急性脑梗死患者血浆活化血小板的变化及其意义
作者：强丽娟 李普蕾 吴松寒
单位：213003常州市第二人民医院神经内科
关键词：急性脑梗死；活化血小板；CD62P；CD63
临床神经病学杂志000213 【摘要】 目的 研究急性脑梗死与活化血小板的关系。方法 采用单克隆抗体、流式细胞术测定50例急性脑梗死患者入院次晨血浆CD62P、CD63，并与20名正常人比较。结果 脑梗死患者血浆CD62P、CD63水平明显高于对照组(均P<0.01)。大面积梗死组血浆CD62P、CD63水平明显高于中、小梗死组(均P<0.01)。死亡组血浆CD62P、CD63水平高于存活组(P<0.01)。结论 急性脑梗死早期活化血小板明显升高，其升高水平与脑梗死范围成正相关。
, 百拇医药
近10年来发现粘附分子、趋化因子、血小板活化因子在脑缺血性损伤的发生、发展、转归过程中的作用越来越引起人们的关注。为了探讨脑梗死时血小板活化程度及其临床意义，本组采用免疫萤光标记流式细胞术检测50例急性脑梗死患者血浆CD62P、CD63水平。现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 50例急性脑梗死患者为本院1998年5月至1999年8月期间住院患者，均经头颅CT或MRI检查证实，并且排除炎症、肿瘤和自身免疫性疾病。男27例、女23例，年龄46～84岁，平均69.5岁。其中50岁以下4例，51～60岁6例，61～70岁17例，71～80岁22例，84岁1例。发病至入院时间3小时至5天。全组按Pullitono[1]公式(脑梗死体积cm3=长×宽×CT扫描阳性层面数÷2)计算脑梗死体积，梗死灶>10 cm3为大梗死组(11例)，4～10 cm3为中梗死组(19例)，<4 cm3为小梗死组(20例)。死亡3例，存活47例。正常对照组20名，男12名，女8名。年龄40～70岁，平均60.1岁，来自健康体检者。
, 百拇医药
1.2 方法 全组患者均于入院后次晨空腹抽肘静脉血2 ml，EDTA抗凝，离心800 r/min，3分钟，分离富含血小板血浆(PRP)，并以等体积2%甲醛固定，用磷酸缓冲液(PBS)漂洗2～3次，调正血小板浓度300×109 /L，分别加入CD62P、CD63萤光单抗(法国科尔特公司提供药盒)避光混匀30分钟，漂洗2次，固定待测。采用流式细胞仪进行检测，测试完毕在计算机上分析结果。
1.3 统计学分析 本资料以均数加减标准差(
±s)表示，组间比较用t检验。
2 结 果
2.1 脑梗死组血浆CD62P、CD63水平变化 急性脑梗死患者入院次晨血浆CD62P水平为12.52±9.8%，明显高于正常对照组0.97±0.33%(P<0.01)。CD63水平为48.34±35.67%明显高于正常对照组1.15±0.64%(P<0.01)。
, 百拇医药
2.2 不同梗死体积组患者血浆CD62P、CD63水平的比较 大梗死组CD62P、CD63水平明显高于中、小梗死组(均P<0.01)。中梗死组CD62P、CD63水平明显高于小梗死组(P<0.01)，见表1。
表1 不同梗死体积组患者血浆CD62P、CD63水平的比较(±s，%)
例数
CD62P
CD63
大梗死组
, 百拇医药
11
18.52±16.78**△△
58.44±40.23**△△
中梗死组
19
9.55±7.17**△
45.11±20.79**△
小梗死组
20
2.21±1.06*
12.91±6.14**
, http://www.100md.com
对照组
20
0.97±0.33
1.15±0.64
与对照组比较*P<0.01，**P<0.001；与小梗死组比较△P<0.01，△△P<0.001
2.3 脑梗死患者预后与血浆CD62P、CD63水平的关系 死亡组(3例)分别为23.21±6.31%和61.73±19.64%，明显高于存活组(47例)8.33±11.8%和30.31±25.18%(P<0.01)。
3 讨 论
, 百拇医药 CD62P是活化血小板а-颗粒糖蛋白，CD63 是血小板溶酶体完整膜蛋白。当组织损伤时，P-选择素集中在小静脉、微静脉内皮细胞的Weibel-Palade小体和血小板的α-颗粒[2]。这时血小板胞浆内α-颗粒上的糖蛋白CD62P、CD63和内皮细胞W-P小体与受体结合，CD62P、CD63在血小板膜表面表达或脱落增加，成为活化血小板最特异和灵敏的标志物[3]。在高血压和血栓性疾病中，血小板由静息状态转变为活化状态，此时血小板活性增强，易于并发缺血性卒中[4]。Okada等[5]动物实验证实脑缺血时P-选择素明显升高。活化血小板参与脑缺血病理生理过程，尤其是病理过程的早期阶段。随脑梗死范围扩大，血小板活性升高，预后不佳。国内尚明谦等[6]研究脑梗死患者CD62P、CD63活化程度，表明脑梗死时血小板功能异常活跃，其活化程度明显升高。本组50例急性脑梗死患者入院次晨血清CD62P、CD63水平明显高于对照组(均P<0.01)。从而表明活化血小板参与脑梗死病理过程的早期阶段。本组大梗死组血清CD62P、CD63明显高于中、小梗死组(均P<0.01)，表明血小板活化水平与脑梗死病变范围有明显关系，脑梗死范围越大，血小板活化水平越高。
, 百拇医药
活化血小板通过各种效应，参与脑缺血损伤的发生、发展和转归过程，此外活化血小板还可促进中枢神经递质的生成，加重炎症、水肿，扩大梗死面积[7]。因此，探索血小板活化因子合成抑制将成为预防和治疗脑梗死的新的有效途径。
参 考 文 献
1.Pullicino P. Small deep infarcts diagnosed on computed tomography.Neurology,1980,30:1890
2.郝延磊,蒲传强.选择素在缺血脑损伤中的作用.国外医学脑血管疾病分册，1999，7：6
3.Suziki H,Abe K,Tojo S,at al.Postischemic expression of P-selection immunoreactivity in rat brain.Neurosci Lets,1997,228:151
, 百拇医药
4.李轶男.高血压病患者并发缺血性脑卒中危险因素分析.国外医学神经病学神经外科学分册，1999,26：64
5.Okada Y,Copeland BR,Mori E,at al.P-Selection and intercellular adhession molecules expression after focal brain ischemia and reperfusion.Stroke,1994,25:202
6.尚明谦,郭述苏,陈同慧,等.脑梗死患者血小板颗粒膜糖蛋白的测定及临床意义.山东医学，1996，9：15
7.张雄.血小板活化因子与脑损伤研究近况.国外医学神经病学神经外科学分册，1999，26：253
(收稿1999-11-28 修回2000-01-25), http://www.100md.com
单位：213003常州市第二人民医院神经内科
关键词：急性脑梗死；活化血小板；CD62P；CD63
临床神经病学杂志000213 【摘要】 目的 研究急性脑梗死与活化血小板的关系。方法 采用单克隆抗体、流式细胞术测定50例急性脑梗死患者入院次晨血浆CD62P、CD63，并与20名正常人比较。结果 脑梗死患者血浆CD62P、CD63水平明显高于对照组(均P<0.01)。大面积梗死组血浆CD62P、CD63水平明显高于中、小梗死组(均P<0.01)。死亡组血浆CD62P、CD63水平高于存活组(P<0.01)。结论 急性脑梗死早期活化血小板明显升高，其升高水平与脑梗死范围成正相关。
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近10年来发现粘附分子、趋化因子、血小板活化因子在脑缺血性损伤的发生、发展、转归过程中的作用越来越引起人们的关注。为了探讨脑梗死时血小板活化程度及其临床意义，本组采用免疫萤光标记流式细胞术检测50例急性脑梗死患者血浆CD62P、CD63水平。现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 50例急性脑梗死患者为本院1998年5月至1999年8月期间住院患者，均经头颅CT或MRI检查证实，并且排除炎症、肿瘤和自身免疫性疾病。男27例、女23例，年龄46～84岁，平均69.5岁。其中50岁以下4例，51～60岁6例，61～70岁17例，71～80岁22例，84岁1例。发病至入院时间3小时至5天。全组按Pullitono[1]公式(脑梗死体积cm3=长×宽×CT扫描阳性层面数÷2)计算脑梗死体积，梗死灶>10 cm3为大梗死组(11例)，4～10 cm3为中梗死组(19例)，<4 cm3为小梗死组(20例)。死亡3例，存活47例。正常对照组20名，男12名，女8名。年龄40～70岁，平均60.1岁，来自健康体检者。
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1.2 方法 全组患者均于入院后次晨空腹抽肘静脉血2 ml，EDTA抗凝，离心800 r/min，3分钟，分离富含血小板血浆(PRP)，并以等体积2%甲醛固定，用磷酸缓冲液(PBS)漂洗2～3次，调正血小板浓度300×109 /L，分别加入CD62P、CD63萤光单抗(法国科尔特公司提供药盒)避光混匀30分钟，漂洗2次，固定待测。采用流式细胞仪进行检测，测试完毕在计算机上分析结果。
1.3 统计学分析 本资料以均数加减标准差(
±s)表示，组间比较用t检验。2 结 果
2.1 脑梗死组血浆CD62P、CD63水平变化 急性脑梗死患者入院次晨血浆CD62P水平为12.52±9.8%，明显高于正常对照组0.97±0.33%(P<0.01)。CD63水平为48.34±35.67%明显高于正常对照组1.15±0.64%(P<0.01)。
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2.2 不同梗死体积组患者血浆CD62P、CD63水平的比较 大梗死组CD62P、CD63水平明显高于中、小梗死组(均P<0.01)。中梗死组CD62P、CD63水平明显高于小梗死组(P<0.01)，见表1。
表1 不同梗死体积组患者血浆CD62P、CD63水平的比较(
±s，%)例数
CD62P
CD63
大梗死组
, 百拇医药
11
18.52±16.78**△△
58.44±40.23**△△
中梗死组
19
9.55±7.17**△
45.11±20.79**△
小梗死组
20
2.21±1.06*
12.91±6.14**
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对照组
20
0.97±0.33
1.15±0.64
与对照组比较*P<0.01，**P<0.001；与小梗死组比较△P<0.01，△△P<0.001
2.3 脑梗死患者预后与血浆CD62P、CD63水平的关系 死亡组(3例)分别为23.21±6.31%和61.73±19.64%，明显高于存活组(47例)8.33±11.8%和30.31±25.18%(P<0.01)。
3 讨 论
, 百拇医药 CD62P是活化血小板а-颗粒糖蛋白，CD63 是血小板溶酶体完整膜蛋白。当组织损伤时，P-选择素集中在小静脉、微静脉内皮细胞的Weibel-Palade小体和血小板的α-颗粒[2]。这时血小板胞浆内α-颗粒上的糖蛋白CD62P、CD63和内皮细胞W-P小体与受体结合，CD62P、CD63在血小板膜表面表达或脱落增加，成为活化血小板最特异和灵敏的标志物[3]。在高血压和血栓性疾病中，血小板由静息状态转变为活化状态，此时血小板活性增强，易于并发缺血性卒中[4]。Okada等[5]动物实验证实脑缺血时P-选择素明显升高。活化血小板参与脑缺血病理生理过程，尤其是病理过程的早期阶段。随脑梗死范围扩大，血小板活性升高，预后不佳。国内尚明谦等[6]研究脑梗死患者CD62P、CD63活化程度，表明脑梗死时血小板功能异常活跃，其活化程度明显升高。本组50例急性脑梗死患者入院次晨血清CD62P、CD63水平明显高于对照组(均P<0.01)。从而表明活化血小板参与脑梗死病理过程的早期阶段。本组大梗死组血清CD62P、CD63明显高于中、小梗死组(均P<0.01)，表明血小板活化水平与脑梗死病变范围有明显关系，脑梗死范围越大，血小板活化水平越高。
, 百拇医药
活化血小板通过各种效应，参与脑缺血损伤的发生、发展和转归过程，此外活化血小板还可促进中枢神经递质的生成，加重炎症、水肿，扩大梗死面积[7]。因此，探索血小板活化因子合成抑制将成为预防和治疗脑梗死的新的有效途径。
参 考 文 献
1.Pullicino P. Small deep infarcts diagnosed on computed tomography.Neurology,1980,30:1890
2.郝延磊,蒲传强.选择素在缺血脑损伤中的作用.国外医学脑血管疾病分册，1999，7：6
3.Suziki H,Abe K,Tojo S,at al.Postischemic expression of P-selection immunoreactivity in rat brain.Neurosci Lets,1997,228:151
, 百拇医药
4.李轶男.高血压病患者并发缺血性脑卒中危险因素分析.国外医学神经病学神经外科学分册，1999,26：64
5.Okada Y,Copeland BR,Mori E,at al.P-Selection and intercellular adhession molecules expression after focal brain ischemia and reperfusion.Stroke,1994,25:202
6.尚明谦,郭述苏,陈同慧,等.脑梗死患者血小板颗粒膜糖蛋白的测定及临床意义.山东医学，1996，9：15
7.张雄.血小板活化因子与脑损伤研究近况.国外医学神经病学神经外科学分册，1999，26：253
(收稿1999-11-28 修回2000-01-25), http://www.100md.com