采用q检验。 表3 三妙胶囊对大鼠前列腺湿重、前列腺指数的影响 组别
, http://www.100md.com
剂量/
g.kg-1
前列腺湿重/
g
前列腺指数/
mg.g-1
正常对照组
1.0±0.22)
3.3±0.72)
模型组
2.1±0.2
, 百拇医药
6.9±1.0
三妙胶囊组
12.6
1.5±0.22)
5.1±0.92)
25.2
1.4±0.22，3)
4.7±0.62，3)
前列康组
1.9
1.6±0.22)
, 百拇医药
5.3±0.72)
注：3)与前列康组比较P<0.05 表4 三妙胶囊对前列腺增生大鼠血清ACP，Zn2+的影响 组别
剂量/
g.kg-1
ACP/
U.L-1
Zn2+/
μg.100ml-1
正常对照组
, 百拇医药
9.6±1.92)
567.5±49.42)
模型组
14.1±2.3
698.3±83.9
三妙胶囊组
12.6
11.6±2.5
667.9±74.2
25.2
10.2±2.52)
, 百拇医药
614.8±87.81)
前列康组
1.9
11.2±2.51)
677.4±66.2
病理切片显示：模型组大鼠前列腺明显呈结节状增生，腺腔扩大，排列紊乱；腺上皮部分呈高柱状，层次增加；部分腺体呈乳头状向腔内突出；局部前列腺被破坏。三妙胶囊小剂量组部分前列腺腔明显扩大，上皮为单层柱状、高柱状兼有，少数层数增加，部分腺上皮增生，呈乳头状向腔内突出。大剂量组前列腺腔极少数扩大，大小接近一致，排列整齐，核圆形，居中，腺上皮为单层柱状上皮，少数呈高柱状，前列腺增生程度大为下降，接近正常对照组。
2.3 利尿实验 取雄性大鼠32只，按文献方法观察给药后5h尿量，并测定尿中Na+，K+，Cl-的含量[4，5]。结果表明，三妙胶囊大、小剂量组尿量均显著增加，与生理盐水组比较有极显著性差异(P<0.01)。大剂量组明显强于前列康组(P<0.01)。三妙胶囊能显著增加尿中K+,Na+，Cl-的排出，与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.01)；与前列康组比较均有增加的趋势。大剂量三妙胶囊组尿Cl-的排出与前列康比较有统计学差异(P<0.05)，见表5。以上采用q检验。表5 三妙胶囊对正常大鼠尿量及尿中离子排出量的影响 组别
, 百拇医药
剂量/ g.kg-1
5h尿量/ ml
Cl-/ mg
Na+/ mg
K+/mg
生理盐水组
2.3±0.3
32.7±4.5
7.4±1.4
9.3±3.3
三妙胶囊组
, 百拇医药
12.6
3.4±0.75)
37.5±4.74)
11.3±3.95)
14.2±4.25)
25.2
4.1±0.85，7)
41.9±4.05，6)
13.9±5.45)
16.3±4.55)
, 百拇医药
前列康组
1.9
3.0±0.74)
36.9±3.84)
9.8±3.5
13.9±4.24)
注：①n=8 ②与生理盐水组比较 4)P<0.05 5)P<0.01 与前列康组比较 6)P<0.05 7)P<0.01(下同)
2.4 镇痛作用
2.4.1 热板法 取痛反应潜伏期在5～30s者雌性小鼠55只，随机分为5组，按文献[6]方法进行试验，结果显示，三妙胶囊大、小剂量组从0.5 h开始均表现一定的镇痛作用，与生理盐水组和前列康组比较，痛阈值均有显著性提高(P<0.05，P<0.01)，但明显弱于阿司匹林组，见表6。以上采用q检验。
, 百拇医药
表6 三妙胶囊对小鼠热板法的镇痛作用 组别
剂量/
g.kg-1
给药前
痛阈/s
0.5h
1h
1.5h
2h
2.5h
痛阈/s
(提高率/%)
, http://www.100md.com
痛阈/s
(提高率/%)
痛阈/s
(提高率/%)
痛阈/s
(提高率/%)
痛阈/s
(提高率/%)
生理盐水组
18.5±3.5
19.2±1.4
19.3±3.7
, 百拇医药
20.1±3.1
20.1±3.5
19.5±2.8
(3.6)
(4.2)
(8.8)
(8.7)
(7.4)
三妙胶囊组
18.2
18.2±3.1
21.5±2.64)
, 百拇医药
23.4±3.34，6)
24.1±3.24，6)
26.0±3.95，6)
24.7±3.75，7)
(18.2)
(27.8)
(32.3)
(42.7)
(35.5)
36.3
18.4±1.8
, 百拇医药
23.2±3.55，6)
25.1±4.45，7)
25.9±4.05，7)
28.3±3.15，7)
25.5±3.35，7)
(26.4)
(36.3)
(40.7)
(53.7)
(44.1)
, 百拇医药
前列康组
1.9
18.5±2.9
20.0±3.1
20.1±3.0
20.2±4.3
21.2±3.1
21.1±3.8
(8.3)
(8.5)
(9.1)
(14.6)
, 百拇医药
(14.2)
阿司匹林组
0.2
18.9±4.7
28.9±4.45，7)
32.0±5.25，7)
33.2±5.65)
33.0±6.75，7)
1.9±6.25，6)
(3.2)
(69.8)
, 百拇医药
(6.1)
(74.9)
(69.1)
2.4.2 扭体法 体重18～22 g小鼠50只，随机分为5组，给药后30 min，按文献[6]方法进行实验。结果显示，三妙胶囊大、小剂量组均能抑制醋酸所致小鼠扭体次数，与生理盐水组比较有极显著差异(P<0.01)；大剂量组与前列康组比较有极显著性差异(P<0.01)；小剂量组与前列康组比较仅在前10 min内有极显著性差异(P<0.01)；但均弱于阿司匹林组，见表7。以上采用q检验。表7 对醋酸致痛小鼠的影响 组别
剂量/
g.kg-1
10 min
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10～20min
扭体数/次
抑制率/ %
扭体数/次
抑制率/ %
生理盐水组
29.2±1.7
22.2±1.7
三妙胶囊组
18.2
20.5±3.25，7)
29.8
, http://www.100md.com
14.8±2.85)
33.3
36.3
18.7±2.55，7)
36.0
10.9±1.55，7)
50.9
前列康组
1.9
27.0±2.64)
7.5
, 百拇医药
17.8±4.74)
19.8
阿司匹林组
0.2
12.8±3.55，7)
56.2
6.4±2.45，7)
71.2
注：n=10
2.5 抗炎作用
2.5.1 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 取体重18～22 g小鼠50只，随机分为5组，连续灌胃给药1周，末次给药后1 h，参照文献[7]方法进行实验。结果三妙胶囊大、小剂量组均能抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀，与生理盐水组和前列康组比较有极显著差异(P<0.01)，但均弱于阿司匹林组，见表8。以上采用q检验。
, 百拇医药
表8 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 组别
剂量/
g.kg-1
左右耳重量差/
mg
炎症抑制率/
%
生理盐水组
14.9±0.9
三妙胶囊组
18.2
10.3±0.65，7)
, http://www.100md.com
30.6
36.3
7.5±0.95，7)
49.8
前列康组
1.9
12.7±0.95)
14.7
阿司匹林组
0.2
5.1±0.85，7)
65.6
, 百拇医药
注：n=10
2.5.2 对小鼠棉球肉芽肿的作用[8]取体重18～22 g小鼠，随机分为5组，于无菌条件下将2 mg消毒棉球埋植在小鼠前肢腋窝皮下。连续灌胃给药10 d，然后处死小鼠，取出棉球肉芽肿，干燥，称重，比较组间差异。结果表明，三妙胶囊大、小剂量组肉芽组织干重明显减轻，与生理盐水组比较有极显著性差异(P<0.01)；大剂量组与前列康组比较有显著性差异(P<0.05)，但高于阿司匹林组，见表9。以上采用q检验。
表9 对小鼠皮下植入棉球肉芽肿的作用 组别
剂量/
g.kg-1
肉芽组织干重/
mg
, 百拇医药
炎症抑制率/
%
生理盐水组
12.9±2.3
三妙胶囊组
18.2
7.6±2.45)
41.0
36.3
6.1±2.25，6)
51.2
前列康组
, http://www.100md.com
1.9
10.1±3.54)
22.1
阿司匹林组
0.2
3.3±0.65，7)
74.8
注：n=10
2.5.3 对甲醛引起大鼠足跖肿胀及PGE2的影响 取体重155 ～195 g雄性大鼠50只，随机分为5组，每组10只。按文献[7，9]方法进行足跖肿胀实验，并测定PGE2的含量。结果表明，三妙胶囊大、小剂量组均表明较强的抑制足肿胀作用，与生理盐水组比较，大剂量组自第2天起就有极显著差异(P<0.01)，与阿司匹林组比较，自第3天起作用接近，见表10(采用q检验)。三妙胶囊大、小剂量组对炎性组织中PGE2含量均有显著抑制作用，与生理盐水组和前列康组比较，大剂量组有极显著差异(P<0.01)，且与阿司匹林组接近，表明大剂量组有较强的抑制炎症作用，见表11(采用q检验)。
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表10 对甲醛引起大鼠足跖肿胀的影响 组别
剂量/
g.kg-1
致炎后不同时间的足肿胀度/ mm
最后足重/
g
1h
2h
3h
4h
生理盐水组
1.2±0.2
, 百拇医药
1.1±0.2
0.8±0.2
0.6±0.1
1.6±0.2
三妙胶囊组
12.6
1.0±0.2
0.9±0.14)
0.6±0.14)
0.5±0.2
1.5±0.2
25.2
, 百拇医药
1.0±0.2
0.8±0.25)
0.5±0.15)
0.5±0.14)
1.5±0.1
前列康组
1.9
1.1±0.2
0.9±0.14)
0.6±0.1
0.6±0.1
, 百拇医药
1.6±0.2
阿司匹林组
0.2
0.8±0.15)
0.7±0.15)
0.5±0.15)
0.4±0.15)
1.5±0.1
表11 对大鼠炎性组织PGE2含量的影响 组别
剂量/
g.kg-1
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PGE2含量/
(A/G)
炎症抑制率/
%
生理盐水组
0.16±0.02
三妙胶囊组
12.6
0.14±0.02
12.5
25.2
0.11±0.025，7)
, 百拇医药
32.5
前列康组
1.9
0.15±0.01
8.8
阿司匹林组
0.2
0.10±0.015，7)
40.6
3 讨论
以丙酸睾丸酮皮下注射法成功地造成前列腺增生动物模型。经给予三妙胶囊治疗后，可使前列腺增生大、小鼠的前列腺湿重和前列腺指数显著降低(P<0.01)。其中大剂量组的作用明显优于前列康组(P<0.05)。提示三妙胶囊对前列腺增生有治疗作用。实验发现，三妙胶囊有利尿、镇痛、抗炎作用，提示该制剂对前列腺增生症的排尿不畅及伴发感染时出现的炎症可有改善作用。
, 百拇医药
雌激素在前列腺增生中起一定作用，有人认为雌激素可抑制前列腺增生[10～12]。实验观察到，三妙胶囊在抑制前列腺增生的同时，也能提高血清E2活性，提示三妙胶囊治疗前列腺增生的作用机制与提高雌激素活性有关。
前列腺增生的发生与双氢睾酮积聚有关。在某些个体，随年龄增长，前列腺内形成双氢睾酮的能力增强，发生双氢睾酮异常增多，促发前列腺增生。前列腺增生患者血清双氢睾酮显著增高，其浓度与血锌水平呈正相关，两者在前列腺增生发生中起一定作用。由于Zn2+是维持5-α还原酶活性的重要成分，而此还原途径是双氢睾酮生成的主要途径[12]，所以降低血清Zn2+浓度可能减少双氢睾酮的产生和积聚，并进而抑制前列腺增生。实验发现，三妙胶囊在抑制前列腺增生的同时，能显著降低血清Zn2+浓度，表明三妙胶囊治疗前列腺增生与抑制血清锌活性有关。
基金项目：河南省科委科技攻关项目(9 61200728)
, http://www.100md.com
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收稿日期：1999-01-06, 百拇医药
单位：侯士良(河南中医学院，河南 郑州 450003)；崔瑛(河南中医学院，河南 郑州 450003)；马爱莲(河南中医学院，河南 郑州 450003)；赵晶(河南中医学院，河南 郑州 450003)；许伏新(安徽省卫生厅 药政局，安徽 合肥 230000)；袁秀荣(上海中医药大学方剂教研室，上海 200032)；杨传标(第一军医大学 中医系，广东 广州 510000)
关键词：三妙胶囊；前列腺增生；血清E2活性；血清AKP，Zn2+浓度
中国中药杂志000218 摘 要：目的：观察三妙胶囊对丙酸睾丸素致大、小鼠前列腺增生的影响。方法：皮下注射丙酸睾丸素 (雄性小鼠5 g.kg-1.d-1，21 d；雄性大鼠3 g.kg-1.d-1，14 d) 造成前列腺增生动物模型。给药组分别灌胃：三妙胶囊组小鼠 36.3，18.2 g.kg-1，大鼠 25.2, 12.6 g.kg-1；前列康组 1.9 g.kg-1。正常对照组和模型对照组灌胃等体积生理盐水。末次给药后24 h，测定雌二醇 (E2)、碱性磷酸酶 (AKP)和血清锌 (Zn2+)；处死动物，取前列腺称重，计算前列腺指数并进行病理学检查。结果：三妙胶囊可降低前列腺增生模型大、小鼠的前列腺湿重和前列腺指数(P<0.01)，提高血清E2活性(P<0.01)，抑制血清Zn2+浓度(P<0.01)。结论：三妙胶囊有治疗前列腺增生作用，其机理可能与提高血清E2活性、降低Zn2+浓度有关。
, http://www.100md.com
Experimental Study on Effect of Sanmiao Mixture Capsules
on Prostate Hyperplasia in Mice and Rats
HOU Shi-liang CUI Ying MA Ai-lian ZHAO Jing
(Henan College of TCM,Henan Zhengzhou 450003,China)
XU Fu-xin
(Pharmaceutical Policy Office of Anhui Public Health Bureau,Anhui Hefei 230000,China)
, 百拇医药 YUAN Xiu-rong
(Prescription Laboratory, Shanghai University of TCM,Shanghai 200032,China)
YANG Chuan-biao
(Guangzhou First Military Medical College,Guangdong Guangzhou 510000,China)
Abstract：Objective:To observe the effect of Sanmiao Mixture Capsules(SMC)on prostate hyperplasia in mice and rats.Method:The model of prostate hyperplasia was made by injecting testosterone propionate in to male mice(5g.kg-1.d-1,21d)and rats(3g.kg-1.d-1,14d).The treated group was administered SMC(mice:36.3g.kg-1and 18.2g.kg-1;rats:25.2g.kg-1and12.6g.kg-1),the normal control group 1.9g.kg-1,and the model control group NS. hours after the last administration serum tests were carried out on E2, AKP and Zn2+.Then the animals were killed,prostates taken out and weighed,index of prostate was calculated and pathological examination performed .Result : In the SMC treated group,the prostate weight and index were lowered( P<0.01) the mean activation of E2 was raised,and the mean concentration of AKP and Zn2+was inhibited ( P<0.01).Conclusion:SMC are helpful in checking prostate hyperplasia in mice and rats,the mechanism being probably related to the raising of activation of E2 as well as to the inhibition of concentration of AKP and Zn2+.
, 百拇医药
Key words：Sanmiao Mixture Capsules;prostate hyperplasia;serum tests on E2;serum tests AKP and Zn2+▲
前列腺增生症(BPH)是中老年男性常见病，50岁以上男性发病率可达85%。随着我国人口结构日趋老龄化，前列腺增生将困扰着越来越多的中老年人。因此，研究治疗该病的有效药物，是医药界面临的迫切任务。我们通过长期临床实践，筛选出以古方三妙散为基础的有效制剂，临床疗效确切。现将该制剂药理研究报告如下。
1 实验材料
1.1 动物 昆明种小鼠、SD大鼠均由河南医科大学实验动物中心提供。
1.2 药物 三妙胶囊(苍术、黄柏、牛膝、肉桂、冬葵子、甘草)，由河南中医学院一附院制剂中心提供，批号950512；前列康，浙江康恩贝制药公司，批号940409；丙酸睾丸素注射液，上海第九制药厂，批号940601；阿司匹林(ASP)，南京第二制药厂，批号940413。临用时以蒸馏水配制成混悬液。
, 百拇医药
1.3 试剂 血清雌二醇放射免疫测定试剂盒，天津利科公司，批号950311；血清锌试剂盒，北京化工厂临床试剂分厂，批号950213
2 方法与结果
2.1 对小鼠前列腺增生的作用[1]取体重18～22 g的雄性小鼠65只，随机分出15只作正常对照，其余小鼠每天皮下注射丙酸睾丸素5 mg.kg-1体重，给药21 d后，处死10只小鼠，剖检前列腺，经形态和病理切片确认造模成功后，再将其余小鼠随机分成4组。分别灌胃等体积三妙胶囊混悬液(36.3，18.2 g.kg-1，以生药计)，前列康混悬液(1.9 g.kg-1，以片重计)及生理盐水，正常对照组给予等体积生理盐水，每日1次。连续用药30 d，末次给药24 h，眼眶取血，放射免疫法[2]测定雌二醇(E2)，磷酸苯二钠法测定酸性磷酸酶(ACP)的含量，剖取小鼠前列腺称重，并计算前列腺指数(前列腺湿重/体重)，同时进行病理学观察。结果表明，三妙胶囊大、小剂量组均能显著抑制实验小鼠前列腺增生，与模型组比较，前列腺湿重、前列腺指数均极显著降低(P<0.01)，且与前列康作用相当(P>0.05)，见表1。三妙胶囊大、小剂量组均能显著抑制前列腺增生小鼠血清中ACP的活性，与模型组比较有极显著性差异(P<0.01)。三妙胶囊能够增强小鼠血清E2的活性，小剂量与模型组比较有极显著性差异(P<0.01)，见表2。以上均采用q检验。
, 百拇医药
表1 三妙胶囊对小鼠前列腺湿重及指数的影响 组别
剂量/
g.kg-1
前列腺湿重/
mg
前列腺指数/
mg.g-1
正常对照组
28.7±4.22)
0.9±0.22)
, 百拇医药 模型组
56.1±69.1
1.5±0.2
三妙胶囊组
18.2
34.3±4.72)
1.0±0.22)
36.3
32.0±4.12)
0.9±0.12)
前列康组
, http://www.100md.com
1.9
34.1±4.32)
1.0±0.22)
注：①
±s ②n=10 ③与模型组比较 1)P<0.05 2)P<0.01 表2 三妙胶囊对小鼠血清E2，ACP的影响组别
剂量/
g.kg-1
E2/
, http://www.100md.com
pg.ml-1
ACP/
U%
正常对照组
5.2±1.62)
2.4±0.32)
模型组
3.2±0.8
3.8±0.6
三妙胶囊组
18.2
, 百拇医药 4.7±1.12)
2.9±0.52)
36.3
4.9±2.31)
2.3±0.52)
前列康组
1.9
5.6±1.62)
2.9±0.52)
2.2 对大鼠前列腺增生的作用[3]取体重200～240 g的雄性大鼠65只，随机取15只作正常对照，其余大鼠每天皮下注射丙酸睾丸素3 mg.kg-1，连续2周，取8只剖检，确认造模成功后，将余下大鼠随机分为4组，分别灌胃等体积的三妙胶囊混悬液(25.2，12.6 g.kg-1)、前列康混悬液(1.88g.kg-1)和生理盐水。正常对照组给予等体积生理盐水。每日1次，连续20 d。最后一次给药24h后，腹主动脉取血进行血清Zn2+及ACP的测定，剖取前列腺，称湿重，计算前列腺指数，并进行病理学观察。结果表明，三妙胶囊大、小剂量组均能明显抑制大鼠前列腺增生，与模型组比较，前列腺湿重、前列腺指数均有极显著性降低(P<0.01)。其中，大剂量组作用优于前列康组(P<0.05)，见表3。三妙胶囊可明显抑制血清ACP活性及血清Zn2+含量(P<0.01，P<0.05)，见表4。以上均采用q检验。 表3 三妙胶囊对大鼠前列腺湿重、前列腺指数的影响 组别
, http://www.100md.com
剂量/
g.kg-1
前列腺湿重/
g
前列腺指数/
mg.g-1
正常对照组
1.0±0.22)
3.3±0.72)
模型组
2.1±0.2
, 百拇医药
6.9±1.0
三妙胶囊组
12.6
1.5±0.22)
5.1±0.92)
25.2
1.4±0.22，3)
4.7±0.62，3)
前列康组
1.9
1.6±0.22)
, 百拇医药
5.3±0.72)
注：3)与前列康组比较P<0.05 表4 三妙胶囊对前列腺增生大鼠血清ACP，Zn2+的影响 组别
剂量/
g.kg-1
ACP/
U.L-1
Zn2+/
μg.100ml-1
正常对照组
, 百拇医药
9.6±1.92)
567.5±49.42)
模型组
14.1±2.3
698.3±83.9
三妙胶囊组
12.6
11.6±2.5
667.9±74.2
25.2
10.2±2.52)
, 百拇医药
614.8±87.81)
前列康组
1.9
11.2±2.51)
677.4±66.2
病理切片显示：模型组大鼠前列腺明显呈结节状增生，腺腔扩大，排列紊乱；腺上皮部分呈高柱状，层次增加；部分腺体呈乳头状向腔内突出；局部前列腺被破坏。三妙胶囊小剂量组部分前列腺腔明显扩大，上皮为单层柱状、高柱状兼有，少数层数增加，部分腺上皮增生，呈乳头状向腔内突出。大剂量组前列腺腔极少数扩大，大小接近一致，排列整齐，核圆形，居中，腺上皮为单层柱状上皮，少数呈高柱状，前列腺增生程度大为下降，接近正常对照组。
2.3 利尿实验 取雄性大鼠32只，按文献方法观察给药后5h尿量，并测定尿中Na+，K+，Cl-的含量[4，5]。结果表明，三妙胶囊大、小剂量组尿量均显著增加，与生理盐水组比较有极显著性差异(P<0.01)。大剂量组明显强于前列康组(P<0.01)。三妙胶囊能显著增加尿中K+,Na+，Cl-的排出，与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.01)；与前列康组比较均有增加的趋势。大剂量三妙胶囊组尿Cl-的排出与前列康比较有统计学差异(P<0.05)，见表5。以上采用q检验。表5 三妙胶囊对正常大鼠尿量及尿中离子排出量的影响 组别
, 百拇医药
剂量/ g.kg-1
5h尿量/ ml
Cl-/ mg
Na+/ mg
K+/mg
生理盐水组
2.3±0.3
32.7±4.5
7.4±1.4
9.3±3.3
三妙胶囊组
, 百拇医药
12.6
3.4±0.75)
37.5±4.74)
11.3±3.95)
14.2±4.25)
25.2
4.1±0.85，7)
41.9±4.05，6)
13.9±5.45)
16.3±4.55)
, 百拇医药
前列康组
1.9
3.0±0.74)
36.9±3.84)
9.8±3.5
13.9±4.24)
注：①n=8 ②与生理盐水组比较 4)P<0.05 5)P<0.01 与前列康组比较 6)P<0.05 7)P<0.01(下同)
2.4 镇痛作用
2.4.1 热板法 取痛反应潜伏期在5～30s者雌性小鼠55只，随机分为5组，按文献[6]方法进行试验，结果显示，三妙胶囊大、小剂量组从0.5 h开始均表现一定的镇痛作用，与生理盐水组和前列康组比较，痛阈值均有显著性提高(P<0.05，P<0.01)，但明显弱于阿司匹林组，见表6。以上采用q检验。
, 百拇医药
表6 三妙胶囊对小鼠热板法的镇痛作用 组别
剂量/
g.kg-1
给药前
痛阈/s
0.5h
1h
1.5h
2h
2.5h
痛阈/s
(提高率/%)
, http://www.100md.com
痛阈/s
(提高率/%)
痛阈/s
(提高率/%)
痛阈/s
(提高率/%)
痛阈/s
(提高率/%)
生理盐水组
18.5±3.5
19.2±1.4
19.3±3.7
, 百拇医药
20.1±3.1
20.1±3.5
19.5±2.8
(3.6)
(4.2)
(8.8)
(8.7)
(7.4)
三妙胶囊组
18.2
18.2±3.1
21.5±2.64)
, 百拇医药
23.4±3.34，6)
24.1±3.24，6)
26.0±3.95，6)
24.7±3.75，7)
(18.2)
(27.8)
(32.3)
(42.7)
(35.5)
36.3
18.4±1.8
, 百拇医药
23.2±3.55，6)
25.1±4.45，7)
25.9±4.05，7)
28.3±3.15，7)
25.5±3.35，7)
(26.4)
(36.3)
(40.7)
(53.7)
(44.1)
, 百拇医药
前列康组
1.9
18.5±2.9
20.0±3.1
20.1±3.0
20.2±4.3
21.2±3.1
21.1±3.8
(8.3)
(8.5)
(9.1)
(14.6)
, 百拇医药
(14.2)
阿司匹林组
0.2
18.9±4.7
28.9±4.45，7)
32.0±5.25，7)
33.2±5.65)
33.0±6.75，7)
1.9±6.25，6)
(3.2)
(69.8)
, 百拇医药
(6.1)
(74.9)
(69.1)
2.4.2 扭体法 体重18～22 g小鼠50只，随机分为5组，给药后30 min，按文献[6]方法进行实验。结果显示，三妙胶囊大、小剂量组均能抑制醋酸所致小鼠扭体次数，与生理盐水组比较有极显著差异(P<0.01)；大剂量组与前列康组比较有极显著性差异(P<0.01)；小剂量组与前列康组比较仅在前10 min内有极显著性差异(P<0.01)；但均弱于阿司匹林组，见表7。以上采用q检验。表7 对醋酸致痛小鼠的影响 组别
剂量/
g.kg-1
10 min
, http://www.100md.com
10～20min
扭体数/次
抑制率/ %
扭体数/次
抑制率/ %
生理盐水组
29.2±1.7
22.2±1.7
三妙胶囊组
18.2
20.5±3.25，7)
29.8
, http://www.100md.com
14.8±2.85)
33.3
36.3
18.7±2.55，7)
36.0
10.9±1.55，7)
50.9
前列康组
1.9
27.0±2.64)
7.5
, 百拇医药
17.8±4.74)
19.8
阿司匹林组
0.2
12.8±3.55，7)
56.2
6.4±2.45，7)
71.2
注：n=10
2.5 抗炎作用
2.5.1 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 取体重18～22 g小鼠50只，随机分为5组，连续灌胃给药1周，末次给药后1 h，参照文献[7]方法进行实验。结果三妙胶囊大、小剂量组均能抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀，与生理盐水组和前列康组比较有极显著差异(P<0.01)，但均弱于阿司匹林组，见表8。以上采用q检验。
, 百拇医药
表8 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 组别
剂量/
g.kg-1
左右耳重量差/
mg
炎症抑制率/
%
生理盐水组
14.9±0.9
三妙胶囊组
18.2
10.3±0.65，7)
, http://www.100md.com
30.6
36.3
7.5±0.95，7)
49.8
前列康组
1.9
12.7±0.95)
14.7
阿司匹林组
0.2
5.1±0.85，7)
65.6
, 百拇医药
注：n=10
2.5.2 对小鼠棉球肉芽肿的作用[8]取体重18～22 g小鼠，随机分为5组，于无菌条件下将2 mg消毒棉球埋植在小鼠前肢腋窝皮下。连续灌胃给药10 d，然后处死小鼠，取出棉球肉芽肿，干燥，称重，比较组间差异。结果表明，三妙胶囊大、小剂量组肉芽组织干重明显减轻，与生理盐水组比较有极显著性差异(P<0.01)；大剂量组与前列康组比较有显著性差异(P<0.05)，但高于阿司匹林组，见表9。以上采用q检验。
表9 对小鼠皮下植入棉球肉芽肿的作用 组别
剂量/
g.kg-1
肉芽组织干重/
mg
, 百拇医药
炎症抑制率/
%
生理盐水组
12.9±2.3
三妙胶囊组
18.2
7.6±2.45)
41.0
36.3
6.1±2.25，6)
51.2
前列康组
, http://www.100md.com
1.9
10.1±3.54)
22.1
阿司匹林组
0.2
3.3±0.65，7)
74.8
注：n=10
2.5.3 对甲醛引起大鼠足跖肿胀及PGE2的影响 取体重155 ～195 g雄性大鼠50只，随机分为5组，每组10只。按文献[7，9]方法进行足跖肿胀实验，并测定PGE2的含量。结果表明，三妙胶囊大、小剂量组均表明较强的抑制足肿胀作用，与生理盐水组比较，大剂量组自第2天起就有极显著差异(P<0.01)，与阿司匹林组比较，自第3天起作用接近，见表10(采用q检验)。三妙胶囊大、小剂量组对炎性组织中PGE2含量均有显著抑制作用，与生理盐水组和前列康组比较，大剂量组有极显著差异(P<0.01)，且与阿司匹林组接近，表明大剂量组有较强的抑制炎症作用，见表11(采用q检验)。
, http://www.100md.com
表10 对甲醛引起大鼠足跖肿胀的影响 组别
剂量/
g.kg-1
致炎后不同时间的足肿胀度/ mm
最后足重/
g
1h
2h
3h
4h
生理盐水组
1.2±0.2
, 百拇医药
1.1±0.2
0.8±0.2
0.6±0.1
1.6±0.2
三妙胶囊组
12.6
1.0±0.2
0.9±0.14)
0.6±0.14)
0.5±0.2
1.5±0.2
25.2
, 百拇医药
1.0±0.2
0.8±0.25)
0.5±0.15)
0.5±0.14)
1.5±0.1
前列康组
1.9
1.1±0.2
0.9±0.14)
0.6±0.1
0.6±0.1
, 百拇医药
1.6±0.2
阿司匹林组
0.2
0.8±0.15)
0.7±0.15)
0.5±0.15)
0.4±0.15)
1.5±0.1
表11 对大鼠炎性组织PGE2含量的影响 组别
剂量/
g.kg-1
, http://www.100md.com
PGE2含量/
(A/G)
炎症抑制率/
%
生理盐水组
0.16±0.02
三妙胶囊组
12.6
0.14±0.02
12.5
25.2
0.11±0.025，7)
, 百拇医药
32.5
前列康组
1.9
0.15±0.01
8.8
阿司匹林组
0.2
0.10±0.015，7)
40.6
3 讨论
以丙酸睾丸酮皮下注射法成功地造成前列腺增生动物模型。经给予三妙胶囊治疗后，可使前列腺增生大、小鼠的前列腺湿重和前列腺指数显著降低(P<0.01)。其中大剂量组的作用明显优于前列康组(P<0.05)。提示三妙胶囊对前列腺增生有治疗作用。实验发现，三妙胶囊有利尿、镇痛、抗炎作用，提示该制剂对前列腺增生症的排尿不畅及伴发感染时出现的炎症可有改善作用。
, 百拇医药
雌激素在前列腺增生中起一定作用，有人认为雌激素可抑制前列腺增生[10～12]。实验观察到，三妙胶囊在抑制前列腺增生的同时，也能提高血清E2活性，提示三妙胶囊治疗前列腺增生的作用机制与提高雌激素活性有关。
前列腺增生的发生与双氢睾酮积聚有关。在某些个体，随年龄增长，前列腺内形成双氢睾酮的能力增强，发生双氢睾酮异常增多，促发前列腺增生。前列腺增生患者血清双氢睾酮显著增高，其浓度与血锌水平呈正相关，两者在前列腺增生发生中起一定作用。由于Zn2+是维持5-α还原酶活性的重要成分，而此还原途径是双氢睾酮生成的主要途径[12]，所以降低血清Zn2+浓度可能减少双氢睾酮的产生和积聚，并进而抑制前列腺增生。实验发现，三妙胶囊在抑制前列腺增生的同时，能显著降低血清Zn2+浓度，表明三妙胶囊治疗前列腺增生与抑制血清锌活性有关。
基金项目：河南省科委科技攻关项目(9 61200728)
, http://www.100md.com
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收稿日期：1999-01-06, 百拇医药