端粒酶在宫颈癌与宫颈上皮内瘤样病变中的表达
作者：马艳 陈忠东 张志胜
单位：马艳 陈忠东(衡阳医学院 附属第一医院，中国湖南 衡阳 421001)；张志胜(湖南医科大学 附属第二医院，中国湖南 长沙 410011)
关键词：宫颈肿瘤；遗传学；宫颈上皮瘤样病变；遗传学；端粒酶；遗传学；癌，鳞状细胞；遗传学；宫颈肿瘤；病理学
湖南医学000302[摘 要]目的探讨宫颈癌、宫颈上皮内瘤样变中端粒酶的表达及其意义。方法采用TRAP—银染法检测26例宫颈癌、12例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及30例正常宫颈组织的端粒酶活性。结果26例宫颈癌和12例CIN中端粒酶表达阳性率分别为88.46%，50.00%，所有正常宫颈组织端粒酶表达阴性。结论端粒酶活性表达出现在宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌中，与宫颈癌的发生、发展有关。
[中图分类号] R737.33，R977.3 [文献标识码] A [文章编号] 1001-9421(2000)03-0163-03
, 百拇医药
Expression of Telomerase in Cervical Cancer and Cervical Intraepithelial Neoplasm
MA Yan
(Dept.of Obstetrics and Gynecology,The First Affiliated Hospital of
Hengyang Medical College,Hengyang,421001,Hunan,China)
CHENG Zhong-dong
(Dept.of Obstetrics and Gynecology,The First Affiliated Hospital of
, 百拇医药
Hengyang Medical College,Hengyang,421001,Hunan,China)
ZHANG Zhi-sheng
(Dept.of Obstetrics and Gynecology,The Second Affiliated Hospital of
Hunan Medical University,Changsha,410011,China)
[Abstract]ObjectiveTo investigate the expression and significance of telomerase in cervical cancer and cervial intraepithelial neoplasm (CIN).MethodFresh samples were collected from twenty-six patients with cervical cancer and twelve patients with CIN,thirty women showing normal cervical tissue served as controls.The activities of telomerase in these samples were detected by telomeric repeat amplification protocol—silver staining method.ResultPositive rate of telomerase was 88.46% in cervial cancer,50% in CIN and negative in normal cervices.ConclusionExpression of telomerase activity appears in cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasm,correlating with the occurrence and progress of cervical cancers.
, 百拇医药
[Key words] cervix neoplasms/genet; cervical intraepithelial/genet; telomerase/genet; carcinoma,squamous; cell/genet; cervix neoplasms/pathol
端粒位于染色体末端，随着细胞分裂的不断进行而逐渐缩短，细胞趋向衰亡，被认为是细胞分裂的“生物钟”。端粒酶是影响端粒长度的主要因素，能以其自身的RNA为模板，向端粒末端添加(TTAGGG)n序列，使端粒延长，从而延长细胞的寿命甚至使其“永生”[1]。近期的研究表明：端粒酶在恶性肿瘤中高表达，但在良性肿瘤和非肿瘤组织中低表达或无表达。为探讨宫颈癌、宫颈上皮内瘤样病变端粒酶活性表达，本文采用端粒重复放大序列—银染法对26例宫颈癌、12例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及30例正常宫颈组织的新鲜标本中端粒酶活性进行检测。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 标本来源 26例宫颈癌(其中鳞癌21例，腺癌3例，腺鳞癌2例)新鲜组织标本取自衡阳医学院附属第一医院1998年6月至1999年2月门诊宫颈活检患者；30例正常宫颈新鲜组织标本取自同期内因子宫肌瘤或功能性子宫出血在该院行子宫全切患者；12例宫颈上皮内瘤样病变(其中CIN Ⅱ 5例，CIN Ⅲ 7例，包括3例原位癌)新鲜组织标本取自衡阳医学院附属第一、二医院、衡阳市中心医院门诊宫颈活检患者。所有病例均经病理诊断证实，活检或手术前均未接受治疗。标本取材约50 mg，清除出血和坏死部分，装入消毒的1.5 ml离心管内，-70 ℃冻存。
1.2 试剂 端粒酶活性测定试剂盒购自Oncor.Inc选用的引物为Ts5′—AATCCG TCGAGCAGAGTT3′，CX 5′—CCCTTA CCCTTA CCCTTA CCCTAA—3′。
1.3 检测手段及对照 端粒酶活性检测采用TRAP—银染法，以宫颈癌Hela细胞作阳性对照，端粒酶裂解液作阴性对照，85 ℃加热处理过的阳性细胞提取液作特异性对照。
, 百拇医药
1.4 TRAP—银染结果判断 端粒酶经TRAP扩增后，其产物电泳银染显影，以Marker为标记，显示相隔6 bp的梯状电泳图，有4条带以上即为阳性结果[2]。
1.5 统计学处理 结果分析采用χ2检验，四格表确切概率计算法，来判断各组间差异是否有显著性。
2 结果
2.1 宫颈癌及CIN中端粒酶活性表达 应用TRAP—银染法检测30例正常宫颈、12例CIN及26例宫颈癌。结果显示：30例正常宫颈中无1例有端粒酶阳性表达；12例CIN中有6例为端粒酶阳性表达，阳性率50.00%；26例宫颈癌中有23例为端粒酶阳性表达，阳性率88.46%。各组间比较差异有显著性。结果见表1。
表1 宫颈癌，CIN及正常宫颈中端粒酶活性表达(例，%) 类型
, http://www.100md.com
n
阳性
阴性
正常宫颈
30
0(0%)
30(100%)
CIN
12
6(50%)1)
6(50%)
宫颈癌
26
, 百拇医药
23(88.46%)2)
3(11.54%)
与正常宫颈比较：1)P<0.01，2)P<0.05；与CIN比较：3)P<0.05
2.2 宫颈癌的端粒酶活性表达与临床分期、病理分级、病理类型的关系 经检测，26例宫颈癌不同的临床分期、不同的组织学分级以及不同的病理类型的端粒酶表达阳性率，虽有所不同，但差异均无显著性(P>0.05)。见表2。
表2 宫颈癌端粒酶活性表达与临床及病理的关系(例，%) 临床病理因素
例数
阴性
阳性
, 百拇医药
临床分期
Ⅰ
6
1
5(83.33)
Ⅱ
18
2
16(88.89)
Ⅲ
2
0
2(100.00)
, http://www.100md.com
病理分级
G1
6
1
5(83.33)
G2
10
1
9(90.00)
G3
10
1
9(90.00)
, 百拇医药
病理分类
鳞癌
21
2
19(90.48)
腺癌
3
1
2(66.67)
腺鳞癌
2
0
2(100.00)
, 百拇医药
3 讨论
端粒酶是一种核糖核蛋白酶。人类端粒酶包括三个主要组成部分，人端粒酶RNA(hTR)、端粒酶催化亚单位(hTRT/hEST2)和端粒酶连接蛋白(TP1/TLP1)。hTR基因位于3 q26.3，它是端粒酶延长端粒的模板，干扰hTR可导致端粒缩短。hTR为维持端粒长度和端粒酶活性所必需。TP1的功能目前尚不清楚，可能参与端粒酶活性的调节。hTRT是端粒酶活性的决定部分，它的过度表达在细胞永生化和人类恶性肿瘤的发生中起关键作用。
端粒长度的维持主要依靠端粒酶的调节，端粒酶激活是永生化肿瘤细胞的重要特征，也是永生化细胞生存所必需[3，4]。近期研究表明：在永生化细胞系及绝大多数肿瘤中可检测出端粒酶活性，而非永生化细胞及正常体细胞中则无端粒酶活性。由于端粒酶的活化，使端粒的长度维持一种动态平衡，细胞得以无限制地增殖下去，导致了肿瘤的发生。但端粒酶基因在肿瘤细胞恶性转变过程中的激活机制如何?目前尚不清楚。也有文献报道一些永生化细胞株及15%的肿瘤为端粒酶阴性，却有较长的端粒。说明端粒酶的活化并不是维持端粒长度的惟一条件，细胞恶性表型的出现，并不完全依靠端粒酶的活化，一些细胞利用其它途径来维持端粒的长度[5]。
, 百拇医药
本文通过对26例宫颈癌、12例CIN(其中3例原位癌)和30例正常宫颈组织中端粒酶的检测，发现26例宫颈癌中端粒酶阳性表达者23例，占88.46%；12例CIN中端粒酶阳性表达者6例(其中3例原位癌全部为阳性)，占50%；30例正常宫颈组织中无一例有端粒酶阳性表达，与国外文献报道一致。端粒酶表达阳性率在宫颈癌中明显高于CIN与正常宫颈组织，而且CIN明显高于正常宫颈。表明在宫颈癌变过程中端粒酶表达呈明显增高趋势，提示端粒酶激活在宫颈癌的发生早期即已出现，并与宫颈癌的发展有一定关系。
端粒酶在多种不同的癌前病变中有较高表达[6，7]，但其机制不清楚。本组CIN中也有端粒酶高表达(50%)，其可能的原因是：①与某些位点对偶质的丢失有关。Larson等[8]发现在宫颈癌和不同级别的CIN中存在3 q,10 P,11 q,13 q,18 q对偶质的丢失；而体外HPV16，HPV18介导的角质细胞永生化和激活端粒酶与这些位点对偶质的丢失有关[9]。②与高危型HPV感染有关。体外实验表明[10]：HPV16，E6，E7转染宫颈上皮细胞可以激活端粒酶；Snijders检测33例CIN发现端粒酶催化亚单位高表达仅限于高危型HPV阳性病例；Heselmeyer等通过整组遗传 因子杂交实验表明：3 q延长决定了CIN Ⅲ向浸润癌的转变，而编码hTR的基因位于3 q,3 q延长与hTR基因的过度表达有关。据此分析，端粒酶活性不仅可能存在于CIN Ⅲ中，并且一旦出现可能标志着CIN已经获得了一个永生化的表型，达到了一种具备恶性潜能，不可逆转的状态，但端粒酶活性检测能否作为判断CIN预后的指标还是待于今后进一步探讨。
, http://www.100md.com
肿瘤组织中，端粒酶活性与临床病理因素和预后的关系尚无肯定结论。Hiyama[11]等认为乳腺癌和胃癌的端粒酶活性与肿瘤的大小和淋巴转移有关，可作为一个判断预后的指标。Brien[12]发现在子宫内膜癌中，端粒酶活性与肿瘤的分级及浸润深度无关。Kyo等[13]用延伸PCR-TRAP法定量检测各种卵巢病变中端粒酶活性，发现端粒酶活性高低与卵巢癌的临床期别有密切关系。本文研究显示宫颈癌的端粒酶表达阳性率随临床期别及病理分级的增加而呈递增趋势，但差异无统计学意义，可能与样本含量少有关，也可能端粒酶表达本来就与这些参数无关。随着PCR-TRAP定量系统的建立，有望进一步准确地分析端粒酶活性表达与宫颈癌或CIN患者临床分期，病理分级及预后的关系。
[作者简介] 马艳(1967-)，女，湖南衡阳人，医学硕士，主要从事妇科肿瘤的研究。
[参 考 文 献]
, 百拇医药
[1] Rhyn MS.Telomere,telomerase and immortality[J].J Natl Cancer Inst,1995,87:884-894.
[2] 陈 雯，张 桥，万德森，等.人胃癌结直肠癌组织中的端粒酶活性[J].中华肿瘤杂志，1998，4(20)：261-263.
[3] Kipling D,Telomerale:immortality enzyme or oncogene?[J][news]Nat Genet,1995,9:104-106.
[4] Harley CB,Villepontean B.Telomeres and telomerase in aging and cancer[J].Curr Opin Genet Dew,1995,5:249-255.
[5] Bryan TM,Englezou A,Gupta J,et al.telomere elongation in immortal human cell with detection telomerase activity[J].EMBO J,1995,14(17):4240-4245.
, http://www.100md.com
[6] Zhang W,Kapusta LR,Slingerland JM,et al.Telomerase activity yin prostate cancer,prostatic intraepithelial neoplasia,and benign prostatic epithelium[J].Cancer Res,1995,58:619-621.
[7] Hytiroglou P,Kotoula V,Thung SN,et al.Telomerase activity in precamenus hepatic nodales[J].Cancer,1998,82:1831-1838.
[8] Larson AA,Liao SY,Stanbridge EJ,et al.Genetic alteration accumulate during cervical turmorgenesis and indicate a common origin for multifocal lesions[J].Cancer Res,1997,57:4171-4176.
, 百拇医药
[9] Mullokandov MR,Kbolodivor NG,Atkin NB,et al.Genomic altertions in cervical carcinoma:losses of chromosome heterozygosity and human papilloma virus tumor status[J].Cancer Res,1996,56(1):197-205.
[10] Ohta Y,Tsutsumi K,Kikuchi K,et al.Two distinct human uterine cervical epithelial cell lines established after transfection with human papillomavirus 16 DNA[J].Jpa J Cancer Res,1997,87(7):644-651.
[11] Hiyama E,Yokogama T,Tatsumotoo N,et al.Telomerase activity in gastric cancer[J].Cancer Res,1996,56:3258-3262.
, http://www.100md.com
[12] Brien TP,Kallakury BV,Lowry CV,et al.Telomerase activity in benign endometrium and endometrial carcinoma[J].Cancer Res,1997,57(13):2760-2764.
[13] Kyo S,Takakura M,Murakami K,et al.Quantitative differences in telomerase activity among maligant,premalignant,and benign ovarian lesions[J].Clin Cancer Res 1998,4(2):399-405.
[收稿日期] 1999-12-13, 百拇医药
单位：马艳 陈忠东(衡阳医学院 附属第一医院，中国湖南 衡阳 421001)；张志胜(湖南医科大学 附属第二医院，中国湖南 长沙 410011)
关键词：宫颈肿瘤；遗传学；宫颈上皮瘤样病变；遗传学；端粒酶；遗传学；癌，鳞状细胞；遗传学；宫颈肿瘤；病理学
湖南医学000302[摘 要]目的探讨宫颈癌、宫颈上皮内瘤样变中端粒酶的表达及其意义。方法采用TRAP—银染法检测26例宫颈癌、12例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及30例正常宫颈组织的端粒酶活性。结果26例宫颈癌和12例CIN中端粒酶表达阳性率分别为88.46%，50.00%，所有正常宫颈组织端粒酶表达阴性。结论端粒酶活性表达出现在宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌中，与宫颈癌的发生、发展有关。
[中图分类号] R737.33，R977.3 [文献标识码] A [文章编号] 1001-9421(2000)03-0163-03
, 百拇医药
Expression of Telomerase in Cervical Cancer and Cervical Intraepithelial Neoplasm
MA Yan
(Dept.of Obstetrics and Gynecology,The First Affiliated Hospital of
Hengyang Medical College,Hengyang,421001,Hunan,China)
CHENG Zhong-dong
(Dept.of Obstetrics and Gynecology,The First Affiliated Hospital of
, 百拇医药
Hengyang Medical College,Hengyang,421001,Hunan,China)
ZHANG Zhi-sheng
(Dept.of Obstetrics and Gynecology,The Second Affiliated Hospital of
Hunan Medical University,Changsha,410011,China)
[Abstract]ObjectiveTo investigate the expression and significance of telomerase in cervical cancer and cervial intraepithelial neoplasm (CIN).MethodFresh samples were collected from twenty-six patients with cervical cancer and twelve patients with CIN,thirty women showing normal cervical tissue served as controls.The activities of telomerase in these samples were detected by telomeric repeat amplification protocol—silver staining method.ResultPositive rate of telomerase was 88.46% in cervial cancer,50% in CIN and negative in normal cervices.ConclusionExpression of telomerase activity appears in cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasm,correlating with the occurrence and progress of cervical cancers.
, 百拇医药
[Key words] cervix neoplasms/genet; cervical intraepithelial/genet; telomerase/genet; carcinoma,squamous; cell/genet; cervix neoplasms/pathol
端粒位于染色体末端，随着细胞分裂的不断进行而逐渐缩短，细胞趋向衰亡，被认为是细胞分裂的“生物钟”。端粒酶是影响端粒长度的主要因素，能以其自身的RNA为模板，向端粒末端添加(TTAGGG)n序列，使端粒延长，从而延长细胞的寿命甚至使其“永生”[1]。近期的研究表明：端粒酶在恶性肿瘤中高表达，但在良性肿瘤和非肿瘤组织中低表达或无表达。为探讨宫颈癌、宫颈上皮内瘤样病变端粒酶活性表达，本文采用端粒重复放大序列—银染法对26例宫颈癌、12例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及30例正常宫颈组织的新鲜标本中端粒酶活性进行检测。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 标本来源 26例宫颈癌(其中鳞癌21例，腺癌3例，腺鳞癌2例)新鲜组织标本取自衡阳医学院附属第一医院1998年6月至1999年2月门诊宫颈活检患者；30例正常宫颈新鲜组织标本取自同期内因子宫肌瘤或功能性子宫出血在该院行子宫全切患者；12例宫颈上皮内瘤样病变(其中CIN Ⅱ 5例，CIN Ⅲ 7例，包括3例原位癌)新鲜组织标本取自衡阳医学院附属第一、二医院、衡阳市中心医院门诊宫颈活检患者。所有病例均经病理诊断证实，活检或手术前均未接受治疗。标本取材约50 mg，清除出血和坏死部分，装入消毒的1.5 ml离心管内，-70 ℃冻存。
1.2 试剂 端粒酶活性测定试剂盒购自Oncor.Inc选用的引物为Ts5′—AATCCG TCGAGCAGAGTT3′，CX 5′—CCCTTA CCCTTA CCCTTA CCCTAA—3′。
1.3 检测手段及对照 端粒酶活性检测采用TRAP—银染法，以宫颈癌Hela细胞作阳性对照，端粒酶裂解液作阴性对照，85 ℃加热处理过的阳性细胞提取液作特异性对照。
, 百拇医药
1.4 TRAP—银染结果判断 端粒酶经TRAP扩增后，其产物电泳银染显影，以Marker为标记，显示相隔6 bp的梯状电泳图，有4条带以上即为阳性结果[2]。
1.5 统计学处理 结果分析采用χ2检验，四格表确切概率计算法，来判断各组间差异是否有显著性。
2 结果
2.1 宫颈癌及CIN中端粒酶活性表达 应用TRAP—银染法检测30例正常宫颈、12例CIN及26例宫颈癌。结果显示：30例正常宫颈中无1例有端粒酶阳性表达；12例CIN中有6例为端粒酶阳性表达，阳性率50.00%；26例宫颈癌中有23例为端粒酶阳性表达，阳性率88.46%。各组间比较差异有显著性。结果见表1。
表1 宫颈癌，CIN及正常宫颈中端粒酶活性表达(例，%) 类型
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n
阳性
阴性
正常宫颈
30
0(0%)
30(100%)
CIN
12
6(50%)1)
6(50%)
宫颈癌
26
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23(88.46%)2)
3(11.54%)
与正常宫颈比较：1)P<0.01，2)P<0.05；与CIN比较：3)P<0.05
2.2 宫颈癌的端粒酶活性表达与临床分期、病理分级、病理类型的关系 经检测，26例宫颈癌不同的临床分期、不同的组织学分级以及不同的病理类型的端粒酶表达阳性率，虽有所不同，但差异均无显著性(P>0.05)。见表2。
表2 宫颈癌端粒酶活性表达与临床及病理的关系(例，%) 临床病理因素
例数
阴性
阳性
, 百拇医药
临床分期
Ⅰ
6
1
5(83.33)
Ⅱ
18
2
16(88.89)
Ⅲ
2
0
2(100.00)
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病理分级
G1
6
1
5(83.33)
G2
10
1
9(90.00)
G3
10
1
9(90.00)
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病理分类
鳞癌
21
2
19(90.48)
腺癌
3
1
2(66.67)
腺鳞癌
2
0
2(100.00)
, 百拇医药
3 讨论
端粒酶是一种核糖核蛋白酶。人类端粒酶包括三个主要组成部分，人端粒酶RNA(hTR)、端粒酶催化亚单位(hTRT/hEST2)和端粒酶连接蛋白(TP1/TLP1)。hTR基因位于3 q26.3，它是端粒酶延长端粒的模板，干扰hTR可导致端粒缩短。hTR为维持端粒长度和端粒酶活性所必需。TP1的功能目前尚不清楚，可能参与端粒酶活性的调节。hTRT是端粒酶活性的决定部分，它的过度表达在细胞永生化和人类恶性肿瘤的发生中起关键作用。
端粒长度的维持主要依靠端粒酶的调节，端粒酶激活是永生化肿瘤细胞的重要特征，也是永生化细胞生存所必需[3，4]。近期研究表明：在永生化细胞系及绝大多数肿瘤中可检测出端粒酶活性，而非永生化细胞及正常体细胞中则无端粒酶活性。由于端粒酶的活化，使端粒的长度维持一种动态平衡，细胞得以无限制地增殖下去，导致了肿瘤的发生。但端粒酶基因在肿瘤细胞恶性转变过程中的激活机制如何?目前尚不清楚。也有文献报道一些永生化细胞株及15%的肿瘤为端粒酶阴性，却有较长的端粒。说明端粒酶的活化并不是维持端粒长度的惟一条件，细胞恶性表型的出现，并不完全依靠端粒酶的活化，一些细胞利用其它途径来维持端粒的长度[5]。
, 百拇医药
本文通过对26例宫颈癌、12例CIN(其中3例原位癌)和30例正常宫颈组织中端粒酶的检测，发现26例宫颈癌中端粒酶阳性表达者23例，占88.46%；12例CIN中端粒酶阳性表达者6例(其中3例原位癌全部为阳性)，占50%；30例正常宫颈组织中无一例有端粒酶阳性表达，与国外文献报道一致。端粒酶表达阳性率在宫颈癌中明显高于CIN与正常宫颈组织，而且CIN明显高于正常宫颈。表明在宫颈癌变过程中端粒酶表达呈明显增高趋势，提示端粒酶激活在宫颈癌的发生早期即已出现，并与宫颈癌的发展有一定关系。
端粒酶在多种不同的癌前病变中有较高表达[6，7]，但其机制不清楚。本组CIN中也有端粒酶高表达(50%)，其可能的原因是：①与某些位点对偶质的丢失有关。Larson等[8]发现在宫颈癌和不同级别的CIN中存在3 q,10 P,11 q,13 q,18 q对偶质的丢失；而体外HPV16，HPV18介导的角质细胞永生化和激活端粒酶与这些位点对偶质的丢失有关[9]。②与高危型HPV感染有关。体外实验表明[10]：HPV16，E6，E7转染宫颈上皮细胞可以激活端粒酶；Snijders检测33例CIN发现端粒酶催化亚单位高表达仅限于高危型HPV阳性病例；Heselmeyer等通过整组遗传 因子杂交实验表明：3 q延长决定了CIN Ⅲ向浸润癌的转变，而编码hTR的基因位于3 q,3 q延长与hTR基因的过度表达有关。据此分析，端粒酶活性不仅可能存在于CIN Ⅲ中，并且一旦出现可能标志着CIN已经获得了一个永生化的表型，达到了一种具备恶性潜能，不可逆转的状态，但端粒酶活性检测能否作为判断CIN预后的指标还是待于今后进一步探讨。
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肿瘤组织中，端粒酶活性与临床病理因素和预后的关系尚无肯定结论。Hiyama[11]等认为乳腺癌和胃癌的端粒酶活性与肿瘤的大小和淋巴转移有关，可作为一个判断预后的指标。Brien[12]发现在子宫内膜癌中，端粒酶活性与肿瘤的分级及浸润深度无关。Kyo等[13]用延伸PCR-TRAP法定量检测各种卵巢病变中端粒酶活性，发现端粒酶活性高低与卵巢癌的临床期别有密切关系。本文研究显示宫颈癌的端粒酶表达阳性率随临床期别及病理分级的增加而呈递增趋势，但差异无统计学意义，可能与样本含量少有关，也可能端粒酶表达本来就与这些参数无关。随着PCR-TRAP定量系统的建立，有望进一步准确地分析端粒酶活性表达与宫颈癌或CIN患者临床分期，病理分级及预后的关系。
[作者简介] 马艳(1967-)，女，湖南衡阳人，医学硕士，主要从事妇科肿瘤的研究。
[参 考 文 献]
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[1] Rhyn MS.Telomere,telomerase and immortality[J].J Natl Cancer Inst,1995,87:884-894.
[2] 陈 雯，张 桥，万德森，等.人胃癌结直肠癌组织中的端粒酶活性[J].中华肿瘤杂志，1998，4(20)：261-263.
[3] Kipling D,Telomerale:immortality enzyme or oncogene?[J][news]Nat Genet,1995,9:104-106.
[4] Harley CB,Villepontean B.Telomeres and telomerase in aging and cancer[J].Curr Opin Genet Dew,1995,5:249-255.
[5] Bryan TM,Englezou A,Gupta J,et al.telomere elongation in immortal human cell with detection telomerase activity[J].EMBO J,1995,14(17):4240-4245.
, http://www.100md.com
[6] Zhang W,Kapusta LR,Slingerland JM,et al.Telomerase activity yin prostate cancer,prostatic intraepithelial neoplasia,and benign prostatic epithelium[J].Cancer Res,1995,58:619-621.
[7] Hytiroglou P,Kotoula V,Thung SN,et al.Telomerase activity in precamenus hepatic nodales[J].Cancer,1998,82:1831-1838.
[8] Larson AA,Liao SY,Stanbridge EJ,et al.Genetic alteration accumulate during cervical turmorgenesis and indicate a common origin for multifocal lesions[J].Cancer Res,1997,57:4171-4176.
, 百拇医药
[9] Mullokandov MR,Kbolodivor NG,Atkin NB,et al.Genomic altertions in cervical carcinoma:losses of chromosome heterozygosity and human papilloma virus tumor status[J].Cancer Res,1996,56(1):197-205.
[10] Ohta Y,Tsutsumi K,Kikuchi K,et al.Two distinct human uterine cervical epithelial cell lines established after transfection with human papillomavirus 16 DNA[J].Jpa J Cancer Res,1997,87(7):644-651.
[11] Hiyama E,Yokogama T,Tatsumotoo N,et al.Telomerase activity in gastric cancer[J].Cancer Res,1996,56:3258-3262.
, http://www.100md.com
[12] Brien TP,Kallakury BV,Lowry CV,et al.Telomerase activity in benign endometrium and endometrial carcinoma[J].Cancer Res,1997,57(13):2760-2764.
[13] Kyo S,Takakura M,Murakami K,et al.Quantitative differences in telomerase activity among maligant,premalignant,and benign ovarian lesions[J].Clin Cancer Res 1998,4(2):399-405.
[收稿日期] 1999-12-13, 百拇医药